عندما تفشل محاولات إنجاب طفل، يسأل الأزواج أنفسهم: ما السبب؟ في كثير من الأحيان لا تستطيع التحليلات والدراسات الأولية الإجابة عليها. لتحديد المشكلة، يصف الأطباء أيضًا كتابة HLA للزوجين. تصبح الهوية المناعية للوالدين عقبة خطيرة أمام ولادة طفل.
أهمية الاختبارات الجينية
الاختبارات الجينية هي أحدث الطرق لتحديد الأمراض والتشوهات لدى الإنسان
يتم تشفير جميع المعلومات المتعلقة بالشخص وخصائصه التنموية وميله للإصابة بالأمراض في جزيء الحمض النووي. يوجد حاليًا المئات من الاختبارات الجينية التي يمكنها التعرف بسرعة على سبب المشكلات الصحية وحتى التنبؤ بحدوثها في المستقبل. في التشخيص قبل الولادة، تُستخدم هذه الاختبارات للكشف المبكر عن الأمراض الوراثية للجنين و"التوافق" بين الزوجين.
أنواع وخصائص HLA
HLA (مستضدات الكريات البيض البشرية)، والتي تُترجم من الإنجليزية تعني مستضد الكريات البيض البشرية، هي المسؤولة عن تفاعل التوافق النسيجي. لدينا جميعًا مجموعتنا الخاصة من جزيئات HLA وجينات HLA. يتلقى الأطفال نصف جينات HLA الخاصة بهم من الأم والأب.
الأكثر شيوعًا هي جينات HLA "الكلاسيكية" و"غير الكلاسيكية". في هذه المقالة، نحن مهتمون بالطبقة الأولى، أو بشكل أكثر دقة، HLA من الدرجة الثانية، والتي تتمثل وظيفتها الرئيسية في التعرف على المستضدات والتفاعل بين الخلايا، مما يضمن مقاومة الإنسان للعدوى. لكن لها أيضًا عيوبًا - فهي يمكن أن تسبب أمراض ومشاكل المناعة الذاتية أثناء الحمل.
دور HLA في الحمل
لحمل الطفل بشكل كامل، يجب أن تكون مستضدات الأب والأم مختلفة.يحتوي الجنين، الذي يتكون نتيجة اتحاد الخلايا الجرثومية الأبوية، على مستضدات متخصصة "غريبة" عن مناعة الأم. يتفاعل جسم المرأة مع خلايا الطفل الجديدة من خلال تشغيل آليات خاصة تحمي الجنين: يتم تصنيع الأجسام المضادة الواقية التي تثبط الخلايا القاتلة المتخصصة. إذا لم يحدث هذا، يبدأ الأخير في قتل الجنين، مما يؤدي إلى إنهاء الحمل.
إذا كانت مستضدات الأب والأم هي نفسها، فسيكون الطفل حاملاً لمستضدات مماثلة لتلك الموجودة في الأم.وفي هذه الحالة، يعتبر جسد الأنثى أن خلايا الجنين خاصة به، مما يعني أنها لا تؤدي إلى تفعيل آليات الحماية للحفاظ على الجنين. ينظر الجهاز المناعي إلى الجنين على أنه نوع من مرض الورم ويحاول تدميره أو إيقاف انقسام الخلايا. في الحياة العادية، هذا ينقذنا من العديد من الأمراض، لكنه في هذه الحالة يسبب نخر في أنسجة الجنين ويؤدي إلى الإجهاض.
يؤثر مجمع التوافق النسيجي على عملية الإخصاب نفسها، والتصاق الجنين وحمل الجنين. هناك علاقة مباشرة: كلما زاد عدد أليلات جين HLA المتشابهة بين الزوجين، كلما زاد خطر الإجهاض. حوالي 35% من الأزواج الذين يعانون من حالات الإجهاض المتكررة لديهم 2-3 تطابقات. إذا تم العثور على أربعة أليلات متشابهة أو أكثر، فسوف يحدث الإجهاض ومحاولات التلقيح الاصطناعي غير الناجحة في جميع الحالات تقريبًا.
من أجل الحمل الكامل للجنين، من المهم جدًا ليس فقط التطابق الكمي بين الوالدين، ولكن أيضًا أليلات جينات HLA نفسها في كل من الزوجين. وهكذا، في الأزواج الذين يعانون من ثلاث حالات إجهاض أو أكثر، كشف فك رموز نتائج كتابة NLA عن زيادة في عدد بعض الأليلات: في النساء - DQB1 0301، 0501، 0602؛ عند الرجال – DRB1 10، 12؛ DQA1 0102، DQA1 0301، 0102؛ DQB1 0501، 0602. مع حالات الإجهاض المتكررة، يتناقص تواتر أليلات DRB1 03 وDQB1 0303 لدى كل من النساء والرجال، مما يشير إلى تأثيرهم الوقائي على مسار الحمل.
مؤشرات لكتابة HLA
لا تعد كتابة HLA إجراءً قياسيًا أثناء الحمل. يوصف هذا الاختبار فقط في حالات الإجهاض المستمر والفشل المتكرر للتخصيب في المختبر.
طريقة التنفيذ
تفاعل البوليميراز المتسلسل - طريقة دقيقة للغاية للتشخيص الوراثي الجزيئي
لإجراء التحليل الجيني، يجب على الزوجين التبرع بالدم من الوريد. سيتم عزل الكريات البيض من المواد التي تم جمعها. يتم إجراء التحليل باستخدام طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR). وبناء على النتائج التي تم الحصول عليها، سيحدد عالم الوراثة درجة التوافق المناعي للوالدين.
فك تشفير النتائج
في هذا البديل، لدى الزوجين 3 تطابقات في متغيرات مستضد HLA
يتم إثبات عدم التوافق المناعي الكامل إذا كان لدى الزوجين نسبة عالية من التطابقات (خمسة أو أكثر من أصل ستة محتملة في ثلاثة مواقع، مع وجود متغيرين في كل موضع) بين الجينات DRB1، DQA1، DQB1. إذا كان هناك عدم توافق جزئي، فلا يمكن تسمية النتيجة بالسبب الرئيسي للإجهاض.يعد عدم التطابق التام بين الشركاء نتيجة إيجابية ومثالية لحياة خالية من المشاكل مسار الحمل.
العلاج المناعي عندما تتطابق الاختبارات في الزوج
تم اختراع طرق الحفاظ على الحمل عندما يكون الوالدان متطابقين من الناحية المناعية منذ عدة عقود. إحدى الطرق هي خياطة أنسجة الأب داخل المرأة الحامل. بدأ الجهاز المناعي في مهاجمة ليس الجنين، ولكن الأنسجة الأجنبية. بالإضافة إلى ذلك، تم إجراء تنقية الدم وقمع مناعة الأم.
التحصين هو الطريقة الأكثر شيوعًا لمكافحة هوية HLA لدى الأزواج
الآن أصبحت الخيارات الأخرى ممكنة للحفاظ على الحمل وحماية الجنين. بعد تلقي النتائج، قد يوصي طبيبك بالتحصين. هناك نوعان من التحصين - الإيجابي والسلبي.
- بالنسبة للمرأة النشيطة يتم حقن الخلايا الليمفاوية المركزة من زوجها. وهكذا، يتعلم جسد الأم الحامل تدريجياً التعرف على خلايا زوجها. توفر بعض الدراسات بيانات عن 60% من النتائج الإيجابية عندما يتم تنفيذ الإجراء في الوقت المحدد.
- يتم إجراء التحصين السلبي باستخدام مستحضرات الجلوبيولين المناعي الخاصة (أوكتاجام، إنتراجلوبين، إيمونوفينين، وما إلى ذلك). يبدأ الإجراء قبل الحمل ويستمر لمدة شهرين إلى ثلاثة أشهر. ثم يتم وصف الدورات الداعمة للحمل. يتم استخدام هذه الطريقة في التخصيب في المختبر.
كتابة الجينات HLA للزوج(فيديو)
سيساعد التحليل الجيني لتوافق مستضد HLA بين الزوجين في تحديد ما إذا كان العقم أو الإجهاض نتيجة لعدم التوافق الجيني بين الزوجين. إذا تم تأكيد التشخيص، فلا تفقد الأمل: فالطب الحديث يمكن أن يحل هذه المشكلة في كثير من الأحيان ويساعد في ولادة طفل سليم. تحصين الأم هو وسيلة شائعة لمكافحة الهوية الجينية الأبوية على أساس مستضدات HLA.
دور نظام التوافق النسيجي البشري
يؤدي نظام التوافق البيولوجي (الأنسجة) البشري (HLA) من الدرجة الثانية عددًا من وظائف الحماية المهمة في الجسم:
الاستجابة المناعية للعدوى.
- إزالة الخلايا السرطانية من الجسم.
- تطور المناعة المكتسبة .
يتم استخدام مصطلح "HLA" (مستضد الكريات البيض البشرية) نظرًا لحقيقة أن جميع المستضدات (البروتينات) لهذا النظام موجودة على سطح كريات الدم البيضاء. ثلاثة جينات تقع على الذراع القصير للكروموسوم 6 مسؤولة عن عمل HLA: DRB1، DQA1، DQB1. يتم تمثيل كل جين بمتغيرين (أليلات) موروثة من الوالدين: أحدهما من الأب والآخر من الأم. الجينات تشفر خصائص معينة. إذا كانت الأليلات مختلفة (متغايرة الزيجوت)، فستظهر صفة "قوية" (سائدة)، وإذا كانت الأليلات متماثلة (متماثلة الزيجوت)، تظهر صفة "ضعيفة" (متنحية). هناك تنوع غير عادي (حوالي 3000) من أليلات الجينات HLA.
الاستعداد لأمراض المناعة الذاتية
كما قلنا من قبل، فإن نظام التوافق النسيجي HLA هو المسؤول عن الاستجابة المناعية. يمكن أن يكون الجانب السلبي لعمله هو عمليات المناعة الذاتية - تخليق الأجسام المضادة الواقية ضد خلايا الفرد وتدميرها.
حاليًا، مشاركة بعض المتغيرات من جينات HLA من الدرجة الثانية في تطور أمراض المناعة الذاتية مثل داء السكري من النوع الأول (DM)، والتهاب المفاصل الروماتويدي، ومرض كرون، والتهاب القولون التقرحي، والذئبة الحمامية الجهازية، والتهاب الكبد المناعي الذاتي، والتهاب الجلد التأتبي، والتهاب الغدة الدرقية المناعي الذاتي، إلخ. .
يمكن أن يكون العقم والإجهاض أحد المظاهر الأولى لاضطرابات المناعة الذاتية بسبب تلف الأجسام المضادة الخاصة بمستضدات مختلفة من الجهاز التناسلي والغدد الصماء: البيض والحيوانات المنوية والهرمونات الجنسية وما إلى ذلك.
التوافق البيولوجي وزراعة الأجنة
يؤثر نظام التوافق النسيجي، حتى في حالة عدم وجود أمراض المناعة الذاتية، على الحمل والغرس (زرع الجنين) ومسار الحمل. يحتوي الجنين، الذي يتكون بعد اندماج الخلايا الجرثومية الذكرية والأنثوية، على بروتينات خاصة على سطحه - مستضدات. إن "غرابتهم" مهمة جدًا للزرع الطبيعي. يؤدي ظهور "بروتينات غريبة" في الجنين إلى تفاعلات مناعية خاصة في جسم الأم تهدف إلى الحفاظ على الحمل: يتم حظر الخلايا القاتلة الخاصة، مما قد يؤدي إلى الإجهاض.
لا يمكن أن تحدث "الغرابة" الضرورية للمستضدات في الجنين إلا إذا كانت جينات HLA الخاصة بالأم والأب تختلف عن بعضها البعض. تؤدي مصادفة بعض أليلات جينات HLA (يحدث تطابق كامل في الأقارب المقربين) إلى ظهور جنين متماثل اللواقح HLA، وهو عامل غير مواتٍ للسير الطبيعي للحمل.
جينات HLA والإجهاض
لقد ثبت مؤخرًا أنه كلما زاد عدد التطابقات بين الزوجين في أليلات جينات HLA، زاد احتمال إنهاء الحمل. ثلث المتزوجين الذين يعانون من الإجهاض المتكرر لديهم 2-3 مباريات. إذا كان هناك 4 أليلات متطابقة أو أكثر، تحدث حالات إجهاض متكررة ومحاولات التلقيح الاصطناعي غير الناجحة في معظم الأزواج.
يؤدي وجود عدد كبير من مستضدات HLA من الدرجة الثانية المتطابقة إلى عدم وجود استجابة مناعية كافية لدى الأم. لا يتم التعرف على الجنين على أنه جنين، ولكن يُنظر إليه على أنه تراكم لخلاياه المتغيرة، والتي يبدأ الجهاز المناعي في العمل ضدها لتدميرها.
وهذا يسبب نخر في أغشية الفاكهة والإنهاء المبكر للحمل. وبالتالي، فإن عدم تطابق الزوجين في مستضدات HLA والفرق بين المستضدات الجنينية وبروتينات HLA الأمومية هي عوامل ضرورية للحفاظ على الحمل.
المهم بالنسبة للحمل ليس فقط عدد التطابقات، ولكن أيضًا مجموعة الأزقة لكل زوج. وهكذا، في الأزواج الذين يعانون من ثلاث حالات إجهاض أو أكثر، تم اكتشاف زيادة في عدد بعض الأليلات: في النساء - DQB1 0301، 0501، 0602؛ عند الرجال – DRB1 10، 12؛ DQA1 0102، DQA1 0301، 0102؛ DQB1 0501، 0602. أيضًا، مع حالات الإجهاض المتكررة، يتناقص تكرار حدوث أليلات DRB1 03 وDQB1 0303 لدى كل من النساء والرجال، مما يشير إلى تأثيرهم الوقائي على مسار الحمل.
بالإضافة إلى ذلك، ثبت أن بعض الأليلات يمكن أن تعطل عملية تكوين الحيوانات المنوية لدى الرجال وتؤثر على جودة الخلايا الجرثومية، مما يؤثر لاحقًا على فائدة الجنين.
اختبار توافق HLA
لا يتم تضمين اختبار توافق HLA في خوارزمية الفحص الأولي للأزواج الذين يعانون من العقم. يوصى بإجرائه فقط للأزواج الذين يعانون من الإجهاض المتكرر، وكذلك بعد محاولتين أو أكثر من محاولات التلقيح الاصطناعي غير الناجحة.
يمكن تحديد عدم التوافق البيولوجي للشركاء في جينات HLA من الدرجة الثانية إذا كان لدى الأشخاص عدد كبير من التطابقات (أربعة أو أكثر من أصل ستة ممكنة) لجينات DRB1 وDQA1 وDQB1.
في حالة الاشتباه في عدم التوافق النسيجي بين الشركاء، بالإضافة إلى التنميط الجيني، يتم تنفيذ الطرق المناعية التالية لفحص الأم الحامل:
تحليل تكوين الخلايا الليمفاوية في الدم.
- تقييم حالة الإنترفيرون؛
- تحديد خصائص حجب المصل الأنثوي (BF)؛
-تركيز الأجسام المضادة للكريات البيض المضادة للأب (AOAT) ؛
- مستوى الأجسام المضادة الذاتية (الأجسام المضادة للفوسفوليبيد، الذئبة المضادة للتخثر)؛
- محتوى الأجسام المضادة لموجهة الغدد التناسلية المشيمية البشرية.
- تحديد الحساسية للمناعة.
في النساء المصابات بالعقم والإجهاض المتكرر، قد يرتفع مستوى الخلايا القاتلة الطبيعية (الخلايا القاتلة)، والإنترفيرون في الدم، وقد تنخفض استجابة الإنترفيرون لخلايا الدم البيضاء ومحتوى BP وAOAT.
ومع ذلك، تجدر الإشارة إلى أن عمليات التنظيم المناعي للصحة الإنجابية معقدة ولم تتم دراستها بشكل كاف، ولا يزال دور مستضدات HLA غير معترف به من قبل جميع المتخصصين.
بالإضافة إلى ذلك، بالإضافة إلى نظام HLA، هناك عوامل أخرى تؤثر على مسار الحمل: أهبة التخثر، واضطرابات استقلاب حمض الفوليك، وفرط الهوموسستئين في الدم، واضطرابات الكروموسومات الجنينية، وما إلى ذلك. ويجب أيضًا تضمين اختبارات الكشف عنها في خوارزمية فحص الإجهاض. .
"التطعيم" بالخلايا الليمفاوية للزوج
حتى الآن، فإن بيانات الأدبيات العالمية متناقضة للغاية بشأن مسألة التصحيح المحتمل لاضطرابات المناعة في الصحة الإنجابية. ومع ذلك، في الوقت الحاضر، عندما يتم اكتشاف عدم التوافق المناعي لشركاء جينات HLA في الأزواج الذين يعانون من الإجهاض المتكرر ومحاولات التلقيح الصناعي غير الناجحة، يتم استخدام التحصين النشط للمرأة ("التطعيم") مع الخلايا الليمفاوية لزوجها - العلاج المناعي اللمفاوي (LIT) كطريقة رئيسية لـ مُعَالَجَة.
وتتمثل آلية عمله في تنشيط الاستجابة المناعية لدى الأم، بهدف الحفاظ على زرع الجنين، استجابة لحقن الكريات البيض تحت الجلد من والد الطفل الذي لم يولد بعد.
موانع استخدام LIT هي: التهاب الكبد B وC المنقول عن طريق الشريك؛ الأمراض الفيروسية في الفترة الحادة. في هذه الحالات، إذا لزم الأمر، يتم استخدام الخلايا الليمفاوية من متبرع تم فحصه.
لتطبيع حالة الإنترفيرون، يتم وصف محفزات الإنترفيرون (Galavit، Immunomax، Imunofan) في المرحلة الأولى، اعتمادًا على الحساسية المكتشفة للدواء.
يتم بعد ذلك تنفيذ LIT. للقيام بذلك، يتم حقن المرأة داخل الأدمة بالكريات البيضاء التي تم الحصول عليها من قبل زوجها بجرعة تتراوح بين 50-100 مليون، تليها (بعد 3 أسابيع) مراقبة مؤشرات الحالة الوظيفية للجهاز المناعي. من الممكن في المستقبل زيادة جرعة الخلايا الليمفاوية (100 أو 150 مليون خلية) اعتمادًا على عدد التطابقات مع مستضدات HLA ومؤشرات الحالة المناعية.
يتم تنفيذ الإجراء في الأيام 5-9 من الدورة الشهرية، مرة واحدة في الشهر، 2-3 أشهر قبل الحمل المخطط أو برنامج التلقيح الصناعي تحت سيطرة الحالة الوظيفية للجهاز المناعي (تحليل تكوين الخلايا الليمفاوية في الدم، مؤشرات BF وAOAT).
بعد LIT، تزداد قيم BF وAOAT لدى المرأة بمقدار 1.5 و3 مرات على التوالي. نتيجة لذلك، في المتزوجين الذين لديهم تطابقات HLA، يزيد معدل الحمل بمقدار مرتين. لوحظ التأثير الأكثر وضوحًا لهذا العلاج في الأزواج الذين لديهم 4 أو أكثر من تطابقات HLA: يصبحون حاملاً 3-4 مرات أكثر من الأزواج "غير المطعمين". بعد الحمل، يستمر LIT طوال الأشهر الثلاثة الأولى، بدءًا من 4-5 أسابيع، ثم كل 3-4 أسابيع تحت مراقبة مستويات ضغط الدم.
"التطعيم" بالخلايا الليمفاوية لدى الزوج يسمح للنساء المصابات بالإجهاض المناعي بالحمل وإنجاب طفل سليم!
دائما معك،
تساهم الاضطرابات المناعية في جسم الزوجين في العديد من حالات الفشل أثناء الإخصاب في المختبر. واحدة من أكثر فئات الاضطرابات المناعية شيوعًا هي هوية الزوج والزوجة وفقًا لنظام مستضد HLA.
لقد تم مؤخرًا التوصية بشكل متزايد بإجراء اختبارات توافق الأزواج مع HLA للأزواج الذين قاموا بالفعل بمحاولات التلقيح الاصطناعي غير الناجحة. إن تحديد HLA لرجل وامرأة قررا اللجوء إلى التلقيح الصناعي كفرصة أخيرة لإنجاب ذرية يجعل من الممكن تحديد درجة "عدم التوافق". كقاعدة عامة، يتم وصف كتابة HLA لتوضيح سبب العقم، وكذلك لتحديد طرق العلاج الإضافي.
توافق HLA
توجد مستضدات HLA على سطح جميع خلايا الجسم تقريبًا، ولكن هذه الجزيئات ممثلة بشكل كامل في الكريات البيض، ولهذا السبب حصلت على اسمها. كل شخص لديه مجموعته الشخصية من مستضدات HLA. وبفضل جزيئاتها، يتمتع الجسم بالقدرة على تمييز خلاياه عن الخلايا الأجنبية، وإنتاج أجسام مضادة محددة إذا لزم الأمر. فهي تساعد في تدمير العوامل الأجنبية، والتي يمكن أن تكون فيروسات وخلايا سرطانية وبكتيريا.
يتم تحديد وجود مستضدات HLA في كل شخص من خلال نفس المجموعة الشخصية من جينات HLA. يتلقى الطفل من والديه مجموعة فردية تمامًا من جينات HLA، تشبه في تفردها بصمات الأصابع. هناك فئتان من مستضدات HLA: مستضدات المواقع A وB وC ومستضدات المواقع DR وDP وDQ. توجد مستضدات HLA من الدرجة الأولى على سطح أي خلية، بينما توجد مستضدات HLA من الدرجة الثانية فقط على سطح تلك الخلايا التي تشارك في التفاعلات المناعية. وتشمل هذه الخلايا الليمفاوية التائية المنشطة، والخلايا الليمفاوية البائية، والخلايا الوحيدة، والخلايا الجذعية، والبلاعم.
توافق HLA والحمل
من خلال وراثة مستضدات التوافق النسيجي، يتلقى الجنين جينًا واحدًا لكل موضع من الأم والأب. وهكذا فإن نصف المستضدات موروثة من الأب، ولهذا السبب يكون الطفل الذي تحمله المرأة نصف غريب عنها. في الظروف العادية، ينتمي هذا العامل إلى فئة الظواهر الفسيولوجية العادية. إن إطلاق التفاعلات المناعية الناتجة عن هذه العملية يضمن الحفاظ على الحمل. يساهم تكوين استنساخ الخلايا المناعية في إنتاج أجسام مضادة خاصة.
في جسم المرأة غير الحامل، تجد الخلايا المناعية التي تعمل ككشافة بروتينات المجمع الرئيسي لمستضدات HLA على سطح أي خلية. عند اكتشاف "الغرباء"، على سبيل المثال، الخلايا السرطانية أو الفيروسات التي يتم إدخالها من الخارج، يعطي الجهاز المناعي الأمر بالتدمير. إذا حدثت هذه العملية بنفس الترتيب عند حدوث الحمل، فلن يكون لدى الجنين فرصة للبقاء على قيد الحياة، لأنه "غريب" بالنسبة لجسم الأم.
لكن هذا لا يحدث لأن الجهاز المناعي للأم أثناء الحمل لا يميز بين الهياكل الخلوية للجنين. خلال هذه الفترة، تساهم الخلايا الليمفاوية B في بطانة الرحم في إنتاج الأجسام المضادة الواقية الموجهة ضد مستضدات HLA التي يتلقاها الطفل كميراث من الأب. تحجب هذه الأجسام المضادة مستضدات HLA الخاصة بالأب، وتحميها من الخلايا المناعية للأم، التي تعمل ككشافة، والتي بسببها لا تستطيع هذه الأخيرة نقل المعلومات إلى الخلايا القاتلة. ولهذا السبب، لا يتم تنشيط رد الفعل المناعي لجسم الأم استجابة لظهور خلايا "غريبة" في البداية، ويتجذر الجنين بنجاح.
في هذه الحالة، فإن الافتقار إلى هوية مستضدات HLA الخاصة بالزوجين له أهمية كبيرة، لأنه فقط في هذه الحالة تكون آلية تحفيز الأجسام المضادة التي تساعد في الحفاظ على الحمل. إذا كانت مستضدات HLA الخاصة بالوالدين متشابهة، فلن يتم إنتاج الأجسام المضادة، التي تتمثل مهمتها الرئيسية في منع مستضدات HLA الأبوية. ونتيجة لذلك، ترى الخلايا الكشفية الجنين كجسم غريب، مما يؤدي إلى تشغيل نظام التدمير ضده. نتيجة هذه العملية هي الإجهاض. كلما زاد عدد مستضدات HLA لدى الوالدين، قلّت احتمالية استمرار الحمل حتى نهايته.
الكتابة HLA
غالبًا ما يصبح وجود هوية HLA هو سبب العقم عند النساء أو الإجهاض المتكرر. ولهذا السبب يوصي الأطباء في كثير من الأحيان بأن يخضع المرضى الذين اختاروا الإخصاب في المختبر كوسيلة لعلاج العقم إلى اختبار HLA مع أزواجهن. لا تشمل مؤشرات كتابة HLA العقم فحسب، بل تشمل أيضًا تاريخًا من حالات الإجهاض أو محاولات التلقيح الاصطناعي غير الناجحة.
تتضمن كتابة HLA تحليل تعدد أشكال HLA ويتم إجراؤها عادةً بطريقتين. الأول منهم، الكلاسيكي، يعتمد على اختبار السمية اللمفاوية الدقيقة. يتضمن استخدام الطريقة الوراثية الجزيئية إجراء تفاعل البلمرة المتسلسل.
يتم إجراء كتابة HLA الكلاسيكية أو المصلية على مجموعات الخلايا المعزولة. نظرًا لأن مستضدات مجمع التوافق النسيجي الرئيسي يتم حملها في الغالب بواسطة الخلايا الليمفاوية، يتم استخدام معلق الخلايا اللمفاوية التائية لتحديد مستضدات الفئة الأولى، ويتم استخدام معلق الخلايا الليمفاوية البائية لمستضدات الفئة الثانية. من أجل عزل مجموعات الخلايا المطلوبة من الدم الكامل، يتم استخدام طريقتين - الفصل المناعي المغناطيسي أو الطرد المركزي. كقاعدة عامة، يتم استخدام الطريقة الأولى بشكل أساسي، لأن الثانية غالبا ما تصبح مصدرا للبيانات الإيجابية الخاطئة بسبب وفاة بعض الخلايا.
لإجراء اختبار كتابة HLA السام للخلايا اللمفاوية، يتم استخدام مصل خاص يحتوي على أجسام مضادة لأنواع مختلفة من المستضدات من كلا الفئتين. في عملية إجراء اختبار مصلي، ودراسة نوع المصل الذي يتفاعل مع الخلايا الليمفاوية، من الممكن تحديد نوع HLA. إذا حدث تفاعل بين المصل والخلية، يتم تشكيل مركب من الأجسام المضادة للمستضد على سطح الأخيرة. إذا تمت إضافة محلول يحتوي على مكمل إلى المصل، فإن تدمير الخلية وموتها أمر لا مفر منه.
لتقييم الطريقة المصلية لكتابة HLA، يتم استخدام الفحص المجهري الفلوري، حيث يشير الفلورة الحمراء إلى تفاعل إيجابي، ويشير الفلورة الخضراء إلى تفاعل سلبي. عند تحديد نتيجة هذه الطريقة، يتم أخذ خصوصية الأمصال التي أظهرت التفاعل، وكذلك مجموعات معينة من المستضدات التي دخلت في تفاعل متقاطع، بعين الاعتبار. بالإضافة إلى ذلك، يتم أيضًا أخذ شدة التفاعل السام للخلايا في الاعتبار.
طريقة الكتابة HLA هذه لها عيوب معينة:
- انخفاض التعبير عن مستضدات HLA أو ضعف تقارب الأجسام المضادة؛
- وجود ردود فعل متقاطعة.
- غياب المنتجات البروتينية في بعض جينات HLA.
يتضمن استخدام الطرق الوراثية الجزيئية لكتابة HLA استخدام عينات اصطناعية جاهزة تتفاعل مع الحمض النووي، وليس مع المستضدات، مما يجعل من الممكن التحديد الدقيق لوجود أنواع معينة من المستضدات في العينة. لا تتطلب هذه الطريقة، من بين أمور أخرى، وجود كريات الدم البيضاء الحية، ويمكن استخدامها لدراسة أي خلية في الجسم، ولا تتطلب الدراسة سوى كمية ضئيلة من الدم. في بعض الحالات، يكفي إجراء كشط مأخوذ من الغشاء المخاطي للفم.
عند استخدام الطريقة الجزيئية لكتابة HLA، يتم استخدام طريقة PCR. المرحلة الأولى هي استخراج الحمض النووي الجينومي النقي أو الأنسجة أو معلقات الكريات البيض من الدم الكامل. بعد ذلك، في أنبوب اختبار، باستخدام الحمض النووي القصير المفرد المحدد لموضع HLA معين، يتم الحصول على نسخة من عينة الحمض النووي الموجودة. يتم تكرار هذه العملية عدة مرات للحصول على عدد كافٍ من أجزاء الحمض النووي للتقييم البصري. ولهذا الغرض، يتم إخضاع مخاليط التفاعل للتهجين أو التحليل الكهربائي، ومن ثم يتم تحديد وجود تضخيم محدد.
تعتبر كتابة HLA الوراثية الجزيئية أكثر دقة من الكتابة المصلية. ويرجع ذلك إلى وجود عينات موحدة. بالإضافة إلى ذلك، توفر كتابة HLA الجزيئية معلومات أكثر أهمية فيما يتعلق بأليلات الحمض النووي الجديدة، كما توفر تفاصيل أفضل من خلال تحديد كل من المستضدات والأليلات نفسها. وهذا الأخير بدوره يحدد وجود نوع معين من المستضد في الخلية.
إذا كان هناك الكثير من المصادفة، فلن يحدث الحمل بدون العلاج المناعي المناسب. يتم تنفيذ مسار العلاج قبل بدء بروتوكول الإخصاب في المختبر، وعادة ما يستغرق 2-3 أشهر. يوصف للمريض مستحضرات الغلوبولين المناعي، على سبيل المثال، إنتراغلوبين، أوكتاغام وغيرها. يتم إجراء دورة علاجية أخرى في بداية الحمل، مما يساعد على تقليل خطر رفض الجنين.
حدد الرسائل من آخر: أيام
مرحبا فالنتينا!
هذا هو التحليل الوراثي الجزيئي الذي يوضح تكوين الجينات التي تشفر بروتينات التوافق النسيجي. يُطلق على نظام جينات التوافق النسيجي اسم HLA أو MHC (هما نفس الشيء). هذه هي مثل فصائل الدم، فقط عدد الخيارات لكل موقف كبير.
DRB1 وDQA1 وDQB1 هي أسماء الجينات. تقوم هذه الجينات بتشفير بروتينات التوافق النسيجي من الدرجة الثانية (DR وDQ). يتكون كل جزيء DR وDQ من سلسلتين من البروتين (ألفا وبيتا). لذلك، يتم الحصول على جينين لكل موضع (DRA1 وDQA1 يشفران سلاسل ألفا للبروتينات المقابلة، وDRB1 وDQB1 يشفران سلاسل بيتا). نظرًا لأن سلاسل ألفا DR هي نفسها لدى معظم الأشخاص، فلا تتم كتابتها عادةً وبالتالي لا يتم تمثيلها في التحليل. بعد العلامة النجمية يوجد رقم متغير الجينات. في كل موضع ترى سطرين - وهما نسختان من كل جين. يتلقى الشخص نسخة واحدة من والده، وواحدة من والدته. سيحصل كل طفل من أطفالك على أحد هذه الخيارات (واحد من الأب، وواحد من الأم). لذلك، سيكون لدى كل طفل مجموعة من جينات HLA الخاصة بالأب والأم. وتستخدم هذه الاختبارات الآن لتحديد الأمومة والأبوة.
تتم الكتابة باستخدام طريقة PCR. يتم إجراء الكتابة لـ HLA DRB1 بدقة تصل إلى رقمين، بالنسبة للجينات الأخرى - بدقة تصل إلى 4 أرقام. يشير أول رقمين إلى عدد مجموعة متغيرات الجينات، ويحدد الرقمان التاليان متغير الجينات داخل المجموعة. وهذا يعني أن 0501 ليس الرقم خمسمائة وواحد، بل الخيار صفر خمسة - صفر واحد. إذا تم عرض الخيارات ككسر، فهذا يعني أن هناك أحد الخيارات العديدة المدرجة (0502 أو 0504)، فإن دقة التحليل لا تسمح لنا بتحديد أي من الاثنين. إذا ظهرت واصلة، فهذا يعني نطاقًا من أرقام الخيارات (على سبيل المثال، 0602-8 يعني 0602 أو 0603 أو 0604، وما إلى ذلك حتى 0608). يشير العمود الثاني إلى متغيرات البروتينات الموجودة على سطح الخلايا والتي يمكن لهذا الجين تشفيرها.
في حالتك، يقوم جين DRB1*09 بتشفير بروتين DR9. إذا ظهرت الأقواس، فإنها تشير إلى التسمية القديمة لمتغير البروتين، والتي تم توضيحها لاحقًا من خلال الدراسات الوراثية الجزيئية. في حالتك، من الواضح أن DRB1*15، الذي لديك، وDRB1*16، الذي لدى زوجك، متشابهان في سلوكهما في زراعة الخلايا وتم تحديدهما على أنهما DR2 من خلال الطرق الثقافية، وقد أثبتت الدراسات اللاحقة ذلك ضمن هناك نوعان مختلفان من صنف DR2، تم تخصيصهما للأرقام 15 و16. يتم تحديد انتماء بروتين DR وDQ إلى متغير واحد أو آخر من خلال سلسلة بيتا، وبالتالي لا تتم الإشارة إلى أي تطابقات مع الخطوط ذات DQA1. من الواضح الآن أنه في هذا التحليل هناك تطابق بين الزوجين في DQA1*0102 وتشابه بين الزوجين في DR2 وDQ3 وDQ6. تُستخدم هذه الاختبارات لاختيار المتبرعين لزراعة الأعضاء. إذا كان المتبرع والمتلقي متطابقين تمامًا، فسوف يتجذر العضو، وإذا لم يكن الأمر كذلك، فسيتم رفضه.
أثناء الحمل هو العكس. تسعى الطبيعة إلى تحقيق أقصى قدر من التنوع في النسل، وإذا كان الجنين مشابهًا لكائن الأم في جينات HLA، فستكون لديه فرصة أقل للبقاء على قيد الحياة. يتضمن جسم الأم ردود فعل تهدف إلى الحفاظ على الحمل ببطء شديد، أو بعد فوات الأوان، وقد يتوقف تطور الحمل. لا ينبغي المبالغة في أهمية هذه الآلية، لأنها لا تدخل في جميع الحالات، وهي في معظمها أحد عوامل الإجهاض الإضافية. يمكنك تحديد كيفية تفاعل جسم الأم مع الجنين الذي يرث جينات التوافق النسيجي للأب باستخدام دراسة مناعية خاصة تسمى MLC، باللغة الروسية. اس كي ال (زراعة مختلطة من الخلايا الليمفاوية، ويمكن إجراء هذا التحليل في مختبرنا).
إذا ضعف رد الفعل تجاه الخلايا الليمفاوية لدى الزوج، فيمكن تقويته بمساعدة تطعيم خاص، يمكن إجراء LIT (العلاج المناعي للخلايا الليمفاوية، في المركز) باستخدام الخلايا الليمفاوية المانحة أو الخلايا الليمفاوية للزوج. إذا كان رد الفعل في SCL جيدًا، فليس من الضروري استخدام LIT. وبالتالي، من المستحيل تغيير تكوين جينات التوافق النسيجي، ولكن من الممكن تثقيف الجهاز المناعي للأم بالطريقة الصحيحة. لا يقتصر استخدام تحليل كتابة HLA على تشخيص العقم والإجهاض وإثبات الأبوة.
وفي بعض الحالات، يمكن لهذا التحليل التنبؤ بمخاطر المرض. على سبيل المثال، يوصف من قبل أطباء الغدد الصماء لتحديد خطر الإصابة بمرض السكري. تقريبا جميع مرضى السكري لديهم متغير DR3 أو DR4.
لحل مشكلة
يمكن أن يكون سبب العديد من حالات الفشل عند محاولة إنجاب طفل هو الاضطرابات المناعية لدى الزوجين. أحد أكثر هذه الاضطرابات شيوعًا هو هوية مستضدات HLA لدى النساء والرجال. لذلك، يُنصح الأزواج الذين لم يتمكنوا من إنجاب طفل لفترة طويلة بالتحقق من توافق HLA لديهم. يسمح لك اختبار الدم HLA للتوافق مع الزوج بتحديد درجة "عدم التوافق". تتيح كتابة HLA توضيح أسباب العقم وتحديد أساليب العلاج الإضافية للزوجين.
تحليل الكتابة HLA
توجد على سطح جميع خلايا الجسم مستقبلات خاصة - مستضدات البروتين لمجمع التوافق النسيجي الرئيسي. يضمن الهيكل الفريد لهذه المستقبلات لدى كل شخص موثوقية الجهاز المناعي، الذي يعمل وفقًا لمبدأ "الصديق أو العدو". يحتوي سطح الكريات البيض على معظم مستضدات HLA. عندما يتغير هيكل المستقبلات (الكشف عن جسم غريب أو تنكس ورم في الخلية)، يرتبط المستضد بالخلايا المناعية ويبدأ إطلاق الاستجابة المناعية من خلال مجمع HLA.
يتلقى الجنين جينًا واحدًا من كل من الوالدين، وبالتالي يرث 50% من المعلومات الجينية منهما. حقيقة أن الطفل جسم غريب عن جسم الأم يؤدي إلى تفاعلات مناعية معينة تساعد في الحفاظ على الحمل. تعد الاختلافات في التركيب البروتيني لمستضدات HLA للجنين والأمهات عاملاً مهمًا للتطور الكامل للحمل. ينتج جسم الأم عادةً أجسامًا مضادة لمستضدات الطفل منذ المراحل الأولى. عندما تكون مستضدات HLA للوالدين متشابهة، وهو ما يحدث في زواج الأقارب، نتيجة لأي اضطرابات في الغدد الصماء أو المناعة لدى الأم، يتم تعطيل التحفيز المستضدي، ويتعقد مسار الحمل بسبب تسمم الحمل الشديد أو قد ينتهي تلقائيًا. ومن بين كل ثالث حالات العقم والإجهاض المتكرر، يكون السبب هو الخصائص الوراثية للزوجين.
لتحديد درجة تشابه مستضدات HLA، يخضع الزوجان لتحليل كتابة HLA. للتحليل، يتم أخذ الدم الوريدي، الذي يتم عزل الكريات البيض منه، ثم يتم إجراء كتابة HLA باستخدام طريقة تفاعل البلمرة المتسلسل.
متى يكون من الضروري إجراء اختبار التوافق؟
من المستحسن أن يخضع آباء المستقبل لفحص سريري حتى قبل الحمل المتوقع. يتم طلب الفحوصات اللازمة وإصدار الإحالة للفحص من قبل المعالج وطبيب أمراض النساء. عندما تكون جميع الاختبارات ممتازة، ولكن لا يحدث الحمل، فقد لا يكون السبب صحة الشركاء بشكل فردي، ولكن قد يكون مخفيًا في التوافق المناعي للزوجين.
يؤدي تشابه الشركاء من حيث توافق الأنسجة إلى عدم كفاية نشاط الجهاز المناعي لدى المرأة، ونتيجة لذلك، لا يقوم الجسم بإثارة ردود الفعل اللازمة للحمل والحفاظ عليه.
في كثير من الأحيان، ينظر جسم المرأة إلى الحيوانات المنوية لدى الرجل على أنها عوامل ضارة ويبدأ في الإنتاج المكثف لبروتينات الأجسام المضادة التي تحيدها، مما يؤدي إلى قمع القدرة على الإخصاب. استحالة التقاء الحيوان المنوي بالبويضة يجعل الحمل مستحيلا.
وبالتالي، فإن الحالات التي يكون فيها من الضروري إجراء اختبار التوافق ليست غير شائعة. لاستبعاد احتمال ظهور مثل هذه المشاكل بين الزوجين، يحتاج كلاهما إلى الخضوع لفحص الدم من أجل التوافق، وكتابة HLA.
تحصين
عندما يقرر الزوجان، بعد التشاور مع الطبيب، الاستمرار في محاولة إنجاب طفل عادي، فقد يوصى بإجراء التحصين الإيجابي أو السلبي.
يتم إجراء التحصين النشط للأم من خلال مزرعة مركزة للخلايا الليمفاوية من الشريك أو المتبرع، مما يسمح بالتغلب على مشكلة تشابه الشركاء في مستضدات HLA. يجب أن "يعلم" الإجراء الجسد الأنثوي التعرف على خلايا الشريك. عادة، يتم تنفيذ الإجراء على ثلاث مراحل باستخدام دواء مصنوع من دم الشريك أو المتبرع. حتى الآن، تنقسم آراء علماء الوراثة وعلماء المناعة حول فعالية العلاج المناعي بالخلايا الليمفاوية إلى النصف. من جهة، تعتبر هذه الطريقة وسيلة للخلاص، ومن جهة أخرى، يتم إنكار معناها بالكامل.
تشير بعض البيانات إلى أن طريقة التحصين النشط المختارة بعناية والموصوفة في الوقت المناسب تكون فعالة بنسبة 60٪. لسوء الحظ، لا يمكن الآن إكمال إجراءات التحصين بالخلايا الليمفاوية إلا في بعض المدن الكبيرة.
يعتبر التحصين السلبي أكثر سهولة ولا يتطلب فترة إعداد طويلة، ولكن البيانات حول فعاليته متضاربة. تتكون هذه الطريقة من تحصين الأم باستخدام مستحضرات الغلوبولين المناعي. يتم وصف الدواء حصريًا من قبل الطبيب، عادةً عن طريق الوريد، على ثلاث مراحل.
تكمن أهمية هذه الاختبارات في أنها توفر للزوجين الفرصة لاتخاذ قرار مستنير عند تقييم مخاطر الاستمرار في محاولة الحمل أو اختيار بنك البويضات والحيوانات المنوية. لذلك، قبل اتخاذ مثل هذا القرار الجاد، من الضروري الحصول على المعلومات ذات الصلة والاستعانة برأي العديد من علماء المناعة وعلماء الوراثة.
