Серозный транссудат. Исследование транссудатов и экссудатов

Клиническое исследование Антимониум крудум в общем подходит в равной мере для лиц любого возраста жизни - как ребёнку, так и взрослому или старику.Органы пищеваренияУ ребёнкаВнезапно, пососав грудь, младенец рвет свернувшимся молоком и отказывается снова взять грудь.

Часть I. Исследование крови

Часть II. Исследование мочи Не все отходы удаляются из организма именно почками, но почки - органы единственной системы тела, занятой главным образом удалением ненужных веществ. Все другие органы, которые также действуют как «уборщики отходов», находятся в других

Часть III. Исследование содержимого желудка Желудочно-кишечный тракт (ЖКТ) - одна из систем организма, обеспечивающая механическую и химическую обработку пищи. Онсостоит из собственно пищеварительной трубки и вспомогательных желез. Желудок, тонкий кишечник, часть

Часть V Исследование кала Ободочная кишка (она называется также толстой кишкой) собирает и удаляет отходы, которые организм не способен переварить (переработать). К тому времени, когда остатки пищи достигают ободочной кишки, организм поглощает из нее почти все

Часть VI. Исследование гормонального статуса Наше тело имеет два способа управления тканями. Первый - с помощью нервной системы, с ее бесконечными километрами нервных путей. Безусловное преимущество этого способа управления - быстрота действия. Эту скорость может

Часть VII Исследование выделений половых органов Исследование выделений половых органов - это ряд клинических анализов, которые приходится делать и женщинам, посещающим гинекологический кабинет, и мужчинам, обращающимся к урологам. Эти анализы позволяют определить

Часть VIII. Исследование мокроты Мокрота выделяется во время кашля из дыхательных путей. Когда больной собирает материал для анализа, он должен помнить об этом и не собирать вместо мокроты слюну или слизь из носоглотки.Состав, количество, цвет, запах и консистенция мокроты

Часть IX. Исследование спинномозговой жидкости Цереброспинальная жидкость - жидкая биологическая среда организма, циркулирующая в желудочках головного мозга, субарахноидальном пространстве головного и спинного мозга. Выполняет в центральной нервной системе

Часть XI Исследование костного мозга Красный костный мозг у взрослого человека находится в эпифизах (конечных участках) трубчатых костей и губчатом веществе плоских костей. Несмотря на разобщенное положение, функционально костный мозг связан в единый орган благодаря

Транссудат , невоспалительный выпот - результат пропотевания сыворотки крови; скапливается в полостях и тканях тела при нарушениях кровообращения, водно-солевого обмена, повышении проницаемости стенок капилляров и венул. От воспалительного выпота (экссудата ) отличается главным образом низким содержанием белка (не более 2 %; плохо связывается белковыми коллоидами).

Отличие экссудата от транссудата

При дифференциальной диагностике выпотов важно отличать экссудат от транссудата. Транссудат образуется из-за нарушения гидростатического или коллоидно-осмотическое давления, а не воспаления. По своему составу наиболее близок к транссудату серозный экссудат.

Транссудат содержат небольшое количество белка, по сравнению с экссудатом. Разницу между транссудатом и экссудатом можно определить измерив удельный вес жидкости, который косвенно будет говорить о содержании в ней белка. Кроме того, при определении природы жидкости может оказаться полезной проба Ривальта .

Автор (ы): О.Ю. КАМЫШНИКОВ ветеринарный врач-патоморфолог, «Ветеринарный центр патоморфологии и лабораторной диагностики доктора Митрохиной Н.В.»
Журнал: №6-2017

Ключевые слова : транссудат, экссудат, выпот, асцит, плеврит

Key words : transudate, exudate, effusion, ascites, pleurisy

Аннотация

Исследование выпотных жидкостей в настоящее время имеет высокую значимость в диагностике патологических состояний. Полученные данные этого исследования позволяют врачу-клиницисту получить информацию о патогенезе образования выпота и корректно организовать лечебные мероприятия. Однако на пути диагностики всегда возникают определенные сложности, способные привести в диагностическую ловушку. Необходимость в данной работе появилась в связи с растущей потребностью в освоении и применении метода исследования выпотных жидкостей в клинике врачами клинической лабораторной диагностики и врачами-цитологами. Поэтому внимание будет уделено как главным задачам врачей-лаборантов – дифференцировать выпот на транссудат и экссудат, так и важнейшей задаче врачей-цитологов – верифицировать клеточный компонент жидкости и сформулировать цитологическое заключение.

Examination of effusion fluids currently has a high significance in the diagnosis of pathological conditions. The findings of this study allow the clinician to obtain information on the pathogenesis of effusion formation, and to correctly organize medical interventions. However, on the path of diagnosis, there are always certain difficulties that can lead to a diagnostic trap. The need for this work has emerged in connection with the growing need for mastering and applying the method of examining exudate fluids in the clinic by physicians of clinical laboratory diagnostics and cytologists. Therefore, attention will be paid, as well as the main tasks of laboratory assistants - to differentiate the effusion to transudate and exudate, and the most important task of cytologists is to verify the cellular component of the fluid and formulate a cytological conclusion.

Сокращения : ЭС – экссудат, ТС – транссудат, Ц – цитология, МК – мезотелиальные клетки.

История вопроса

Хотелось бы осветить немного исторических данных, сформировавших современный образ лабораторной диагностики выпотных жидкостей. Исследование жидкостей из серозных полостей применялось уже XIX в. В 1875 г. H.J. Quincke и в 1878 г. E. Bocgehold указывали на такие характерные признаки опухолевых клеток, как жировая дегенерация и большие размеры по сравнению с мезотелиальными клетками (МК). Успех подобных исследований был относительно небольшим, так как метода исследования фиксированных и окрашенных препаратов еще не существовало. Пауль Эрлих в 1882 г. и М.Н. Никифоров в 1888 г. описали специфические методы фиксации и окрашивания биологических жидкостей, таких как мазки крови, выпотные жидкости, отделяемое и т.д. J.C. Dock (1897) указал, что признаками раковых клеток служат значительное увеличение размера ядер, изменение их формы и расположения. Он отметил также атипию мезотелия при воспалении. Румынский патологоанатом и микробиолог A. Babes создал основу современного цитологического метода с использованием азуровых красителей. Дальнейшее развитие метода происходило совместно с вхождением в практическую медицину лабораторной диагностики, которая в нашей стране включила в ряды своих специалистов врачей-цитологов. Клиническая цитология в СССР как метод клинического обследования больных начала применяться в 1938 г. Н.Н. Шиллер-Волковой. Развитие клинической лабораторной диагностики в ветеринарной медицине происходило с значительным отставанием, так, первый фундаментальный труд отечественных врачей и ученых этой области знания увидел свет лишь в 1953–1954 гг. Это был трехтомник «Ветеринарные методы исследования в ветеринарии» под редакцией проф. С.И. Афонского, д.в.н. М.М. Иванова, проф. Я.Р. Коваленко, где впервые методы лабораторной диагностики, несомненно экстраполированные из сферы медицины человека, были доступно изложены. С тех давних пор по настоящее время метод исследования выпотных жидкостей постоянно совершенствовался, опираясь на фундамент приобретенных ранее знаний, и сейчас занимает неотъемлемую часть любого клинико-диагностического лабораторного исследования.

В данной работе предпринята попытка осветить основы и суть лабораторного исследования выпотных жидкостей.

Общая характеристика

Выпотными жидкостями называются компоненты плазмы крови, лимфы, тканевой жидкости, которые накапливаются в серозных полостях. По общепринятому убеждению, выпот – это жидкость в полостях тела, а в тканях по тому же принципу скапливается отечная жидкость. Серозные полости тела – это узкий промежуток между двумя листками серозной оболочки. Серозные оболочки – это пленки, происходящие из мезодермы, представленные двумя листками: париетальным (пристеночным) и висцеральным (органным). Микроструктура париетального и висцерального листка представлена шестью слоями:

1. мезотелий;

2. пограничная мембрана;

3. поверхностный волокнистый коллагеновый слой;

4. поверхностная неориентированная сеть эластических волокон;

5. глубокая продольная эластическая сеть;

6. глубокий решетчатый слой коллагеновых волокон.

Мезотелий – однослойный плоский эпителий, состоящий из плотно прилегающих друг к другу полигональных клеток. Несмотря на свою эпителиальную форму, мезотелий имеет мезодермальное происхождение. Клетки весьма разнообразны по своим морфологическим свойствам. Можно наблюдать двуядерные и трехъядерные клетки. Мезотелий постоянно секретирует жидкость, выполняющую скользяще-амортизационную функцию, способен к крайне интенсивной пролиферации, проявляет характеристики соединительной ткани. На поверхности МК находится множество микроворсинок, увеличивающих поверхность всей оболочки серозной полости приблизительно в 40 раз. Волокнистый слой соединительной ткани листков серозных оболочек определяет их подвижность. Кровоснабжение серозной оболочки висцерального листка осуществляется за счет сосудов того органа, который она покрывает. А для париетального листка основой системы кровообращения является широкопетлистая сеть артерио-артериолярных анастомозов. Капилляры располагаются сразу под мезотелием. Лимфоотток от серозных оболочек хорошо развит. Лимфатические сосуды сообщаются с серозными пространствами благодаря особым отверстиям – стоматам. По причине этого даже незначительная закупорка дренажной системы может привести к накоплению жидкости в серозной полости. А анатомические свойства кровоснабжения располагают к быстрому возникновению кровотечения при раздражении и повреждении мезотелия.

Клиническая лабораторная диагностика выпотных жидкостей

При лабораторном исследовании решается вопрос принадлежности выпота к транссудату или экссудату, оцениваются общие свойства (макроскопический вид жидкости): цвет, прозрачность, консистенция.

Жидкость, скапливающаяся в серозных полостях без воспалительной реакции, называется транссудатом. Если жидкость собирается в тканях, то имеем дело с отеком (edema ). Транссудат может накапливаться в перикарде (hydropericardium ), брюшной полости (ascites ), плевральной полости (hydrothorax ), между оболочками яичка (hydrocele ).Транссудат обычно бывает прозрачным, почти бесцветным или с желтоватым оттенком, реже слегка мутноватым из-за примеси слущенного эпителия, лимфоцитов, жира и др. Удельный вес не превышает 1,015 г/мл.

Образование транссудата может быть вызвано следующими факторами.

1. Увеличением венозного давления, которое имеет место при недостаточности кровообращения, заболеваниях почек, циррозе печени. Транссудация является результатом увеличением проницаемости капиллярных сосудов в результате токсического поражения, гипертермии, расстройствами питания.
2. Уменьшением количества белка в крови, осмотическое давление коллоидов уменьшается при снижении альбумина плазмы крови менее 25 г/л (нефротический синдром различной этиологии, тяжелые поражения печени, кахексия).
3. Закупоркой лимфатических сосудов. В этом случае образуются хилезные отеки и транссудаты.
4. Нарушением обмена электролитов, главным образом повышение концентрации натрия (гемодинамическая сердечная недостаточность, нефротический синдром, цирроз печени).
5. Увеличением продукции альдостерона.

Одной фразой охарактеризовать образование транссудата можно так: транссудат возникает, когда гидростатическое или коллоидно-осмотическое давление изменяется в той мере, что жидкость, фильтрующаяся в серозную полость, превышает объем реабсорбции.

Макроскопические характеристики экссудатов позволяют отнести их к следующим видам.

1. Серозный экссудат может быть прозрачным или мутным, желтоватым или бесцветным (что определяется присутствием билирубина), разной степени мутности (рис. 1).

2. Серозно-гнойный и гнойный экссудат – мутная, желтовато-зеленая жидкость с обильным рыхлым осадком. Гнойный экссудат встречается при эмпиеме плевры, перитоните и др. (рис. 2).

3. Гнилостный экссудат – мутная жидкость серо-зеленого цвета с резким гнилостным запахом. Гнилостный экссудат характерен для гангрены легкого и других процессов, сопровождающихся распадом ткани.

4. Геморрагический экссудат – прозрачная или мутная жидкость, красновато- или буровато-коричневого цвета. Количество эритроцитов может быть различным: от небольшой примеси, когда жидкость имеет слабо-розовую окраску, до обильной, когда она сходна с цельной кровью. Наиболее частой причиной геморрагического выпота является новообразование, однако геморрагический характер жидкости большого диагностического значения не имеет, поскольку наблюдается и при ряде неопухолевых заболеваний (травма, инфаркт легкого, плеврит, геморрагический диатез). В то же время при злокачественных процессах с обширной диссеминацией опухоли по серозной оболочке может быть серозный, прозрачный выпот (рис. 3).

5. Хилезный экссудат – мутная жидкость молочного цвета, содержащая во взвешенном состоянии мельчайшие жировые капли. При добавлении эфира жидкость просветляется. Такой выпот обусловлен попаданием в серозную полость лимфы из разрушенных крупных лимфатических сосудов, абсцессом, инфильтрацией сосудов опухолью, филяриозом, лимфомой и др. (рис. 4).

6. Хилусоподобный экссудат – молочно-мутная жидкость, появляющаяся в результате обильного распада клеток с жировым перерождением. Так как кроме жира данный экссудат содержит большое число жироперерожденных клеток, добавление эфира оставляет жидкость мутной или просветляет ее незначительно. Хилусоподобный экссудат характерен для выпотных жидкостей, появление которых связано с атрофическим циррозом печени, злокачественными новообразованиями и др.

7. Холестериновый экссудат – густая желтоватого или буроватого цвета с перламутровым оттенком жидкость с блестящими хлопьями, состоящими из скоплений кристаллов холестерина. Примесь разрушенных эритроцитов может придавать выпоту шоколадный оттенок. На стенках пробирки, смоченной выпотом, видны слепки кристаллов холестерина в виде мельчайших блесток. Такой характер имеет осумковавшийся выпот, который длительно существует (иногда несколько лет) в серозной полости. При определенных условиях – обратном всасывании из серозной полости воды и некоторых минеральных компонентов экссудата, а также при отсутствии притока жидкости в замкнутую полость – экссудат любой этиологии может приобрести характер холестеринового.

8. Слизистый экссудат – содержит значительное количество муцина и псевдомуцина, может встречаться при мезотелиоме, слизеобразующих опухолях, псевдомиксоме.

9. Фибринозный экссудате– содержит значительное количество фибрина.

Встречаются также смешанные формы экссудата (серозно-геморрагический, слизисто-геморрагический, серозно-фибринозный).

В нативной выпотной жидкости необходимо провести исследование цитоза. Для этого сразу после пункции жидкость забирают в пробирку с ЭДТА, чтобы предотвратить ее сворачивание. Цитоз, или клеточность (в данном методе определяется только количество ядросодержащих клеток) проводят по стандартной методике в камере Горяева или на гематологическом анализаторе в режиме подсчета цельной крови. За количество ядерных клеток принимают значение WBC (white blood cell, или лейкоцитов) в тысячах клеток на миллилитр жидкости.

После определения цитоза жидкость можно центрифугировать с получением осадка для микроскопического исследования. Надосадочная жидкость, или супернатант, также может исследоваться на содержание белка, глюкозы и т.д. Однако не все биохимические параметры могут быть определены из жидкости с ЭДТА, поэтому рекомендовано также вместе с взятием выпота в пробирку с антикоагулянтом одновременно брать жидкость и в чистую сухую пробирку (например, центрифужную или для биохимического исследования). Отсюда следует, что для исследования выпотной жидкости в лаборатории необходимо получить материал как минимум в двух емкостях: пробирке с ЭДТА и в чистой сухой пробирке, а жидкость должна помещаться туда непосредственно сразу после эвакуации ее из полости тела.

Исследование осадка производится в лаборатории врачом-лаборантом или врачом-цитологом. Чтобы осадить выпотную жидкость, необходимо ее центрифугировать при 1500 об/мин в течение 15–25 минут. В зависимости от вида выпота образуется различный осадок по количеству и качеству (может быть сероватым, желтоватым, кровянистым, однослойным или двухслойным, изредка трехслойным). В серозном прозрачном выпоте осадка может быть крайне мало, его характер мелкозернистый, цвет серовато-белый. В мутном гнойном или хилезном выпоте с большим количеством клеток осадок образуется обильный, крупнозернистый. В геморрагическом выпоте с большой примесью эритроцитов образуется двухслойный осадок: верхний слой в виде белесоватой пленки и нижний в виде плотного скопления эритроцитов. А при разделении осадка на 3 слоя верхний чаще представлен компонентом разрушенных клеток и детрита. При приготовлении мазков на предметных стеклах материал из осадка берется из каждого слоя и приготавливается не менее 2-х мазков. При однослойном осадке рекомендовано изготавливать не менее 4-х стекол. При скудном количестве осадка готовится 1 мазок с максимальным количеством материала в нем.

Высушенные на воздухе при комнатной температуре мазки фиксируются и окрашиваются азур-эозином по стандартному методу (Романовского-Гимзы, Паппенгейма-Крюкова, Лейшмана, Нохта, Райта и т.д.).

Дифференциальная диагностика транссудатов и экссудатов

Чтобы дифференцировать транссудат от экссудата, можно пользоваться несколькими методами, в основе которых лежит определение физических и биохимических параметров жидкости. Различие основано на содержании белка, типе клеток, цвете жидкости и ее удельном весе.

Транссудат, в отличие от экссудата, - выпот невоспалительного происхождения, причем это жидкость, которая накапливается в полостях тела в результате влияния системных факторов регуляции гомеостаза на образование и резорбцию жидкости. Удельный вес транссудата ниже, чем у экссудатов, и составляет менее 1,015 г/мл против 1,015 и более у экссудатов. Содержание общего белка у транссудатов составляет менее 30 г/л против значения, превышающего 30 г/л у экссудатов. Существует качественная проба, позволяющая верифицировать транссудат от экссудата. Это широко известная проба Ривальта. Она вошла в лабораторную практику более 60 лет назад и занимала важное место в диагностике выпотных жидкостей вплоть до развития биохимических методов и их упрощения и доступности, что сделало возможным перейти от качественного метода пробы Ривальта к количественным характеристикам содержания белка. Однако сейчас многими исследователями предлагается использовать пробу Ривальта для быстрого и достаточно точного получения данных о выпоте. Поэтому необходимо немного описать эту пробу.

Проба Rivalta

В узкий цилиндр со слабым раствором уксусной кислоты (100 мл дистиллированной воды + 1 капля ледяной уксусной кислоты) добавляют по каплям исследуемую выпотную жидкость. Если эта капля, падая вниз, дает тянущуюся за ней полоску помутнения, то жидкость является экссудатом. Транссудаты положительную пробу не дают или дают слабо положительную кратковременную реакцию помутнения.

«Цитологический атлас собак и кошек» (2001) Р. Раскин и Д. Мейер предлагают выделять следующие типы серозных жидкостей: транссудаты, модифицированные транссудаты и экссудаты.

Модифицированный транссудат является переходной формой от транссудата к экссудату, содержит «промежуточные значения» концентрации белка (между 25 г/л и 30 г/л) и удельного веса (1,015–1,018). В современной отечественной литературе термин «модифицированный транссудат» не приводится. Однако допускаются формулировки «больше данных за транссудат» или «больше данных за экссудат» на основании результатов параметров дифференциальных характеристик.

В табл. 1 приведены параметры, определение которых позволяет верифицировать транссудат от экссудата.

Табл. 1. Дифференциальные характеристики транссудатов и экссудатов

Микроскопическое исследование экссудатов

Описание цитограмм выпотных жидкостей

На рис. 5 представлена микрофотография осадка реактивного выпота. В осадке наблюдаются клетки мезотелия, часто двуядерные, с обильной интенсивно базофильной цитоплазмой и округлыми гиперхромными ядрами. Край цитоплазмы неровный, ворсинчатый, часто с резким переходом от базофильного окрашивания к ярко-оксифильному по краю клетки. Ядра содержат плотный компактный гетерохроматин, нуклеолы не видны. В микроокружении присутствуют макрофаги и сегментоядерные нейтрофилы. Фон препарата не определяется.

На рис. 6 представлена микрофотография осадка реактивного выпота. В осадке наблюдаются макрофаги (на рисунке изображены 2 клетки в тесном расположении). Клетки неправильной формы, имеют обильную негомогенную «ажурную» цитоплазму с множеством вакуолей, фагосом, включений. Ядра клеток неправильной формы, содержат нежносетчатый и петлистый хроматин. Видны остатки нуклеол в ядрах. В микроокружении присутствуют 2 лимфоцита. Фон препарата содержит эритроциты.

На рис. 7 представлена микрофотография осадка реактивного выпота. В осадке наблюдаются клетки мезотелия с выраженными признаками реактивных изменений: гиперхромия как цитоплазмы, так и ядер, набухание цитоплазмы, фигуры митоза. Макрофаги в микроокружении имеют признаки эритрофагоцитоза, что часто наблюдается при острых геморрагиях в серозные полости.

На рис. 8 представлена микрофотография осадка реактивно-воспалительного выпота. В осадке наблюдаются макрофаги, лимфоциты и сегментоядерные нейтрофилы с признаками дегенеративных изменений. Дегенеративные изменения нейтрофилов расцениваются как показатель длительности существования воспаления и активности воспалительной реакции. Чем «старше» воспаление, тем более выражены дегенеративные признаки. Чем активнее процесс, тем чаще на фоне измененных нейтрофилов встречаются типичные клетки.

Большую проблему в интерпретации цитограмм создают клетки мезотелия, которые способны под действием неблагоприятных факторов и раздражения приобретать признаки атипии, которые можно ошибочно принять за признаки злокачественности.

Критерии злокачественности (атипии) клеток в выпоте приведены в сравнении в табл. 2.

Табл. 2. Отличительные особенности реактивных клеток мезотелия и клеток злокачественных новообразований.

Злокачественные опухоли серозных оболочек могут быть первичными (мезотелиома) и вторичными, т.е. метастатическими.

Часто встречающиеся метастазы злокачественных опухолей по серозным оболочкам:

1. для плевральной и брюшной полости – рак молочной железы, рак легкого, рак ЖКТ, яичников, семенников, лимфома;

2. для перикардиальной полости – чаще всего рак легкого и молочной железы.

Не исключено обнаружение в серозных полостях тела также и метастазов плоскоклеточного рака, меланомы и т.д.

На рис. 9 представлена микрофотография осадка выпотной жидкости при поражении брюшной полости метастазами железистого рака. В центре микрофотографии виден многослойный комплекс атипичных эпителиальных клеток – метастаз железистого рака молочной железы. Границы между клетками неразличимы, гиперхромная цитоплазма скрывает ядра. Фон препарата содержит эритроциты и клетки воспаления.

На рис. 10 представлена микрофотография осадка выпотной жидкости при поражении брюшной полости метастазами железистого рака. В центре микрофотографии визуализируется шаровидная структура из атипичных эпителиоцитов. Комплекс клеток имеет железистое строение. Границы соседних клеток неразличимы. Ядра клеток отличаются умеренным полиморфизмом. Цитоплазма клеток умеренная, интенсивно базофильная.

На рис. 11 и 12 представлены микрофотографии осадка выпотной жидкости при поражении плевральной полости метастазами железистого рака. На рисунках видны комплексы из атипичных полиморфных клеток эпителиального генеза. Клетки содержат крупные полиморфные ядра с мелкозернистым дисперсным хроматином и 1 крупной нуклеолой. Цитоплазма клеток умеренная, базофильная, содержит мелкую оксифильную зернистость – признаки секреции.

На рис. 13 представлена микрофотография осадка выпотной жидкости при поражении брюшной полости метастазами железистого рака. Представлено малое увеличение микроскопа – комплекс клеток очень крупный. А на рис. 14 видно более детальное строение клеток рака. Клетки образуют железистый комплекс – просветление неклеточного компонента в центре комплекса окружено рядами из атипичных опухолевых эпителиоцитов.

Формирование заключения о принадлежности найденных опухолевых клеток первичному очагу возможно на основании данных анамнеза и специфического строения клеток и их комплексов. При невыявленном первичном опухолевом очаге, отсутствии данных анамнеза, низкой дифференцировке клеток, резкой атипии определить тканевую принадлежность клеток опухоли затруднительно.

Рис. 15 показывает гигантскую атипичную клетку рака в выпотной жидкости. Первичный очаг в данном случае не выявлен. Клетка содержит крупное, «причудливой» формы ядро, умеренную базофильную цитоплазму с включениями и явлением эмпириополеза.

При диссеминации лимфомы по серозным оболочкам в выпот попадет множество атипичных лимфоидных клеток (рис. 16). Данные клетки часто имеют тип бластных клеток, отличаются полиморфизмом и атипией: содержат полиморфные нуклеолы, имеют неровную кариолемму с вдавлениями, неравномерный хроматин (рис. 17).

Значительные трудности на этапе диагностики поражения серозных оболочек злокачественными опухолями создает мезотелиома.

Мезотелиома – первичное злокачественное новообразование серозных оболочек. По статистике, чаще встречается в плевральной, чем в перитонеальной полости. Мезотелиома крайне трудна для гистологической и уж тем более цитологической диагностики, так как возникает необходимость дифференцировать ее от реактивного мезотелия и от практически всех возможных видов рака, встречающихся в серозных полостях.

На рис. 18–19 представлены микрофотографии клеток мезотелиомы в выпоте. Клетки отличаются резкой атипией, полиморфизмом, гигантскими размерами. Однако морфологические характеристики мезотелиальных клеток столь разнообразны, что без большого практического опыта врачу-цитологу «узнать» мезотелиому практически невозможно.

Заключение

Исходя из вышеизложенного, можно заключить, что цитологическое исследование экссудатов из серозных полостей является единственным методом диагностики характера выпота. А рутинное исследование выпотных жидкостей при определении принадлежности их к экссудату должно быть дополнено цитологическим исследованием осадка.

Литература

1. Абрамов М.Г. Клиническая цитология. М.: Медицина, 1974.

2. Балакова Н.И., Жухина Г.Е., Большакова Г.Д., Мочалова И.Н. Исследование жидкости

из серозных полостей. Л., 1989.

3. Волченко Н.Н., Борисова О.В. Диагностика злокачественных опухолей по серозным экссудатам. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2017.

4. Долгов В.В., Шабалова И.П. и др. Выпотные жидкости. Лабораторное исследование. Тверь: Триада, 2006.

5. Климанова З.Ф. Цитологическое исследование экссудатов при метастатических поражениях брюшины и плевры раком: Методические рекомендации. М., 1968.

6. Кост Е.А. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. М.: Медицина, 1975.

7. Руководство по цитологической диагностике опухолей человека. Под ред. А.С. Петровой, М.П. Птохова. М.: Медицина, 1976.

8. Стрельникова Т.В. Выпотные жидкости (аналитический обзор литературы). Вестник РУДН, серия: Агрономия и животноводство. 2008; 2.

9. Raskin R.E., Meyer D.J. Atlas of canine and feline cytology. W.B. Sanders, 2001.

Отличия экссудата от транссудата.

Признаки экссудата.

1. Мутный.

2. Высокая относительная плотность (выше 1.015).

4. Количество лейкоцитов боле 15 в поле зрения.

5. Положительные пробы Ривальта и Лукерини.

Признаки транссудата.

1. Прозрачный

2. Относительная плотность менее 1.015.

4. Количество лейкоцитов менее 15 в поле зрения.

5. Отрицательные пробы Ривальта и Лукерини.

Рентгенологическое исследование легких

Рентгенологическое исследование легких является ведущим доступным методом, позволяющим достоверно диагностировать наличие выпота в плевральной полости не менее 300-400 мл; при наличии большого выпота (2-3 л) обнаруживается интенсивное гомогенное затемнение с косой верхней границей, идущей книзу и кнутри, средостение смещается в здоровую сторону; низкое расположение купола диафрагмы; по мере уменьшения количества жидкости в полости плевры могут быть видны плевральные шварты, неровность плевральных листков за счет наложения фибрина; при наличии небольшого количества сво­бодной неосумкованной жидкости обнаруживается пристеноч­ная лентовидная тень; при сформировавшихся плевральных сращениях возникают осумкованные выпоты (реберно-диафрагмальный, паракостальный, верхушечный (апикальный), парамедиастинальный, наддиафрагмальный, междолевой выпоты); рентгенологическое исследование легких следует производить до и после эвакуации выпота из плевральной полости, что позволяет выяснить характер патологического процесса (туберкулез, пневмо­ния, опухоль) в соответствующем легком.

Для более точной диагно­стики может быть использована компьютерная томография легких, торакоскопия с исследованием плевральной жидкости.

Ультразвуковое исследование

При ультразвуковом исследовании свободная жидкость в плев­ральной полости выявляется даже в небольшом объеме; эхографическая картина при наличии плеврального выпота за­висит от количества жидкости – если объем выпота небольшой, он выглядит в виде клиновидных эхонегативных участков; по мере увели­чения количества жидкости эхонегативное пространство расширя­ется, сохраняя клиновидную форму; образующиеся в экссудате нити фибрина выглядят в виде эхогенных линий различной дли­ны и толщины.

Лабораторные данные

Общий клинический анализ крови - характерен нейтрофильный лейкоцитоз со сдвигом лейкоцитарной формулы влево, токсическая зернистость лейкоцитов, резкое увеличение СОЭ; умеренно выраженная анемия нормохромного или гипохромно го типа;

Общий анализ мочи – в разгар болезни у части больных обнаруживаются не большая протеинурия (как правило, менее 1 г/л), единичные све­жие эритроциты, клетки почечного эпителия;

Биохимический анализ крови - наиболее характерны выраженная диспротеинемия (снижение уровня альбумина и увеличение α 1 - и α 2 -глобулинов); белки острой фазы воспаления - повышение содержания сиаловых кислот, серомукоида, фибрина, гаптоглобина, появление С-реактивного протеина.

13. Каковы причины пневмоторакса?

Пневмоторакс - патологическое состояние, характери­зующееся скоплением воздуха между висцеральным и париетальным местами плев­ры.

Пневмоторакс, возникающий вследствие деструкции легочной ткани при патологическом процессе в легких считается симптомати­ческим (вторичным).

Причины симптоматического пневмоторакса: туберкулез легких (прорыв в плевральную полость расположенных около плевры казеозных очагов или каверн); осложнения пневмонии - эмпиема плев­ры, абсцесс и гангрена легких; бронхоэктазы; врожденные кисты лег­ких; эхинококковые кисты и сифилис легкого; злокачественные опу­холи легких и плевры; прорыв в плевру карциномы или дивертикула пищевода, поддиафрагмального абсцесса.

Спонтанный пневмоторакс - патологическое состояние, характери­зующееся скоплением воздуха между висцеральной и париетальной плев­рой, не связанное с механическим повреждением легкого или грудной клетки в результате травмы или врачебных манипуляций.

Спонтанный пневмоторакс, развивающийся без клинически выраженного предшествующего заболевания у практически здоровых лиц называется идиопатическим.

К развитию идиопатического пневмоторакса приводит чаще всего ограниченная буллезная эмфизема, буллезная эмфизема при врожденной недо­статочности α 1 -антитрипсина, при врожденной кон­ституциональной слабости плевры, которая легко разрывается при сильном кашле, смехе, глубоком дыхании, интенсивном физичес­ком усилии; при глубоком погру­жении в воду, нырянии, во время полета в самолете на большой высо­те, вероятно, в силу перепадов давления, которое неравномерно пере­дается на различные отделы легких.

Исследование жидкостей, добытых при помощи пробного прокола грудной и брюшной полостей, суставов, абсцессов и кист, ставит целью изучение свойств добытого пунктата. Данные этого рода исследования имеют большое диагностическое значение, во многих случаях решающее при определении характера болезненного процесса, вызвавшего скопление жидкости. Количество добытого пунктата при этом не имеет существенного значения. Оно важно лишь в прогностическом отношении. В то время как в одних случаях едва удаётся собрать лишь несколько кубических сантиметров выпота, в других - его можно удалять литрами. Вопрос о происхождении пунктата и характере заболевания в каждом отдельном случае по существу решается на основании данных исследования жидкости.

Путём пробного прокола грудной и брюшной полостей могут быть получены различного рода экссудаты, транссудаты, кровь, содержимое желудкаили кишечника, моча, содержимое различного рода кист и пузырей эхинококка.

Исследование пунктатов ставит задачей определение физических свойств жидкости, её химического состава, изучение форменных элементов, примешивающихся к выпоту, и, наконец, бактериологическое исследование.

При определении физических свойств обращают внимание на цвет выпота, его прозрачность, консистенцию, удельный вес и реакцию.

По внешнему виду различают выпоты: а) совершенно бесцветные, б) окрашенные в тот или другой цвет, в) прозрачные, г) опалесцирующие, д) мутные и е) молочно-белые.

Совершенно бесцветным и прозрачным, чистым, как вода, является содержимое пузырей эхинококка и мешётчатых опухолей - кист; к прозрачным, кроме того, относятся транссудаты и серозные экссудаты, а также моча, скопляющаяся в брюшной полости при разрыве мочевого пузыря. Цвет выпота и интенсивность его окраски при этом могут быть различными.

Серозные экссудаты и транссудаты представляют собой почти совершенно прозрачные, лишь слегка опалесцирующие жидкости, красивого лимонно-жёлтого цвета. Примесь небольшого количества красящего вещества крови придаёт им красноватый оттенок; при более резкой экстравазации жидкость становится красной и даже вишнёво-красной, по цвету не отличаясь существенно от крови.

К мутным жидкостям относятся серо-фибринозные, гнойные и ихорозные экссудаты, геморрагические экссудаты, скопляющиеся при туберкулёзных поражениях серозных оболочек, а также при злокачественных новообразованиях органов грудной и брюшной полости, содержимое желудка и кишечника и, наконец, геморрагические транссудаты, скопляющиеся в брюшной полости при тромбоэмболических коликах и некоторых формах илеуса.

Молочно-белыми являются экссудаты - хилёзные, хилусоподобные и псев-дохилёзные.

Молочно-белый цвет хилёзного экссудата, скопляющегося в брюшной полости при разрыве лимфатических сосудов полости, обусловливается примесью большого количества жира, при отстаивании скопляющегося в виде густой сметанообразной массы на её поверхности. После прибавления нескольких кубических сантиметров эфира, подщелочённого каплею едкого кали, жидкость, вследствие полного растворения жира, делается совершенно прозрачной. В обработанных Судан 111 препаратах при микроскопическом исследовании видна масса окрашенных в интенсивно красный цвет зёрнышек жира. При хроническом воспалении серозных оболочек, например, туберкулёзе, в полостях скопляются хилусоподобные экссудаты, характерная окраска которых зависит от скопления большого количества распавшихся жирно перерождённых клеток. Этого рода экссудаты содержат жира значительно меньше; после прибавления эфира жидкость, лишь несколько просветлевшая, остаётся мутной вследствие примеси большого количества взвешенных в ней эндотелиальных клеток и лейкоцитов.

Псевдохилёзные экссудаты, окраской напоминающие разбавленное молоко, содержат лишь очень небольшое количество жира. Они не просветляются после прибавления эфира и не образуют сливкоподобного слоя при отстаивании. Характерную их окраску одни объясняют присутствием лецитинсодержащих глобулинов, другие - нуклеидов и мукоидов.

По своей консистенции добытые путём прокола выпоты являются чаще всего совершенно жидкими; сюда относятся экссудаты, транссудаты, жидкость из эхинококкового пузыря, моча и т. д.; ясно слизистую консистенцию имеет лишь содержимое кист матки. Вследствие примеси большого количества псевдомуцина, пунктаты овариальных кист показывают ясно слизистую консистенцию и могут растягиваться в длинные тонкие нити. Содержимое матки, попадающее при её разрывах в брюшную полость, представляет собой густую, вязкую, растягивающуюся также в длинные нити массу. При микроскопическом исследовании в осадке обнаруживают много лейкоцитов и эпителиальных клеток.

При определении Удельного веса Пунктата обыкновенно пользуются Пробой Детре, Которая представляет собой лишь видоизменение пробы Гаммершляга. Определение при помощи ареометра не всегда удаётся вследствие быстрого свёртывания жидкости; кроме того, оно требует большого количества (до 25 куб. см) пунктата. Чтобы задержать свёртывание, рекомендуют собирать пунктат в сосуд, погружённый в подогретую до 38° воду. Исследование следует проводить с ареометрами, установленными для температуры в 36°.

В основе метода Детре лежит разница удельного веса основного раствора и исследуемой жидкости. Если опустить каплю выпота в жидкость более лёгкого удельного веса, она быстро опускается на дно, в растворе более тяжёлом капля плавает на поверхности. При тождестве удельных весов она оказывается взвешенной в растворе, плавает в нём, не поднимаясь и не опускаясь.

В качестве основных пользуются 4 растворами поваренной соли удельного веса 1,010 (1,380%), 1,020 (2,76%), 1,030 (4,14%) и 1,040 (5,52%). Основные растворы готовят на дестиллированной воде, прибавляя указанные количества поваренной соли. Удельный вес реактива должен быть выверен точно по ареометру. Вначале определяют концентрацию пограничных растворов. С этой целью одну каплю исследуемой жидкости опускают при помощи пипетки в разлитые по пробиркам основные растворы. Если в растворе с удельным весом 1,020 капля опускается на дно, а при удельном весе 1,030 плавает на поверхности, удельный вес исследуемой жидкости лежит где-то в пределах 1,020-1,030. Приготовив затем промежуточные концентрации путём соответствующего разведения раствора с удельным весом 1,030 дестиллированной водой (9+.1,8 + + 2,7 + 3 и т. д.), производят окончательное определение.

Удельный вес транссудата колеблется в пределах от 1,005 до 1,018. Самый высокий удельный вес обнаруживают в лунктатах при пневмотораксах, когда жидкость по своим свойствам стоит между транссудатами и экссудатами.

Экссудаты отличаются большею плотностью. Их удельный вес обычно выше 1,018. Однако различия в этом отношении между экссудатами и транссудатами далеко не всегда постоянны. Во многих случаях удельный вес экссудата оказывается ниже предельного, с другой стороны, встречаются нередко транссудаты с очень высоким удельным весом.

Реакция пунктата имеет большое значение при исследовании содержимого желудка и мочевого пузыря. Выпоты при водянках и воспалениях серозных-оболочек обыкновенно щелочной реакции. Наблюдающиеся при этом колебания концентрации водородных ионов очень непостоянны и не имеют существенного значения при диференцировке транссудатов от экссудатов. Содержимое желудка резко кислой реакции с кислым запахом и нередко содержит кровь; моча при разрыве мочевого пузыря у плотоядных чаще всего нейтральной, иногда кислой, реже заметно щелочной реакции.

Определение количества белка является основным моментом исследования выпота, так как в этом отношении установлены довольно значительные различия, помогающие диференцировать экссудаты от транссудатов. Наиболее точные результаты даёт метод взвешивания сухого осадка белка. Для осаждения пользуются 1 % раствором поваренной соли, подкисленной каплей уксусной кислоты. К 100 куб. см горячего раствора NaCl прибавляют 10 куб. см исследуемой жидкости и после основательного взбалтывания фильтруют; осадок промывают водой, подкисленной уксусной кислотой, спиртом, эфиром, высушивают в эксикаторе и взвешивают. Вычтя из общего веса вес фильтра и умножив полученную разность на 10, получают процентное содержание белка в жидкости.

Из более простых методов довольно точные результаты даёт способ Робертса - Стольникова (см. определение белка в моче). Так как удельный веспунктата зависит, главным образом, от количества растворённого в нём белка, его содержание в жидкости можно приблизительно вычислить по удельному весу при помощи формулы: х = аД (УД - вес - 1,000) - 2,88 для экссудатов Пх = г1я (УД - вес--1,000)-2,72 для транссудатов.

Наиболее простым и удобным методом, позволяющим определить не только общее количество белка, но и установить отношения между белковыми фракциями, является рефрактометрический способ.

Содержание белка в транссудатах, по сравнению с экссудатами, не особенно велико и обыкновенно ниже 2,5%. Только в редких случаях, как, например, при асцитах, водянках, вследствие пневмоторакса, количество его в транссудатах доходит до 3 и даже 4%. Содержание белка в экссудатах значительно выше 2,5 % и часто доходит до 4 и даже 5%. Такого рода соотношения помогают легко диференцировать воспалительные выпоты от механических. Однако нередко наблюдаются случаи, когда содержание белка в экссудате стоит несколько ниже указанной границы. Значительные услуги при оценке подобного рода выпота в таких случаях оказывает реакция Ривальта (Rivalt), а также Морица (Moritz).

Реакция Ривальта основана на выпадении особого белка, осаждаемого разведённой уксусной кислотой. Эта разновидность белковых веществ может быть установлена только в выпотах воспалительного характера. Транссудаты её совершенно не содержат. В качестве реактива применяют слабые растворы уксусной кислоты (2 капли на 100 куб. см дестиллированной воды). Техника крайне несложна. В узкий цилиндр ёмкостью 25 куб. см наливают 20 куб. см реактива. Затем при помощи пипетки наносят на его поверхность одну каплю исследуемой жидкости. В присутствии белка капля, медленно падая, оставляет облачко мути, причём на дне получается небольшой мутный осадок. Транссудаты быстро растворяются в реактиве, не давая помутнения.

Реакция Морица. К 2-3 куб. см пунктата добавляют несколько капель 5% уксусной кислоты. Экссудат даёт помутнение и осадок, транссудат - слабое помутнение.

На основании результатов этих проб, в тех случаях, когда нет резкой разницы по удельному весу и содержанию белка, можно точно диференцировать экссудат от транссудата.

Определение псевдомуцина. Содержимое овариальных кист представляющее собой желтоватую или грязно-коричневую вязкую жидкость с удельным весом от 1,005 до 1,050, отличается присутствием своеобразного белкового тел а -псевдомуцина. Псевдомуцин не осаждается ни уксусной, ни азотной кислотой, но выпадает в осадок под действием спирта. Однако эта разница не является доказательной, так как сывороточные белки - постоянная составная часть выпотов-также осаждаются алкоголем.

Для определения псевдомуцина к 25 куб. см пунктата прибавляют несколько капель спиртового раствора розоловой кислоты, подогревают до кипения и затем добавляют каплями п/10 раствора серной кислоты до слабо кислой реакции. Слегка пожелтевшую после этой обработки жидкость снова доводят до кипения и затем фильтруют. Полная прозрачность фильтрата указывает на отсутствие псевдомуцина.

Особенно большое значение при определении характера выпота и его происхождения придают микроскопическому исследованию осадка - Цитоскопии. Изучение морфологических элементов выпота не только даёт возможность отличать экссудаты от транссудатов, но вместе с тем позволяет иногда делать заключения и относительно этиологии заболевания, сопровождающегося скоплением выпота в полостях тела.

Для микроскопического исследования пользуются осадком, полученным путём центрифугирования. Чтобы удалить сгустки фибрина, которые значительно затрудняют исследование, жидкость лучше дефибринировать. С этой целью выпот помещают в толстостенную бутылку со стеклянными бусами и взбалтывают в течение 30-60 минут. Дефибринированную таким образом жидкость сливают в конические пробирки и центрифугируют до тех пор, пока пробная капля, взятая с поверхности, не будет больше содержать форменных элементов. Слив прозрачную жидкость, осадок осторожно размешивают при помощи стеклянной палочки. Полученную эмульсию используют для приготовления мазков и свежих препаратов.

Окрашивание свежих препаратов производят чаще всего 1 % водным раствором метиленовой синьки, одну каплю которого смешивают с каплей взятой эмульсии. Размешав осторожно смесь стеклянной палочкой, покрывают её покровным стеклом, удаляют фильтровальной бумажкой избыток жидкости, выступившей за край стёклышка, и немедленно исследуют. Под микроскопом легко различить крупные, рыхлые эндотелиальные клетки, компактные, с характерным ядром, белые кровяные тельца, безъядерные эритроциты, клетки различных новообразований и разнообразную микробную флору.

Свежие препараты приготовляют лишь для исследования ex tempore; они быстро портятся, сохранить их удаётся лишь при помощи особого рода консервирующих составов.

Гораздо удобнее в этом отношении сухие препараты, которые приготовляют, размазывая каплю эмульсии по поверхности предметного стекла.

После высушивания мазок фиксируется метиловым алкоголем и окрашивается по Гимза.

При оценке полученных результатов следует помнить, что реакция серозных оболочек на механические раздражения (транссудаты) выражается обильной десквамацией эндотелия; на пиогенные инфекции серозные оболочки отвечают нейтрофилией, для туберкулёза характерен лимфоцитоз.

В выпотах при сердечных и почечных заболеваниях поэтому обнаруживают громадное количество крупных эндотелиальных клеток, группирующихся в кучки по 5-10 клеток. Эти скопления иногда настолько обильны, что сплошь покрывают всё поле зрения. Их легко отличить от лейкоцитов по крупному, сильно вакуолизированному ядру, окрашивающемуся в фиолетовый цвет, и нежной розовой протоплазме, окружающей ядро толстым слоем. Кроме эндотелиальных клеток, в транссудатах обнаруживают большое количество эритроцитов, лимфоцитов и отдельные нейтрофилы.

При серозных плевритах и перитонитах, обусловленных действием пиогенных микробов, в экссудатах находят скопление большого количества сегмен-тоядерных и палочкоядерных нейтрофилов, а также эритроцитов. Эндотелиальные клетки и лимфоциты представлены скудно.

При туберкулёзных плевритах поле зрения покрыто массой мелких лимфоцитов, среди них встречаются отдельные клетки средней и крупной величины. К ним иногда в большом количестве примешиваются красные кровяные тельца. Нейтрофилы и эозинофилы представлены скудно. По Видалю, их количество не должно быть больше 10% общей массы лейкоцитов.

При злокачественных новообразованиях обнаруживают громадных размеров клетки с сильно вакуолизированной, часто перерождённой протоплазмой и крупным почковидным или овальным ядром, в котором можно заметить несколько (2-3) ядрышек. Этого рода клетки считаются специфичными для злокачественных новообразований.