Микрофлора ризосферы. Растения являются хорошей средой для обитания микроорганизмов. Корневая система и наземные органы растений обильно населены микроорганизмами. Микрофлору зоны корня принято подразделять на микрофлору ризопланы – микроорганизмы, непосредственно поселяющиеся на поверхности корня, и микрофлору ризосферы – микроорганизмы, населяющие область почвы, прилегающей к корню. Численность микроорганизмов в ризоплане и ризосфере в сотни и даже тысячи раз превышает содержание их в обычной почве.
На численность и групповой состав микрофлоры ризопланы и ризосферы оказывает влияние тип почвы, климатические условия, характер растительного покрова и стадия развития растений. Как правило, в динамике численности микроорганизмов ризопланы и ризосферы наблюдаются два максимума: первый приходится на фазу кущения растений, второй – на фазу цветения и начало плодоношения. Доминируют неспорообразующие бактерии рода Pseudomonas и некоторые микроскопические грибы, бациллы, актиномицеты, клетчаткоразрушающие бактерии, микобактерии. Процессы трансформации веществ в ризосфере обусловливают накопление в ней элементов минерального питания растений. Выделяемые бактериями кислоты способствуют растворению и усвоению растениями труднодоступных соединений, таких, как фосфаты кальция, силикаты калия и магния. Синтезируемые микроорганизмами витамины (тиамин, витамин B12, пиридоксин, рибофлавин, пантотеновая кислота и др.) и ростовые вещества (гиббереллин, гетероауксин) оказывают стимулирующее действие на ростовые процессы растений. Многие сапрофитные бактерии ризосферы являются антагонистами фитопатогенных микробов и выполняют роль санитаров в почве.
Эпифитная микрофлора растений. Микроорганизмы, развивающиеся на поверхности стеблей и листьев растений, получили название эпифитной микрофлоры. Состав эпифитной микрофлоры весьма специфичен. Большинство составляют бактерии Erwinia herbicola. Второе место по численности занимают различные грибы (Penicillium, Mucor, Fusarium и др.). На поверхности многих тропических растений обнаружены азотфиксирующие бактерии рода Beijerinckia, поставляющие азот непосредственно в лист.
Разнообразная и обильная микрофлора находится на поверхности семян. В состав микрофлоры семян обязательно входят неспорообразующие бактерии Pseudomonas, Arthrobacter и Flavobacterium, дрожжи Candida, Rhodotorula, Criptococcus, а также грибы Penicilium, Aspergillus, Alternaria, Cladosporium, Mucor и др. Развитие микроорганизмов на поверхности зерна в значительной мере зависит от влажности и температуры.
Считают, что эпифитная микрофлора образует определенный биологический барьер, препятствующий заражению растительных тканей фитопатогенными микробами.
Фитопатогенные микроорганизмы. Первое место среди фитопатогенных микробов принадлежит грибам, второе место занимают вирусы и бактерии и лишь небольшой процент болезней растений вызывают актикомицеты. Фитопатогенные микроорганизмы активно синтезируют гидролитические ферменты (пектиназы, целлюлазы, протеазы и др.), вызывающие мацерацию растительных тканей и разрушение клеточных оболочек, что приводит к проникновению возбудителя болезни внутрь клетки, нарушают обмен, отравляют токсинами, что приводит ее к гибели.
Источниками заражения растений фитопатогенными микроорганизмами служат почва, вода и многие насекомые. Наибольшую опасность представляют инфицированный семенной материал и остатки больных растений в почве.
Нормальная микрофлора человека и животных. Совокупность микроорганизмов, приспособившихся к жизни в организме человека и животных и не вызывающих каких-либо нарушений физиологических функций макроорганизма, носит название нормальной микрофлоры.
Нормальную микрофлору человека и животных подразделяют на облигатную и факультативную. К облигатной микрофлоре относятся относительно постоянные сапрофитные и условно-патогенные микроорганизмы, максимально приспособленные к существованию в организме хозяина. Факультативная микрофлора является случайной и временной. Она определяется поступлением микроорганизмов из окружающей среды, а также состоянием иммунной системы макроорганизма.
Постоянными обитателями ротовой полости являются стрептококки, лактобациллы, коринебактерии, бактероиды, а также дрожжевые грибы, актиномицеты, микоплазмы и простейшие. К факультативным обитателям относятся энтеробактерии, спорообразующие бактерии и синегнойная палочка. Наличие Escherichia coli является показателем неблагополучного состояния ротовой полости.
Главную роль в поддержании качественного и количественного состава микроорганизмов в ротовой полости играет слюна, содержащая различные ферменты, обладающие антибактериальной активностью.
В желудке человека микроорганизмы почти отсутствуют. Иногда в желудке в незначительном количестве встречаются Sarcina ventriculi, Bacillus subtilis и некоторые дрожжи.
В тонком кишечнике обитает сравнительно мало бактерий (10 2 –10 3), преимущественно аэробные формы. Зато в толстом кишечнике имеется колоссальное количество микробов, включающих более 260 разных видов факультативных и облигатных анаэробов. Основными обитателями толстого кишечника являются бактероиды, бифидобактерии, фекальный стрептококк, кишечная палочка, молочнокислые бактерии. Последние в кишечнике выступают в роли антагонистов гнилостной микрофлоры и некоторых патогенных микробов.
Из окружающего воздуха поступает масса микробов. Большая часть микроорганизмов задерживается в верхних дыхательных путях. Бронхи и альвеолы легких практически стерильны. В составе микрофлоры верхних дыхательных путей содержатся относительно постоянные микробы, представленные стафилококками, коринебактериями, стрептококками, бактероидами, капсульными грамотрицательными бактериями и др. Кроме бактерий в верхних дыхательных путях в течение длительного времени в латентном состоянии могут пребывать некоторые вирусы, в частности, аденовирусы.
Субстратом для питания бактерий на поверхности кожи служат выделения потовых и сальных желез, а также отмирающие клетки эпителия. Наиболее богата микроорганизмами кожа открытых частей тела – рук, лица, шеи. Подавляющая масса микроорганизмов кожи представлена сапрофитными бактериями – стафилококками, бациллами, микобактериями, коринебактериями и дрожжевыми грибами, и только в 5% анализов выделяется условно-патогенный микроб – золотистый стафилококк. При санитарно-бактериологических анализах обнаружение на поверхности кожи Escherichia coli свидетельствует о загрязнении ее фекалиями.
Нормальная микрофлора в организме человека и животных играет важную роль в формировании естественного иммунитета. Облигатные микроорганизмы, продуцирующие вещества типа антибиотиков, молочную кислоту, спирты, пероксид водорода и другие соединения, обладают ярко выраженными антагонистическими свойствами в отношении многих патогенных бактерий. Качественные и количественные нарушения в составе микробной флоры в организме человека получили название дисбактериоза. Дисбактериоз возникает чаще всего в результате длительного приема антибиотиков, а также при хронических инфекциях, радиации и действии экстремальных факторов. Развитие дисбактериоза объясняется подавлением облигатной микрофлоры макроорганизма.
Патогенные микроорганизмы. Патогенными (от греч. patos – болезнь) называются микроорганизмы, способные вызывать заболевания человека, животных и растений.
Степень патогенности выражается вирулентностью бактерий, измеряемой условно принятой единицей DLM (Dosis letalis minima – минимальная летальная доза). Одна DLM равна наименьшему количеству бактерий, способных вызвать в течение определенного времени гибель не менее чем 80–95% лабораторных животных.
Вирулентность связана с образованием экзо- и эндотоксинов, способностью к инвазии (проникновению в организм хозяина), формированием капсульной слизи, а также выделением агрессинов (веществ, подавляющих защитные силы организма).
Внедрение патогенных микробов, нарушающих физиологическое равновесие и физиологические функции организма, приводит к развитию инфекции. Общими наиболее типичными признаками инфекции являются воспаление, лихорадка, поражение нервной системы, нарушение сердечно-сосудистой и дыхательной функций, а при некоторых заболеваниях появление накожной сыпи. В ходе инфекционного процесса возбудители из первичного очага могут поступать в кровь и разноситься по всему организму, что приводит к развитию сепсиса. При благоприятном течении инфекционный процесс заканчивается выздоровлением.
Иммунитет. Защита организма от инфекционных и других генетически чужеродных для него агентов (микробов или их токсинов) получила название иммунитета. По происхождению различают врожденный и приобретенный иммунитет. Врожденный иммунитет является одним из видовых генетических признаков организма, передается по наследству. Так, человек невосприимчив к чуме собак и крупного рогатого скота, куриной холере. Животные не поражаются такими инфекциями человека, как гонорея, сифилис, брюшной тиф, скарлатина, корь и др. Врожденный иммунитет является естественной и наиболее совершенной и прочной формой защиты организма, так как он сформировался в процессе эволюции в ходе естественного отбора.
Приобретенный иммунитет формируется в процессе жизни организма и не передается по наследству. Он вырабатывается в организме после перенесенного заболевания или искусственного введения вакцины либо готовых антител. Приобретенный иммунитет является высокоспецифичным.
Одним из механизмов иммунитета является фагоцитоз . Значение фагоцитоза в иммунитете обосновано И.И. Мечниковым. Процесс фагоцитоза заключается в активном поглощении и переваривании чужеродного агента специализированными клетками организма, получившими название фагоцитов. Фагоцитарной активностью обладают микрофаги и макрофаги. К микрофагам относятся гранулоциты (нейтрофилы, эозинофилы, базофилы). Среди макрофагов различают подвижные (моноциты крови, полибласты, гистиоциты) и неподвижные (клетки селезенки, лимфатической ткани, клетки Купфера печени) клетки.
Процесс фагоцитоза проходит в несколько стадий: 1) приближение фагоцита к чужеродному объекту; 2) захват объекта; 3) внутриклеточное ферментативное переваривание объекта фагоцитом. Фагоцитарная активность организма в значительной мере определяет его сопротивляемость инфекции.
Специфическим механизмом приобретенного иммунитета служит образование антител в ответ на внедрение в организм того или иного антигена. В роли антигенов выступают чужеродные для организма патогенные микробы, их токсины, а также белки, нуклеиновые кислоты, липиды, полисахариды и т.д. Антигены обладают способностью вызывать образование антител и вступать с ними в специфическое взаимодействие.
Антитела представляют собой иммуноглобулины – специфические гетерогенные белки с характерными химическими и биологическими свойствами. Для синтеза иммуноглобулинов необходима кооперация трех типов клеток в организме – Т- и В-лимфоцитов и макрофагов.
Профилактика и терапия инфекционных заболеваний.
В профилактике инфекционных заболеваний исключительно важную роль играют вакцины. Термин «вакцина» происходит от латинского слова vaccina, что означает «корова». Первая вакцина против оспы получена в 1796 г.
Э. Дженнером из гнойников на коже руки доярки, ухаживавшей за коровами, больными коровьей оспой. По характеру вакцинного материала различают живые, убитые и химические вакцины.
Живые вакцины применяются для профилактики таких серьезных инфекционных заболеваний, как оспа, полиомиелит, бешенство, корь, паротит, грипп, сыпной тиф, сибирская язва, чума и др.
Убитые вакцины представляют собой суспензию убитых патогенных микроорганизмов в растворе хлорида натрия. Для инактивации вакцинных штаммов микроорганизмов применяют ультрафиолетовое облучение, ультразвук, химические вещества – формалин, фенол, спирт и др. Введение убитых вакцин, как правило, вызывает менее стойкий иммунитет организма.
К эффективно действующим убитым вакцинам относятся вакцины против брюшного тифа, паратифа, холеры, коклюша, клещевого энцефалита и др.
Химические вакцины получают извлечением из клеток патогенных микроорганизмов антигенов, обладающих наиболее выраженными иммуногенными свойствами. В качестве химических вакцин практическое применение нашли О-антиген сальмонелл брюшного тифа и паратифов, Vi-антиген сальмонелл брюшного тифа, протективный антиген бацилл сибирской язвы.
К наиболее эффективно действующим относятся ассоциированные вакцины, вырабатывающие иммунитет организма сразу к нескольким заболеваниям. Примером такой ассоциированной вакцины является коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (акдс).
Для лечения инфекционных заболеваний современная медицина располагает арсеналом химических препаратов и антибиотиков.
Различают корпускулярные вакцины, содержащие ослабленные (аттенуированные) или убитые микроорганизмы и вирионы.
Некорпускулярные – содержат продукты химического расщепления микроорганизмов, обезвреженные яды, экзотоксины.
По числу антигенов различают моновакцины и ассоциированные поливакцины.
Синтетические – безбаластные, не обладают побочным токсическим действием, они коньюгируют с Т-зависимыми носителями, введены в адьюванты.
Рекомбинантные – искусственно созданные вакцины на основе рекомбинантных вирусов или микробов-химер, в геномы которых введены гены антигенов (вакцина против оспы и гепатита; вакцина против герпеса, гриппа А и стоматита).
Антиидиотипические вакцины – смесь моноклональных антител (используют гибридомы).
Иммунныесыворотки – жидкая часть плазмы крови без фибриногена: нормальные и иммунные; гомологичные (от человека) и гетерологические (от животных), по целям: диагностические и лечебно-протифилактические (пассивный иммунитет).
Большая часть микробов задерживается в носовой полости, в терминальных бронхиолах и альвеолах микробов практически нет.
В носовой полости гемолитический микрококк, дифтероиды. стафилококки, стрептококки, сапрофитные Гр- диплококки, протей, Haemophilus influenzae, многие вирусы, в том числе аденовирусы. На микробы оказывают бактерицидное действие муцин и лизоцим. В носоглотке содержатся негемолитические и зеленящие стрептококки, непатогенные нейссерии, стиафилококки и энтеробактерии, а также менингококки, пиогенные стрептококки, пневмококки, возбудитель коклюша.
Микрофлора мочеполовой системы .
Верхние отделы (почки, мочеточники) в норме стерильны. В уретре – стрептококки, пептококки, коринебактерии, бактероиды, микобактерии, Staph. epidermis, дифтероиды, грибы родов Candida, Torulopsis, Geotrichum. В наружных отделах Mycobacterium smegmatis. Во влагалище содержатся палочки Додерлейна, Str. agalactiae.
Микрофлора ЖКТ.
В ЖКТ > 260 видов. В основном анаэробы.
В желудке бактерий мало (не более 1000/мл). Встречаются молочнокислые бактерии, Sarcina ventriculus, Bac. subtilis, дрожжи. Могут проникать дизентерийные, брюшнотифозные, паратифозные бактерии, холерные вибрионы и др. патогенные МО.
В тонком кишечнике немного больше, чем в желудке. Встречаются анаэробы, протей, грибы, Str. faecalis.
В толстом кишечнике очень много (1012/г фекальных масс). E. coli (в том числе и патогенные серовары), бифидобактерии, бактероиды, лактобациллы, энтерококки, стафилококки, энтерококки, Clostridium perfringens, Proteus vulgaris.
Бактерии слизистых оболочек глаз – стафилококки, микоплазмы, Corynebacterium xerosis. При нарушениях – могут вызывать конъюктивиты, блефариты.
Нарушение видового состава нормальной МФ под влиянием различных факторов, характеризующееся изменением соотношения различных видов бактерий – дисбактериоз.
Обычно резко снижается содержание бифидобактерий, увеличивается содержание стафилококков, в том числе и гемолитических, Candida, измененных кишечных палочек,
Дисбактериозы как правило встречаются в кишечнике.
Посевы изучают на наличие патогенных микроорганизмов и на нарушение соотношений МФ. Для обогащения рекомендуют использовать среды Мюллера-Хитона, селенитовый бульон, магниевую среду, для культивирования – среды Плоскирева, Эндо и Левина, среды Цейсслера, Сабуро, Блаурокка, тригликолевый бульон. Патогенные бактерии определяют на средах с АБ; исследования на дисбактериоз проводят для получения основных критериев и показателей. Результаты следует считать объективными при анализе роста изолированных колоний, у которых можно подсчитать общее количество на чашку Петри. При сплошном росте анализ следует повторить, производя высев из больших разведений. Факультативные бактерии культивируют 24-48 ч при 37° С, бифидобактерии – 48 ч, анаэробы и бактероиды – 4-5 суток в анаэростате, посевы на среде Сабуро – 96 ч при 28-30° С. После идентификации производят пересчет содержания МО каждой таксономической группы на 1 г исследуемого материала.
К оценке результатов следует подходить осторожно, т.к. состав кишечной МФ подвержен различным колебаниям и необходимо отличать истинный дисбактериоз от дисбактериальных реакций (сдвиги в составе МФ незначительны либо кратковременны и не требуют специфической коррекции). При истинном дисбактериозе нарушения микробного ценоза обычно коррелируют с клиническими проявлениями, и их нормализация достаточно длительна (20-30 суток).
При проведении повторных исследований следует отразить имеющиеся позитивные или негативные сдвиги.
29) Дисбактериоз - это изменение состава и количества микрофлоры (болезнетворных и полезных микроорганизмов), в норме заселяющей полые органы, сообщающиеся с окружающей средой (верхние дыхательные пути, кишечник, влагалище) и кожу человека.
С жизнедеятельностью микрофлоры тесно связано состояние защитных сил организма или иммунитет. Полезные бактерии благодаря своей активности борются с болезнетворными бактериями, не позволяя им неограниченно размножаться. Положительные свойства нормальной микрофлоры наиболее изучены в кишечнике.
Почему может возникнуть дисбактериоз
Одной из наиболее частых причин развития дисбактериоза является бесконтрольный прием антибиотиков, который может привести к гибели значительной части нормальной микрофлоры, чувствительной к принимаемому препарату, и размножению патогенной и условно-патогенной (вызывающей заболевание при определенных условиях) микрофлоры. Причинами дисбактериоза могут быть также нарушения питания, систематическое употребление алкоголя, тяжелые заболевания и др.
При дисбактериозе могут исчезать некоторые представители нормальной микрофлоры (бифидобактерии, молочнокислые, кишечные палочки и др.) и появляться редко встречающиеся микроорганизмы (грибки рода кандида, стафилококки, протей, синегнойная палочка и др.). Болезнетворные микроорганизмы вызывают разной степени выраженности местные воспалительные процессы, а при ослаблении защитных свойств организма, инфекция может поразить весь организм.
Виды кишечного дисбактериоза
Кишечный дисбактериоз - явление наиболее изученное. Он может быть гнилостным, ферментативным, дефицитным и сенсибилизирующим.
Признаки дисбактериоза кишечника
Дисбактериоз всегда сопровождается повышенной утомляемостью, слабостью. Кроме того, возникают такие неприятные симптомы, как снижение или отсутствие аппетита, тошнота, рвота, металлический привкус во рту, отрыжка, схваткообразные или тупые боли в животе, вздутие живота, запоры, поносы, чувство неполного опорожнения кишечника.
Кал при дисбактериозе может быть жидким с твердой первой порцией, иногда с примесью слизи, а может быть очень твердым, в виде небольших шариков (овечий кал) с гнилостным или кислым запахом.
Признаком дисбактериоза может быть недостаток витаминов. При дефиците витамина В1 возможны неврологические нарушения в виде расстройства сна, витамина В12 - развитие анемии, никотиновой кислоты - появление раздражительности, неуравновешенности, воспаления слизистой оболочки полости рта и языка, повышенного слюнотечения. При дисбактериозе кишечника страдает нарушение всасывания жирорастворимых витаминов, в частности витамина Д, что может усугублять течение рахита у детей. Частым проявлением дисбактериоза являются аллергические реакции в виде высыпаний на коже в ответ на прием какой-то пищи (пищевые аллергии).
Лечение дисбактериоза
Лечение дисбактериоза должно проводиться только после лабораторного исследования кала и уточнения, какая именно микрофлора преобладает в кишечнике. Лечение также должно быть комплексным, и должно зависеть от причины, вызвавшей дисбактериоз.
Особое значение в лечении дисбактериоза придается рациональному питанию: исключение жирной, жареной, острой пищи и достаточный прием пищи богатой клетчаткой.
Для воспроизведения нормальной микрофлоры кишечника назначают различные бактериальные препараты, которые при правильном выборе способны ее полностью восстановить. Обязательно назначаются витаминно-минеральные комплексы и ферменты, способствующие расщеплению пищи.
Если дисбактериоз возник на фоне какого-то хронического заболевания желудочно-кишечного тракта, то лечат как основное заболевание, так и проявления дисбактериоза.
Помните: нельзя бесконтрольно принимать любые лекарственные препараты, так как это может нанести непоправимый вред организму.
На микробный состав у человека влияние могут оказывать пол, возраст, продукты питания, климат, использование лекарственных средств.
Микрофлора делится на 2 группы:
· постоянная (резидентная) – непатогенные бактерии на коже и в полостях тела;
· факультативная (транзиторная) – непатогенные и патогенные.
Микрофлора кожи.
Непатогенная: сарцины, дифтероиды, плесневые и дрожжевые грибы, Staphylococcus epidermis, микрококки.
Патогенная и условно-патогенная: E. coli – свидетельствует о фекальном загрязнении кожи, Staphylococcus aureus, a -гемолитические и негемолитические стрептококки, клостридии столбняка, плесневые, дрожжевые и несовершенные грибы, споры аэробных и анаэробных бацилл. Наиболее часто инфицируются руки. Патогенная МФ кожи может вызывать гнойничковые и грибковые поражения.
Микрофлора полости рта.
Обитает более 100 видов бактерий.Непатогенная: Str. salivarius, str. mitior, грибы Candida, нейссерии, актиномицеты, лактобактерии.Патогенная: анаэробные бактероиды, фузобактерии, вейллонеллы, актиномицеты, спирохеты родов Leptospira, Borrelia, Treponema, микоплазмы.
Микрофлора дыхательных путей
Большая часть микробов задерживается в носовой полости, в терминальных бронхиолах и альвеолах микробов практически нет.В носовой полости гемолитический микрококк, дифтероиды. стафилококки, стрептококки, сапрофитные Гр- диплококки, протей, Haemophilus influenzae, многие вирусы, в том числе аденовирусы. На микробы оказывают бактерицидное действие муцин и лизоцим. В носоглотке содержатся негемолитические и зеленящие стрептококки, непатогенные нейссерии, стиафилококки и энтеробактерии, а также менингококки, пиогенные стрептококки, пневмококки, возбудитель коклюша.
Микрофлора мочеполовой системы
Верхние отделы (почки, мочеточники) в норме стерильны. В уретре – стрептококки, пептококки, коринебактерии, бактероиды, микобактерии, Staph. epidermis, дифтероиды, грибы родов Candida, Torulopsis, Geotrichum. В наружных отделах Mycobacterium smegmatis. Во влагалище содержатся палочки Додерлейна, Str. agalactiae.
Микрофлора ЖКТ.
В ЖКТ > 260 видов. В основном анаэробы.В желудке бактерий мало (не более 1000/мл). Встречаются молочнокислые бактерии, Sarcina ventriculus, Bac. subtilis, дрожжи. Могут проникать дизентерийные, брюшнотифозные, паратифозные бактерии, холерные вибрионы и др. патогенные МО.В тонком кишечнике немного больше, чем в желудке. Встречаются анаэробы, протей, грибы, Str. faecalisВ толстом кишечнике очень много (1012/г фекальных масс). E. coli (в том числе и патогенные серовары), бифидобактерии, бактероиды, лактобациллы, энтерококки, стафилококки, энтерококки, Clostridium perfringens, Proteus vulgaris.Бактерии слизистых оболочек глаз – стафилококки, микоплазмы, Corynebacterium xerosis. При нарушениях – могут вызывать конъюктивиты, блефариты.Нарушение видового состава нормальной МФ под влиянием различных факторов, характеризующееся изменением соотношения различных видов бактерий – дисбактериоз.Обычно резко снижается содержание бифидобактерий, увеличивается содержание стафилококков, в том числе и гемолитических, Candida, измененных кишечных палочек,Дисбактериозы как правило встречаются в кишечнике.Посевы изучают на наличие патогенных микроорганизмов и на нарушение соотношений МФ. Для обогащения рекомендуют использовать среды Мюллера-Хитона, селенитовый бульон, магниевую среду, для культивирования – среды Плоскирева, Эндо и Левина, среды Цейсслера, Сабуро, Блаурокка, тригликолевый бульон. Патогенные бактерии определяют на средах с АБ; исследования на дисбактериоз проводят для получения основных критериев и показателей. Результаты следует считать объективными при анализе роста изолированных колоний, у которых можно подсчитать общее количество на чашку Петри. При сплошном росте анализ следует повторить, производя высев из больших разведений. Факультативные бактерии культивируют 24-48 ч при 37° С, бифидобактерии – 48 ч, анаэробы и бактероиды – 4-5 суток в анаэростате, посевы на среде Сабуро – 96 ч при 28-30° С. После идентификации производят пересчет содержания МО каждой таксономической группы на 1 г исследуемого материала.К оценке результатов следует подходить осторожно, т.к. состав кишечной МФ подвержен различным колебаниям и необходимо отличать истинный дисбактериоз от дисбактериальных реакций (сдвиги в составе МФ незначительны либо кратковременны и не требуют специфической коррекции). При истинном дисбактериозе нарушения микробного ценоза обычно коррелируют с клиническими проявлениями, и их нормализация достаточно длительна (20-30 суток).при проведении повторных исследований следует отразить имеющиеся позитивные или негативные сдвиги.
бактерий. Вместе с E. coli эти бактерии выделяются с фекалиями больных, реконвалесцентов (выздоравливающих) и бактерионосителей и могут попадать в почву и питьевую воду. На основании этого для оценки фекального загрязнения почвы и воды в качестве санитарно-показательного микроорганизма используют кишечную палочку.
Количество кишечной палочки в 1 грамме почвы или в 1 литре воды называется коли-индекс.
Минимальное количество мг почвы или мл воды, содержащее 1 кишечную палочку, называется коли-титр.
Эти санитарно-бактериологические показатели для воды в нашей стране также нормируютcя ГОСТом. Коли-индекс питьевой воды в системе центрального водоснабжения не должен превышать 3 (3 кишечных палочки в 1 л воды), а коли-титр для питьевой воды должен быть не менее 300 мл.
Для почвы коли-титр и коли-индекс определяются, но не нормируются. Среди условно-патогенных и патогенных микроорганизмов в воздухе чаще всего выявляются представители нормальной микрофлоры кожи и верхних дыхательных путей. Контроль за бактериальным загрязнением воздуха является одним из важных путей профилактики внутрибольничных инфекций, основные возбудители которых - золотистый стафилококк и грамотрицательные условнопатогенные бактерии (последние не передаются
воздушно-капельным путем).
Поэтому санитарно-показательными микроорганизмами воздуха принято считать золотистый стафилококк и гемолитические стрептококки - возбудители достаточно широкого спектра инфекций. Их содержание в воздухе медицинских учреждений нормируется приказами Минздрава России и различного рода методическими рекомендациями.
Методы санитарно-бактериологических исследований.
Забор воды открытых водоемов на бактериологическое исследование производят с определенной глубины с помощью специальных приборов - батометров. Забор водопроводной воды осуществляют следующим образом: водопроводный кран обжигают с помощью спиртовки, сливают первые порции воды, а затем наполняют стерильный флакон объемом 500 мл, плотно закрывают и доставляют в баклабораторию.
ОМЧ воды подсчитывают по результатам прямого высева 1 мл водопроводной воды на МПА, или по 1 мл из серийных десятикратных разведений при анализе воды открытых водоемов.
Для определения количества санитарно-показательных микроорганизмов в воде используют метод мембранных фильтров и бродильный метод.
Метод мембранных фильтров. Определенные объемы воды фильтруют через мембранные фильтры, которые помещают на среду Эндо. После культивирования в течение 18-24 часов при 370 С подсчитывают
количество выросших на фильтре красных (ферментирующих лактозу) колоний и рассчитывают коли-титр и коли-индекс.
Бродильный метод. Определенные объемы воды засевают в полужидкую среду Эйкмана с глюкозой и индикатором. Это позволяет определить так называемый “бродильный титр” - наименьший объем воды, содержащий газообразующие бактерии. После этого их идентифицируют и определяют среди них количество кишечных палочек, т.е. коли-титр.
Коли-титр почвы определяют бродильным методом, но для посева используют среду Кесслера, на которой подавляется рост грамположительных бактерий.
Для определения перфрингенс-титра готовят серийные десятикратные разведения из навески почвы в 1 г и засевают в пробирки с высоким столбиком обезжиренного молока (или средой Вильсона-Блера). Посевы заливают слоем масла для ограничения доступа кислорода и помещают в термостат при 37о С на 24-48 час. Результаты учитывают по створаживанию молока или образованию черных колоний в среде Вильсона-Блера (железосульфитной среде). Максимальное разведение почвы, дающее эти изменения при посеве, и будет перфрингенс-титр.
Для оценки ОМЧ воздуха и содержания санитарно-показательных микробов в нем проводят санитарно-бактериологическое исследование воздуха. Посев воздуха можно произвести 2 методами:
1.седиментационный (Коха), основанный на оседании под действием силы тяжести определенного количества бактерий на определенную площадь питательной среды при определенной температуре и за определенное время.
2.аспирационный метод, основанный на использовании специальных аппаратов, в частности аппарата Кротова, для принудительной аспирации определенного объема воздуха над поверхностью чашки Петри с питательной средой (МПА), куда и оседают бактерии из воздуха при аспирации. При учете роста подсчитывают число колоний на чашке, считая что 1 колония - потомство 1 клетки.
При выявлении в воздухе санитарно-показательных микроорганизмов - стрептококков и стафилококков, определяют их гемолитическую (по зонам гемолиза на кровяном агаре) и плазмокоагулирующую (по свертыванию цитратной кроличьей плазмы) активности.
Микробиологический режим лечебно- профилактических учреждений.
В силу своей значимости санитарно-бактериологические исследования проводятся, а, соответственно, и регламентируются для хирургических и акушерско-гинекологических отделений и стационаров, а также их подразделений, связанных с приготовлением лекарственных препаратов.
В соответствии с приказом Министерства Здравоохранения №215 “О мерах по улучшению организации и повышению качества
специализированной медицинской помощи больным гнойными
хирургическими заболеваниями” санитарно-гигиенический режим (обсемененность различных объектов и воздуха) контролируется 1 раз в месяц.
Ниже приведены основные положения приказа №215. 2.1.Исследование микробной обсемененности воздушной среды 2.1.1.Бактериологические исследования воздушной среды
предусматривают:
- определение общего содержания микробов в 1 кубометре воздуха;
- определение содержания золотистого стафилококка в 1 кубометре воздуха;
2.1.2.Отбор проб воздуха проводят в следующих помещениях:
Оперблоках;
Перевязочных;
- послеоперационных палатах;
- отделениях и палатах реанимации и интенсивной терапии и других помещений, требующих асептических условий.
2.1.3.Пробы воздуха отбирают аспирационным методом с помощью аппарата Кротова.
Скорость протягивания воздуха составляет 25 л/мин, количество пропущенного воздуха должно составлять 100 л для определения общего содержания бактерий и 250 л для определения наличия золотистого стафилококка. Исследование воздуха седиментационным методом допускается в исключительных случаях.
2.1.4. В протоколе количество плесневых грибов указывают отдельно. Примечание: при переносе аппарата Кротова из одного помещения в
другое его поверхность обрабатывают дезинфицирующим раствором. Столик,
внутренние стыки и крышку прибора с внутренней внешней стороны протирают спиртом 70о .
с.53 Критерии оценки микробной обсемененности воздуха в
хирургических клиниках - операционные до начала работы - не выше 500 колоний/м3 , во время работы - не выше 1000 колоний/м3 ; и в том, и в другом случае в 250 л воздуха патогенного стафилококка не должно быть.
Контроль стерильности инструментов (шприцы, иглы, системы переливания крови многократного использования, зонды, бужи, и другие изделия из резины), перевязочного материала, операционного белья, рук хирургов и кожи операционного поля (выборочно) - 1 раз в неделю.
3.1.Забор проб на стерильность проводит операционная сестра.... в стерильные емкости, с соблюдением строжайших правил асептики непосредственно перед проведением операции.
3.2.Для контроля стерильности используют следующие питательные среды: - сахарный бульон Хоттингера (0,5 и 1% глюкозы);
- тиогликолевую среду;
Бульон Сабуро.
Одновременный посев изделий на 3 вышеуказанные среды обязателен. с.62. 6.Учет результатов
Материал стерилен при отсутствии роста во всех посевах. Материал не стерилен при росте микрофлоры.
с.62. 7.Бактериологический контроль эффективности обработки кожи операционного поля и рук хирургов.
Марлевой салфеткой, смоченной в физиологическом растворе, протирают ладони, околоногтевые и межпальцевые пространства обеих рук. Отмывную жидкость засевают на 2 чашки Петри с МПА, а марлевую салфетку - в 0,5% сахарный бульон.
8.Кожа и руки стерильны при отсутствии роста микроорганизмов как на твердой, так и на жидкой питательной среде.
Приказ №691 от 28.12.89 МЗ СССР “О профилактике внутрибольничных инфекций в акушерских стационарах”
Ниже приведены основные положения приказа №691.
с.30. 1.2.В акушерских стационарах бактериологический контроль проводят... в порядке текущего надзора не менее 1 раза в квартал.
1.3.Бактериологический контроль при текущем саннадзоре осуществляется в родильных залах, операционном блоке, процедурных, детских палатах и палатах интенсивной терапии, в комнатах сбора, пастеризации и хранения грудного молока, в палатах послеродового отделения.
1.4. Объектами исследования являются:
- воздушная среда;
- медицинский инструментарий;
- руки и одежда медперсонала;
- грудное молоко и питьевые растворы;
- лекарственные средства.
с.32. 2.1.1.Бактериологические исследования воздуха предусматривают определение общего содержания микроорганизмов в 1 м3 воздуха и определение содержания золотистого стафилококков в 1 м3 воздуха.
2.1.2.Пробы воздуха отбирают аспирационным методом с помощью аппарата Кротова. Скорость протягивания воздуха - 25 л/мин. Количество пропущенного воздуха - 100 л для определения общего содержания микроорганизмов и 250 л для определения наличия золотистого стафилококка.
2.1.3. ..... отбор проводят на 2% питательный агар..., 2.1.4. ... на ЖСА...
2.1.5.Критерии оценки микробной обсемененности воздуха в роддомах: В операционных и родильных комнатах до начала работы и в детских палатах, подготовленных к приему детей, общее количество КОЕ (колониеобразующих единиц) в 1 м3 допустимо не выше 500, а колоний золотистого стафилококка не должно быть вообще. Во время работы эти показатели равны 1000 -750 и не более 4, соответственно. В палатах
недоношенных и травмированных детей колоний золотистого стафилококка не должно быть ни до, ни во время работы, в то же время общее количество КОЕ допустимо не выше 500/750 в 1 м3 воздуха.
В соответствии с “Методическими указаниями по микробиологическому контролю в аптеках “ (1985) отбор проб для бактериологического исследования различных объектов в аптеках производится не менее 2 раз в квартал, при этом
2.12.Пробы воздуха отбирают в следующих помещениях:
- в асептическом блоке; стерилизационной;
- в ассистентской, фасовочной, комнате дефектара и материальной;
В моечной;
- в зале обслуживания.
Отбор проб воздуха производят при соблюдении следующих условий:
- чистое подготовленное к работе помещение;
- закрытые форточки и двери;
- определение в помещении % относительной влажности воздуха;
- уровень высоты отбора проб воздуха - соответствует высоте рабочего
- не ранее чем за 30 мин. после влажной уборки помещения.
Пробы воздуха отбирают аспирационным методом с помощью приборов для бактериологического анализа воздуха - прибор Кротова в том числе. Скорость протягивания воздуха должна составлять 25 л/мин, количество пропущенного воздуха - 100 л для определения общего количества бактерий, 250 л для определения золотистого стафилококка и 250 л для определения плесневых и дрожжевых грибов.
Для определения общего содержания бактерий в 1 м3 отбор производят на 2% питательный агар, разлитый в чашки по 12-15 мл. Для определения золотистого стафилококка используют желточно-солевой агар, для определения плесневых и дрожжевых грибов - среду Сабуро.
Критерии оценки микробной обсемененности воздуха помещений аптек: общее количество колоний микроорганизмов в 1 м3 воздуха в асептическом блоке, стерилизационной, ассистентской, фасовочной, дефектарной, материальной после работы должно быть не выше 1000 (до работы 500-750, соответственно), а золотистого стафилококка, плесневых и дрожжевых грибов не должно быть в 250 л воздуха ни до, ни после работы. В моечной ОМЧ во время работы должно быть не выше 1000, золотистого стафилококка не должно быть в 250 л воздуха, количество плесневых и дрожжевых грибов до 12/м3 воздуха. В зале обслуживания аптек во время работы ОМЧ должно быть не выше 1 500, количество золотистого стафилококка допускается до 100 в 1 м3 , а плесневых и дрожжевых грибов - до 20 в 1 м3 воздуха.
Известно, что причиной пирогенности дистиллированной воды, предназначенной для изготовления инъекционных растворов, а также самих инъекционных растворов в подавляющем большинстве случаев являются грамотрицательные (пирогенобразующие) микроорганизмы. Их предельнодопустимое содержание в 1 мл дистиллированной воды, используемой для приготовления инъекционных растворов нормируется на уровне 5, при общем количестве 15-20, а растворы глюкозы (5-10-25-40%), натрия хлорида (0,9%) до стерилизации, но не позднее 1- 1,5 часов после изготовления должны содержать не более 50 особей в 1 мл, из них пирогенных - не более 10.
Глава 3. Нормальная микрофлора тела человека и ее роль. Дисбиоз, методы его выявления и коррекции.
В настоящее время твердо установленным является положение о том, что организм человека и населяющие его микроорганизмы представляют собой единую экосистему. Жизнь лишенных микрофлоры животных (гнотобионтов) существенно отличается от таковой нормальных особей, а порою просто невозможна.
В этой связи учение о нормальной микрофлоре человека и ее нарушениях представляет важный, весьма существенный раздел медицинской микробиологии.
Совокупность микробных биоценозов, встречающихся в организме здоровых людей, составляет нормальную микрофлору человека.
Заселение бактериями различных областей тела, органов и систем организма начинается в момент рождения человека и продолжается на протяжении всей его жизни. Формирование качественного и количественного состава нормальной микрофлоры регулируется сложными антагонистическими и синергическими отношениями между отдельными ее представителями в составе биоценозов. Состав микрофлоры может меняться в зависимости от возраста, условий внешней среды, условий труда, рациона питания, перенесенных заболеваний, травм и стрессовых ситуаций.
Любой человеческий организм содержит 2 группы микроорганизмов. 1.Постоянная, или резидентная, или естественная микрофлора. Она
представлена относительно стабильным составом микроорганизмов, обычно обнаруживаемых в определенных местах тела человека, у людей определенного возраста. После нарушений состав этой флоры быстро спонтанно восстанавливается.
2.Транзиторная, или временная микрофлора, которая попадает на кожу или слизистые оболочки из окружающей среды, не вызывая заболеваний и не обитая постоянно на поверхностях тела человека. Она представлена непатогенными, т.е. сапрофитными, или потенциально патогенными, т.е. условнопатогенными, микроорганизмами, которые обитают на коже или слизистых оболочках в течение нескольких часов, дней или недель.
Присутствие транзиторной микрофлоры определяется не только поступлением микробов из окружающей среды, но и состоянием иммунной системы организма хозяина, составом постоянной нормальной микрофлоры. Однако, если в составе нормальной микрофлоры и/или в состоянии иммунной системы макроорганизма происходят изменения, транзиторные микроорганизмы могут вызывать заболевания - эндогенные инфекции.
В норме многие ткани и органы здорового человека свободны от микроорганизмов, т.е. являются стерильными. К ним относятся внутренние органы, головной и спинной мозг, альвеолы легких, внутреннее и среднее ухо, кровь, лимфа, спинномозговая жидкость, матка, почки, мочеточники и моча в
мочевом пузыре. Это обеспечивается наличием неспецифических клеточных и гуморальных факторов иммунитета, препятствующих проникновению микробов в эти ткани и органы.
На всех открытых поверхностях и во всех открытых полостях формируется достаточно стойкая микрофлора, специфичная для данного органа, биотопа или его участка - эпитопа.
Наиболее богаты микроорганизмами ротовая полость, толстый кишечник, верхние отделы дыхательной системы, наружные отделы мочеполовой системы и кожа, особенно её волосистая часть.
3.1.Нормальная микрофлора кожи.
Вследствие постоянного контакта с внешней средой кожа чаще всего становится местом обитания транзиторных микроорганизмов. Тем не менее имеется стабильная и хорошо изученная постоянная микрофлора, состав которой изменяется в различных анатомических зонах в зависимости от близости к слизистым оболочкам (рот, нос, перианальная область), особенностей секреции, одежды.
В составе постоянной микрофлоры кожи и слизистых оболочек превалируют аэробные и анаэробные дифтероиды (например, коринебактерии, пропионибактерии); негемолитические аэробные и анаэробные стафилококки (Staphylococcus epidermidis, Peptococcus); грамположительные аэробные спорообразующие палочки, которые повсеместно распространены в воздухе, воде и почве; альфа-гемолитические стрептококки (Streptococcus viridans) и энтерококки (Streptococcus faecalis), а также грамотрицательные колиформные бактерии и бактерии рода Acinetobacter. В области кожных складок часто обитают грибы и дрожжи. В зонах, где имеются скопления сальных желез (гениталии, наружное ухо), встречаются кислотоустойчивые непатогенные микобактерии.
Значительное большинство микроорганизмов, в том числе и патогенных, не проникает через неповрежденные кожные покровы и погибает под воздействием бактерицидных свойств кожи.
К числу таких факторов, которые могут оказывать существенное влияние на удаление непостоянных микроорганизмов с поверхности кожи, относятся кислая реакция среды, наличие жирных кислот в секретах сальных желез и присутствие лизоцима. Ни обильное потоотделение, ни мытье или купание не могут удалить нормальную постоянную микрофлору или существенно повлиять на ее состав, т.к. микрофлора быстро восстанавливается вследствие выхода микроорганизмов из сальных и потовых желез даже в тех случаях, когда контакт с другими участками кожи или с внешней средой полностью прекращен. Поэтому увеличение обсемененности
того или иного участка кожи в результате уменьшения бактерицидных свойств кожи может служить показателем снижения иммунологической реактивности макроорганизма.
Обнаружение кишечной палочки на руках или других участках тела при санитарно-бактериологическом исследовании смывов с поверхности кожи свидетельствует об их фекальном загрязнении.
3.2. Нормальная микрофлора глаза (конъюнктивы).
Доминирующими микроорганизмами на слизистых оболочках глаза являются дифтероиды, нейссерии и грамотрицательные бактерии, преимущественно рода Moraxella. Нередко обнаруживаются стафилококки и негемолитические стрептококки, микоплазмы, хламидии, адено- и герпесвирусы. На количество и состав конъюнктивальной микрофлоры значительное влияние оказывает слезная жидкость, в которой содержится лизоцим, обладающий антибактериальной активностью.
3.3. Нормальная микрофлора уха.
В среднем ухе в норме микробов не содержится, так как сера обладает бактерицидными свойствами, но они все же могут проникать в среднее ухо через евстахиеву трубу. В наружном слуховом проходе могут находиться обитатели кожи - стафилококки, коринебактерии, реже встречаются бактерии рода Pseudomonas, дрожжевые грибы рода Candida.
3.4. Нормальная микрофлора верхних дыхательных путей.
Большая часть микроорганизмов вдыхаемого воздуха задерживается в полости носа, где погибает через некоторое время. Собственная же микрофлора носа представлена коринебактериями, стафилококками, стрептококками и нейссериями.
В верхних дыхательных путях, в частности в гортани, преобладают негемолитические и альфа-гемолитические стрептококки, а также нейссерии. Кроме того, встречаются стафилококки, дифтероиды, гемофильные бактерии, пневмококки, микоплазмы, бактероиды.
Слизистая оболочка гортани, трахеи, бронхов и всех нижележащих отделов сохраняется стерильной благодаря активности их эпителия, макрофагов, а также продукции секреторного иммуноглобулина А.
Несовершенство этих защитных механизмов у недоношенных детей, нарушение их функционирования в результате иммунодефицитных состояний или при ингаляционном наркозе приводит к проникновению микроорганизмов вглубь бронхиального дерева и, соответственно, может быть одной из причин тяжелых респираторных заболеваний.
3.5.Нормальная микрофлора полости рта и пищеварительного тракта.
В настоящее время описано несколько сотен видов микроорганизмов, составляющих нормальную микрофлору полости рта.
Слизистые оболочки ротовой полости и глотки при рождении ребенка нередко стерильны, однако уже при прохождении через родовой канал может происходить их контаминация. Через 4-12 часов после родов в составе микрофлоры полости рта обнаруживают зеленящие стрептококки, которые сопутствуют человеку в течение всей его жизни. В организм ребенка они попадают, вероятно из организма матери или от обслуживающего персонала. К этим микроорганизмам уже в раннем детстве добавляются аэробные и анаэробные стафилококки, грамотрицательные диплококки (нейссерии, бранхамеллы), коринебактерии (дифтероиды) и иногда молочнокислые бактерии (лактобациллы). Во время прорезывания зубов на слизистых оболочках поселяются анаэробные спирохеты, бактероиды (в частности, B. melaninogenicus), фузобактерии и некоторые анаэробные вибрионы и лактобациллы.
Наибольшие микробные скопления у взрослых образуются в межзубных промежутках, физиологических десневых карманах (гингивальной борозде), зубных бляшках и на спинке языка, особенно в задних ее отделах.
При нормальном состоянии зубов и слизистой оболочки и отсутствия нарушений секреции слюны, жевания, глотания количество микроорганизмов в ротовой полости взрослых зависит от состояния межзубных промежутков, продолжительности интервалов между приемами пищи, её консистенции и гигиенического ухода за зубами. Например, при отсутствии гигиенического ухода за полостью рта относительно возрастает количество аспорогенных анаэробов: лептотрихий, фузобактерий, бактероидов, спирохет и др.
Качественный состав резидентной микрофлоры ротовой полости каждого здорового человека варьирует в довольно ограниченных пределах. Различия зависят преимущественно от пола, возраста и особенностей питания людей. Например, даже у мужа и жены микрофлора полости рта различна, а избыток содержания в пище сахарозы способствует размножению дрожжеподобных грибов (Candida albicans), при замене же ее глюкозой они убывают или исчезают.
Микрофлора тела человека представлена постоянными (нормальная микрофлора) и временными обитателями, попадаюими с одежды, пищевых продуктов, водой и пр.
Постоянные обитатели кожи - сарцины, стафилококки, стрептококки, отдельные виды дрожжей и грибов. Они питаются выделениями сальных и потовых желез и слущенными клетками эпителия. Временная микрофлора разнообразна и находится в инертном состоянии, но проявляет себя при повреждении кожи.
Микрофлора полости рта зависит от возраста, особенностей питания, состояния зубов, десен, миндалин. Обитают микро-, дипло-, стрептококки, стафилококки, кислотообразующие палочки, вибрионы, спириллы, спирохеты. Могут встречаться актиномицеты, дрожжи, иногда вирусы.
Микрофлора дыхательных путей меняется в зависимости от состава вдыхаемого воздуха. Большая часть микроорганизмов задерживаются в полости носа и небольшое количество кокковых форм проникает в верхние отделы дыхательных путей. Бронхиолы и альвеолы на содержат м/о. Слизистая носа продуцирует муцин, лизоцим, но в полости носа всегда присутствуют стрепто-, микро-, стафило-, диплококки, капсульные грам- бактерии
Микрофлора желудочно-кишечного тракта самая богатая по наличию микроорганизмов. Его части различны по численному и видовому составу микроорганизмов. Этот состав меняется в зависимости от возраста и состояния здоровья.
Микрофлора желудка бедна из-за высокой кислотности и высоких бактерицидных свойств желудочного сока.
В тонком кишечнике - щелочная среда (бактерицидные свойства), там присутствуют кислотообразующие бактерии и энтерококки, в количестве, большем, чем в желудке.
Толстый отдел кишечника самый богатый по микрофлоре, так же как и прямая кишка. Один грамм экскрементов содержит миллиарды клеток, и микроорганизмы составляют 30% от сухих веществ (биомасса микроорганизмов). Это Грамм-положительные анаэробные бактерии (бифидиобактерии и молочно-кислые бактерии), кишечная палочка E.Coli и родственные ей формы, такие как энтерококки, лактобациллы, протеи, споровые анаэробные бактерии рода Сlostridium . Перечисленные микроорганизмы участвуют в разложении пектиновых веществ, клетчатки, синтезируют витамины E, K, H и др., образуют антибиотические вещества, направленные против гнилостных и патогенных бактерий.
| | | следующая лекция ==> | |
