Qual è il gruppo sanguigno del sistema evo. Sistemi sanguigni antigenici

Perché nasce il conflitto madre-feto?
Il conflitto "madre-feto" si verifica quando il sangue della madre e del feto è incompatibile, quando nel sangue della madre si formano anticorpi che danneggiano gli eritrociti del feto, il che porta alla malattia emolitica del neonato. Questo fenomeno si basa sulla differenza nel sangue umano per gruppi, a seconda della presenza di diversi antigeni negli eritrociti e negli anticorpi plasmatici a livello di gruppo. Il numero di antigeni di gruppo è elevato e determinano il gruppo sanguigno. Il bambino riceve il sistema dei gruppi sanguigni dal padre e dalla madre, secondo la legge di Mendel. In pratica, non è difficile definire un gruppo. Non tutti gli antigeni sono ugualmente comuni e ugualmente forti, quindi non tutti causano conflitti sierologici. Molto spesso, l'incompatibilità si verifica in base al fattore Rh e al sistema AB0.

Conflitto del sistema ABO

L'isoimmunizzazione può svilupparsi a causa dell'incompatibilità del sangue della madre e del feto secondo il sistema ABO, quando la madre ha il gruppo sanguigno O (I) e il feto ne ha un altro. Gli antigeni A e B del feto possono entrare nel flusso sanguigno della madre durante la gravidanza, portando rispettivamente alla produzione di anticorpi immunitari alfa e beta e allo sviluppo di una reazione nel feto
antigene-anticorpo. L'incompatibilità di gruppo materno-fetale, sebbene più comune dell'incompatibilità del fattore Rh, la malattia emolitica del feto e del neonato è più lieve e, di regola, non richiede una terapia intensiva.

Perché si verifica il conflitto immunologico?

Il primo gruppo sanguigno non contiene gli antigeni A e B negli eritrociti, ma ci sono anticorpi α e β. In tutti gli altri gruppi ci sono tali antigeni, e quindi il primo gruppo sanguigno, avendo incontrato gli antigeni A o B che gli sono estranei, inizia con loro "inimicizia", ​​distruggendo i globuli rossi contenenti questi antigeni. È questo processo il conflitto immunologico nel sistema AB0.

Un po' di fisiologia.

Vediamo cos'è un gruppo sanguigno e perché può verificarsi un tale conflitto durante la gravidanza. Considera la biologia delle scuole superiori. Il sangue è costituito da cellule del sangue (eritrociti, leucociti) e plasma (la parte liquida). I globuli rossi sembrano dischi biconcavi rossi.
Un globulo rosso contiene un'enorme quantità di emoglobina, una proteina complessa in grado di trasportare ossigeno. Si stima che ogni globulo rosso contenga oltre 3 milioni di molecole di emoglobina.

Inoltre, sulla superficie dei globuli rossi possono essere localizzate proteine ​​speciali, i cosiddetti agglutinogeni. La loro presenza varia da persona a persona. Se gli eritrociti, che contengono determinati agglutinogeni, entrano nel corpo di una persona che non possiede tali agglutinogeni, li percepisce come estranei e produce anticorpi speciali contro di loro: le agglutinine. Lo scopo di tali anticorpi è la distruzione dei globuli rossi estranei. Approssimativamente questa situazione si verifica quando c'è un conflitto tra i gruppi sanguigni della madre e del bambino durante la gravidanza. La stessa cosa accade con la trasfusione di sangue incompatibile.

In realtà esiste un numero enorme di agglutinogeni, ma nella medicina pratica di solito ne vengono determinati solo pochi. Questi sono agglutinogeni A, B e D. È dalla presenza di questi agglutinogeni che viene giudicato il gruppo sanguigno di una persona:

Gruppo I: non sono presenti agglutinogeni A e B sugli eritrociti.

Gruppo II: l'agglutinogeno A è presente sugli eritrociti.

Gruppo III: sugli eritrociti è presente l'agglutinogeno B.

Gruppo IV: sugli eritrociti sono presenti gli agglutinogeni A e B.

E l'agglutinogeno D determina il fattore Rh. Se si trova sui globuli rossi, il sangue è considerato Rh positivo e, in caso contrario, Rh negativo.

Chi dovrebbe aver paura di un conflitto di gruppi sanguigni?

In teoria, un problema del genere può sorgere se la madre e il nascituro hanno gruppi sanguigni diversi:

• una donna con gruppo sanguigno I o III - un feto con II;
• una donna con gruppo sanguigno I o II - un feto con III;
• una donna con gruppo I, II o III - un feto con IV.

La combinazione più pericolosa è considerata se una donna con gruppo sanguigno I dà alla luce un bambino con II o III. È questo allineamento che molto spesso porta allo sviluppo di tutti i segni di conflitto tra la madre e il feto e all'insorgenza della malattia emolitica nel neonato. Le donne a rischio includono anche:

• che hanno ricevuto una trasfusione di sangue in passato;
• sopravvissuti a aborti o aborti multipli;
• ha dato alla luce in precedenza un bambino che ha sviluppato una malattia emolitica o un ritardo mentale.

La possibilità di sviluppare un conflitto immunologico di gruppo secondo il sistema AB0 esiste nelle coppie con le seguenti combinazioni di gruppi sanguigni:

• una donna del gruppo I + un uomo del gruppo II, III o IV;
• una donna del gruppo II + un uomo del gruppo III o IV;
• donna con III + uomo con II o IV.

Cosa contribuisce allo sviluppo del conflitto?

Una placenta sana e funzionante protegge dallo sviluppo di un conflitto di gruppi sanguigni. La sua particolare struttura non consente la mescolanza del sangue della madre e del feto, soprattutto a causa della barriera placentare. Tuttavia, ciò può ancora accadere in caso di violazione dell'integrità dei vasi della placenta, del suo distacco e di altre lesioni o, molto spesso, durante il parto. Le cellule fetali entrate nel flusso sanguigno materno, se sono estranee, provocano la produzione di anticorpi che hanno la capacità di penetrare nel corpo fetale e attaccare le sue cellule del sangue, provocando la malattia emolitica. La sostanza tossica bilirubina, che si forma in grandi quantità a seguito di tale esposizione, può danneggiare gli organi del bambino, principalmente cervello, fegato e reni, con gravi conseguenze per la salute fisica e mentale del bambino.

Manifestazioni di conflitto di gruppo, suo trattamento e prevenzione

Una donna incinta non sentirà alcun segno di sviluppo di un conflitto di gruppo sanguigno. Scoprirne la presenza aiuterà un esame del sangue, che mostrerà un alto titolo di anticorpi nel sangue della donna. Con lo sviluppo della malattia emolitica del feto e del neonato, si può osservare quanto segue:

• rigonfiamento,
• ittero,
• anemia,
• ingrossamento della milza e del fegato.

La prevenzione di gravi complicazioni è la donazione regolare di sangue per l'analisi e il rilevamento di anticorpi specifici in esso contenuti: l'emolisina. Se vengono ritrovati, la donna incinta viene posta sotto osservazione. Se, a seguito di test ripetuti, il titolo anticorpale continua ad aumentare costantemente e le condizioni del feto peggiorano, potrebbe essere necessario un parto prematuro o una trasfusione di sangue intrauterina al feto.
La sensibilizzazione da parte del sistema ABO non è un grosso problema. È importante saperlo, controllare due volte il titolo anticorpale durante la gravidanza e non prolungare la gravidanza, poiché è il parto tardivo che dà luogo alle forme più gravi di HDN che richiedono una trasfusione di sangue sostitutiva.

Alcuni ginecologi prescrivono abitualmente un test per gli anticorpi di gruppo alle donne incinte con il primo gruppo sanguigno se ci sono i prerequisiti per questo. In realtà, ciò accade molto raramente, poiché il conflitto nel sistema AB0 di solito non comporta conseguenze gravi e provoca ittero solo nel bambino già nato, praticamente senza alcun effetto sul feto nel grembo materno. Pertanto, non esistono studi di massa come quelli sulla gravidanza di una donna Rh negativa.

In un conflitto secondo il sistema ABO, il feto non si ammala e il neonato non soffre di anemia. Tuttavia, le manifestazioni dell'ittero nei primi giorni di vita sono molto gravi e molti bambini necessitano di cure.
Nella maggior parte dei casi, la malattia emolitica del neonato relativa al sistema ABO non si ripresenta nei figli successivi (vale a dire, le gravidanze ripetute sono generalmente più facili, a differenza della sensibilizzazione Rh), ma non può essere esclusa (THD). la vita del feto, la diagnostica di massa del conflitto ABO nelle donne in gravidanza non viene eseguita.

Una caratteristica distintiva dell'immunoconflitto secondo il sistema ABO è la comparsa successiva di segni di malattia emolitica in un neonato. Di norma, solo dal 3° al 6° giorno di vita comincia ad apparire la colorazione itterica della pelle del bambino, che spesso viene indicata come ittero fisiologico, e solo nelle forme gravi di malattia emolitica, che si osserva in un caso su 200- 256 nascite, è la diagnosi corretta stabilita in modo tempestivo. Tali forme di malattia emolitica del neonato diagnosticate prematuramente secondo il sistema ABO spesso lasciano conseguenze nei bambini.

La malattia emolitica del neonato richiede un trattamento obbligatorio per evitare lo sviluppo di gravi complicanze. Più pronunciati sono i sintomi, più intenso è il conflitto, per confermare che viene eseguito un esame del sangue per un aumento del contenuto di bilirubina. Lo scopo del trattamento è rimuovere gli anticorpi, i globuli rossi danneggiati e la bilirubina in eccesso dal sangue del bambino, per il quale vengono eseguiti la fototerapia e altri trattamenti sintomatici. Nel caso in cui ciò non aiuti, o il livello di bilirubina nel sangue aumenta molto rapidamente, si ricorre alla procedura di trasfusione di sangue al neonato.

I futuri genitori che corrono il rischio di sviluppare un tale conflitto devono sapere che, in primo luogo, la probabilità di un vero conflitto nei gruppi sanguigni è molto piccola nella pratica e, in secondo luogo, molto spesso è molto più semplice del conflitto Rh e dei casi di i casi gravi sono relativamente rari, quindi il conflitto secondo il sistema AB0 è considerato meno pericoloso per la salute del bambino.

DISPOSIZIONI GENERALI

Il sistema dei gruppi sanguigni ABO è costituito da due gruppi agglutinogeni, A e B, e da due corrispondenti agglutinine plasmatiche, alfa (anti-A) e beta (anti-B). Varie combinazioni di questi antigeni e anticorpi formano quattro gruppi sanguigni: gruppo 0(1) - entrambi gli antigeni sono assenti; gruppo A (II) - sugli eritrociti è presente solo l'antigene A; gruppo B(III) - sugli eritrociti è presente solo l'antigene B; gruppo AB (IV) - gli antigeni A e B sono presenti sugli eritrociti.

L'unicità del sistema ABO sta nel fatto che nel plasma delle persone non immunizzate sono presenti anticorpi naturali contro l'antigene assente sugli eritrociti: nelle persone del gruppo 0 (1) - anticorpi contro A e B; nelle persone del gruppo A (II) - anticorpi anti-B; nelle persone del gruppo B (III) - anticorpi anti-A; le persone del gruppo AB(IV) non hanno anticorpi contro gli antigeni del sistema ABO.

Nel testo seguente gli anticorpi anti-A e anti-B verranno indicati come anti-A e anti-B.

La determinazione del gruppo sanguigno ABO viene effettuata identificando antigeni e anticorpi specifici (reazione doppia o incrociata). Gli anti-A e gli anti-B vengono rilevati nel siero del sangue utilizzando eritrociti standard A(II) e B(III). La presenza o l'assenza degli antigeni A e B sugli eritrociti viene determinata utilizzando anticorpi monoclonali o policlonali (sieri emoagglutinanti standard) della specificità appropriata.

La determinazione del gruppo sanguigno viene effettuata due volte: studio primario - nel dipartimento medico (team di raccolta del sangue); studio di conferma - nel dipartimento di laboratorio. L'algoritmo per condurre test di laboratorio immunoematologici durante la trasfusione di sangue è mostrato in fig. 18.1.

Il risultato della determinazione del gruppo sanguigno viene registrato in alto a destra sul foglio anteriore dell'anamnesi o sul diario (carta) del donatore indicando la data e firmato dal medico che ha effettuato la determinazione.

Nel nord-ovest della Russia, la distribuzione dei gruppi sanguigni del sistema ABO nella popolazione è la seguente: gruppo 0 (I) - 35%; gruppo A(II) - 35-40%; gruppo B(III) - 15-20%; gruppo AB (IV) - 5-10%.

Va notato che esistono diversi tipi (varianti deboli) sia dell'antigene A (in misura maggiore) che dell'antigene B. I tipi più comuni di antigene A sono A 1 e A 2. La prevalenza dell'antigene A 1 negli individui dei gruppi A (II) e AB (IV) è dell'80% e dell'antigene A 2 - circa il 20%. I campioni di sangue con A 2 possono contenere anticorpi anti-A 1 che interagiscono con i globuli rossi standard del gruppo A (II). La presenza di anti-A 1 viene rilevata mediante determinazione incrociata dei gruppi sanguigni e durante il test di compatibilità individuale.

Per la determinazione differenziata delle varianti dell'antigene A (A 1 e A 2), è necessario utilizzare reagenti specifici (fitoemoagglutinine o anticorpi monoclonali anti-A 1. I pazienti dei gruppi A 2 (II) e A 2 B (IV) devono essere trasfuso con emocomponenti contenenti eritrociti, rispettivamente, dei gruppi A 2 (II) e A 2 B (IV) Si possono anche raccomandare trasfusioni di eritrociti lavati: 0 (I) - per pazienti con gruppo sanguigno A 2 (II); 0 ( I) e B (III) - per pazienti con gruppo sanguigno A 2 B(II).

Tabella 18.4. Risultati della tipizzazione del sangue ABO
Risultati della ricerca						Affiliazione di gruppo del sangue studiato
eritrociti con reagente			siero (plasma) con eritrociti standard
anti-AB	anti-A	anti-B	0(io)	A(II)	B(III)
-	-	-	-	+	+	0(io)
+	+	-	-	-	+	A(II)
+	-	+	-	+	-	B(III)
+	+	+	-	-	-	AB(IV)
Notazione: + - presenza di agglutinazione, - - assenza di agglutinazione

Determinazione del gruppo sanguigno secondo il sistema ABO

I gruppi sanguigni vengono determinati mediante sieri standard (reazione semplice) ed eritrociti standard (reazione doppia o incrociata).

Il gruppo sanguigno viene determinato mediante una semplice reazione con due serie di sieri isoemoagglutinanti standard.

• Progresso della definizione [spettacolo] .

  La determinazione del gruppo sanguigno viene effettuata in buona luce e ad una temperatura compresa tra + 15 e + 25 ° C sulle compresse. Sul lato sinistro della tavoletta inscrivi 0 (1), al centro - A (II), sul lato destro - B (III). Al centro del bordo superiore della compressa è annotato il nome del donatore o il numero del sangue da analizzare. Utilizzare sieri standard attivi di tre gruppi (O, A, B) con un titolo di almeno 1:32, due serie. I sieri vengono posizionati in appositi rack su due file. Ogni siero corrisponde ad una pipetta etichettata. Il gruppo di siero AB(IV) viene utilizzato come controllo aggiuntivo.

  Applicare una o due gocce di sieri standard sulla compressa in due file: siero del gruppo 0(1) - a sinistra, siero del gruppo A(II) - al centro, siero del gruppo B(III) - a destra.

  Gocce di sangue prelevate da un dito o da una provetta vengono applicate con una pipetta o una bacchetta di vetro vicino a ciascuna goccia di siero e mescolate con un bastoncino. La quantità di sangue dovrebbe essere 8-10 volte inferiore a quella del siero. Dopo la miscelazione, la piastra o la compressa viene agitata delicatamente tra le mani, il che contribuisce ad un'agglutinazione più rapida e chiara degli eritrociti. Quando si verifica l'agglutinazione, ma non prima che siano trascorsi 3 minuti, una goccia di soluzione di cloruro di sodio allo 0,9% viene aggiunta alle gocce di siero con eritrociti, dove si è verificata l'agglutinazione, e l'osservazione viene continuata fino a quando non sono trascorsi 5 minuti. Leggere la reazione in luce trasmessa dopo 5 minuti.

  Se l'agglutinazione non è chiara, alla miscela di siero e sangue viene aggiunta anche una goccia di soluzione di cloruro di sodio allo 0,9%, dopo di che si giunge alla conclusione sull'appartenenza al gruppo (Tabella 18.4).

• Risultati della reazione [spettacolo] .
  1. L'assenza di agglutinazione in tutte e tre le gocce indica che nel sangue analizzato non è presente agglutinogeno, cioè il sangue appartiene al gruppo 0(I).
  2. La comparsa dell'agglutinazione nelle gocce con i sieri 0(I) e B(III) indica che nel sangue è presente l'agglutinogeno A, cioè il sangue appartiene al gruppo A(II).
  3. La presenza di agglutinazione nelle gocce con sieri del gruppo 0(I) e A(II) indica che il sangue analizzato contiene agglutinogeno B, cioè sangue del gruppo B(III).
  4. L'agglutinazione in tutte e tre le gocce indica la presenza degli agglutinogeni A e B nel sangue analizzato, cioè il sangue appartiene al gruppo AB (IV). Tuttavia, in questo caso, poiché l'agglutinazione con tutti i sieri è possibile a causa di una reazione aspecifica, è necessario applicare sulla piastra o sulla piastra due o tre gocce di siero standard AB(IV) e aggiungere 1 goccia del test sangue a loro. Siero e sangue vengono miscelati e il risultato della reazione viene osservato entro 5 minuti.

     Se non si è verificata agglutinazione, il sangue analizzato viene assegnato al gruppo AB(IV). Se si verifica un'agglutinazione con il siero del gruppo AB (IV), la reazione non è specifica. In caso di agglutinazione debole e in tutti i casi dubbi, il sangue viene ritestato con sieri standard di altre serie.

Determinazione del gruppo sanguigno ABO mediante doppia reazione
(secondo sieri standard ed eritrociti standard)

Gli eritrociti standard sono una sospensione al 10-20% di eritrociti nativi freschi (o cellule test lavate dal conservante) dei gruppi 0 (I), A (II) e B (III) in soluzione di cloruro di sodio allo 0,9% o soluzione salina di citrato. Gli eritrociti standard nativi possono essere utilizzati entro 2-3 giorni se conservati in soluzione salina isotonica a +4°C. Gli eritrociti standard conservati vengono conservati a +4°C per 2 mesi e lavati dalla soluzione conservante prima dell'uso.

Le fiale o i flaconi con sieri standard ed eritrociti standard vengono collocati in appositi rack con contrassegni appropriati. Per lavorare con i reagenti di tipizzazione vengono utilizzate pipette asciutte e pulite, separate per ciascun reagente. Per lavare le bacchette e le pipette di vetro (plastica), preparare i bicchieri con una soluzione di cloruro di sodio allo 0,9%.

Per determinare il gruppo, 3-5 ml di sangue vengono prelevati in una provetta senza stabilizzatore. Il sangue dovrebbe riposare per 1,5-2 ore ad una temperatura di + 15-25 ° C.

• Progresso della definizione [spettacolo] .

  Sulla compressa si applicano due gocce (0,1 ml) di sieri standard dei gruppi 0(I), A(II), B(III) di due serie. Di conseguenza, in ciascun gruppo di sieri viene posta una piccola goccia (0,01 ml) di eritrociti standard dei gruppi 0(I), A(II), B(III). Una goccia di sangue da analizzare viene aggiunta ai sieri standard e due gocce di siero da analizzare vengono aggiunte agli eritrociti standard. La quantità di sangue dovrebbe essere 8-10 volte inferiore a quella del siero. Le gocce si mescolano con una bacchetta di vetro e, agitando la compressa tra le mani per 5 minuti, si controlla la comparsa dell'agglutinazione. Se l'agglutinazione è indistinta, alla miscela di siero e sangue viene aggiunta ulteriormente una goccia di soluzione di cloruro di sodio allo 0,9% (0,1 ml), dopo di che si giunge alla conclusione sull'appartenenza al gruppo (Tabella 18.4).

• Valutazione dei risultati della determinazione del gruppo sanguigno del sistema ABO [spettacolo] .
  1. La presenza di agglutinazione con gli eritrociti standard A e B e l'assenza di agglutinazione in tre sieri standard di due serie indica che entrambe le agglutinine, alfa e beta, sono presenti nel siero del test e che non sono presenti agglutinogeni negli eritrociti del test, cioè , il sangue appartiene al gruppo 0 (I) .
  2. La presenza di agglutinazione con sieri standard dei gruppi 0(I), B(III) e con eritrociti standard del gruppo B(III) indica che l'agglutinone A è presente negli eritrociti studiati e l'agglutinina beta è presente nel siero studiato. Pertanto, il sangue appartiene al gruppo A(II).
  3. La presenza di agglutinazione con sieri standard dei gruppi 0 (I), A (II) e con eritrociti standard del gruppo A (II) indica che gli eritrociti studiati contengono agglutinogeno B e il siero studiato contiene agglutinina alfa. Pertanto, il sangue appartiene al gruppo B (III).
  4. La presenza di agglutinazione con tutti i sieri standard e l'assenza di agglutinazione con tutti gli eritrociti standard indica che entrambe le agglutinine sono presenti negli eritrociti studiati, cioè il sangue appartiene al gruppo AB(IV).

Determinazione del gruppo sanguigno
utilizzando colicloni anti-A e anti-B

Gli zolicloni anti-A e anti-B (anticorpi monoclonali contro gli antigeni A e B) sono progettati per determinare il gruppo sanguigno del sistema ABO umano invece dei sieri isoemoagglutinanti standard. Per ogni tipizzazione del sangue viene utilizzato un lotto di reagenti anti-A e anti-B.

• Progresso della definizione [spettacolo] .

  Una grande goccia di tsolicloni anti-A e anti-B (0,1 ml) viene applicata sulla compressa (piastra) sotto le iscrizioni appropriate: "Anti-A" o "Anti-B". Una piccola goccia del sangue da analizzare viene posta nelle vicinanze (il rapporto del reagente del sangue è 1:10), quindi il reagente e il sangue vengono miscelati e il decorso della reazione viene monitorato facendo oscillare leggermente la piastra o la piastra.

  L'agglutinazione con i colicloni anti-A e anti-B avviene solitamente entro i primi 5-10 secondi. L'osservazione deve essere effettuata per 2,5 minuti, a causa della possibilità di una successiva agglutinazione con eritrociti contenenti varietà deboli di antigeni A o B.

• La valutazione dei risultati della reazione di agglutinazione con colicloni anti-A e anti-B è presentata nella tabella. 18.4, che comprende anche i risultati della determinazione delle agglutinine nel siero dei donatori utilizzando eritrociti standard.

Se si sospetta un'agglutinazione spontanea in persone con gruppo sanguigno AB (IV), viene eseguito uno studio di controllo con una soluzione di cloruro di sodio allo 0,9%. La risposta deve essere negativa.

Gli zolicloni anti-A (rosa) e anti-B (blu) sono disponibili sia in forma nativa che liofilizzata in fiale da 20, 50, 100 e 200 dosi con un solvente attaccato a ciascuna fiala, rispettivamente da 2, 5, 10, 20 ml .

Un ulteriore controllo della correttezza della determinazione del gruppo sanguigno ABO con i reagenti anti-A e anti-B è il reagente monoclonale anti-AB (Gematologo, Mosca). Si consiglia di utilizzare il reagente anti-AB in parallelo sia con sieri immuni policlonali che con reagenti monoclonali. Come risultato della reazione con il reagente anti-AB, si sviluppa l'agglutinazione degli eritrociti dei gruppi A (II), B (III) e AB (IV); gli eritrociti del gruppo 0(I) non hanno agglutinazione.

ERRORI NELLA DETERMINAZIONE DEGLI ACCESSORI DEL GRUPPO

Gli errori nella determinazione dei gruppi sanguigni possono dipendere da tre ragioni:

1. tecnico;
2. inferiorità dei sieri standard e degli eritrociti standard;
3. caratteristiche biologiche del sangue studiato.

Gli errori tecnici includono:

• a) disposizione errata dei sieri sulla piastra;
• b) rapporti quantitativi errati di sieri ed eritrociti;
• c) l'uso di compresse e altri oggetti a contatto con il sangue non sufficientemente puliti. Dovrebbe esserci una pipetta separata per ciascun siero; per il lavaggio delle pipette è necessario utilizzare solo una soluzione di cloruro di sodio allo 0,9%;
• d) registrazione errata del sangue studiato;
• e) mancato rispetto del tempo previsto per la reazione di agglutinazione; in caso di fretta, quando la reazione viene presa in considerazione prima della scadenza dei 5 minuti, l'agglutinazione potrebbe non verificarsi se sono presenti agglutinogeni deboli nel sangue analizzato; se la reazione viene sovraesposta per più di 5 minuti, le gocce dai bordi potrebbero seccarsi, simulando un'agglutinazione, che porterà anche a una conclusione errata;
• f) mancanza di agglutinazione dovuta alla temperatura ambiente elevata (superiore a 25°C). Per evitare questo errore è consigliabile utilizzare sieri appositamente preparati per lavorare in climi caldi; per determinare i gruppi sanguigni su un piatto o un vassoio di plastica, la cui superficie esterna del fondo viene immersa in acqua fredda.
• g) centrifugazione errata: una centrifugazione insufficiente può portare a un risultato falso negativo, mentre una centrifugazione eccessiva può portare a un risultato falso positivo.

Errori dipendenti dall'uso di sieri standard difettosi ed eritrociti standard:

• a) sieri standard deboli con titolo inferiore a 1:32 o scaduti possono causare agglutinazioni tardive e deboli;
• b) l'uso di sieri standard o eritrociti non idonei, preparati non sterili e non sufficientemente conservati, porta alla comparsa di agglutinazioni "batteriche" aspecifiche.

Errori dipendenti dalle caratteristiche biologiche del sangue analizzato:

Errori dipendenti dalle caratteristiche biologiche degli eritrociti studiati:

• a) l'agglutinazione tardiva e debole è dovuta a forme "deboli" di antigeni, eritrociti, più spesso - alla presenza di agglutinogeno debole A 2 nei gruppi A e AB. Allo stesso tempo, nel caso di determinazione del gruppo sanguigno senza esaminare il siero per la presenza di agglutinine (una reazione semplice), si possono osservare errori a causa dei quali il sangue del gruppo A 2 B viene determinato come gruppo B (III) e sangue A 2 - come gruppo 0 (I). Pertanto, per evitare errori, la determinazione del gruppo sanguigno sia dei donatori che dei riceventi deve essere effettuata utilizzando eritrociti standard (reazione doppia o incrociata). Per identificare l'agglutinogeno A 2 si consiglia di ripetere lo studio con altri tipi (serie) di reagenti, utilizzando vetreria da laboratorio diversa, con aumento del tempo di registrazione della reazione.

  I reagenti specifici per chiarire il gruppo sanguigno in presenza di varianti deboli dell'antigene A (A 1, A 2, A 3) mediante il metodo della reazione di agglutinazione diretta sono il reagente anti-A sl e anti-A).

• b) "panagglutinazione" o "autoagglutinazione", cioè la capacità del sangue di dare la stessa agglutinazione aspecifica con tutti i sieri e anche con il proprio. L'intensità di tale reazione diminuisce dopo 5 minuti, mentre aumenta la vera agglutinazione. Si verifica più spesso in pazienti ematologici, oncologici, pazienti ustionati, ecc. Per il controllo, si raccomanda di valutare se l'agglutinazione degli eritrociti testati avviene nel siero standard del gruppo AB (IV) e nella soluzione salina.

  Il gruppo sanguigno in "panagglutinazione" può essere determinato dopo aver lavato gli eritrociti tre volte. Per eliminare l'agglutinazione aspecifica, la compressa viene posta in termostato a +37°C per 5 minuti, dopodiché l'agglutinazione aspecifica scompare, ma rimane quella vera. Si consiglia di ripetere la determinazione utilizzando anticorpi monoclonali, test di Coombs.

  Nel caso in cui il lavaggio degli eritrociti non dia il risultato desiderato, è necessario prelevare nuovamente un campione di sangue in una provetta preriscaldata, posizionare il campione in un contenitore termico per mantenere una temperatura di +37°C e consegnare portarlo al laboratorio per le analisi. La determinazione del gruppo sanguigno deve essere effettuata ad una temperatura di +37 ° C, per la quale vengono utilizzati reagenti preriscaldati, soluzione salina e una compressa.

• c) gli eritrociti del sangue analizzato si ripiegano in "colonne di monete", che all'esame macroscopico possono essere confuse con agglutinati. L'aggiunta di 1-2 gocce di soluzione isotonica di cloruro di sodio, seguita da una leggera oscillazione della compressa, solitamente distrugge i rouleaux.
• d) agglutinazione mista o incompleta: alcuni eritrociti si agglutinano e altri rimangono liberi. Si osserva nei pazienti dei gruppi A(II), B(III) e AB(IV) dopo trapianto di midollo osseo o durante i primi tre mesi dopo la trasfusione di sangue del gruppo 0(I). L'eterogeneità degli eritrociti del sangue periferico è chiaramente verificata nel test del gel DiaMed.

Errori dipendenti dalle caratteristiche biologiche del siero studiato:

• a) la rilevazione di anticorpi di diversa specificità durante i test di routine è il risultato di una precedente sensibilizzazione. È consigliabile determinare la specificità degli anticorpi e selezionare eritrociti tipizzati senza l'antigene verso il quale è stata rilevata l'immunizzazione. Un ricevente immunizzato deve selezionare individualmente il sangue del donatore compatibile;
• b) quando si rileva la formazione di "colonne di monete" di eritrociti standard in presenza del siero in esame, è consigliabile confermare il risultato anomalo utilizzando eritrociti standard del gruppo 0 (I). Per differenziare le "colonne del denaro" dai veri agglutinati, aggiungere 1-2 gocce di soluzione isotonica di cloruro di sodio e agitare la compressa, mentre le "colonne del denaro" vengono distrutte;
• c) l'assenza di anticorpi anti-A o anti-B. Forse nei neonati e nei pazienti con immunità umorale soppressa;
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LETTERATURA [spettacolo] .

1. Selezione immunologica del donatore e del ricevente nelle trasfusioni di sangue, suoi componenti e nel trapianto di midollo osseo / Comp. Shabalin V.N., Serova L.D., Bushmarina T.D. e altri - Leningrado, 1979. - 29 p.
2. Kaleko S. P., Serebryanaya N. B., Ignatovich G. P. et al. Allosensibilizzazione nella terapia con emocomponenti e ottimizzazione della selezione di coppie donatore-ricevente istocompatibili in istituzioni mediche militari / Metodo. raccomandazioni - San Pietroburgo, 1994. - 16 p.
3. Trasfusiologia pratica / Ed. Kozinets G.I., Biryukova L.S., Gorbunova N.A. ecc. - Mosca: Triada-T, 1996. - 435 p.
4. Guida alla trasfusiologia militare / Ed. E. A. Nechaev. - Mosca, 1991. - 280 p.
5. Guida alla medicina trasfusionale / Ed. E.P. Svedentsova. - Kirov, 1999.- 716.
6. Rumyantsev A. G., Agranenko V. A. Trasfusiologia clinica.- M.: GEOTAR MEDICINE, 1997.- 575 p.
7. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Trasfusione di sangue sicura: una guida per i medici.- San Pietroburgo: Pietro, 2000.- 320 p.
8. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Serebryanaya N.B. Sicurezza immunologica e infettiva della terapia con emocomponenti - San Pietroburgo: Nauka, 1998. - 232 p.
9. Schiffman F.J. Fisiopatologia del sangue / Per. dall'inglese - M. - San Pietroburgo: Casa editrice BINOM - Dialetto Nevskij, 2000. - 448 p.
10. Trasfusione di sangue in medicina clinica / Ed. P. L. Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras.- Oxford, 1988.- 1233 p.

Fonte: Diagnostica medica di laboratorio, programmi e algoritmi. Ed. prof. Karpishchenko A.I., San Pietroburgo, Intermedica, 2001

Sebbene il tutto polimorfismo- a seguito di differenze nella sequenza del DNA, alcuni loci polimorfici vengono studiati controllando i cambiamenti nelle proteine ​​codificate da questi alleli, e non studiando le differenze nella sequenza del DNA degli alleli stessi. Qualsiasi individuo è considerato probabilmente eterozigote per gli alleli che definiscono polipeptidi strutturalmente diversi in circa il 20% di tutti i loci; quando si confrontano individui di diversi gruppi etnici, il polimorfismo si riscontra in una percentuale ancora maggiore di proteine.

Quindi, dentro specie umana c'è un sorprendente grado di individualità biochimica nelle caratteristiche degli enzimi e di altri prodotti genetici. Inoltre, poiché i prodotti di molte vie biochimiche interagiscono, è plausibile supporre che ogni individuo, indipendentemente dal suo stato di salute, abbia caratteristiche biochimiche uniche e geneticamente determinate e quindi risponda in modo univoco a fattori ambientali, dietetici e farmacologici.

Questo concetto di chimica individualità, proposto per la prima volta un secolo fa dallo straordinario medico britannico Archibald Harrod, si è rivelato corretto.

Qui ne discuteremo diversi polimorfismi di importanza medica: gruppi sanguigni ABO e fattore Rh (importante nel determinare la compatibilità per le trasfusioni di sangue) e MHC (che svolge un ruolo importante nei trapianti di organi e tessuti). Gli studi sui cambiamenti nelle proteine, piuttosto che nel DNA che le codifica, sono di reale beneficio; dopo tutto, sono i diversi prodotti proteici di diversi alleli polimorfici che sono spesso responsabili di diversi fenotipi e quindi determinano il modo in cui i cambiamenti genetici in un locus influenzano l'interazione organismo-ambiente.

Gruppi sanguigni e loro polimorfismi

I primi esempi di genetica cambiamenti proteici predefiniti sono stati trovati negli eritrociti, i cosiddetti antigeni dei gruppi sanguigni. Sono noti numerosi polimorfismi nei componenti del sangue umano, in particolare negli antigeni ABO e Rh degli eritrociti. In particolare, i sistemi ABO e Rh sono importanti nelle trasfusioni di sangue, nei trapianti di tessuti e organi e nella malattia emolitica del neonato.

Sistema del gruppo sanguigno ABO

umano sangue può appartenere ad uno dei quattro gruppi, a seconda della presenza sulla superficie dei globuli rossi di due antigeni, A e B, e della presenza nel plasma dei due anticorpi corrispondenti, anti-A e anti-B. Esistono quattro fenotipi principali: 0, A, B e AB. Le persone del gruppo A hanno l'antigene A sui globuli rossi, le persone del gruppo B hanno l'antigene B, le persone del gruppo AB hanno sia l'antigene A che l'antigene B e infine le persone del gruppo 0 non hanno l'antigene.

Una delle caratteristiche Gruppi ABO non si applica ad altri sistemi di gruppi sanguigni: si tratta di una relazione reciproca tra la presenza di antigeni sugli eritrociti e gli anticorpi nel siero. Quando sugli eritrociti è assente l'antigene A, il siero contiene anticorpi anti-A; quando l'antigene B è assente, il siero contiene anticorpi anti-B. La ragione della relazione reciproca è sconosciuta, ma si ritiene che la formazione di anticorpi anti-A e anti-B sia una risposta alla presenza di antigeni A e B nell'ambiente (ad esempio, nei batteri).

Sono determinati dal locus sul cromosoma 9. Gli alleli A, B e 0 in questo locus sono un classico esempio di multiallelismo, quando tre alleli, due dei quali (A e B) vengono ereditati come codominanti e il terzo (0) come un tratto recessivo, determinare quattro fenotipi. Gli antigeni A e B sono determinati dall'azione degli alleli A e B sulla glicoproteina superficiale degli eritrociti, chiamata antigene H.

La specificità degli antigeni è determinata dai carboidrati terminali aggiunti al substrato H. L'allele B codifica per una glicosiltransferasi che riconosce preferenzialmente lo zucchero D-galattosio e lo aggiunge all'estremità della catena oligosaccaridica contenuta nell'antigene H, creando così l'antigene B L'allele A codifica una forma leggermente diversa dell'enzima che riconosce e aggiunge N-acetilgalattosamina al substrato invece del D-galattosio, creando così l'antigene A. Il terzo allele, 0, codifica una versione mutante della transferasi che non hanno attività transferasica e non influenzano il substrato H.

Differenze molecolari nel gene identificato glicosiltransferasi, responsabile degli alleli A, B e 0. La sequenza di quattro diversi nucleotidi, che differisce tra gli alleli A e B, porta a cambiamenti di aminoacidi che modificano la specificità della glicosiltransferasi. L'allele 0 ha una delezione di un singolo nucleotide nella regione codificante del gene ABO, causando una mutazione frameshift e inattivando l'attività della transferasi nelle persone del gruppo 0. Ora che le sequenze di DNA sono note, il raggruppamento ABO può essere eseguito direttamente a livello del genotipo, non il fenotipo, soprattutto quando sussistono difficoltà tecniche nell'analisi sierologica, cosa che spesso avviene nella pratica forense o nell'accertamento della paternità.

Il video mostra la tecnica per determinare il gruppo sanguigno con sieri standard:

Significato medico primario Sistemi AVO- nella trasfusione di sangue e nel trapianto di tessuti o organi. Esistono combinazioni compatibili e incompatibili nel sistema dei gruppi sanguigni ABO. Una combinazione compatibile è quando gli eritrociti del donatore non portano l'antigene A o B corrispondente all'anticorpo nel siero del ricevente. Sebbene esistano teoricamente donatori "universali" (Gruppo 0) e riceventi "universali" (Gruppo AB), al paziente viene trasfuso il sangue del proprio gruppo ABO, tranne in caso di emergenza.

Presenza permanente anti-A E anti-B Gli anticorpi spiegano il fallimento di molti tentativi precoci di trasfusione di sangue, poiché questi anticorpi possono causare la rapida uccisione delle cellule ABO-incompatibili. Quando si trapiantano tessuti e organi, l'attecchimento riuscito richiede la compatibilità del donatore e del ricevente nel gruppo ABO e HLA (descritto più avanti).

Sistema del gruppo sanguigno Rh

Secondo clinico sistema di valori Rh paragonabile al sistema ABO per il suo ruolo nello sviluppo della malattia emolitica del neonato e nell'incompatibilità con le trasfusioni di sangue. Il nome Rh deriva dalle scimmie Rhesus utilizzate negli esperimenti che hanno portato alla scoperta del sistema. In parole povere, la popolazione è divisa in individui Rh positivi che esprimono l'antigene Rh D, un polipeptide codificato dal gene (RHD) sul cromosoma 1, negli eritrociti, e individui Rh negativi che non esprimono questo antigene. Il fenotipo Rh negativo è solitamente causato dall'omozigosità per l'allele non funzionale del gene RHD. La frequenza degli individui Rh negativi varia notevolmente tra i gruppi etnici. Ad esempio, il 17% dei bianchi e il 7% degli afroamericani sono Rh negativi, mentre solo lo 0,5% dei giapponesi lo è.

Malattia emolitica del neonato e gruppi sanguigni

Il principale significato clinico del sistema Rh- che gli individui Rh negativi possono facilmente formare anticorpi anti-Rh quando incontrano globuli rossi Rh positivi. Ciò diventa un problema quando una donna incinta Rh negativa porta con sé un feto Rh positivo. Normalmente, durante la gravidanza, piccole quantità di sangue fetale attraversano la barriera placentare ed entrano nella circolazione materna. Se la madre è Rh negativa e il feto è Rh positivo, la madre forma anticorpi che tornano al feto e ne danneggiano i globuli rossi, causando una grave malattia emolitica del neonato.

A Donne incinte Rh negative Il rischio di immunizzazione con eritrociti fetali Rh positivi può essere ridotto al minimo mediante la somministrazione di immunoglobuline anti-Rh alla 28-32a settimana di gestazione e inoltre subito dopo il parto. L'immunoglobulina umana antirhesus rimuove le cellule Rh positive del feto dal flusso sanguigno della madre prima che la sensibilizzino. L'immunoglobulina anti-Rh viene somministrata anche dopo aborti spontanei, aborti o procedure invasive come villocentesi o amniocentesi, nei casi in cui le cellule fetali Rh positive entrano nella circolazione materna. La scoperta del sistema Rh e del suo ruolo nello sviluppo della malattia emolitica del neonato rappresenta un importante contributo della genetica alla medicina.

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La classificazione del sangue umano, a seconda delle sue caratteristiche, è di importanza pratica negli interventi chirurgici che ne richiedono la trasfusione, nel trapianto di organi e tessuti, in medicina legale per accertare il fatto della paternità, della maternità e in caso di perdita precoce di figli età e anche per la pianificazione della gravidanza.

L'appartenenza al gruppo di una persona è determinata dagli antigeni situati sulla superficie dei globuli rossi (eritrociti), è una caratteristica ereditaria e non cambia durante la nostra vita. La comunità medica mondiale riconosce vari sistemi di gruppi sanguigni umani, ma quello generalmente accettato è la determinazione del gruppo sanguigno secondo il sistema ABO.

Classificazione

Secondo questo sistema, il sangue è diviso in sottotipi O, A, B e AB, a seconda della presenza o dell'assenza degli antigeni A e B in esso.

La scoperta e lo studio dell'identificazione dei gruppi hanno rivelato una distribuzione non uniforme degli antigeni A e B tra le diverse razze e nazionalità dell'umanità. Ad esempio, la maggior parte degli europei del nord ha l'antigene A. L'80% degli indiani d'America possiede il primo gruppo e tra loro non sono presenti il ​​terzo e il quarto. Gli indigeni dell'Australia appartengono al primo gruppo. E tra gli abitanti dell'Asia centrale e orientale prevale il terzo.

Ciò consente agli etnografi di studiare l'origine delle razze e dei popoli esistenti, di tracciare il loro insediamento e la loro migrazione attorno al pianeta.

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21.10.2019

Inoltre, grazie alle moderne osservazioni mediche, è stato stabilito uno schema tra l'identificazione di gruppo delle persone e la frequenza di alcune malattie. Questi studi potrebbero portare a importanti scoperte in medicina.

Gruppo 0

Il primo, o AB0, significa che non contiene antigeni A o B. Per molto tempo si è ipotizzato che per questo motivo il sangue di questo tipo potesse essere trasfuso a tutti i pazienti, indipendentemente dal gruppo di appartenenza, pertanto i suoi proprietari erano chiamati donatori universali. Secondo gli antropologi, è il più antico, i suoi segni sono stati trovati anche tra i popoli primitivi impegnati nella caccia e nella raccolta. Il 40-50% della popolazione mondiale è rappresentato da questa sottospecie del gruppo.

Si ritiene che i suoi portatori abbiano un forte sistema immunitario, siano meno suscettibili alle infezioni, ma più spesso di altre persone soffrono di artrite, allergie e ulcera peptica.

Gruppo A

I globuli rossi del secondo gruppo sanguigno secondo il sistema AB0 contengono l'antigene A. Non possono essere utilizzati come materiale donatore per i portatori di quei gruppi in cui questo antigene è assente.

È al secondo posto per prevalenza: 30-40% dell'umanità. I punti di forza della salute sono un buon metabolismo e una sana digestione. Tra i portatori dell'antigene A, vengono spesso diagnosticate anomalie nel funzionamento del fegato, della cistifellea, delle malattie cardiovascolari e del diabete.

Gruppo B

A loro volta, i globuli rossi del terzo gruppo sanguigno secondo il sistema AB0 contengono antigeni B, che si trovano solo nel 10-20% della popolazione mondiale.

Informazioni importanti: Cosa significa 3 (terzo B iii) gruppo sanguigno positivo (negativo) negli uomini e nelle donne

Tra i rappresentanti di questa classe dell'umanità, notano la tendenza a sviluppare stanchezza cronica e la presenza di malattie autoimmuni, pur concordando sul fatto che sono proprietari di un sistema digestivo forte e sano.

Gruppo AB

Nel sangue di questa specie sono presenti sia gli antigeni A che quelli B, quindi i suoi proprietari sono chiamati riceventi universali.

È il più raro, i suoi portatori costituiscono solo il 5% della popolazione. Hanno un forte sistema immunitario, ma allo stesso tempo possono verificarsi varie malattie cardiovascolari.

L'ereditarietà dell'appartenenza al gruppo secondo il sistema ABO avviene secondo le leggi classiche della genetica:

• Se i genitori non hanno gli antigeni A, B, neanche il bambino li avrà.
• Nelle famiglie in cui i genitori (uno o entrambi) hanno sangue AB (IV), non può nascere un bambino con sangue 0.
• Se la madre e il padre hanno il secondo gruppo, il bambino avrà il primo o il secondo.

A seconda della presenza o dell'assenza degli antigeni A e B nei globuli rossi umani, il plasma può contenere anticorpi responsabili della distruzione degli antigeni estranei. Qualsiasi utilizzo del sangue del ricevente o dei suoi componenti dovrà essere effettuato solo tenendo conto della compatibilità di gruppo con il donatore.

Nella pratica clinica moderna, vengono trasfusi sangue, eritrociti e plasma dello stesso tipo del paziente. In alcuni casi di emergenza, i globuli rossi del gruppo 0 possono essere trasfusi a riceventi di altre sottospecie. Gli eritrociti del gruppo A possono essere utilizzati per la trasfusione ai pazienti dei gruppi A e AB, mentre gli eritrociti del donatore B possono essere utilizzati per i riceventi B e AB. Stiamo parlando solo di globuli rossi, l'uso di plasma e sangue intero per pazienti di altri gruppi può causare danni irreparabili alla loro salute.

Schede di compatibilità

Donatore di sangue	destinatario
		UN	IN	AB
	+	—	—	—
UN	—	+	—	—
IN	—	—	+	—
AB	—	—	—	+
Eritrociti del donatore	destinatario
		UN	IN	AB
	+	+	+	+
UN	—	+	—	+
IN	—	—	+	+
AB	—	—	—	+

Per evitare complicazioni durante la trasfusione di sangue anche dello stesso gruppo, viene eseguito un test biologico preliminare: al paziente vengono iniettati 25 ml di materiale del donatore 3 volte con intervalli di 3 minuti, monitorando le condizioni del paziente. Un'ulteriore trasfusione della quantità totale richiesta di materiali viene effettuata solo in assenza di segni di deterioramento della condizione umana.

Come viene definito un gruppo

Per determinare di quale gruppo sanguigno ABO una persona è portatrice, è sufficiente un materiale prelevato dal suo dito. I reagenti tes Anti-A e anti-B vengono applicati su una piastra bianca, mescolati con i campioni da testare e il risultato viene valutato dopo 3-5 minuti.

Se si formano coaguli nel primo campione, ad es. gli eritrociti si uniscono (agglutinazione) e nel secondo caso gli eritrociti non si uniscono, il che significa che una persona ha l'antigene A e nessun antigene B. In questo caso, il donatore ha il primo gruppo (A). Altri gruppi sono definiti in modo simile.

Questo sistema è il principale che determina la compatibilità o incompatibilità del sangue trasfuso. Comprende due importanti antigeni geneticamente determinati: A e B - e due tipi di anticorpi contro di essi, agglutinine a e b. Combinazioni di agglutinogeni e agglutinine definiscono 4 gruppi del sistema ABO. Questo sistema è l'unico in cui gli individui non immuni hanno anticorpi naturali nel plasma contro l'antigene mancante. L'agglutinogeno A nella maggior parte delle persone è ben espresso (ha un grande potere antigenico): con gli anticorpi anti-A (a), dà una pronunciata reazione di agglutinazione degli eritrociti. Circa il 12% degli individui dei gruppi A(11) e AB(IV) ha proprietà antigeniche deboli ed è designato come antigene A2. Pertanto, esiste un gruppo di antigeni A: A1 (forte) e A2, A3, A4 più deboli, ecc. L'esistenza di antigeni A deboli dovrebbe essere ricordata quando si determinano i gruppi sanguigni, poiché gli eritrociti con tali antigeni sono in grado di produrre solo tardi e lieve agglutinazione, che può portare ad errori. Le varietà deboli di antigene B sono molto rare. Gli anticorpi del sistema ABO a (anti-A) eb (anti-B) sono una proprietà normale del plasma sanguigno che non cambia qualitativamente durante la vita di una persona, eeb sono anticorpi freddi completi. Nella maggior parte dei casi, non si riscontrano nei neonati e compaiono durante i primi tre mesi di vita o addirittura un anno. Le agglutinine di gruppo raggiungono il pieno sviluppo all'età di 18 anni e nella vecchiaia il loro titolo (livello) diminuisce, cosa che si osserva anche negli stati di immunodeficienza. Oltre agli antigeni di gruppo (naturali) normalmente esistenti e, in alcuni casi, esistono anticorpi immunitari anti-A e anti-B. La causa più comune di ciò è la gravidanza, in cui la madre e il feto hanno gruppi sanguigni diversi, più spesso se la madre è del gruppo 1(0), il feto è 11(A) o III(B). La tipizzazione del sangue è essenziale per la trasfusione di sangue compatibile. In questo caso è necessario rispettare la regola: i globuli rossi del donatore non devono contenere un antigene corrispondente agli anticorpi del ricevente, cioè A e a, B e B, altrimenti i globuli rossi iniettati verranno distrutti in modo massiccio da gli anticorpi del paziente - emolisi, che può portare alla morte del ricevente. Gli anticorpi del gruppo donatore possono essere ignorati poiché sono diluiti dal plasma del ricevente. Pertanto, il sangue O(I) che non contiene agglutinogeni può essere trasfuso a persone con qualsiasi gruppo sanguigno. Gli individui con gruppo sanguigno 0(1) sono considerati “donatori universali”. Il sangue del gruppo A(P) può essere trasfuso ai destinatari del gruppo A(P) e del gruppo AB(IV) che non hanno agglutinine plasmatiche. Le persone del gruppo sanguigno B(III) possono essere trasfuse a persone del gruppo B(III) e AB(IV).

La determinazione dei gruppi sanguigni del sistema ABO viene effettuata con i seguenti metodi.

I. Determinazione del gruppo sanguigno mediante sieri isoemoagglutinanti standard. Con questo metodo, viene stabilita la presenza o l'assenza di agglutinogeni nel sangue e, sulla base di ciò, si conclude sull'appartenenza al gruppo del sangue in esame.

2. Determinazione del gruppo sanguigno in modo incrociato, cioè utilizzando contemporaneamente sieri isoemoagglutinanti standard ed eritrociti standard. Con questo metodo, così come con il primo, viene determinata la presenza o l'assenza di agglutinogeni e, inoltre, utilizzando eritrociti standard, viene determinata la presenza o l'assenza di agglutinine di gruppo.

3. Determinazione del gruppo sanguigno mediante anticorpi monoclonali (COLICLONI).

ERRORI NELLA DETERMINAZIONE DEI GRUPPI SANGUIGNI

Errori tecnici. La violazione delle regole di cui sopra per determinare i gruppi sanguigni può portare a una valutazione errata dei risultati della reazione. Le deviazioni dalle regole possono essere:

Utilizzo di sieri o eritrociti standard di bassa qualità (data di scadenza, contaminazione con essi, essiccazione dei sieri);

Mescolanza di campioni del sangue studiato;

Disposizione errata dei sieri standard o dei fociti nei rack;

Ordine errato di applicazione dei reagenti standard sulla piastra;

Rapporto errato tra siero e globuli rossi (non 10:1);

Ricerca a una temperatura inferiore a 15 ° C (si verifica un'agglutinazione a freddo) o superiore a 25 ° C (l'agglutinazione rallenta);

Mancato rispetto del tempo necessario per la reazione (5 min);

Non effettuare l'aggiunta di soluzione salina seguita dall'oscillazione della piastra;

Non utilizzare una reazione di controllo con siero del gruppo ABo(IV);

Utilizzo di pipette, bastoncini, piastre contaminati o bagnati.

In tutti i casi di risultato indistinto o dubbio, è necessario ripetere la determinazione del gruppo sanguigno con il metodo incrociato utilizzando sieri standard di altre serie.

Errori associati alle caratteristiche biologiche del sangue studiato.

Definizione errata del gruppo A 2 e A 2 B. Gli eritrociti con un antigene A debole con antisiero formano piccoli agglutinati che appaiono lentamente. La reazione può essere considerata negativa, cioè il gruppo A 2 viene erroneamente registrato come O (1) e A 2 B - come V (Sh). Il rischio di un tale errore è particolarmente elevato con la presenza simultanea di errori tecnici (il rapporto tra siero ed eritrociti è 10:1, la temperatura è superiore a 25 ° C, i risultati vengono registrati prima di 5 minuti).

Errori associati alla presenza di agglutinabilità non specifica degli eritrociti studiati. Questo fenomeno si osserva in pazienti con tumori maligni, leucemia, sepsi, ustioni, cirrosi epatica, anemia emolitica autoimmune ed è dovuto alla disproteinemia. Rileva la presenza di controllo di agglutinazione non specifico con siero del gruppo ABo (IV). In questi casi è necessario rideterminare l'appartenenza al gruppo mediante il metodo incrociato. Nelle gocce in cui si osserva agglutinazione si può aggiungere soluzione salina riscaldata a 37°. Se necessario, è possibile lavare gli eritrociti studiati con soluzione salina calda (37 °) e rideterminare il gruppo sanguigno.

Errori legati alla presenza di extraagglutinine. Nel siero del sangue delle persone dei gruppi A2 (P) e A2B (IV), in circa l'1% dei casi vengono rilevati anticorpi contro l'antigene A1 - a1. Ciò complica la determinazione del gruppo sanguigno mediante il metodo incrociato, poiché il siero di tali individui agglutina gli eritrociti standard del gruppo A (P), cioè si manifesta come il siero del gruppo 0 (1).

In alcune malattie si osserva una diminuzione dell'agglutinabilità degli eritrociti, soprattutto del gruppo A (P).

Negli stati di immunodeficienza negli anziani si osserva una diminuzione del livello delle agglutinine di gruppo.

In tutti i casi in cui si ottiene un risultato dubbio, la determinazione del gruppo sanguigno deve essere ripetuta con il metodo incrociato utilizzando sieri ad attività più elevata.

18. Antigeni del sistema Rhesus. Gruppi del sistema Rhesus. significato clinico. Metodi per la determinazione degli antigeni Rh e possibili errori.

Gli antigeni Rh sono i secondi più importanti nella pratica trasfusionale dopo i gruppi sanguigni ABO. Durante il periodo di introduzione attiva delle trasfusioni di sangue in clinica, il numero di complicanze post-trasfusionali dopo ripetute trasfusioni di sangue compatibile con gli antigeni ABO è aumentato in modo significativo. Il sistema Rh comprende sei antigeni, per la designazione dei quali vengono utilizzate due nomenclature in parallelo: Wiener (Rh 0 , rh", rh", Hr 0 , hr", hr"); Fisher e Reis (D, C, E, d, c, e).

Rh 0 - D, rh "- C, rh" - E, Hr 0 - d, hr "- c, hr" - e.

Poiché l'antigene Rho(D) è il più attivo in questo sistema, viene chiamato fattore Rh. È a seconda della presenza o dell'assenza di questo fattore che le persone si dividono in Rh-positivo (Rh+) e Rh-negativo (Rh-). Questa divisione è accettata solo in relazione ai destinatari. Gli antigeni rh "(C) e rh" (E) sono meno attivi di Rho (D), ma possono essere prodotti anticorpi anche in persone che non contengono antigeni C ed E negli eritrociti. Pertanto, i requisiti per gli eritrociti dei donatori Rh negativi sono più severi. Gli eritrociti non dovrebbero contenere non solo l'antigene D, ma anche C ed E. Gli antigeni Hro (d), hr "(c), hr" (e) sono caratterizzati da una bassa attività, sebbene gli anticorpi hr "(c) possano causare isoimmunologia conflitti Nell'1-3% degli individui Rh positivi negli eritrociti, ha una versione debole dell'antigene D-D, che determina la presenza di piccole e discutibili agglutinazioni quando si determina il fattore Rh. In questi casi, il sangue Rh della ricevente o della donna incinta viene indicato come Rh negativo (Rh-) e il sangue Rh del donatore come Rh positivo (Rh+). Non è consentita la trasfusione di sangue con angen D u a soggetti Rh negativi. Gli antigeni Rh si formano a 8-10 settimane di embriogenesi e la loro antigenicità può addirittura superare l'attività degli antigeni negli adulti. Il sistema Rh, a differenza del sistema ABO, non possiede anticorpi naturali. Gli anticorpi anti-Rhesus si verificano solo dopo l'immunizzazione di un organismo Rh negativo a seguito di una trasfusione di sangue Rh positivo o di una gravidanza con un feto Rh positivo. Nel corpo degli individui sensibilizzati, gli anticorpi contro gli antigeni Rh persistono per diversi anni, talvolta per tutta la vita. Nella maggior parte dei casi, il titolo anticorpale anti-Rhesus diminuisce gradualmente, ma aumenta nuovamente bruscamente quando il sangue Rh positivo entra nuovamente nel corpo. Gli anticorpi Rh differiscono nella specificità (anti-D, an-III C, ecc.) e nelle proprietà sierologiche (completi e incompleti). Gli anticorpi totali provocano l'agglutinazione dei globuli rossi in un mezzo salino a temperatura ambiente. Per la manifestazione dell'agglutinazione sotto l'azione di anticorpi incompleti sono necessarie condizioni speciali: temperatura elevata, mezzo colloidale (gelatina, proteine ​​del siero di latte). Gli anticorpi completi (IgM) vengono sintetizzati all'inizio della risposta immunitaria e presto scompaiono dal sangue. Gli anticorpi incompleti (IgG, IgA) compaiono più tardi, vengono sintetizzati a lungo e sono la causa dello sviluppo della malattia emolitica nei neonati, poiché attraversano la placenta e danneggiano le cellule fetali.

Determinazione dell'affiliazione Rh del sangue

Il metodo per determinare il fattore Rh dipende dalla forma degli anticorpi Rh nel siero standard e dal metodo di produzione. Al siero anti-Rhesus è allegata un'istruzione di accompagnamento con la descrizione del metodo a cui è destinata questa serie di siero dispensato.

In ogni studio, per verificare la specificità e l'attività del siero anti-Rhesus, è necessario impostare un controllo. Per il controllo vengono utilizzati eritrociti standard Rh-positivi del gruppo 0 (1) o dello stesso gruppo del sangue in esame, mentre gli eritrociti standard Rh-negativi appartengono necessariamente allo stesso gruppo del sangue in esame.

Quando si determina l'Rh appartenente a due serie di sieri standard nei casi in cui vengono utilizzati con metodi diversi, il risultato viene considerato vero se coincide in entrambe le serie di studi dopo aver controllato i campioni di controllo confermando la specificità e l'attività di ciascuna serie di sieri siero anti-Rhesus, cioè in assenza di agglutinazione con eritrociti standard Rh negativi dello stesso gruppo e presenza di agglutinazione con eritrociti standard Rh positivi dello stesso gruppo o gruppo 0(1) e in campioni di controllo senza siero anti-Rhesus (reagente). Se durante la determinazione dell'appartenenza Rh si osserva una reazione debole o dubbia, il sangue di questa persona deve essere riesaminato con la stessa e altre serie di siero anti-Rh ed è auspicabile includere siero contenente anticorpi completi. Se contemporaneamente tutte le serie di sieri contenenti anticorpi incompleti danno anche una reazione debole o dubbia, e con anticorpi completi la reazione è negativa, ciò significa che gli eritrociti contengono una versione debole dell'antigene Rh, il cosiddetto fattore D u . In questi casi, l'affiliazione Rh del sangue di un paziente o di una donna incinta viene indicata come Rh negativo (Rh-) e l'affiliazione Rh del sangue del donatore come Rh positivo (Rh+), impedendo così la trasfusione. del suo sangue a riceventi Rh negativi.

La determinazione del fattore Rh può essere effettuata anche con i seguenti metodi.

Determinazione del fattore Rh Rh 0 (D) mediante reazione di conglutinazione utilizzando gelatina (in una provetta riscaldata a 46-48 ° C).

Determinazione del fattore Rh Rho(D) mediante reazione di conglutinazione nel mezzo siero su un piano riscaldato.

Determinazione del fattore Rh Rh 0 (D) mediante reazione di agglutinazione in mezzo salino in piccole provette. Il test di agglutinazione con soluzione salina è adatto solo per l'uso con siero contenente anticorpi Rh completi.

Determinazione del fattore Rh Rh 0 (D) mediante anticorpi monoclonali.

Determinazione del fattore Rh Rho(D) mediante test di Coombs indiretto.

19 Anemia. Classificazione e breve descrizione. Eziologia e patogenesi dell'anemia. L'anemia (dal greco anemia - assenza di sangue) è un ampio gruppo di malattie caratterizzate da una diminuzione della quantità di emoglobina o emoglobina e globuli rossi per unità di volume di sangue. Le anemie sono diverse nell'eziologia, nei meccanismi di sviluppo, nel quadro clinico ed ematologico, quindi esistono molte classificazioni diverse, ma non sono sufficientemente perfette. L. I. Idelson ha proposto una classificazione operativa dell'anemia per i medici: 1) anemia postemorragica acuta; 2) anemia da carenza di ferro; 3) anemia associata ad alterata sintesi o utilizzazione delle porfirine (sideroblastiche); 4) anemia associata a una violazione della sintesi di DNA, RNA (megaloblastico); 5) anemia emolitica; 6) anemia associata all'inibizione della proliferazione delle cellule del midollo osseo (ipoplastiche, aplastiche); 7) anemia associata alla sostituzione del midollo osseo emopoietico con un processo tumorale (metaplastico).

L'anemia può essere sia una malattia indipendente che un sintomo concomitante o una complicazione di alcune malattie interne, malattie infettive e oncologiche. Esistono anemie multifattoriali, cioè di genesi mista, ad esempio: anemia emolitica con carenza di ferro, anemia aplastica con componente emolitica, ecc.

Dipende da:

1) i valori​​dell'indice di colore distinguono l'anemia:

Normocromico (indice di colore 0,9-1,1);

Ipocromico (indice di colore inferiore a 0,85);

Ipercromico (indice di colore maggiore di 1,15);

2) il diametro medio degli eritrociti:

Normocitico (diametro medio degli eritrociti 7,2-7,5 micron)

Microcitico (il diametro medio dei globuli rossi è inferiore a 6,5 ​​micron),

Macrocitico (il diametro medio degli eritrociti è superiore a 8,0 micron),

Megalocitico (il diametro medio degli eritrociti è superiore a 12 micron);

3) il valore del volume medio degli eritrociti in femtolitri (fl, 1 fl è pari a 1 micron 3):

Normocitico (volume medio degli eritrociti 87±5 fl);

Microcitico (il volume medio degli eritrociti è inferiore a 80 fl);

Macrocitico (il volume medio degli eritrociti è superiore a 95 fl);

4) il livello dei reticolociti nel sangue periferico.

Rigenerativo (numero di reticolociti 0,5-5%);

Iperrigenerativo (il numero di reticolociti è superiore al 5%);

Ipo- e rigenerante (il numero di reticolociti è ridotto o sono assenti, nonostante il grave decorso dell'anemia).

Il livello dei reticolociti è un indicatore della funzione rigenerativa del midollo osseo in relazione all'eritropoiesi.

Le anemie normocromiche comprendono quelle acute postemorragiche (nei primi giorni dopo la perdita di sangue), ipo- e aplastiche, emolitiche non sferocitiche, emolitiche autoimmuni, metaplastiche (con leucemia, mieloma multiplo, ecc.), nonché l'anemia che si sviluppa con malattie endocrine disturbi (ipofunzione surrenale), malattie renali, infezioni croniche.

Le anemie ipocromiche comprendono carenza di ferro, sideroblastica, alcune mielotossiche, emolitiche (talassemia).

Carenza di vitamina B12 (folica), alcune anemie emolitiche sono ipercromiche (microsferocitosi ereditaria, se i microsferociti predominano tra gli eritrociti nello striscio). Talvolta l'anemia da carenza di vitamina B12 è normocromica.

I normocitici comprendono l'anemia emolitica acuta postemorragica, aplastica, autoimmune, ecc.

I microcitici comprendono la carenza di ferro, l'anemia sideroblastica, l'anemia da carenza macrocitica di vitamina B12 (folica), ecc.

Le rigenerative comprendono l'anemia postemorragica; all'anemia iperrigenerativa - emolitica, in particolare la condizione dopo una crisi emolitica; all'anemia ipoplastica e rigenerante: ipoplastica e aplastica.

Il midollo osseo reagisce allo sviluppo di carenza di ferro, anemia emolitica con irritazione, iperplasia del germe rosso. Con l'anemia ipoplastica si assiste ad un progressivo declino dell'eritropoiesi fino al suo completo esaurimento.

20. Diagnosi di laboratorio dell'anemia ferro-satura e ferro-insatura. Anemia da carenza di ferro. Tipi di carenza di ferro. Esami di laboratorio che riflettono la carenza di ferro nel corpo. Immagine del sangue periferico e del midollo osseo nell'IDA. Diagnosi di laboratorio dell'anemia sideroblastica. Metabolismo e ruolo del ferro nel corpo

Il ferro è di grande importanza per il corpo, fa parte dell'emoglobina, della mioglobina, degli enzimi respiratori. È distribuito tra i principali fondi.

fondo dell'emoglobina. Il ferro dell'emoglobina costituisce il 60-65% del contenuto totale di ferro nel corpo.

Fondo di riserva. Questo è il ferro della ferritina e dell'emosiderina, che si depositano nel fegato, nella milza, nel midollo osseo e nei muscoli. Rappresenta il 30-40% del livello di ferro nel corpo. La ferritina è un complesso idrosolubile di ferro ferrico e proteina apoferritina contenente il 20% di ferro. È una frazione labile del fondo di riserva di ferro. All'occorrenza è facilmente utilizzabile per le esigenze dell'eritropoiesi. L'emosiderina è una proteina insolubile in acqua, simile nella composizione alla ferritina, ma contiene più ferro - 25-30%. È una frazione stabile e saldamente fissata delle riserve di ferro nel corpo.

Il fondo di trasporto è rappresentato dal ferro associato alla proteina di trasporto transferrina. Costituisce l'1% del contenuto di ferro nel corpo.

Il fondo tissutale è rappresentato da enzimi contenenti ferro (citocromi, perossidasi, ecc.), Mioglobina. Costituisce l'1% del contenuto di ferro nel corpo.

Il contenuto totale di ferro nel corpo degli adulti è di 4-5 g ed entra nel corpo con la dieta. Contenuto in prodotti di origine animale e vegetale (carne, soprattutto manzo, fegato, uova, legumi, mele, albicocche secche, ecc.). Il ferro viene assorbito molto meglio dai prodotti animali rispetto ai prodotti vegetali, poiché si trova in essi sotto forma di eme. Quindi, il 20-25% viene assorbito dalla carne, l'11% dal pesce, il 3-5% del ferro in essi contenuto dai prodotti vegetali. L'acido ascorbico, gli acidi organici (citrico, malico, ecc.) contribuiscono all'assorbimento del ferro, inibiscono l'assorbimento del tannino e un alto contenuto di grassi nella dieta. L'assorbimento del ferro dal cibo è limitato. Durante il giorno vengono assorbiti 2-2,5 mg di ferro, per un breve periodo dopo un grave sanguinamento possono essere assorbiti fino a 3 mg di ferro. La maggior parte del ferro viene assorbita nel duodeno e nella parte iniziale del digiuno. Una piccola quantità di ferro può essere assorbita in tutte le parti dell'intestino tenue.

L'assorbimento del ferro avviene in due fasi: 1) la mucosa intestinale cattura il ferro dalla dieta; 2) il ferro dalla mucosa intestinale passa nel sangue, viene caricato sulla transferrina e consegnato ai luoghi di utilizzo e al deposito. La transferrina trasporta anche il ferro dai suoi accumuli e dalle cellule del sistema mononucleare fagocitico, in cui avviene la distruzione degli eritrociti, al midollo osseo, dove viene in parte utilizzato per la sintesi dell'emoglobina e in parte depositato come deposito di ferro, nonché ad altri siti di stoccaggio del ferro. Di solito, 1/3 della transferrina si lega al ferro. Si chiama ferro legato alla transferrina o ferro sierico. Normalmente, il contenuto di ferro nel siero negli uomini e nelle donne è rispettivamente di 13-30 e 12-25 µmol/l. La porzione di transferrina che non è legata al ferro è chiamata transferrina libera o capacità di legare il ferro sierica latente e insatura. La quantità massima di ferro che la transferrina può legare alla sua saturazione viene definita capacità sierica totale di legare il ferro (TIBC) (normalmente 30-85 µmol/l). La differenza tra TIBC e ferro sierico riflette la capacità latente di legare il ferro e il rapporto tra ferro sierico e TIBC, espresso in percentuale, riflette la percentuale di saturazione della transferrina con il ferro (normale 16-50%). Per giudicare la quantità di riserve di ferro e l’organismo effettuare:

Indagine del livello di ferritina nel siero mediante metodi radioimmuni;

Prova di desferal. Il Desferal (desferoxamina) è un agente chelante che, dopo essere stato introdotto nell'organismo, si lega selettivamente alle riserve di ferro, cioè la ferritina, e lo espelle con le urine. Al paziente vengono iniettati per via intramuscolare 500 mg di Desferal una volta, viene raccolta l'urina giornaliera e in essa viene determinato il contenuto di ferro. Dopo la somministrazione di desferal, normalmente vengono escreti nelle urine da 0,8 a 1,2 mg di ferro, mentre nei pazienti con anemia sideropenica o in presenza di carenza di ferro latente, la quantità di ferro escreta nelle urine diminuisce drasticamente;

Conteggio del numero di sideroblasti nel midollo osseo punteggiato e di siderociti nel sangue periferico. I sideroblasti sono normoblasti, cioè cellule nucleate della fila rossa, nel cui citoplasma si rilevano granuli blu di riserve di ferro - ferritina. Normalmente, il 20-40% dei normoblasti sono sideroblasti. I siderociti sono eritrociti in cui si trovano granuli di ferritina. Normalmente nel sangue periferico: fino all'1% dei siderociti. I granuli di ferritina nei sideroblasti e nei siderociti vengono rilevati mediante colorazione speciale con blu di Prussia.

L'organismo è caratterizzato da una perdita fisiologica di ferro con l'urina, le feci, la bile, le cellule esfoliate della mucosa intestinale, con il sudore, quando si tagliano capelli e unghie. Le donne perdono ferro con le mestruazioni.

Lo sviluppo dell'anemia da carenza di ferro è preceduto da una carenza di ferro latente (latente). I pazienti presentano disturbi e segni clinici caratteristici della piemia da carenza di ferro, ma meno pronunciati (debolezza, moderato pallore della pelle e mucose visibili, mal di testa, palpitazioni, spesso alterazione del gusto e dell'olfatto, pelle secca, unghie fragili, ecc. ). L'esame non ha ancora rivelato cambiamenti nel contenuto di emoglobina, eritrociti e altri indicatori del sangue periferico. Ma vengono rilevati disturbi nel metabolismo del ferro: il ferro sierico diminuisce, le capacità totali e latenti di legare il ferro del siero aumentano, la percentuale di saturazione della transferrina diminuisce e il livello delle riserve di ferro diminuisce. Questa è sideropenia senza anemia. Una carenza latente di ferro può svilupparsi a qualsiasi età, soprattutto nelle donne, negli adolescenti e nei bambini. Se la carenza di ferro latente non viene compensata, ma si approfondisce, l'anemia da carenza di ferro si riscalda.