Principi generali della diagnosi di laboratorio delle malattie metaboliche ereditarie

A livello clinico, la diagnosi di NBO può essere solo sospettata e l'ulteriore diagnosi dipende interamente dall'uso di una gamma insolitamente ampia di metodi biochimici e genetici molecolari. Nella maggior parte dei casi, solo un'interpretazione combinata di tutti i risultati ottenuti consente di determinare con precisione la forma della malattia.

La strategia per una diagnosi affidabile dell'NBO comprende diverse fasi: 1. Identificazione di un collegamento difettoso nella via metabolica attraverso l'analisi (quantitativa, semiquantitativa o qualitativa) dei relativi metaboliti; 2. Identificazione della disfunzione proteica valutandone la quantità e/o l'attività; 3. Scoprire la natura della mutazione, ad es. caratterizzazione dell'allele mutante a livello genico.

Tale strategia viene utilizzata non solo per risolvere problemi scientifici legati allo studio del normale metabolismo, ai meccanismi molecolari della patogenesi dell'NBO e all'identificazione delle correlazioni geno-fenotipiche, ma è necessaria, prima di tutto, per la diagnosi pratica dell'NBO. La verifica della diagnosi a livello della proteina e del gene mutante è necessaria sia per la diagnosi prenatale, la consulenza genetica medica delle famiglie gravate, sia in alcuni casi per la nomina di una terapia adeguata. Ad esempio, nel deficit di diidropteridina reduttasi, il fenotipo clinico e i livelli di fenilalanina saranno indistinguibili dalla forma classica di PKU, ma gli approcci al trattamento di queste malattie sono fondamentalmente diversi. L'importanza della differenziazione del locus NBO per la consulenza genetica medica può essere dimostrata utilizzando come esempio la mucopolisaccaridosi di tipo II (malattia di Hunter). Secondo lo spettro dei glicosaminoglicani escreti è impossibile distinguere tra loro le mucopolisaccaridosi di tipo II, I e VII, ma di queste malattie solo la malattia di Hunter viene ereditata secondo il tipo recessivo legato all'X, il che è di fondamentale importanza per la prognosi della prole in una famiglia gravata. La priorità dei metodi di genetica molecolare è incondizionata nello stabilire il portatore eterozigote, così come nella diagnosi prenatale di malattie in cui l'enzima mutante non è espresso nelle cellule dei villi coriali.

Fase di studio dei metaboliti

La valutazione dei metaboliti nei fluidi biologici è un passo necessario nella diagnosi di aminoacidopatia, aciduria organica, mucopolisaccaridosi, malattie mitocondriali e perossisomiali, difetti nel metabolismo delle purine e delle pirimidine, ecc. I metodi di analisi cromatografici svolgono un ruolo importante nella diagnosi di NBO. Ciò è dovuto al fatto che il moderno arsenale di tecnologie cromatografiche è estremamente ampio e consente una separazione efficiente e informativa di complesse miscele multicomponenti, compreso il materiale biologico. Per lo screening selettivo degli NBO, viene utilizzata con successo la cromatografia su strato sottile, che consente di ottenere informazioni a livello qualitativo. Questo metodo cromatografico è applicabile per la separazione di aminoacidi, purine e pirimidine, carboidrati, oligosaccaridi. Per l'analisi quantitativa dei marcatori dei metaboliti NBO, vengono utilizzati con successo metodi cromatografici come la gascromatografia e la cromatografia liquida ad alte prestazioni, nonché la cromatografia-spettrometria di massa (rispettivamente GC, HPLC e CMS). GC e HPLC sono metodi universali per separare miscele complesse di composti, si distinguono per l'elevata sensibilità e riproducibilità. In entrambi i casi la separazione viene effettuata a seguito della diversa interazione dei componenti della miscela con le fasi stazionaria e mobile della colonna cromatografica. Per GC la fase mobile è il gas di trasporto, per HPLC è il liquido (eluente). L'uscita di ciascun composto viene registrata dal rilevatore del dispositivo, il cui segnale viene convertito in picchi sul cromatogramma. Ogni picco è caratterizzato da tempo di ritenzione e area. Va notato che la GC viene eseguita, di regola, a un regime di temperatura elevata, pertanto l'instabilità termica dei composti costituisce un limite al suo utilizzo. Da allora non esistono tali restrizioni per l'HPLC in questo caso l'analisi viene effettuata in condizioni blande. CMS è un sistema GC o HPLC combinato con un rivelatore selettivo di massa, che consente di ottenere informazioni non solo quantitative ma anche qualitative, ad es. inoltre viene determinata la struttura dei composti nella miscela analizzata.

Una delle direzioni promettenti nello sviluppo di programmi diagnostici NBO è l'uso di metodi che permettano di quantificare molti metaboliti che sono marcatori di diversi gruppi NBO. Tali metodi includono la spettrometria di massa tandem (TMS). TMS consente di caratterizzare la struttura, il peso molecolare e quantificare 3000 composti contemporaneamente. Non richiede una preparazione a lungo termine dei campioni per l'analisi (come, ad esempio, per GC) e il tempo di studio richiede pochi secondi.

Stadio di ricerca di proteine mutanti

Lo studio delle proteine mutanti può essere effettuato utilizzando vari metodi:

Determinazione dell'attività enzimatica utilizzando substrati naturali;
Determinazione dell'attività enzimatica utilizzando substrati artificiali;
Caricamento di fibroblasti coltivati con substrati accumulati;
Misurazione della concentrazione proteica mediante metodi immunochimici.

Il materiale per misurare l'attività degli enzimi nell'NBO sono principalmente i leucociti del sangue periferico: in quasi tutte le malattie da accumulo lisosomiale, l'aciduria metilmalonica e alcune glicogenosi. Il plasma sanguigno o il siero vengono utilizzati per diagnosticare le gangliosidosi GM2 e il deficit di biotinidasi. In alcuni casi oggetto di studio sono i tessuti muscolari o epatici: enzimi della catena respiratoria mitocondriale, glicogenosi. Anche la coltura dei fibroblasti cutanei è ampiamente utilizzata per la diagnosi.

Stadio di ricerca di geni mutanti

Lo sviluppo di metodi di biologia molecolare ha rappresentato una vera rivoluzione nel campo della biochimica clinica. Lo sviluppo di protocolli standard per gli studi molecolari e l'automazione dei metodi utilizzati costituiscono oggi un insieme completo di approcci diagnostici e, insieme ai metodi biochimici, stanno diventando una procedura di routine nei laboratori clinici. Il rapido sviluppo della ricerca nel campo della decifrazione del genoma umano e della determinazione della sequenza del DNA dei geni consente ora di diagnosticare la diagnostica del DNA di varie malattie ereditarie. Nell'ultimo decennio sono stati utilizzati metodi di diagnostica del DNA e di analisi della struttura dei geni normali e dei loro analoghi mutanti nelle malattie metaboliche ereditarie.

Per la diagnostica del DNA delle malattie ereditarie vengono utilizzati due approcci principali: la diagnostica del DNA diretta e indiretta. La diagnostica diretta del DNA è uno studio della struttura primaria di un gene danneggiato e l'isolamento delle mutazioni che portano a una malattia. Per rilevare il danno molecolare nei geni che causano malattie ereditarie, viene utilizzato l'arsenale standard di metodi di biologia molecolare. A seconda delle caratteristiche e dei tipi di mutazioni, della loro frequenza di insorgenza in varie malattie ereditarie, l'uno o l'altro metodo è preferibile.

Per la diagnosi di NBO, nei casi in cui il difetto biochimico è noto con precisione, determinato facilmente e in modo affidabile utilizzando metodi biochimici, è improbabile che i metodi del DNA occupino un posto prioritario. In questi casi, l’uso dell’analisi del DNA è più un approccio di ricerca che diagnostico. Tuttavia, dopo una diagnosi accurata, i metodi di analisi del DNA saranno utili per la successiva diagnosi prenatale, l'identificazione dei portatori eterozigoti nella famiglia e la prognosi della malattia negli omozigoti, nonché per la selezione dei pazienti allo scopo di condurre una terapia casuale in il futuro (sostituzione enzimatica e terapia genica). Inoltre, nei casi in cui il difetto biochimico non è esattamente noto, la diagnosi biochimica è difficile, non sufficientemente affidabile o richiede metodi di ricerca invasivi, i metodi diagnostici del DNA sono gli unici e indispensabili per una diagnosi accurata.

In generale, la tattica per diagnosticare l'NBO in ciascun caso specifico dovrebbe essere pianificata insieme a un biochimico e un genetista. Le condizioni necessarie per una diagnosi rapida e efficace sono la comprensione dell'eziologia, dei meccanismi della patogenesi della malattia, la conoscenza di specifici marcatori biochimici.

Genetica Intervista ad un esperto

Ekaterina Zakharova: “Per evitare gravi conseguenze invalidanti, è necessaria una diagnosi precoce”

2014-04-17

"Siamo tutti sulle spalle dei nostri antenati" - questo detto si applica non solo alle tradizioni familiari, alla mentalità, all'educazione, ma anche alla salute. I bambini portano con sé l’informazione genetica delle generazioni precedenti. Sfortunatamente, a volte questa "catena" fallisce. Cosa sta causando questo incidente? Come e quali malattie vengono ereditate ed è possibile prevederne e prevenirne lo sviluppo in anticipo? Su questo e molto altro, la nostra conversazione con il capo del laboratorio di malattie metaboliche ereditarie del Centro di ricerca genetica medica, il presidente del consiglio della Società tutta russa delle malattie rare (orfane) (OMS), dottore in medicina Scienze Ekaterina Yurievna Zakharova.

— Raccontaci, cosa fa il tuo laboratorio?
— Il nostro laboratorio è una suddivisione strutturale del Centro di ricerca genetica medica. Siamo impegnati nella diagnosi del metabolismo. Questo è un gruppo abbastanza ampio di patologie, comprese 500-600 malattie. Questi disturbi compaiono come risultato di mutazioni genetiche che causano un cambiamento significativo nel metabolismo, pertanto per la loro diagnosi vengono utilizzati test biochimici insieme a metodi di genetica molecolare: vari studi sui metaboliti, attività enzimatica.

- Se ho capito bene, la maggior parte delle malattie ereditarie sono incurabili?
- Per curare qualsiasi malattia, è necessario eliminarne completamente la causa. Con una malattia ereditaria, questa è una mutazione. L’unico metodo che può eliminarlo è la terapia genica. Tuttavia, nonostante le grandi speranze riposte nella terapia genica, questo metodo non ha ancora prodotto effetti significativi. Ad oggi esistono solo pochi protocolli ufficialmente approvati per . La particolarità delle malattie metaboliche ereditarie sta nel fatto che alcune di queste malattie possono essere curate con successo, e per molte di esse esistono già metodi efficaci di trattamento e correzione, compresa la dietoterapia e l'alimentazione medica speciale, che compensano le carenze mancanti. enzima nel corpo umano.

In generale, sono stati sviluppati approcci terapeutici per 20-30 malattie metaboliche ereditarie, tra cui galattosemia, leucinosi (malattia dello sciroppo d'acero), tirosinemia, aciduria organica e altre. La terapia enzimatica sostitutiva viene utilizzata nella malattia di Gaucher, nelle mucopolisaccaridosi, nella malattia di Pompe, nella malattia di Fabry e sono attualmente in fase di sviluppo regimi di trattamento per una serie di altre malattie di questo gruppo.

“Nonostante le grandi speranze riposte nella terapia genica, questo metodo non ha ancora prodotto effetti significativi”.

- Per esempio?
“L’esempio classico è la fenilchetonuria, dove al corpo manca un certo enzima in grado di scomporre e metabolizzare le molecole complesse nella cellula. In questo caso, il trattamento consiste nell'adesione permanente ad una dieta specifica che limiti il numero di prodotti contenenti proteine animali. La cosa più importante è iniziare la terapia dietetica in tempo. Se il bambino inizia a ricevere miscele specializzate nei primi giorni dopo la nascita, in futuro praticamente non differirà dai suoi coetanei sani. Se ciò non accade, svilupperà inevitabilmente gravi lesioni del sistema nervoso centrale, disturbi dello sviluppo mentale fino alla demenza.

Per evitare gravi conseguenze invalidanti, è necessario diagnosticare la malattia il più precocemente possibile. Il metodo più promettente per la diagnosi precoce delle malattie ereditarie è lo screening neonatale. Inizialmente, nel nostro Paese, nel programma di screening neonatale venivano incluse 2 malattie: e l'ipotiroidismo congenito. Dal 2006 ad esse si sono aggiunte altre 3 malattie ereditarie: la galattosemia e la sindrome adrenogenitale.

Perché hai scelto queste particolari malattie? Per quanto ne so, negli Stati Uniti, ad esempio, lo screening neonatale comprende test per 50 malattie ereditarie.
- Ci sono diverse ragioni per questo. Innanzitutto è necessario comprendere che lo screening non è solo un test per la definizione di una particolare malattia. Questo è un intero sistema di attività, che comprende, oltre ai test, la consulenza familiare, la fornitura di cure a un bambino malato, il suo monitoraggio costante e così via. Supponiamo che la malattia venga rilevata. Ma come trattare un bambino se i medicinali o la nutrizione specialistica necessari per lui non sono registrati in Russia e possono essere acquistati solo all'estero, se non ci sono specialisti con esperienza nella gestione di tali pazienti? Si tratta di questioni molto complesse che necessitano di essere affrontate in modo complesso e graduale.

Inizialmente, nel nostro Paese, nel programma di screening neonatale venivano incluse 2 malattie: la fenilchetonuria e l'ipotiroidismo congenito. Dal 2006 ad esse si sono aggiunte altre 3 malattie ereditarie: galattosemia, fibrosi cistica e sindrome adrenogenitale.

Un altro grosso problema è quello finanziario. Oggi il programma di screening neonatale è finanziato dal bilancio federale, ma dal 2015 si prevede di trasferirlo alle regioni. Per gli esperti, questa situazione è motivo di grande preoccupazione. Lo screening neonatale dovrebbe coprire più del 95% dei neonati, essere continuo e sotto costante controllo statale. Solo in questo caso sarà efficace. E cosa succederebbe se qualche regione decidesse improvvisamente di non avere soldi per lo screening? Allora l’intero sistema crollerebbe semplicemente e questo non dovrebbe assolutamente essere permesso. E in gioco c’è la salute dei bambini. Gli esperti ritengono che sarebbe più logico mantenere il programma statale federale.

E, naturalmente, lo screening per le malattie ereditarie dovrebbe essere ampliato, seguendo la migliore pratica mondiale. I primi passi in questa direzione sono già stati fatti. Progetti pilota per uno screening neonatale ampliato per 30 malattie ereditarie sono stati avviati in due regioni russe: Mosca e la regione di Sverdlovsk.

“Prima di tutto bisogna capire che lo screening non è solo un test per identificare una particolare malattia. È un intero sistema di eventi"

- È possibile scoprire in anticipo se una persona ha una predisposizione a una particolare malattia genetica?
- Esiste un metodo del genere: il sequenziamento genomico. Con esso, il genoma di ogni singola persona. Finora questo è un piacere piuttosto costoso: il suo costo è di circa 10.000 euro. Si ritiene che nel prossimo futuro il prezzo di questa procedura diminuirà di dieci volte. Sembrerebbe che abbia fatto l'analisi e tutto è noto. Qui però entriamo nel campo dell’etica medica e delle relative decisioni. Posso dire una cosa: la conoscenza scientifica moderna non è sufficiente per dare una risposta inequivocabile su come determinati cambiamenti possano influenzare la qualità e la durata della vita umana, se le mutazioni genetiche esistenti porteranno allo sviluppo della malattia in questa particolare persona.

Qui sorge un'altra domanda: quanto è necessaria tale conoscenza per una persona? Ad esempio, esiste una malattia ereditaria così grave: la corea di Huntington, che si basa su disturbi neurologici che si manifestano con movimenti involontari e non regolati, tic nervosi, contrazioni. Quindi si sviluppano cambiamenti intellettuali e una persona in un periodo di tempo abbastanza breve si trasforma in un invalido grave. Questo di solito accade dopo 30 anni. Non è ancora possibile curare questa malattia, ma è del tutto possibile determinare mediante test la probabilità che una determinata persona sviluppi la malattia se uno dei suoi parenti (madre o padre) è malato. Tuttavia, alcune persone, consapevoli del potenziale rischio, rifiutano di farsi diagnosticare. Questo è esattamente ciò che hanno fatto le due sorelle, fondatrici della Huntington Chorea Foundation. Avendo svolto un enorme lavoro per raccogliere informazioni, creare una banca di biomateriali e finanziare la ricerca scientifica per trovare il gene responsabile della malattia, loro stessi non hanno osato sottoporsi al test. È stata una loro scelta consapevole. A volte una persona semplicemente non vuole sapere cosa lo attende in futuro se non è in grado di cambiare nulla.

- Una delle questioni più controverse discusse dai genetisti da un punto di vista etico è la modellazione degli embrioni, in cui i genitori potranno scegliere l'aspetto, il carattere e le capacità del loro bambino non ancora nato. Quanto sono realistiche queste previsioni futuristiche?
- Con l'ulteriore sviluppo della scienza, sembrano abbastanza reali, ma se valga la pena farlo è una domanda molto difficile. In Cina, ad esempio, non esistono divieti che regolano i test genetici. Come sapete, fino a poco tempo fa alle famiglie cinesi era consentito avere un solo figlio. Naturalmente molti genitori hanno optato per i ragazzi. Oggi questi bambini sono cresciuti e la società si trova ad affrontare un grave problema legato a una grave sproporzione di genere: ci sono sette maschi per una femmina. Di conseguenza molti giovani semplicemente non riescono a trovare un compagno.

In Cina non esistono divieti che regolano i test genetici. Come sapete, fino a poco tempo fa alle famiglie cinesi era consentito avere un solo figlio.

Oggi i paesi dell’UE hanno adottato una serie di documenti che regolano i test genetici. Spiegano chiaramente cosa si può e cosa non si può fare. In particolare, è impossibile selezionare gli embrioni in base ad una determinata base (colore degli occhi, sesso, ecc.). Inoltre, nei paesi europei è vietato sottoporre i bambini al test per una malattia considerata a priori incurabile. Se la famiglia ha già un figlio malato, è vietato testare il secondo bambino mentre è piccolo. Ciò viene fatto per ragioni morali ed etiche: è probabile che i genitori si concentrino sui malati o, al contrario, diano tutte le loro forze a un bambino sano e i diritti del secondo vengano violati.

“Nei paesi europei è vietato sottoporre i bambini al test per una malattia considerata a priori incurabile”

Recentemente, su uno dei canali televisivi britannici, il programma ha discusso della selezione dei donatori per il trapianto di midollo osseo. In un trapianto allogenico (cioè non correlato), il midollo osseo del donatore donato al paziente dovrebbe essere, per quanto possibile, geneticamente compatibile con il proprio. Sfortunatamente, non è sempre possibile trovare un tale donatore. E poi i genitori si rivolgono ai genetisti in modo che le madri “piantano” un feto adatto come donatore a questo bambino malato. Come procedere in un caso del genere? Da un lato, i genitori vogliono salvare la vita dei loro figli. Allo stesso tempo, il bambino che nasce non soffrirà: gli prenderanno il sangue cordonale e basta. D'altra parte, affinché possa nascere in questo modo, il processo di selezione dovrà distruggere diversi embrioni fecondati. Come relazionarsi alla nascita di un bambino che dovrebbe diventare donatore, cosa succederà alla sua psiche quando lo scoprirà? Ritornando alla tua domanda. La genetica è ancora una scienza molto giovane e oggi non sappiamo in cosa possa trasformarsi questa o quell'intrusione in questa sfera sottile.

Ognuno di noi è portatore di un certo numero di diverse mutazioni "dannose" - da 20 a 50 secondo varie fonti.

- In altre parole, qualsiasi intrusione nei processi naturali è irta di conseguenze imprevedibili?
Ci sono molti esempi nella storia dell'umanità in cui tali esperimenti si sono conclusi con un completo fallimento. Ma se in Germania gli esperimenti eugenetici cessarono subito dopo la fine della guerra, in Svezia e in altri paesi scandinavi le corrispondenti modifiche legislative furono apportate solo a metà degli anni '70. Si credeva che la sterilizzazione forzata avrebbe ridotto il numero di persone con determinate caratteristiche nella popolazione. Ma non ne è venuto fuori nulla.

- Perché?
- La base di questa attività era una falsa premessa sul ruolo determinante di un fattore ereditario. In realtà, questo è tutt’altro che vero. Molte malattie sono poligeniche (multifattoriali), cioè molti geni sono responsabili del loro sviluppo e anche l'ambiente esterno ha la sua influenza. Inoltre, le mutazioni ricompaiono e nella popolazione, secondo le leggi della genetica, la frequenza dei portatori di mutazioni è abbastanza costante. Ognuno di noi è portatore di un certo numero di diverse mutazioni "dannose" - da 20 a 50 secondo varie fonti. E, probabilmente, dal punto di vista dell'evoluzione, questo è necessario a qualcosa.

Così, negli anni '30 del secolo scorso, fu avanzata l'ipotesi che una malattia ereditaria così grave come quando si impara a curarla può essere un segno molto utile: l'aumento del sanguinamento nei giovani sarà compensato dall'assenza di trombosi in persone anziane. È anche noto che i portatori di un'altra malattia ereditaria - l'anemia falciforme - sono resistenti alla malaria. Pertanto, il genotipo non esiste di per sé e alcuni tratti, valutati come "dannosi" in un ambiente, possono essere molto utili in un altro.

La natura prova costantemente diverse combinazioni di geni. Va sempre ricordato che quando una persona inizia a restringere artificialmente la diversità genetica disponibile, ciò può essere irto di gravi conseguenze negative in futuro.

“Si credeva che la sterilizzazione forzata avrebbe ridotto il numero di persone con determinate caratteristiche nella popolazione. Ma non ne è venuto fuori nulla."

Vale lo stesso per i matrimoni tra parenti? Inoltre, come è noto, alcune malattie genetiche sono caratteristiche di nazionalità e gruppi etnici specifici. Il gruppo di parentela più famoso a questo riguardo sono gli ebrei ashkenaziti...
- Le persone vicine hanno maggiori probabilità di portare gli stessi alleli e, di conseguenza, nei matrimoni tra parenti, il rischio che i loro figli possano sviluppare malattie ereditarie è piuttosto alto. Per quanto riguarda i gruppi etnici, le diverse popolazioni hanno le proprie caratteristiche genetiche. Ad esempio, tra i Chuvash, l'osteopetrosi è molto più comune che in altre popolazioni, tra i russi - fenilchetonuria e fibrosi cistica, e tra i finlandesi - una forma speciale di epilessia.

Tali caratteristiche possono presentarsi in popoli che hanno sperimentato un forte calo numerico e poi una crescita. Questo è esattamente quello che è successo agli ebrei ashkenaziti, tra i quali è alta la frequenza dei portatori di alcune malattie genetiche. Una delle più comuni è la malattia di Tay-Sachs. Nella popolazione generale si verifica in una proporzione di 1 su 100.000 neonati e tra gli ebrei ashkenaziti 1 su 3000. Oggi in Israele vengono effettuati test obbligatori per la portabilità di questa malattia. E questo approccio si giustifica: nell'ultimo anno nel paese è nato un solo bambino affetto dalla malattia di Tay-Sachs. Ed è stata una decisione consapevole dei genitori, presa per motivi religiosi. Conoscendo le caratteristiche di una particolare popolazione, i genetisti possono sviluppare programmi di screening neonatale di massa, test dei portatori e così via.

Chi visita più spesso il tuo centro genetico medico?
- Innanzitutto, i genitori con figli sospettati di avere l'una o l'altra malattia ereditaria. Effettuiamo anche la diagnostica prenatale per individuare la patologia in una fase iniziale dello sviluppo intrauterino. Veniamo avvicinati anche da persone che hanno parenti con malattie ereditarie per escluderli da se stessi.

- I test sono costosi. Lo Stato sostiene in qualche modo il centro in questo senso?
— Oggi non tutti possono pagare per uno studio del genere. Sfortunatamente, i test genetici complessi non sono attualmente inclusi in nessuno dei sistemi di garanzia statale. Alcune malattie vengono testate nell’ambito della ricerca scientifica, ma questa è una goccia nell’oceano. Questi problemi devono essere affrontati, ovviamente. Dopotutto, quanto prima viene fatta una diagnosi, tanto più è probabile che aiuti una persona, migliori la qualità della sua vita e talvolta semplicemente la salvi.

- La diagnosi è seguita dal trattamento e non è disponibile per tutte le persone affette da malattie rare (o “orfane”, come vengono anche chiamate). Tutto si basa ancora una volta sulle finanze.
— Ahimè. A volte una persona va dai medici per anni per ricevere la diagnosi. Negli ultimi anni è apparso anche il termine “odissea diagnostica”. E ora, finalmente, la diagnosi è chiarita. E qui iniziano nuove prove: esiste un trattamento per questa malattia, ma il paziente stesso non può pagarlo: è troppo costoso e anche liberarsi non è immediatamente e non sempre possibile.

“Purtroppo oggi i test genetici complessi non rientrano in nessuno dei sistemi di garanzia statale”

— Recentemente si è parlato del tema delle malattie rare. Dal 2014 era previsto il trasferimento dei finanziamenti per il programma 7 Nosologie alle regioni, ma sotto la pressione dell’opinione pubblica questa decisione è stata rinviata di un anno. Inoltre, esiste anche un elenco speciale, che comprende 24 malattie rare potenzialmente letali...
- SÌ. Lo Stato, in un modo o nell’altro, sta cercando di trovare il modo di garantire l’accesso alle terapie ai pazienti affetti da malattie rare. Oggi è completamente affidato alle Regioni, che non riescono a far fronte a questo onere.

Per affrontare in modo efficace la questione della fornitura di farmaci e di nutrizione terapeutica ai pazienti affetti da malattie rare, è necessario mantenere un certo equilibrio tra il bilancio federale e quello regionale. Trovarlo è difficile, ma possibile. Ad esempio, secondo gli esperti, tenendo conto delle diverse nosologie, la cosiddetta “lista delle 24” comprende molte più malattie, circa 58. La metà di queste vengono trattate con la dietoterapia. Rispetto ai farmaci, le formule specializzate sono relativamente economiche e le regioni possono facilmente sopportare questo onere finanziario. Inoltre, è spesso necessario acquistare alimenti medici in caso di emergenza per garantire che i giovani pazienti recentemente identificati a seguito dello screening neonatale vengano forniti senza fallo, e talvolta è più facile per la regione farlo. Per quanto riguarda le altre malattie rare, è più logico includerle nel programma "7 nosologie", perché inizialmente questo programma è stato creato proprio per il trattamento delle malattie rare.

Ad esempio, secondo gli esperti, tenendo conto delle diverse nosologie, la cosiddetta "lista delle 24" comprende circa 58 malattie.

- E qui le organizzazioni pubbliche dei pazienti dovrebbero avere voce in capitolo.
“Certamente, i pazienti affetti da malattie rare dovrebbero avere accesso alle cure. E il nostro compito come organizzazione pubblica è aiutarli a ottenere questo diritto alla vita. Attualmente stiamo assistendo a tendenze positive nel processo decisionale: l’opinione pubblica viene ascoltata e viene prestata maggiore attenzione ai problemi delle persone affette da malattie rare. È stato istituito un Consiglio per la protezione dei diritti dei pazienti presso il Ministero della Sanità della Federazione Russa e consigli simili sono stati organizzati presso i Ministeri regionali della Sanità. Includono anche le organizzazioni pubbliche di pazienti. Grazie a questo lavoro congiunto sistematico, alcuni risultati sono stati raggiunti: sono state apportate modifiche ad alcune leggi e regolamenti, in alcuni casi i pazienti hanno iniziato a ricevere la terapia necessaria.

“Oggi il finanziamento della lista delle 24 malattie rare è completamente affidato alle regioni, e queste non possono far fronte a questo onere”

Tuttavia, dobbiamo andare avanti e contribuire al miglioramento degli approcci alla fornitura di farmaci per i pazienti affetti da malattie rare. È molto importante sviluppare criteri trasparenti e comprensibili per la formazione degli elenchi di medicinali nei programmi di finanziamento pubblico. Gli esperti sono sicuri che gli elenchi non dovrebbero essere statici, ma dovrebbero essere costantemente aggiornati, tenendo conto anche dell'emergere di nuove malattie e di nuove opzioni terapeutiche per malattie rare precedentemente considerate incurabili, come la sclerosi tuberosa, la malattia di Pompe, la criopirina associata malattie. A volte nel paese ci sono solo poche decine di questi pazienti e non ricevono cure perché queste malattie e questi farmaci non sono inclusi in nessun elenco.

La scienza rende possibile curare un numero sempre maggiore di malattie che prima erano incurabili. Medici e pazienti non perdono la speranza che, con il sostegno dello Stato, tutti i metodi terapeutici efficaci e innovativi saranno a disposizione dei pazienti russi, indipendentemente dalla diagnosi.

Foto dall'archivio personale di E. Zakharova

Intervistata da Irina Tretyakova

Capo di
"Oncogenetica"

Zhusina
Julia Gennadievna

Laureato presso la Facoltà di Pediatria dell'Università medica statale di Voronezh. N.N. Burdenko nel 2014.

2015 - tirocinio in terapia presso il Dipartimento di Terapia della Facoltà dell'Università medica statale di Voronezh. N.N. Burdenko.

2015 - corso di certificazione nella specialità "Ematologia" sulla base del Centro di ricerca ematologica di Mosca.

2015-2016 – terapista del VGKBSMP n. 1.

2016 - è stato approvato il tema della tesi di laurea in scienze mediche "studio del decorso clinico della malattia e della prognosi in pazienti con malattia polmonare ostruttiva cronica con sindrome anemica". Coautore di più di 10 pubblicazioni. Partecipante a conferenze scientifiche e pratiche su genetica e oncologia.

2017 - corso di formazione avanzata sul tema: “interpretazione dei risultati di studi genetici in pazienti con malattie ereditarie”.

Dal 2017 residenza nella specialità "Genetica" sulla base di RMANPE.

Capo di
"Genetica"

Kanivets
Ilya Vyacheslavovich

Kanivets Ilya Vyacheslavovich, genetista, candidato alle scienze mediche, capo del dipartimento di genetica del centro genetico medico Genomed. Assistente del Dipartimento di Genetica Medica dell'Accademia Medica Russa di Formazione Professionale Continua.

Si è laureato presso la Facoltà di Medicina dell'Università Statale di Medicina e Odontoiatria di Mosca nel 2009 e nel 2011 ha completato la specializzazione nella specialità "Genetica" presso il Dipartimento di Genetica Medica della stessa università. Nel 2017 ha difeso la sua tesi per il grado di candidato in scienze mediche sul tema: Diagnosi molecolare delle variazioni del numero di copie dei segmenti di DNA (CNV) in bambini con malformazioni congenite, anomalie fenotipiche e/o ritardo mentale utilizzando microarray di oligonucleotidi ad alta densità SNP »

Dal 2011 al 2017 ha lavorato come genetista presso l'Ospedale Clinico Pediatrico. NF Filatov, dipartimento di consulenza scientifica dell'istituto scientifico di bilancio dello Stato federale "Centro di ricerca genetica medica". Dal 2014 ad oggi è stato responsabile del dipartimento di genetica dell'MHC Genomed.

Principali attività: diagnosi e gestione di pazienti con malattie ereditarie e malformazioni congenite, epilessia, consulenza genetica medica di famiglie in cui è nato un bambino con una patologia o malformazioni ereditarie, diagnostica prenatale. Durante la consultazione viene effettuata un'analisi dei dati clinici e della genealogia per determinare l'ipotesi clinica e la quantità necessaria di test genetici. Sulla base dei risultati dell'indagine, i dati vengono interpretati e le informazioni ricevute vengono spiegate ai consulenti.

È uno dei fondatori del progetto Scuola di Genetica. Effettua regolarmente presentazioni a convegni. Tiene conferenze per genetisti, neurologi e ostetrici-ginecologi, nonché per genitori di pazienti con malattie ereditarie. È autore e coautore di oltre 20 articoli e recensioni su riviste russe e straniere.

L'area di interesse professionale è l'introduzione dei moderni studi sull'intero genoma nella pratica clinica, l'interpretazione dei loro risultati.

Orario di ricevimento: mercoledì, venerdì 16-19

Capo di
"Neurologia"

Sharkov
Artem Alekseevich

Sharkov Artyom Alekseevich– neurologo, epilettologo

Nel 2012 ha studiato nell'ambito del programma internazionale “Medicina orientale” presso l'Università di Daegu Haanu in Corea del Sud.

Dal 2012 - partecipazione all'organizzazione del database e dell'algoritmo per l'interpretazione dei test genetici xGenCloud (https://www.xgencloud.com/, Project Manager - Igor Ugarov)

Nel 2013 si è laureato presso la Facoltà di Pediatria dell'Università Nazionale Russa di Ricerca Medica intitolata a N.I. Pirogov.

Dal 2013 al 2015 ha studiato in neurologia presso l'istituto scientifico di bilancio dello Stato federale "Centro scientifico di neurologia".

Dal 2015 lavora come neurologo, ricercatore presso l'Istituto clinico di ricerca scientifica di pediatria intitolato all'accademico Yu.E. Veltishchev GBOU VPO RNIMU loro. N.I. Pirogov. Lavora anche come neurologo e medico nel laboratorio di monitoraggio video-EEG nelle cliniche del Centro di Epilettologia e Neurologia intitolato ad A.I. AA Ghazaryan” e “Centro Epilessia”.

Nel 2015 ha studiato in Italia presso la scuola “2° Corso Residenziale Internazionale sulle Epilessie Farmacoresistenti, ILAE, 2015”.

Nel 2015 formazione avanzata – “Genetica clinica e molecolare per medici praticanti”, RCCH, RUSNANO.

Nel 2016 formazione avanzata - "Fondamenti di genetica molecolare" sotto la guida di bioinformatica, Ph.D. Konovalova F.A.

Dal 2016 - capo della direzione neurologica del laboratorio "Genomed".

Nel 2016 ha studiato in Italia presso la scuola “Corso avanzato internazionale San Servolo: Brain Exploration and Epilepsy Surger, ILAE, 2016”.

Nel 2016 formazione avanzata – “Tecnologie genetiche innovative per i medici”, “Istituto di Medicina di Laboratorio”.

Nel 2017 - la scuola "NGS in Medical Genetics 2017", Centro scientifico statale di Mosca

Attualmente sta conducendo ricerche scientifiche nel campo della genetica dell'epilessia sotto la guida del Professore MD. Belousova E.D. e professore, d.m.s. Dadali E.L.

È stato approvato il tema della tesi di laurea in Scienze mediche "Caratteristiche cliniche e genetiche delle varianti monogeniche delle encefalopatie epilettiche precoci".

Le principali aree di attività sono la diagnosi e il trattamento dell'epilessia nei bambini e negli adulti. Specializzazione ristretta: trattamento chirurgico dell'epilessia, genetica dell'epilessia. Neurogenetica.

Pubblicazioni scientifiche

Sharkov A., Sharkova I., Golovteev A., Ugarov I. "Ottimizzazione della diagnostica differenziale e interpretazione dei risultati dei test genetici da parte del sistema esperto XGenCloud in alcune forme di epilessia". Genetica medica, n. 4, 2015, pag. 41.
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Sharkov A.A., Vorobyov A.N., Troitsky A.A., Savkina I.S., Dorofeeva M.Yu., Melikyan A.G., Golovteev A.L. "Chirurgia per l'epilessia nelle lesioni cerebrali multifocali nei bambini con sclerosi tuberosa". Abstract del XIV Congresso Russo "TECNOLOGIE INNOVATIVE IN PEDIATRIA E CHIRURGIA PEDIATRICA". Bollettino russo di perinatologia e pediatria, 4, 2015. - p.226-227.
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Dadali E.L., Belousova E.D., Sharkov A.A. "Approcci genetici molecolari alla diagnosi dell'epilessia monogenica idiopatica e sintomatica". Abstract del XIV Congresso Russo “TECNOLOGIE INNOVATIVE IN PEDIATRIA E CHIRURGIA PEDIATRICA”. Bollettino russo di perinatologia e pediatria, 4, 2015. - p.221.
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Sharkov A.A., Dadali E.L., Sharkova I.V. "Una rara variante dell'encefalopatia epilettica precoce di tipo 2 causata da mutazioni nel gene CDKL5 in un paziente maschio." Convegno “L'epilettologia nel sistema delle neuroscienze”. Raccolta materiali del convegno: / A cura di: prof. Neznanova N.G., prof. Mikhailova V.A. San Pietroburgo: 2015. - p. 210-212.
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Dadali E.L., Sharkov A.A., Kanivets I.V., Gundorova P., Fominykh V.V., Sharkova I.V. Troitsky A.A., Golovteev A.L., Polyakov A.V. Una nuova variante allelica dell'epilessia mioclonica di tipo 3 causata da mutazioni nel gene KCTD7 // Genetica medica.-2015.- v.14.-№9.- p.44-47
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Dadali E.L., Sharkova I.V., Sharkov A.A., Akimova I.A. "Caratteristiche cliniche e genetiche e metodi moderni di diagnosi dell'epilessia ereditaria". Raccolta di materiali "Tecnologie biologiche molecolari nella pratica medica" / Ed. membro corrispondente RANEN A.B. Maslennikova.- Problema. 24.- Novosibirsk: Academizdat, 2016.- 262: p. 52-63
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Belousova E.D., Dorofeeva M.Yu., Sharkov A.A. Epilessia nella sclerosi tuberosa. In "Malattie cerebrali, aspetti medici e sociali" a cura di Gusev E.I., Gekht A.B., Mosca; 2016; pp.391-399
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Dadali E.L., Sharkov A.A., Sharkova I.V., Kanivets I.V., Konovalov F.A., Akimova I.A. Malattie e sindromi ereditarie accompagnate da convulsioni febbrili: caratteristiche cliniche e genetiche e metodi diagnostici. //Giornale russo di neurologia infantile.- T. 11.- N. 2, p. 33-41.doi: 10.17650/ 2073-8803-2016-11-2-33-41
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Sharkov A.A., Konovalov F.A., Sharkova I.V., Belousova E.D., Dadali E.L. Approcci genetici molecolari alla diagnosi delle encefalopatie epilettiche. Raccolta di abstract "VI CONGRESSO BALTICO SULLA NEUROLOGIA INFANTILE" / A cura della Professoressa Guzeva V.I. San Pietroburgo, 2016, pag. 391
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Emisferotomia nell'epilessia resistente ai farmaci in bambini con danno cerebrale bilaterale Zubkova N.S., Altunina G.E., Zemlyansky M.Yu., Troitsky A.A., Sharkov A.A., Golovteev A.L. Raccolta di abstract "VI CONGRESSO BALTICO SULLA NEUROLOGIA INFANTILE" / A cura della Professoressa Guzeva V.I. San Pietroburgo, 2016, pag. 157.
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Articolo: Genetica e trattamento differenziato delle encefalopatie epilettiche precoci. AA. Sharkov*, I.V. Sharkova, E.D. Belousova, E.L. Dadali. Giornale di Neurologia e Psichiatria, 9, 2016; Problema. 2doi:10.17116/jnevro20161169267-73
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Golovteev A.L., Sharkov A.A., Troitsky A.A., Altunina G.E., Zemlyansky M.Yu., Kopachev D.N., Dorofeeva M.Yu. "Trattamento chirurgico dell'epilessia nella sclerosi tuberosa" a cura di Dorofeeva M.Yu., Mosca; 2017; p.274
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Nuove classificazioni internazionali dell'epilessia e delle crisi epilettiche della Lega Internazionale contro l'epilessia. Giornale di Neurologia e Psichiatria. C.C. Korsakov. 2017. V. 117. N. 7. S. 99-106

Capo di
"Diagnosi prenatale"

Kiev
Yulia Kirillovna

Nel 2011 si è laureata presso l'Università statale di medicina e odontoiatria di Mosca. A.I. Evdokimova con una laurea in Medicina Generale Ha studiato in specializzazione presso il Dipartimento di Genetica Medica della stessa università con una laurea in Genetica

Nel 2015 ha completato uno stage in Ostetricia e Ginecologia presso l'Istituto medico per l'educazione medica post-laurea dell'Istituto educativo di bilancio dello Stato federale di istruzione professionale superiore "MGUPP"

Dal 2013 svolge attività consultiva presso il Centro per la pianificazione e la riproduzione familiare, DZM

Dal 2017 è responsabile del dipartimento di “Diagnostica Prenatale” del laboratorio Genomed

Effettua regolarmente presentazioni a convegni e seminari. Tiene conferenze per medici di varie specialità nel campo della riproduzione e della diagnostica prenatale

Svolge consulenza medico-genetica alle donne in gravidanza sulla diagnostica prenatale al fine di prevenire la nascita di bambini con malformazioni congenite, nonché di famiglie con patologie presumibilmente ereditarie o congenite. Conduce l'interpretazione dei risultati ottenuti dalla diagnostica del DNA.

SPECIALISTI

Latypov
Artur Shamilevich

Latypov Artur Shamilevich – medico genetista della categoria di qualifica più alta.

Dopo essersi laureato presso la facoltà di medicina dell'Istituto medico statale di Kazan nel 1976, ha lavorato per molti anni prima come medico presso l'ufficio di genetica medica, poi come capo del centro di genetica medica dell'Ospedale repubblicano del Tatarstan, specialista capo del Ministero della Salute della Repubblica del Tatarstan, docente presso i dipartimenti dell'Università di Medicina di Kazan.

Autore di oltre 20 articoli scientifici sui problemi della genetica riproduttiva e biochimica, partecipante a numerosi congressi e conferenze nazionali e internazionali sui problemi della genetica medica. Ha introdotto metodi di screening di massa di donne incinte e neonati per malattie ereditarie nel lavoro pratico del centro, ha eseguito migliaia di procedure invasive per sospette malattie ereditarie del feto in diverse fasi della gravidanza.

Dal 2012 lavora presso il Dipartimento di Genetica Medica con un corso di diagnostica prenatale presso l'Accademia Russa di Formazione Post-laurea.

Interessi di ricerca – malattie metaboliche del bambino, diagnostica prenatale.

Orario ricevimento: mercoledì 12-15, sabato 10-14

I medici sono ammessi su appuntamento.

Genetista

Gabelko
Denis Igorevich

Nel 2009 si è laureato presso la facoltà di medicina della KSMU da cui prende il nome. S. V. Kurashova (specialità "Medicina").

Stage presso l'Accademia medica di formazione post-laurea di San Pietroburgo dell'Agenzia federale per la salute e lo sviluppo sociale (specialità "Genetica").

Stage in Terapia. Riqualificazione primaria nella specialità "Diagnostica ad ultrasuoni". Dal 2016 è dipendente del Dipartimento del Dipartimento di Fondamenti Fondamentali di Medicina Clinica dell'Istituto di Medicina e Biologia Fondamentale.

Area di interessi professionali: diagnosi prenatale, utilizzo dei moderni metodi diagnostici e di screening per identificare la patologia genetica del feto. Determinazione del rischio di recidiva di malattie ereditarie in famiglia.

Partecipante a conferenze scientifiche e pratiche su genetica, ostetricia e ginecologia.

Esperienza lavorativa 5 anni.

Consultazione su appuntamento

I medici sono ammessi su appuntamento.

Genetista

Grishina
Cristina Aleksandrovna

Nel 2015 si è laureata in Medicina Generale presso l'Università statale di medicina e odontoiatria di Mosca. Nello stesso anno, è entrata nella specialità 30.08.30 "Genetica" presso l'istituto scientifico di bilancio dello Stato federale "Centro di ricerca genetica medica".
È stata assunta nel Laboratorio di genetica molecolare delle malattie ereditarie complesse (responsabile - Dottore in scienze biologiche Karpukhin A.V.) nel marzo 2015 come assistente di laboratorio di ricerca. Da settembre 2015 è stata trasferita all'incarico di ricercatrice. È autore e coautore di oltre 10 articoli e abstract su genetica clinica, oncogenetica e oncologia molecolare su riviste russe e straniere. Partecipante regolare a conferenze sulla genetica medica.

Area di interessi scientifici e pratici: consulenza genetica medica di pazienti con patologia ereditaria sindromica e multifattoriale.

La consultazione con un genetista ti consente di rispondere alle seguenti domande:

I sintomi del bambino sono segni di una malattia ereditaria? quali ricerche sono necessarie per identificare la causa determinare una previsione accurata raccomandazioni per condurre e valutare i risultati della diagnosi prenatale tutto quello che devi sapere sulla pianificazione familiare Consulenza sulla pianificazione della fecondazione in vitro consultazioni sul campo e online

ha preso parte alla scuola scientifico-pratica “Tecnologie genetiche innovative per i medici: applicazione nella pratica clinica”, al convegno della Società Europea di Genetica Umana (ESHG) e ad altri convegni dedicati alla genetica umana.

Conduce consulenza genetica medica per famiglie con patologie presumibilmente ereditarie o congenite, comprese malattie monogeniche e anomalie cromosomiche, determina le indicazioni per studi genetici di laboratorio, interpreta i risultati della diagnostica del DNA. Fornisce consulenza alle donne incinte sulla diagnostica prenatale al fine di prevenire la nascita di bambini con malformazioni congenite.

Genetista, ostetrico-ginecologo, candidato alle scienze mediche

Kudryavtseva
Elena Vladimirovna

Genetista, ostetrico-ginecologo, candidato alle scienze mediche.

Specialista nel campo della consulenza riproduttiva e della patologia ereditaria.

Laureato presso l'Accademia medica statale degli Urali nel 2005.

Specializzazione in Ostetricia e Ginecologia

Stage nella specialità "Genetica"

Riqualificazione professionale nella specialità "Diagnostica ad ultrasuoni"

Attività:

Infertilità e aborto spontaneo

Si è laureata all'Accademia medica statale di Nizhny Novgorod, Facoltà di Medicina (specialità "Medicina"). Ha conseguito il tirocinio clinico presso la FBGNU "MGNTS" con una laurea in "Genetica". Nel 2014 ha completato un tirocinio presso la clinica della maternità e dell'infanzia (IRCCS materno infantile Burlo Garofolo, Trieste, Italia).

Dal 2016 lavora come medico consulente presso Genomed LLC.

Partecipa regolarmente a conferenze scientifiche e pratiche sulla genetica.

Principali attività: Consulenza sulla diagnostica clinica e di laboratorio delle malattie genetiche e interpretazione dei risultati. Gestione dei pazienti e dei loro familiari con sospetta patologia ereditaria. Consulenza durante la pianificazione di una gravidanza, nonché durante la gravidanza sulla diagnostica prenatale al fine di prevenire la nascita di bambini con patologie congenite.

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Centro di ricerca genetica medica dell'Accademia russa delle scienze mediche. Il sito web del Laboratorio delle Malattie Metaboliche Ereditarie contiene informazioni sulla diagnosi di laboratorio delle malattie ereditarie rare, sulle loro manifestazioni cliniche e sulle opzioni terapeutiche. Sul sito: spettrometria di massa tandem / malattie rilevate dalla TMS / indicazioni per l'analisi TMS / malattie da accumulo lisosomiale / regole per il prelievo di sangue / listino prezzi / invio del campione per l'analisi / come raggiungerci / link utili

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Feedback e domande

Anna Mignenko, 01/09/2015

Ciao. Siamo di Stavropol. Il bambino ha 3,5 anni. Abbiamo consultato un genetista dell'SKKKDC in merito al ritardo psicomotorio con perdita di abilità precedentemente acquisite di origine sconosciuta e atassia di origine sconosciuta.
Sono state effettuate le seguenti operazioni. esami:
-studio citogenetico (cariotipo): 46,XX
-esame del sangue per FA - 0,7 mg%
- TLC di aminoacidi e carboidrati nel sangue - nessuna patologia
- TLC degli aminoacidi nelle urine: iperaminoaciduria generalizzata!
-analisi delle urine: leucociti++; test per l'acido xanturenico - debolmente positivo.
Nelle condizioni del laboratorio NBO, sono stati eseguiti quanto segue:
- analisi del sangue con il metodo TMS - non sono stati rilevati dati per aminoacidopatia ereditaria, aciduria organica e difetti nella beta-ossidazione mitocondriale;
- Diagnostica enzimatica per 6 malattie da accumulo: non sono state riscontrate deviazioni.
Ci è stata consigliata la consulenza di Ekaterina Yurievna Zakharova. Potete dirmi come possiamo contattarla e fissare un appuntamento?