Esame di compatibilità dei coniugi mediante il sistema HLA. Genotipizzazione di coppia (HLA classe II)

Con tentativi infruttuosi di dare alla luce un figlio, gli sposi si chiedono: qual è il motivo? Le analisi e gli studi primari spesso non riescono a rispondere. Per identificare il problema, i medici prescrivono inoltre alla coppia la tipizzazione HLA. L'identità immunologica dei genitori diventa un serio ostacolo alla nascita di un bambino.

Rilevanza delle analisi genetiche

Analisi genetiche: il metodo più moderno per rilevare malattie e anomalie negli esseri umani

Tutte le informazioni su una persona, le sue caratteristiche di sviluppo, la suscettibilità alle malattie sono crittografate nella molecola del DNA. Attualmente esistono centinaia di test genetici che consentono di identificare rapidamente la causa dei disturbi della salute e persino di prevederne il verificarsi in futuro. Nella diagnostica prenatale, tali test vengono utilizzati per la diagnosi precoce delle malattie ereditarie del feto e della "compatibilità" dei coniugi.

Tipi e proprietà HLA

L'HLA (Human Leuccita Antigens), che in inglese significa antigene leucocitario umano, è responsabile della reazione di compatibilità istologica. Tutti noi abbiamo il nostro set di molecole HLA e geni HLA. I bambini ricevono la metà dei geni HLA da mamma e papà.

I più comuni sono i geni HLA "classici" e "non classici". In questo articolo siamo interessati al primo, o meglio, all'HLA di classe II, la cui funzione principale si riduce al riconoscimento antigenico e all'interazione intercellulare, garantendo la resistenza umana alle infezioni. Ma presentano anche degli svantaggi: possono causare malattie autoimmuni e problemi durante la gravidanza.

Il ruolo dell'HLA in gravidanza

Per il pieno sviluppo del bambino, gli antigeni del padre e della madre devono differire. L'embrione, formato come risultato della connessione delle cellule germinali dei genitori, ha antigeni specializzati che sono "estranei" per l'immunità della madre. Il corpo della donna reagisce alle nuove cellule del bambino attivando speciali meccanismi che proteggono il feto: vengono sintetizzati anticorpi protettivi che sopprimono le cellule NK-killer specializzate. Se ciò non accade, questi ultimi iniziano a uccidere il feto, il che porta all'interruzione della gravidanza.

Se gli antigeni del padre e della madre corrispondono, il bambino sarà portatore di antigeni identici alla madre. In questo caso, il corpo femminile considera proprie le cellule dell'embrione, il che significa che non attiva meccanismi protettivi per la conservazione del feto. L'immunità percepisce il feto come una sorta di malattia tumorale e cerca di distruggerlo o di fermare la divisione cellulare. Nella vita ordinaria, questo ci salva da molte malattie, ma in questo caso provoca necrosi nei tessuti del feto e porta ad aborto spontaneo.

Il complesso di istocompatibilità influenza il processo di fecondazione stesso, l'attaccamento dell'embrione e la gestazione del feto. Esiste una relazione diretta: più alleli dei geni HLA risultano simili nei coniugi, maggiore è il rischio di aborto spontaneo. Circa il 35% delle coppie con aborti ricorrenti ha 2-3 aborti spontanei. Se vengono trovati quattro o più alleli simili, in quasi tutti i casi si verificheranno aborti spontanei e tentativi di fecondazione in vitro falliti.

Per il pieno portamento del feto, è molto importante non solo la corrispondenza quantitativa nei genitori, ma anche gli alleli dei geni HLA in ciascuno dei coniugi. Quindi, nelle coppie con tre o più aborti, la decifrazione dei risultati della tipizzazione NLA ha rivelato un aumento del numero di alcuni alleli: nelle donne - DQB1 0301, 0501, 0602; negli uomini - DRB1 10, 12; DQA1 0102, DQA1 0301, 0102; DQB1 0501, 0602. Con aborti ricorrenti, la frequenza degli alleli DRB1 03 e DQB1 0303 diminuisce sia nelle donne che negli uomini, il che indica il loro effetto protettivo sul decorso della gravidanza.

Indicazioni per la tipizzazione HLA

La tipizzazione HLA non è una procedura standard durante la gravidanza. Questo test è indicato solo in caso di aborto persistente e di fallimenti ricorrenti della fecondazione in vitro.

Metodo di condotta

Reazione a catena della polimerasi: un metodo ad alta precisione di diagnostica genetica molecolare

Per condurre un'analisi genetica, i coniugi devono donare il sangue da una vena. Dal materiale raccolto verranno isolati i leucociti. L'analisi viene effettuata mediante la reazione a catena della polimerasi (PCR). Sulla base dei risultati ottenuti, un genetista determinerà il grado di compatibilità immunologica dei genitori.

Decifrare i risultati

In questa variante, i coniugi hanno 3 corrispondenze per le varianti dell'antigene HLA

L'incompatibilità immunologica completa viene stabilita se una coppia ha un'alta percentuale di corrispondenze (cinque o più su sei possibili in tre loci, con 2 varianti in ciascuno dei loci) tra i geni DRB1, DQA1, DQB1. Con incompatibilità parziale, il risultato non può essere definito la causa principale degli aborti spontanei. Una completa mancata corrispondenza dei partner è un risultato positivo, ideale per una relazione senza problemi corso della gravidanza.

Immunoterapia in caso di coincidenza di test in una coppia

I metodi per mantenere la gravidanza nell'identità immunologica dei genitori sono stati inventati diversi decenni fa. Un modo è cucire il tessuto del padre a una donna incinta. L'immunità cominciò ad attaccare non il feto, ma i tessuti estranei. Inoltre, sono state effettuate la purificazione del sangue e la soppressione dell'immunità della madre.

L'immunizzazione è il metodo più comune per combattere l'identità HLA dei coniugi

Ora sono possibili altre opzioni per mantenere la gravidanza e proteggere il feto. Dopo aver ricevuto i risultati, il medico curante può raccomandare l'uso dell'immunizzazione. Esistono due tipi di immunizzazione: attiva e passiva.

1. Con una donna attiva vengono introdotti i linfociti concentrati del coniuge. Pertanto, il corpo della futura mamma impara gradualmente a riconoscere le cellule del marito. Alcuni studi forniscono dati sul 60% dei risultati positivi con una procedura tempestiva.
2. L'immunizzazione passiva viene effettuata con preparazioni speciali di immunoglobuline (Octagam, Intraglobin, Immunovenin, ecc.) La procedura inizia prima del concepimento, dura da due a tre mesi. Quindi vengono prescritti corsi di supporto alla gravidanza. Questo metodo viene utilizzato nella fecondazione in vitro.

Tipizzazione del gene HLA del marito(video)

L'analisi genetica per la compatibilità dell'antigene HLA dei coniugi aiuterà a scoprire se l'infertilità o l'aborto sono una conseguenza dell'incompatibilità genetica della coppia. Se la diagnosi è confermata, non perdere la speranza: la medicina moderna è spesso in grado di risolvere questo problema e aiutare nella nascita di un bambino sano. L'immunizzazione materna è un metodo comune per combattere l'identità genetica dei genitori per gli antigeni HLA.

Il ruolo del sistema di compatibilità dei tessuti umani

Il sistema di compatibilità biologica (tissutale) umano (HLA) di classe II svolge una serie di importanti funzioni protettive nel corpo:

Risposta immunitaria all'introduzione dell'infezione;
- rimozione delle cellule tumorali dal corpo;
-sviluppo dell'immunità acquisita.

Il termine "HLA" (antigene leucocitario umano) viene utilizzato perché tutti gli antigeni (proteine) di questo sistema si trovano sulla superficie dei leucociti. Tre geni situati sul braccio corto del 6o cromosoma sono responsabili del lavoro dell'HLA: DRB1, DQA1, DQB1. Ogni gene è rappresentato da due varianti (alleli) ereditate dai genitori: una dal padre, l'altra dalla madre. I geni codificano determinati tratti. Se gli alleli sono diversi (eterozigoti), appare un tratto "forte" (dominante), se lo stesso (omozigote) - "debole" (recessivo). Esiste una straordinaria diversità (circa 3000) di alleli del gene HLA.

Predisposizione alle malattie autoimmuni

Come abbiamo detto, il sistema di istocompatibilità HLA è responsabile della risposta immunitaria. Il rovescio del suo lavoro possono essere i processi autoimmuni: la sintesi di anticorpi protettivi sulle proprie cellule e la loro distruzione.

Attualmente, il coinvolgimento di alcune varianti dei geni HLA di classe II nello sviluppo di malattie autoimmuni come il diabete mellito di tipo 1 (DM), l'artrite reumatoide, il morbo di Crohn, la colite ulcerosa, il lupus eritematoso sistemico, l'epatite autoimmune, la dermatite atopica, la tiroidite autoimmune , ecc.

Una delle prime manifestazioni dei disturbi autoimmuni può essere l'infertilità e l'aborto spontaneo a causa del danno dei propri anticorpi a vari antigeni del sistema riproduttivo ed endocrino: ovuli, sperma, ormoni sessuali, ecc.

Compatibilità biologica e impianto dell'embrione

Il sistema di istocompatibilità, anche in assenza di malattie autoimmuni, influenza il concepimento, l'impianto (impianto dell'embrione) e il decorso della gravidanza. L'embrione, che si forma dopo la fusione delle cellule germinali maschili e femminili, ha sulla sua superficie speciali proteine ​​- antigeni. La loro "estraneità" è molto importante per il normale impianto. La comparsa di "proteine ​​​​sconosciute" dell'embrione innesca speciali reazioni immunitarie nel corpo della madre volte a mantenere la gravidanza: speciali cellule NK-killer (killer) che possono provocare un aborto spontaneo vengono bloccate.

La necessaria "estraneità" degli antigeni può verificarsi nell'embrione solo se i geni HLA della madre e del padre differiscono l'uno dall'altro. La coincidenza di alcuni alleli dei geni HLA (una corrispondenza completa si verifica nei parenti stretti) porta alla comparsa di un feto omozigote HLA, che è un fattore sfavorevole per il normale corso della gravidanza.

Geni HLA e aborto spontaneo

Recentemente è stato stabilito che maggiore è il numero di corrispondenze alleliche del gene HLA in una coppia sposata, maggiore è la probabilità di aborto. Un terzo delle coppie con aborti ricorrenti ha 2-3 incontri. In presenza di 4 o più alleli identici, nella maggior parte delle coppie si verificano aborti ripetuti e tentativi di fecondazione in vitro falliti.

Un gran numero di antigeni HLA di classe II corrispondenti porta alla mancanza di una risposta immunitaria sufficiente nella madre. L'embrione non viene riconosciuto come feto, ma viene percepito come un accumulo delle proprie cellule alterate, contro le quali il sistema immunitario comincia a lavorare per distruggerle.

Ciò provoca la necrosi delle membrane dei frutti e l'interruzione anticipata della gravidanza. Pertanto, la mancata corrispondenza degli antigeni HLA dei coniugi e la differenza tra gli antigeni delle proteine ​​HLA del feto e quelle materne sono fattori necessari per il mantenimento della gravidanza.

Importante per la gestazione non è solo il numero di partite, ma anche l'insieme di vicoli per ciascuno degli sposi. Quindi, nelle coppie con tre o più aborti, è stato rivelato un aumento del numero di alcuni alleli: nelle donne - DQB1 0301, 0501, 0602; negli uomini - DRB1 10, 12; DQA1 0102, DQA1 0301, 0102; DQB1 0501, 0602. Inoltre, con aborti ripetuti, la frequenza degli alleli DRB1 03 e DQB1 0303 diminuisce sia nelle donne che negli uomini, il che indica il loro effetto protettivo sul decorso della gravidanza.

Inoltre, è stato stabilito che alcuni alleli possono interrompere il processo di spermatogenesi negli uomini e influenzare la qualità delle cellule germinali, il che influisce successivamente sull'utilità dell'embrione.

Test di compatibilità HLA

Lo studio della compatibilità HLA non è incluso nell'algoritmo per l'esame iniziale delle coppie infertili. È consigliato solo ai coniugi con aborti abituali e dopo 2 o più tentativi di fecondazione in vitro falliti.

L'incompatibilità biologica dei partner nei geni HLA di classe II può essere dichiarata se nei soggetti è stato riscontrato un gran numero di corrispondenze (quattro o più su sei possibili) nei geni DRB1, DQA1, DQB1.

Se vi è il sospetto di incompatibilità istonica dei partner, oltre alla genotipizzazione, vengono eseguiti i seguenti metodi immunologici per l'esame della futura mamma:

Analisi della composizione dei linfociti nel sangue;
-valutazione dello stato dell'interferone;
-determinazione delle proprietà bloccanti del siero femminile (BF);
- concentrazione di anticorpi anti-leucociti anti-paterni (AOAT);
-livello di autoanticorpi (anticorpi antifosfolipidi, lupus anticoagulant);
- il contenuto di anticorpi contro la gonadotropina corionica;
-determinazione della sensibilità agli immunomodulatori.

Nelle donne con infertilità e aborti ricorrenti, il livello delle cellule NK (killer), l'interferone sierico può essere aumentato e anche la reazione dell'interferone dei leucociti e il contenuto di BF e AOAT possono essere ridotti.

Tuttavia, va notato che i processi di regolazione immunitaria della salute riproduttiva sono complessi e non sufficientemente studiati e il ruolo degli antigeni HLA non è ancora riconosciuto da tutti gli esperti.

Inoltre, oltre al sistema HLA, ci sono altri fattori che influenzano il corso della gravidanza: trombofilia, alterato metabolismo dei folati, iperomocisteinemia, anomalie cromosomiche fetali, ecc. Anche i test per il loro rilevamento dovrebbero essere inclusi nell'algoritmo di esame per l'aborto spontaneo.

"Vaccinazione" con i linfociti del marito

Ad oggi, i dati della letteratura mondiale sono molto contraddittori sulla questione della possibile correzione dei disturbi immunitari della salute riproduttiva. Tuttavia, al momento, quando viene rilevata l'incompatibilità immunologica dei partner del gene HLA nei coniugi con aborto abituale e tentativi di fecondazione in vitro falliti, l'immunizzazione attiva di una donna ("vaccinazione") con i linfociti del marito viene utilizzata come metodo principale di terapia - linfocitoimmunoterapia (LIT) .

Il meccanismo della sua azione è quello di attivare la risposta immunitaria nella madre, volta a mantenere l'impianto dell'embrione, in risposta all'iniezione sottocutanea di leucociti da parte del padre del nascituro.

Controindicazioni per la LIT sono: epatite B e C, trasferita da un partner; malattie virali nel periodo acuto. In questi casi, se necessario, vengono utilizzati i linfociti del donatore esaminato.

Per normalizzare gli indicatori dello stato dell'interferone nella prima fase, vengono prescritti induttori dell'interferone (galavit, immunomax, imunofan), a seconda della sensibilità identificata al farmaco.

Quindi viene eseguito LIT. Per fare ciò, a una donna vengono iniettati per via intradermica i leucociti del marito precedentemente ottenuti alla dose di 50-100 milioni, seguiti (dopo 3 settimane) dal monitoraggio degli indicatori dello stato funzionale del sistema immunitario. In futuro sarà possibile aumentare la dose di linfociti (100 o 150 milioni di cellule) a seconda del numero di corrispondenze con gli antigeni HLA e gli indicatori dello stato immunitario.

La procedura viene eseguita dal 5 al 9 giorno del ciclo mestruale una volta al mese 2-3 mesi prima del concepimento previsto o del programma di fecondazione in vitro sotto il controllo dello stato funzionale del sistema immunitario (analisi della composizione dei linfociti del sangue, indicatori di BF e AOAT).

Dopo la LIT, i valori di BP e AOAT aumentano in una donna rispettivamente di 1,5 e 3 volte. Di conseguenza, le coppie con corrispondenze HLA hanno un aumento di 2 volte del tasso di gravidanza. L'effetto più pronunciato di questa terapia si osserva nei coniugi che hanno 4 o più corrispondenze HLA: rimangono incinte 3-4 volte più spesso rispetto alle coppie “non vaccinate”. Dopo il concepimento, la LIT viene continuata per tutto il primo trimestre, a partire dalle 4-5 settimane, poi ogni 3-4 settimane sotto il controllo del livello dell'allattamento al seno.

La "vaccinazione" con i linfociti del marito consente alle donne con aborto immunologico di concepire e dare alla luce un bambino sano!

Sempre con te,

I disturbi immunitari nel corpo dei coniugi contribuiscono a numerosi fallimenti nella fecondazione in vitro. Una delle categorie più comuni di disturbi immunitari è l'identità di marito e moglie secondo il sistema antigene HLA.
Recentemente i test di compatibilità HLA coniugale sono stati raccomandati sempre più spesso a quelle coppie che hanno già avuto tentativi di fecondazione in vitro senza successo. La tipizzazione HLA di un uomo e di una donna che decidono di ricorrere alla fecondazione in vitro, come ultima possibilità di avere figli, permette di determinare il grado di "incompatibilità". Di norma, la tipizzazione HLA viene prescritta per chiarire la causa dell'infertilità e per determinare i metodi di ulteriore trattamento.

Compatibilità HLA

Gli antigeni HLA sono presenti sulla superficie di quasi tutte le cellule del corpo, ma queste molecole sono rappresentate in modo più completo sui leucociti, motivo per cui hanno preso il nome. Ogni persona ha il proprio set di antigeni HLA. Grazie alle loro molecole, l'organismo ha la capacità di distinguere le proprie cellule da quelle estranee, producendo se necessario anticorpi specifici. Contribuiscono alla distruzione di agenti estranei, che possono essere virus, cellule tumorali, batteri.

La presenza di antigeni HLA in ogni persona è determinata esattamente dallo stesso set personale di geni HLA. Il bambino riceve dai suoi genitori una combinazione assolutamente individuale di geni HLA, simile nella sua unicità alle impronte digitali. Esistono 2 classi di antigeni HLA: antigeni dei loci A, B e C e antigeni dei loci DR, DP e DQ. Gli antigeni HLA della prima classe si trovano sulla superficie di qualsiasi cellula, gli antigeni HLA della seconda classe sono presenti solo sulla superficie di quelle cellule che prendono parte alle reazioni immunologiche. Questi includono linfociti T attivati, linfociti B, monociti, cellule dendritiche e macrofagi.

Compatibilità HLA e gravidanza

Ereditando gli antigeni di compatibilità tissutale, il feto riceve dalla madre e dal padre un gene per ciascun locus. Pertanto, la metà degli antigeni vengono ereditati dal padre, motivo per cui il bambino che la donna dà alla luce le è per metà estraneo. In circostanze normali, un tale fattore appartiene alla categoria dei fenomeni fisiologici ordinari. L'avvio di reazioni immunologiche dovute a questo processo garantisce la conservazione della gravidanza. La formazione di un clone di cellule immunitarie contribuisce alla produzione di anticorpi bloccanti specifici.

Nel corpo di una donna non incinta, le cellule immunitarie che agiscono come esploratori trovano proteine ​​del complesso principale degli antigeni HLA sulla superficie di qualsiasi cellula. Rilevando "estranei", ad esempio cellule tumorali o virus portati dall'esterno, il sistema immunitario dà l'ordine di distruggere. Se, al momento della gravidanza, questo processo si verificasse nello stesso ordine, il feto non avrebbe la possibilità di sopravvivere, poiché è un "estraneo" per il corpo della madre.

Ma questo non accade perché durante la gravidanza il sistema immunitario della madre non distingue tra le strutture cellulari del feto. Durante questo periodo, i linfociti B endometriali contribuiscono alla produzione di anticorpi protettivi diretti contro gli antigeni HLA ereditati dal padre. Questi anticorpi bloccano gli antigeni HLA del padre, proteggendoli dalle cellule immunitarie materne, che agiscono come esploratori, in modo che queste ultime non siano in grado di trasmettere informazioni alle cellule killer. Per questo motivo, la risposta immunitaria del corpo materno non si attiva in risposta alla comparsa di cellule inizialmente “estranee” e l'embrione attecchisce in modo sicuro.

Allo stesso tempo, l'assenza dell'identità degli antigeni HLA degli sposi è di grande importanza, poiché solo in questo caso avviene il meccanismo di lancio di anticorpi bloccanti che contribuiscono al mantenimento della gravidanza. Se gli antigeni HLA dei genitori sono simili, gli anticorpi il cui compito principale è bloccare gli antigeni HLA paterni non vengono prodotti. Di conseguenza, le cellule scout percepiscono il feto come un corpo estraneo, attivando contro di esso il sistema di distruzione. Il risultato di questo processo è un aborto spontaneo. Più antigeni HLA hanno i genitori, meno probabilità hanno di portare avanti una gravidanza.

Tipizzazione HLA

La presenza di un'identità HLA molto spesso causa infertilità femminile o aborti ricorrenti. Per questo motivo i medici raccomandano spesso che i pazienti che scelgono la fecondazione in vitro come metodo di trattamento dell'infertilità si sottopongano alla tipizzazione HLA insieme ai loro mariti. Le indicazioni per la tipizzazione HLA non sono solo l'infertilità, ma anche una storia di aborto spontaneo o tentativi di fecondazione in vitro falliti.

La tipizzazione HLA prevede l'analisi del polimorfismo HLA e viene solitamente eseguita in due modi. Il primo di essi, classico, si basa sul test microlinfocitotossico. L'uso del metodo genetico molecolare comporta una reazione a catena della polimerasi.

La tipizzazione HLA classica o sierologica viene effettuata su popolazioni cellulari isolate. Poiché gli antigeni del complesso maggiore di istocompatibilità sono trasportati principalmente dai linfociti, per determinare gli antigeni di classe I viene utilizzata una sospensione di linfociti T e per gli antigeni di classe II una sospensione di linfociti B. Per isolare le popolazioni cellulari desiderate dal sangue intero, vengono utilizzati due metodi: separazione immunomagnetica o centrifugazione. Di norma, viene utilizzato principalmente il primo metodo, poiché il secondo diventa più spesso fonte di dati falsi positivi a causa della morte di alcune cellule.

Per condurre un test di tipizzazione HLA linfocitotossico, viene utilizzato un siero speciale, che include anticorpi contro vari tipi di antigeni di entrambe le classi. Nel processo di conduzione di un test sierologico, studiando quale tipo di siero reagisce con i linfociti, è possibile determinare il tipo HLA. In caso di reazione tra il siero e la cellula, sulla superficie di quest'ultima si forma un complesso antigene-anticorpo. Se al siero viene aggiunta una soluzione contenente il complemento, la distruzione e la morte della cellula è inevitabile.

La microscopia a fluorescenza viene utilizzata per valutare il metodo sierologico di tipizzazione HLA, con la fluorescenza rossa che indica una reazione positiva e quella verde che indica una reazione negativa. Nel determinare il risultato di questo metodo, viene presa in considerazione la specificità dei sieri che hanno mostrato una reazione, nonché alcuni gruppi di antigeni che sono entrati in una reazione incrociata. Inoltre, viene presa in considerazione anche l'intensità della reazione citotossica.

Questo metodo di tipizzazione HLA presenta alcuni svantaggi:
- bassa espressione di antigeni HLA o bassa affinità anticorpale;
- l'esistenza di reazioni crociate;
- l'assenza di prodotti proteici in alcuni geni HLA.

L'uso di metodi genetici molecolari per la tipizzazione HLA prevede l'uso di campioni sintetici già pronti che reagiscono con il DNA anziché con gli antigeni, il che consente di determinare con precisione la presenza di tipi specifici di antigeni in un campione. Questo metodo, tra le altre cose, non richiede la presenza di leucociti vivi, può essere utilizzato per studiare qualsiasi cellula del corpo e per lo studio è necessaria una quantità trascurabile di sangue. In alcuni casi è sufficiente solo un raschiamento prelevato dalla mucosa orale.

Quando si utilizza il metodo di tipizzazione HLA molecolare, viene utilizzato il metodo PCR. Il primo passo è ottenere DNA genomico puro, tessuti o sospensione di leucociti dal sangue intero. Successivamente, in una provetta, utilizzando un corto DNA a filamento singolo specifico per un particolare locus HLA, si ottiene una copia del campione di DNA esistente. Questa operazione viene ripetuta più volte per ottenere abbastanza frammenti di DNA per la valutazione visiva. A questo scopo le miscele di reazione vengono sottoposte ad ibridazione o elettrolisi, quindi viene stabilita la presenza di un'amplificazione specifica.

La tipizzazione genetica molecolare HLA è considerata più accurata di quella sierologica. Ciò è dovuto alla presenza di campioni standardizzati. Inoltre, la tipizzazione HLA molecolare fornisce informazioni più importanti sui nuovi alleli del DNA e fornisce anche dettagli migliori attraverso l'identificazione sia degli antigeni che degli alleli stessi. Questi ultimi, a loro volta, determinano la presenza di un particolare tipo di antigene sulla cellula.

Se ci fossero molte coincidenze, il concepimento non avverrà senza un'immunoterapia adeguata. Il ciclo di trattamento viene effettuato prima dell'inizio del protocollo di fecondazione in vitro e dura solitamente 2-3 mesi. Al paziente vengono prescritti preparati immunoglobulinici, ad esempio Intraglobin, Octagam e altri. Un altro ciclo di trattamento viene effettuato all'inizio della gravidanza, questo aiuta a ridurre al minimo il rischio di una reazione di rigetto dell'embrione.

Seleziona i messaggi degli ultimi: giorni

Ciao Valentino!

Si tratta di un'analisi genetica molecolare che mostra la configurazione dei geni che codificano per le proteine ​​di compatibilità tissutale. Il sistema dei geni di compatibilità tissutale si chiama HLA o MHC (sono la stessa cosa). È come i gruppi sanguigni, solo che il numero di opzioni per ciascuna posizione è ampio.

DRB1, DQA1 e DQB1 sono i nomi dei geni. Questi geni codificano per proteine ​​di compatibilità tissutale di classe II (DR e DQ). Ciascuna molecola DR e DQ è costituita da due catene proteiche (alfa e beta). Pertanto, si ottengono 2 geni per ciascuna posizione (DRA1 e DQA1 codificano le catene alfa delle proteine ​​corrispondenti, e DRB1 e DQB1 codificano le catene beta). Poiché le catene alfa della DR sono le stesse nella maggior parte delle persone, di solito non vengono tipizzate e quindi non vengono presentate nell'analisi. L'asterisco è seguito dal numero della variante del gene. Per ogni posizione vedi 2 linee: queste sono due copie di ciascun gene. Una persona riceve una copia da suo padre, una da sua madre. Ciascuno dei tuoi figli riceverà una di queste opzioni (una dal padre, una dalla madre). Pertanto, ogni bambino avrà una combinazione di geni HLA del padre e della madre. Questi test vengono ora utilizzati per stabilire la maternità e la paternità.

La tipizzazione viene effettuata tramite PCR. La digitazione per HLA DRB1 viene eseguita con una precisione di 2 cifre, per altri geni - con una precisione di 4 cifre. Le prime 2 cifre indicano il numero del gruppo di varianti genetiche, le 2 cifre successive specificano la variante genetica all'interno del gruppo. Cioè, 0501 non è il numero cinquecentouno, ma l'opzione zero cinque - zero uno. Se le opzioni sono presentate tramite una frazione, ciò significa che esiste una tra più opzioni elencate (0502 o 0504), l'accuratezza dell'analisi non consente di determinare quale delle due. Se appare un trattino, significa un intervallo di numeri di opzioni (ad esempio, 0602-8 significa 0602 o 0603 o 0604, ecc. fino a 0608). La seconda barra indica le varianti proteiche sulla superficie cellulare che il gene può codificare.

Nel tuo caso, il gene DRB1*09 codifica per la proteina DR9. Le parentesi indicano la vecchia denominazione della variante proteica, successivamente perfezionata mediante studi di genetica molecolare. Nel tuo caso, si può vedere che DRB1*15, che hai tu, e DRB1*16, che ha tuo marito, sono simili nel loro comportamento nella coltura cellulare e sono stati determinati con metodi colturali come DR2, e studi successivi hanno scoperto che c'è ci sono 2 diverse varianti all'interno della varietà DR2, a cui sono stati assegnati i numeri 15 e 16. L'affiliazione delle proteine ​​DR e DQ all'una o all'altra variante è determinata dalla catena beta, pertanto non sono indicate corrispondenze rispetto alle linee con DQA1. Ora è chiaro che in questa analisi esiste una corrispondenza del coniuge su DQA1*0102 e una somiglianza del coniuge su DR2, DQ3 e DQ6. Questi test vengono utilizzati per selezionare i donatori per i trapianti di organi. Se il donatore e il ricevente coincidono completamente, l'organo attecchisce, altrimenti viene rifiutato.

Durante la gravidanza è vero il contrario. La natura si impegna per la massima diversità della prole e se l'embrione è simile all'organismo della madre nei geni HLA, ha meno possibilità di sopravvivenza. L'organismo della madre attiva le reazioni volte a mantenere la gravidanza troppo lentamente o tardivamente e lo sviluppo della gravidanza può arrestarsi. L'importanza di questo meccanismo non dovrebbe essere esagerata, poiché non è inclusa in tutti i casi e nella maggior parte dei casi è uno dei fattori aggiuntivi di aborto spontaneo. È possibile determinare come reagirà l'organismo della madre all'embrione che eredita i geni di compatibilità tissutale del padre utilizzando uno speciale studio immunologico chiamato MLC, in russo SKL ( coltura mista di linfociti, questa analisi può essere effettuata nel nostro laboratorio).

Se la reazione ai linfociti del marito è indebolita, può essere potenziata con una vaccinazione speciale, la LIT (immunoterapia linfocitaria, effettuabile presso il CIR) utilizzando linfociti del donatore o linfociti del marito. Se la reazione nell'SKL è buona, LIT non è necessario. Pertanto, è impossibile modificare la configurazione dei geni di compatibilità tissutale, ma è possibile rafforzare il sistema immunitario della madre nel modo giusto. L'uso dell'analisi della tipizzazione HLA non si limita alla diagnosi di infertilità, aborto spontaneo e genitorialità.

In alcuni casi, questa analisi consente di prevedere i rischi di malattie. Ad esempio, viene prescritto dagli endocrinologi per determinare il rischio di sviluppare il diabete. Quasi tutti i diabetici hanno varianti DR3 o DR4.

Per risolvere il problema di

Numerosi tentativi falliti di concepire un bambino possono essere dovuti a disturbi immunitari nei coniugi. Uno dei disturbi più comuni è l'identità degli antigeni HLA di una donna e di un uomo. Pertanto, si consiglia alle coppie che non riescono a concepire un bambino da molto tempo di verificare la compatibilità HLA. Un esame del sangue HLA per la compatibilità del coniuge consente di determinare il grado di "incompatibilità". La tipizzazione HLA consente di chiarire le cause dell'infertilità e di determinare ulteriori tattiche di trattamento per la coppia.

Analisi della tipizzazione HLA

Sulla superficie di tutte le cellule del corpo sono presenti recettori speciali: antigeni proteici del complesso maggiore di istocompatibilità. L'unicità della struttura di questi recettori in ogni persona garantisce l'affidabilità del sistema immunitario, funzionando secondo il principio "amico o nemico". La maggior parte degli antigeni HLA si trovano sulla superficie dei leucociti. Quando la struttura dei recettori cambia (rilevamento di un corpo estraneo o degenerazione tumorale di una cellula), l'antigene si lega alle cellule immunitarie e, attraverso il complesso HLA, viene avviata una risposta immunitaria.

Il feto riceve un gene da ciascuno dei genitori, ereditando così il 50% dell'informazione genetica da loro. Il fatto che il bambino sia un corpo estraneo per il corpo della madre innesca alcune reazioni immunologiche che aiutano a mantenere la gravidanza. Le differenze nelle strutture proteiche degli antigeni HLA del feto e della madre sono un fattore importante per il pieno sviluppo della gravidanza. Il corpo della madre produce normalmente, fin dai primissimi tempi, anticorpi contro gli antigeni del bambino. Quando gli antigeni HLA dei genitori sono simili, cosa che accade in un matrimonio strettamente imparentato, a causa di disturbi endocrini o immunologici nella madre, la stimolazione antigenica è disturbata e il corso della gravidanza è complicato da una gestosi grave o può interrompersi spontaneamente . Un caso su tre di infertilità e aborto ricorrente è dovuto alle caratteristiche genetiche della coppia.

Per determinare il grado di somiglianza degli antigeni HLA con una coppia, viene eseguita un'analisi di tipizzazione HLA. Per l'analisi, viene prelevato il sangue venoso, da cui vengono isolati i leucociti, quindi, utilizzando il metodo della reazione a catena della polimerasi, viene eseguita la tipizzazione HLA.

Quando è necessario fare un test di compatibilità?

È auspicabile che i futuri genitori si sottopongano ad un esame clinico anche prima del concepimento previsto. La nomina dei test necessari e l'emissione di un rinvio per l'esame vengono effettuati da un terapista e un ginecologo. Quando tutti i test sono eccellenti e la gravidanza non si verifica, il motivo potrebbe non essere lo stato di salute dei partner individualmente, ma la compatibilità immunologica della coppia.

La somiglianza dei partner in termini di compatibilità tissutale è la ragione della mancanza di attività del sistema immunitario della donna, di conseguenza il corpo non innesca le reazioni necessarie per concepire e mantenere la gravidanza.

Spesso il corpo di una donna percepisce gli spermatozoi di un uomo come agenti dannosi e inizia la produzione intensiva di proteine ​​anticorpali che li neutralizzano, sopprimendo la capacità di fecondare. L'impossibilità di incontrare gli spermatozoi con l'ovulo rende impossibile l'inizio della gravidanza.

Pertanto, i casi in cui è necessario effettuare un'analisi di compatibilità non sono rari. Per escludere la possibilità di tali problemi in una coppia, entrambi devono sottoporsi a un esame del sangue per compatibilità, tipizzazione HLA.

Immunizzazione

Quando, dopo aver consultato un medico, una coppia decide di continuare a provare a concepire un bambino comune, può essere raccomandata una procedura di immunizzazione attiva o passiva.

L'immunizzazione attiva della madre viene effettuata con una coltura concentrata di linfociti del partner o del donatore e consente di superare il problema della somiglianza dei partner per gli antigeni HLA. La procedura dovrebbe “insegnare” al corpo femminile a riconoscere le cellule partner. Tipicamente, la procedura viene eseguita in tre fasi utilizzando un farmaco ottenuto dal sangue di un partner o di un donatore. Ad oggi i pareri di genetisti e immunologi sull'efficacia dell'immunoterapia con i linfociti sono stati divisi a metà. Una parte considera questo metodo un mezzo di salvezza, mentre l'altra ne nega completamente ogni significato.

Alcuni dati indicano una percentuale di successo del 60% per un metodo di immunizzazione attiva attentamente selezionato e prescritto tempestivamente. La procedura di immunizzazione con i linfociti, purtroppo, oggi è possibile solo in alcune grandi città.

L’immunizzazione passiva è più conveniente e non richiede un lungo periodo di preparazione, ma i dati sulla sua efficacia sono contrastanti. Questo metodo consiste nell'immunizzare la madre con preparati immunoglobulinici. Il farmaco viene prescritto esclusivamente da un medico, solitamente per via endovenosa, in tre fasi.

L'importanza di questi test sta nel fatto che offrono alla coppia una scelta informata nella valutazione di tutti i rischi a favore di continuare a tentare di concepire o a favore dei servizi della banca degli ovuli e del seme. Pertanto, prima di prendere una decisione così seria, è necessario disporre delle informazioni pertinenti e avvalersi del parere di numerosi esperti in immunologia e genetica.