4.1. Diffusione dei germi
I microrganismi sono onnipresenti. Popolano il suolo e l'acqua, partecipando al ciclo delle sostanze in natura, distruggendo i resti di animali e piante morti, aumentando la fertilità del suolo e mantenendo un equilibrio stabile nella biosfera. Molti di essi costituiscono la normale microflora degli esseri umani, degli animali e delle piante, svolgendo funzioni utili per i loro ospiti.
4.1.1. Il ruolo dei microrganismi nel ciclo delle sostanze in natura
Le sostanze di origine vegetale e animale vengono mineralizzate dai microrganismi in carbonio, azoto, zolfo, fosforo, ferro e altri elementi.
Il ciclo del carbonio. Nel ciclo del carbonio, oltre a piante, alghe e cianobatteri, sono attivamente coinvolti i microrganismi che decompongono i tessuti di piante e animali morti con il rilascio di CO 2 . Durante la decomposizione aerobica delle sostanze organiche si formano CO 2 e acqua e durante la fermentazione anaerobica si formano acidi, alcoli e CO 2. Pertanto, durante la fermentazione alcolica, il lievito e altri microrganismi scompongono i carboidrati in alcol etilico e anidride carbonica. La fermentazione dell'acido lattico (causata dai batteri lattici), dell'acido propionico (causata dai propionobatteri), butirrica e acetone-butile (causata dai clostridi) e altri tipi di fermentazione sono accompagnati dalla formazione di acidi e anidride carbonica.
Il ciclo dell'azoto. I batteri nodulari e i microrganismi del suolo che vivono liberi fissano l’azoto atmosferico. I composti organici di residui vegetali, animali e microbici vengono mineralizzati dai microrganismi del suolo, trasformandosi in composti
ammonio. Viene chiamato il processo di formazione dell'ammoniaca durante la distruzione delle proteine da parte dei microrganismi ammonizione, o mineralizzazione dell'azoto. Le proteine vengono distrutte da Pseudomonas, Proteus, Bacilli e Clostridia. Durante la decomposizione aerobica delle proteine, si formano ammoniaca, solfati, anidride carbonica e acqua, durante la decomposizione anaerobica: ammoniaca, ammine, anidride carbonica, acidi organici, indolo, scatolo, idrogeno solforato. Gli urobatteri escreti nelle urine scompongono l'urea in ammoniaca, anidride carbonica e acqua. I sali di ammonio, formati durante la fermentazione dei composti organici da parte dei batteri, sono utilizzati dalle piante verdi superiori. Ma i più digeribili per le piante sono i nitrati: sali nitrati, che si formano durante la decomposizione delle sostanze organiche nel processo di ossidazione dell'ammoniaca in acido nitroso e quindi in acido nitrico. Questo processo si chiama nitrificazione, e i microrganismi che la causano - nitrificante. La nitrificazione avviene in due fasi: la prima fase è effettuata dai batteri del genere Nitrosomonas ed altri, mentre l'ammoniaca viene ossidata ad acido nitroso, si formano nitriti; i batteri del genere partecipano alla seconda fase Nitrobatterio e altri, mentre l'acido nitroso viene ossidato ad acido nitrico e si trasforma in nitrati. I batteri nitrificanti furono isolati e descritti dallo scienziato russo S.N. Vinogradskij. I nitrati aumentano la fertilità del suolo, ma esiste anche un processo inverso: come risultato del processo i nitrati possono essere ripristinati denitrificazione prima del rilascio di azoto libero, che ne riduce la riserva sotto forma di sali nel terreno, determinandone una diminuzione della fertilità.
4.1.2. Microflora del suolo
Solo il numero di batteri in 1 g di terreno raggiunge i 10 miliardi.I microrganismi sono coinvolti nella formazione del suolo e nell'autopurificazione del suolo, nella circolazione dell'azoto, del carbonio e di altri elementi in natura. Oltre ai batteri, è abitato da funghi, protozoi e licheni, che sono una simbiosi di funghi con cianobatteri. Ci sono relativamente pochi microrganismi sulla superficie del suolo a causa degli effetti dannosi dei raggi UV, dell'essiccazione e di altri fattori. Lo strato arabile di terreno spesso 10-15 cm contiene il maggior numero di microrganismi. Man mano che la profondità si approfondisce, il numero di microrganismi diminuisce fino a scomparire a una profondità di 3-4 M. La composizione della microflora del suolo dipende dal tipo e dalle condizioni, dalla composizione della vegetazione, dalla temperatura, dall'umidità, ecc.
La maggior parte dei microrganismi del suolo sono in grado di svilupparsi a pH neutro, elevata umidità relativa e temperatura di 25-45 °C.
bacillo E Clostridio. Bacilli non patogeni (Vas. megaterium, Vas. subtilis ecc.), insieme a Pseudomonas, Proteus e alcuni altri batteri, sono ammonificanti, costituendo un gruppo di batteri putrefattivi che mineralizzano le sostanze organiche. Il suolo è anche un habitat per i batteri che fissano l’azoto e che assimilano l’azoto molecolare. e così via.). Le varietà di cianobatteri, o alghe blu-verdi, che fissano l'azoto, vengono utilizzate per migliorare la fertilità delle risaie. I bastoncini patogeni che formano spore (agenti causali di antrace, botulismo, tetano, cancrena gassosa) possono persistere a lungo, persino moltiplicarsi nel terreno. Membri della famiglia dei batteri intestinali Enterobatteriacee)- L'Escherichia coli, gli agenti causali della febbre tifoide, della salmonellosi e della dissenteria, una volta nel terreno con le feci, muoiono. Nei terreni puliti, Escherichia coli e Proteus sono rari; il rilevamento di batteri del gruppo Escherichia coli (batteri coliformi) in quantità significative è un indicatore di contaminazione del suolo con feci umane e animali e indica il suo svantaggio sanitario ed epidemiologico dovuto alla possibilità di trasmissione di agenti patogeni di infezioni intestinali. Il numero di protozoi nel terreno varia da 500 a 500.000 per 1 g di terreno. Nutrendosi di batteri e residui organici, i protozoi provocano cambiamenti nella composizione della materia organica del suolo. Nel terreno sono presenti anche numerosi funghi, le cui tossine, accumulandosi nel cibo umano, causano intossicazione: micotossicosi e aflatossicosi.
4.1.3. Microflora dell'acqua
Nell'acqua si formano alcune biocenosi con predominanza di microrganismi che si sono adattati alle condizioni del luogo, ad es. condizioni fisiche e chimiche, illuminazione, grado di solubilità dell'ossigeno e dell'anidride carbonica, contenuto di sostanze organiche e minerali, ecc. La microflora dell'acqua è attivamente coinvolta nel processo di autodepurazione dai rifiuti organici. L’utilizzo dei rifiuti organici è associato alle attività di con-
microrganismi che vivono chiaramente nell’acqua, ad es. costituiscono la microflora autoctona. Nei corpi d'acqua dolce sono presenti vari batteri: a forma di bastoncino (pseudomonas, aeromonadi, ecc.), Cocchi (micrococchi), contorti e filamentosi (attinomiceti). Sul fondo dei serbatoi, nel limo, aumenta il numero degli anaerobi. Quando l'acqua è contaminata da sostanze organiche, compaiono un gran numero di rappresentanti non permanenti (alloctoni) della microflora dell'acqua, che scompaiono nel processo di autodepurazione dell'acqua.
L'acqua degli oceani e dei mari contiene anche vari microrganismi, tra cui archeobatteri, batteri luminosi e alofili (amanti del sale), come i vibrioni alofili, che infettano i molluschi e alcuni tipi di pesci e, se mangiati, si sviluppa un'intossicazione alimentare. Inoltre sono stati rilevati, ad esempio, numerosi nanobatteri sfingomonas,
4.1.4. Microflora aerea
I microrganismi entrano nell'aria dal suolo, dall'acqua, nonché dalla superficie del corpo, dalle vie respiratorie e con gocce di saliva umana e animale. Nell'aria dei locali interni sono contenuti numerosi microrganismi, la cui contaminazione microbica dipende dalle condizioni di pulizia dei locali, dal livello di illuminazione, dal numero di persone nella stanza, dalla frequenza della ventilazione, ecc. Un numero maggiore di microrganismi è presente nell'aria delle grandi città, in numero minore nell'aria delle zone rurali. Soprattutto pochi microrganismi si trovano nell'aria sopra foreste, montagne e mari.
Qui si trovano batteri coccoidi e bastoncini, bacilli, clostridi, attinomiceti, funghi e virus. L'aria è considerata un fattore di trasmissione delle infezioni respiratorie, in cui l'agente patogeno viene trasmesso da goccioline trasportate dall'aria o polvere trasportata dall'aria. La luce solare e altri fattori contribuiscono alla morte della microflora aerea. Per ridurre la contaminazione microbica dell'aria, la pulizia a umido dei locali viene effettuata in combinazione con la ventilazione e la purificazione (filtrazione) dell'aria in entrata. Vengono utilizzati anche la disinfezione con aerosol e il trattamento dei locali con lampade UV (ad esempio nei laboratori microbiologici e nelle unità operative).
4.1.5. Microflora delle strutture domestiche e mediche
Negli oggetti domestici si trovano microrganismi del suolo, dell'acqua, dell'aria, delle piante, delle escrezioni umane e animali. La microflora patogena e opportunistica isolata da pazienti o personale medico, così come la microflora introdotta con medicazioni o altri materiali, farmaci, ecc., possono prendere parte alla formazione della microflora delle strutture mediche. Nelle zone umide (docce, bagni, tubi di scarico, lavandini, ecc.) possono moltiplicarsi gli agenti patogeni delle infezioni sapronose e opportunistiche - Legionella, Aeromonas, Pseudomonas, Klebsiella, Proteus.
4.2. Microflora del corpo umano
La microflora del corpo umano svolge un ruolo estremamente importante nel mantenimento della sua salute a un livello ottimale. La microflora normale è un insieme di molti microbiocenosi(comunità di microrganismi) caratterizzati da una certa composizione e che occupano l'uno o l'altro biotopo(pelle e mucose) nel corpo umano e animale, comunicando con l'ambiente. Il corpo umano e la sua microflora sono in uno stato di equilibrio dinamico (eubiosi) e costituiscono un unico sistema ecologico.
In ogni microbiocenosi occorre distinguere tra le cosiddette specie caratteristiche (obbligate, autoctone, indigene, residenti). I rappresentanti di questa parte della microflora sono costantemente presenti nel corpo umano e svolgono un ruolo importante nel metabolismo.
ospitarlo e proteggerlo dagli agenti patogeni di malattie infettive. Il secondo componente della microflora normale è microflora transitoria(alloctono, casuale). Rappresentanti opzionale parti della microflora sono abbastanza comuni nelle persone sane, ma la loro composizione qualitativa e quantitativa non è costante e cambia di volta in volta. Il numero delle specie caratteristiche è relativamente piccolo, ma numericamente sono sempre rappresentate in modo più abbondante.
Funzioni della microflora normale
Creazione di resistenza alla colonizzazione.
Regolazione della composizione del gas, del potenziale redox dell'intestino e di altre cavità dell'organismo ospite.
Produzione di enzimi coinvolti nel metabolismo di proteine, carboidrati, lipidi, nonché una migliore digestione e un aumento della motilità intestinale.
Partecipazione al metabolismo del sale marino.
Partecipazione nel fornire energia alle cellule eucariotiche.
Detossificazione di substrati e metaboliti esogeni ed endogeni principalmente a causa di reazioni idrolitiche e riducenti.
Produzione di composti biologicamente attivi (amminoacidi, peptidi, ormoni, acidi grassi, vitamine).
funzione immunogenica.
Azione morfocinetica (influenza sulla struttura della mucosa intestinale, mantenimento dello stato morfologico e funzionale delle ghiandole, cellule epiteliali).
Funzione mutagena o antimutagena.
Partecipazione alle reazioni carcinolitiche (la capacità dei rappresentanti indigeni della normale microflora di neutralizzare le sostanze che inducono la carcinogenesi).
La funzione più importante della microflora normale è la sua partecipazione alla creazione della resistenza alla colonizzazione (resistenza, resistenza alla colonizzazione da parte di microflora estranea). Il meccanismo con cui si crea la resistenza alla colonizzazione è complesso. La resistenza alla colonizzazione è fornita dalla capacità di alcuni rappresentanti della normale microflora di aderire all'epitelio della mucosa intestinale, formando su di esso uno strato parietale e prevenendo così l'attaccamento di agenti infettivi patogeni e opportunistici.
malattie. Un altro meccanismo per creare resistenza alla colonizzazione è associato alla sintesi da parte di microrganismi indigeni di una serie di sostanze che inibiscono la crescita e la riproduzione di agenti patogeni, principalmente acidi organici, perossido di idrogeno e altre sostanze biologicamente attive, nonché alla competizione con microrganismi patogeni per le fonti alimentari .
La composizione della microflora e la riproduzione dei suoi rappresentanti sono controllate principalmente dal macroorganismo (resistenza alla colonizzazione associata all'organismo ospite) utilizzando i seguenti fattori e meccanismi:
Fattori meccanici (desquamazione dell'epitelio della pelle e delle mucose, rimozione dei microbi mediante segreti, peristalsi intestinale, forza idrodinamica dell'urina nella vescica, ecc.);
Fattori chimici: acido cloridrico del succo gastrico, succo intestinale, acidi biliari nell'intestino tenue, secrezione alcalina della mucosa dell'intestino tenue;
Secrezioni battericide delle mucose e della pelle;
Meccanismi immunitari: soppressione dell'adesione batterica sulle mucose da parte di anticorpi secretori della classe IgA.
Diverse aree del corpo umano (biotopi) hanno la propria microflora caratteristica, che differisce nella composizione qualitativa e quantitativa.
Microflora cutanea. I principali rappresentanti della microflora cutanea: batteri corineformi, muffe, bastoncini aerobici sporigeni (bacilli), stafilococchi epidermici, micrococchi, streptococchi e funghi simili a lieviti del genere Malas-sezia.
I batteri corineformi sono rappresentati da bastoncini Gram-positivi che non formano spore. Batteri aerobici corineformi del genere Corinebatterio si trova nelle pieghe della pelle: ascelle, perineo. Altri batteri corineformi aerobi sono rappresentati dal genere Brevibatterio. Si trovano più spesso sulla pianta dei piedi. I batteri corineformi anaerobici sono rappresentati principalmente dalla specie Propionibacterium acnes - sulle ali del naso, testa, schiena (ghiandole sebacee). Sullo sfondo dei cambiamenti ormonali, svolgono un ruolo significativo nell'insorgenza della giovinezza acne vulgaris.
Microflora delle prime vie respiratorie. Le particelle di polvere cariche di microrganismi entrano nel tratto respiratorio superiore -
mi, la maggior parte dei quali ritarda e muore nel rinofaringe e nell'orofaringe. Qui crescono batterioidi, batteri corineformi, Haemophilus influenzae, lattobacilli, stafilococchi, streptococchi, Neisseria, peptococchi, peptostreptococchi, ecc .. Sulle mucose delle vie respiratorie, la maggior parte dei microrganismi dal rinofaringe all'epiglottide. Nelle fosse nasali la microflora è rappresentata dai corinebatteri, gli stafilococchi sono costantemente presenti (residenti S. epidermidis), esistono anche Neisseria, Haemophilus influenzae, non patogene.
Laringe, trachea, bronchi E alveoli solitamente sterile.
Tratto digerente. La composizione qualitativa e quantitativa delle varie parti del tubo digerente non è la stessa.
Bocca. Nella cavità orale vivono numerosi microrganismi. Ciò è facilitato dai resti di cibo in bocca, da una temperatura favorevole e da una reazione alcalina dell'ambiente. Ci sono 10-100 volte più anaerobi che aerobi. Qui vivono diversi batteri: batterioidi, prevotella, porphyromonas, bifidobatteri, eubatteri, fusobatteri, lattobacilli, attinomiceti, bastoncini emofilici, leptotrichia, neisseria, spirochete, streptococchi, stafilococchi, peptococchi, peptostreptococchi, voilonella, ecc. Gli anaerobi si trovano principalmente nel tasche di de sen e targhe. Sono rappresentati da generi Bacteroides, Porfiromo- noi, Fusobatterio e altri Sono rappresentati gli aerobi Micrococcus spp., Streptococcus spp. Esistono anche funghi del genere Candida e protozoi (Entamaeba gingivalis, Trichomonas tenax). I soci della normale microflora e i loro prodotti metabolici formano la placca.
I componenti antimicrobici della saliva, in particolare il lisozima, i peptidi antimicrobici, gli anticorpi (IgA secretorie), inibiscono l'adesione dei microbi estranei agli epiteliociti. D'altra parte, i batteri formano polisaccaridi: S.sanguis E S.mutans convertono il saccarosio in un polisaccaride extracellulare (glucani, destrani) coinvolto nell'adesione alla superficie dei denti. La colonizzazione da parte di una parte costante della microflora è facilitata dalla fibronectina, che riveste le cellule epiteliali delle mucose (vedi testo completo su dischetto).
Esofago praticamente non contiene microrganismi.
Stomaco. Nello stomaco, il numero di batteri non supera i 10 3 CFU per 1 ml. Si verifica la moltiplicazione dei microrganismi nello stomaco
lentamente a causa del pH acido dell’ambiente. I lattobacilli sono i più comuni, poiché sono stabili in un ambiente acido. Altri batteri Gram-positivi non sono rari: micrococchi, streptococchi, bifidobatteri.
Intestino tenue. Le parti prossimali dell'intestino tenue contengono un piccolo numero di microrganismi: non supera i 10 3 -10 5 CFU / ml. I più comuni sono i lattobacilli, gli streptococchi e gli attinomiceti. Ciò è apparentemente dovuto al basso pH dello stomaco, alla natura della normale attività motoria dell'intestino e alle proprietà antibatteriche della bile.
Nelle parti distali dell'intestino tenue il numero dei microrganismi aumenta, raggiungendo le 10 7 -10 8 CFU/g, mentre la composizione qualitativa è paragonabile a quella della microflora del colon.
Colon. Nelle sezioni distali del colon, il numero di microrganismi raggiunge 10 11 -10 12 CFU / g, e il numero di specie trovate raggiunge 500. I microrganismi predominanti sono anaerobi obbligati, il loro contenuto in questa sezione del tubo digerente supera quello di aerobi di 1000 volte.
La microflora obbligata è rappresentata principalmente da bifidobatteri, eubatteri, lattobacilli, batterioidi, fusobatteri, propionobatteri, peptostreptococchi, peptococchi, clostridi, voilonella. Tutti loro sono altamente sensibili all'azione dell'ossigeno.
I batteri aerobici e anaerobici facoltativi sono rappresentati da enterobatteri, enterococchi e stafilococchi.
Nel tratto digestivo i microrganismi sono localizzati sulla superficie delle cellule epiteliali, nello strato profondo del gel mucoso delle cripte, nello spessore del gel mucoso che ricopre l'epitelio intestinale, nel lume intestinale e nel biofilm batterico.
Microflora del tratto gastrointestinale dei neonati.È noto che il tratto gastrointestinale di un neonato è sterile, ma dopo un giorno inizia a essere colonizzato da microrganismi che entrano nel corpo del bambino dalla madre, dal personale medico e dall'ambiente. La colonizzazione primaria dell'intestino del neonato prevede diverse fasi:
1a fase - 10-20 ore dopo la nascita - caratterizzata dall'assenza di microrganismi nell'intestino (asettico);
2a fase - 48 ore dopo la nascita - il numero totale di batteri raggiunge 10 9 o più in 1 g di feci. Questa fase
caratterizzato dalla colonizzazione dell'intestino con lattobacilli, enterobatteri, stafilococchi, enterococchi, seguiti da anaerobi (bifidobatteri e batterioidi). Questa fase non è ancora accompagnata dalla formazione di una flora permanente;
La terza fase - la stabilizzazione - avviene quando la bifidoflora diventa la flora principale del paesaggio microbico. Nella maggior parte dei neonati della prima settimana di vita non si verifica la formazione di una bifidoflora stabile. La predominanza dei bifidobatteri nell'intestino si osserva solo nel 9-10 giorno di vita.
I bambini del primo anno di vita sono caratterizzati da un'elevata popolazione e da una frequenza di rilevamento non solo di gruppi di batteri come bifidobatteri, enterococchi, Escherichia non patogeni, ma anche di batteri che di solito sono classificati come gruppi opportunistici. Tali gruppi di batteri sono clostridi lecitinasi positivi, stafilococchi coagulasi positivi, funghi del genere Candida enterobatteri che assimilano il citrato ed Escherichia con bassa attività biochimica, nonché con la capacità di produrre emolisine. Entro la fine del primo anno di vita si verifica l'eliminazione parziale o completa dei batteri opportunistici.
Caratteristiche dei principali rappresentanti della microflora intestinale Bifidobatteri- Bastoncini Gram-positivi, non sporigeni, anaerobi obbligati. Predominano nel colon fin dai primi giorni e per tutta la vita. I bifidobatteri secernono una grande quantità di prodotti acidi, batteriocine, lisozima, che consente loro di esibire attività antagonista contro i microrganismi patogeni, mantenere la resistenza alla colonizzazione e prevenire la traslocazione di microrganismi opportunistici.
lattobacilli- Bastoncini Gram-positivi non sporigeni, microarofili. Sono rappresentanti della microflora indigena del colon, della cavità orale e della vagina, hanno una spiccata capacità di aderire agli epiteliociti intestinali, fanno parte della flora della mucosa, partecipano alla creazione della resistenza alla colonizzazione, hanno proprietà immunomodulatorie e contribuiscono alla produzione di immunoglobuline secretrici.
La quantità dipende in gran parte dai prodotti a base di latte fermentato introdotti ed è 10 6 -10 8 per 1 g.
eubatteri- Bastoncini Gram-positivi non sporigeni, anaerobi stretti. Nei bambini allattati al seno, si verificano raramente. Sono coinvolti nella deconiugazione degli acidi biliari.
Clostridi - Bastoncini Gram-positivi, sporigeni, anaerobi stretti. I clostridi lecitinasi-negativi compaiono nei neonati già alla fine della 1a settimana di vita e la loro concentrazione raggiunge 10 6 -10 7 CFU / g. Clostridi lecitinasi-positivi (C perfrange) si verificano nel 15% dei bambini piccoli. Questi batteri scompaiono quando il bambino raggiunge l'età di 1,5-2 anni.
Batterioidi - Batteri anaerobi obbligati Gram-negativi, non sporigeni. I batterioidi appartenenti al gruppo predominano nell'intestino B. fragilis. Questo è prima di tutto B. thetaiotaomicron, B. vulgatus. Questi batteri diventano dominanti nell'intestino del bambino dopo 8-10 mesi di vita: il loro numero raggiunge i 10 10 CFU / g. Partecipano alla deconiugazione degli acidi biliari, hanno proprietà immunogeniche, elevata attività saccarolitica e sono in grado di scomporre i componenti alimentari contenenti carboidrati, producendo una grande quantità di energia.
I microrganismi anaerobici facoltativi sono rappresentati da Escherichia e alcuni altri enterobatteri, nonché da cocchi gram-positivi (stafilococchi, streptococchi ed enterococchi) e funghi del genere Candida.
Escherichia- bastoncini Gram-negativi, compaiono nei primi giorni di vita e persistono per tutta la vita nella quantità di 10 7 -10 8 CFU / g. L'Escherichia, caratterizzato da ridotte proprietà enzimatiche, nonché dalla capacità di produrre emolisina, come altri batteri (Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Proteus, ecc.), costituisce una parte significativa della composizione sia qualitativa che quantitativa degli enterobatteri nei bambini di il primo anno di vita, ma successivamente, entro la fine del primo anno di vita, con la maturazione del sistema immunitario del bambino, si verifica l'eliminazione parziale o completa dei batteri opportunisti.
Stafilococchi- Cocchi Gram-positivi, stafilococchi coagulasi-negativi colonizzano l'intestino di un bambino fin dai primi giorni di vita. Coagulasi positiva (S.aureus) attualmente
tempo si riscontrano in oltre il 50% dei bambini di età compresa tra 6 mesi e dopo 1,5-2 anni. La fonte della colonizzazione dei bambini da parte dei batteri della specie S.aureusè la flora della pelle delle persone che circondano il bambino.
streptococchi E enterococchi- Cocchi Gram-positivi. Abitano nell'intestino fin dai primi giorni di vita, la quantità è abbastanza stabile per tutta la vita - 10 6 -10 7 CFU / g. Partecipare alla creazione della resistenza alla colonizzazione intestinale.
Funghi del genere Candida - microflora transitoria. Raramente osservato nei bambini sani.
Microflora delle vie urinarie. I reni, gli ureteri e la vescica sono generalmente sterili.
Nell'uretra si trovano batteri corineformi, Staphylococcus epidermidis e micobatteri saprofiti (M. smegmatis), anaerobi non clostridiali (prevotella, porphyromonas), enterococchi.
I principali rappresentanti della microflora vaginale nelle donne in età riproduttiva sono i lattobacilli, il loro numero raggiunge 10 7 -10 8 in 1 ml di secrezioni vaginali. La colonizzazione della vagina da parte dei lattobacilli è dovuta agli alti livelli di estrogeni nelle donne in età fertile. Gli estrogeni inducono l'accumulo di glicogeno nell'epitelio vaginale, che è un substrato per i lattobacilli, e stimolano la formazione di recettori per i lattobacilli sulle cellule dell'epitelio vaginale. I lattobacilli scompongono il glicogeno per formare acido lattico, che mantiene un pH vaginale basso (4,4-4,6) ed è il meccanismo di controllo più importante che impedisce ai batteri patogeni di colonizzare questa nicchia ecologica. La produzione di perossido di idrogeno, lisozima, lattacine contribuisce al mantenimento della resistenza alla colonizzazione.
La normale microflora vaginale comprende bifidobatteri (rari), peptostreptococchi, propionibatteri, prevotella, batterioidi, porfiromonas, batteri corineformi, stafilococchi coagulasi negativi. I microrganismi predominanti sono batteri anaerobici, il rapporto anaerobi/aerobi è 10/1. Circa il 50% delle donne sane sessualmente attive ne soffre Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, e il 5% ha batteri del genere Mobilunco.
La composizione della microflora vaginale è influenzata dalla gravidanza, dal parto, dall'età. Durante la gravidanza il numero dei lattobacilli aumenta e raggiunge il massimo nel terzo trimestre di gravidanza.
i cambiamenti. La predominanza dei lattobacilli nelle donne in gravidanza riduce il rischio di colonizzazione patologica durante il passaggio attraverso il canale del parto.
Il parto porta a cambiamenti drammatici nella composizione della microflora vaginale. Il numero di lattobacilli diminuisce e il numero di batterioidi, Escherichia, aumenta notevolmente. Queste violazioni della microbiocenosi sono transitorie e entro la sesta settimana dalla nascita la composizione della microflora ritorna alla normalità.
Dopo l'inizio della menopausa, i livelli di estrogeni e glicogeno nel tratto genitale diminuiscono, il numero di lattobacilli diminuisce, predominano i batteri anaerobici e il pH diventa neutro. La cavità uterina è normalmente sterile.
Disbatteriosi
Si tratta di una sindrome clinica e di laboratorio che si manifesta in una serie di malattie e situazioni cliniche, caratterizzata da un cambiamento nella composizione qualitativa e quantitativa della normoflora di un determinato biotopo, nonché dalla traslocazione di alcuni dei suoi rappresentanti in insoliti biotopi con conseguenti disturbi metabolici e immunitari. Con i disturbi disbiotici, di norma, si osserva una diminuzione della resistenza alla colonizzazione, la soppressione delle funzioni del sistema immunitario e una maggiore suscettibilità alle malattie infettive. Cause che portano alla comparsa di disbatteriosi:
Antibiotico a lungo termine, chemioterapia o terapia ormonale. Molto spesso, i disturbi disbiotici si verificano quando si utilizzano farmaci antibatterici appartenenti al gruppo delle aminopenicilline [ampicillina, amoxicillina, lincosamine (clindamicina e lincomicina)]. In questo caso, la complicanza più grave dovrebbe essere considerata la comparsa di colite pseudomembranosa associata Clostridium difficile.
Esposizione a radiazioni γ forti (radioterapia, irradiazione).
Malattie del tratto gastrointestinale di eziologia infettiva e non infettiva (dissenteria, salmonellosi, malattie oncologiche).
Situazioni stressanti ed estreme.
Degenza prolungata (infezione da ceppi ospedalieri), in spazi confinati (stazioni spaziali, sottomarini).
Durante l'esame batteriologico viene registrata una diminuzione del numero o della scomparsa di uno o più tipi di microrganismi - rappresentanti della microflora indigena, principalmente bifidobatteri, lattobacilli. Allo stesso tempo aumenta il numero di microrganismi condizionatamente patogeni che appartengono alla microflora facoltativa (enterobatteri che assimilano il citrato, protee), mentre possono diffondersi oltre i loro biotopi caratteristici.
Esistono diversi stadi della disbatteriosi.
Stadio I compensato - fase latente (subclinica). Si osserva una diminuzione del numero di uno dei rappresentanti della microflora indigena senza modificare gli altri componenti della biocenosi. Clinicamente non è mostrato - la forma risarcita di una disbatteriosi. Con questa forma di disbatteriosi si raccomanda una dieta.
II stadio - forma subcompensata di disbatteriosi. Si osserva una diminuzione del numero o l'eliminazione dei singoli rappresentanti della microflora indigena e un aumento del contenuto della microflora opportunistica transitoria. La forma subcompensata è caratterizzata da disfunzione intestinale e processi infiammatori locali, enteriti, stomatiti. Con questa forma si consiglia una dieta, un'alimentazione funzionale e, per la correzione, pre e probiotici.
Stadio III - scompensato. Le principali tendenze nel cambiamento della microflora aumentano, i microrganismi opportunisti diventano dominanti e i singoli rappresentanti si diffondono oltre il biotopo e compaiono in cavità, organi e tessuti in cui di solito non si trovano, ad esempio Escherichia coli nei dotti biliari Candida nelle urine. Una forma scompensata di disbatteriosi si sviluppa fino a forme settiche gravi. Per correggere questa fase, è spesso necessario ricorrere alla cosiddetta decontaminazione selettiva - la nomina di farmaci antibatterici del gruppo dei fluorochinoloni, monobattami, aminoglicosidi per os seguita da una correzione a lungo termine della microflora con l'aiuto di nutrizione dietetica, pre e probiotici.
Esistono diversi approcci alla correzione dei disturbi disbiotici:
Eliminazione della causa che ha causato cambiamenti nella microflora intestinale;
Correzione della dieta (uso di prodotti a base di latte fermentato, alimenti di origine vegetale, integratori alimentari, nutrizione funzionale);
Ripristino della normale microflora con l'aiuto della decontaminazione selettiva - la nomina di pro, pre e simbiotici.
Probiotici- I microrganismi vivi (batteri lattici, talvolta lieviti), che appartengono agli abitanti dell'intestino di una persona sana, hanno un effetto positivo sulle reazioni fisiologiche, biochimiche e immunitarie del corpo, attraverso l'ottimizzazione della microflora ospite. I seguenti gruppi di probiotici sono registrati e ampiamente utilizzati nella Federazione Russa.
Farmaci contenenti bifidi. Il loro principio attivo sono i bifidobatteri vivi, che presentano un'elevata attività antagonista contro un'ampia gamma di batteri patogeni e opportunisti. Questi farmaci aumentano la resistenza alla colonizzazione, normalizzano la microflora intestinale. Per esempio, bifidumbatterina, che contiene bifidobatteri vivi liofilizzati - B. bifido.
preparati lattici. Il principio attivo di questi farmaci sono i lattobacilli vivi, che possiedono un ampio spettro di attività antagonista contro batteri patogeni ed opportunisti, dovuta alla produzione di acidi organici, acqua ossigenata, lisozima; ad esempio, la droga acilatto, contenente 3 ceppi L. acidophilus.
preparati per le coliche, Per esempio colibatterina. Esistono anche preparati policomponenti: bifikol (contiene bifidobatteri e Escherichia coli; linex contenente B. infantis, L. acidophilus, E. faecium.
Prebiotici - preparati di origine non microbica che non possono essere assorbiti nelle sezioni superiori del tratto digestivo. Sono in grado di stimolare la crescita e l'attività metabolica della normale microflora intestinale. Molto spesso, le sostanze che costituiscono la base del prebiotico sono carboidrati a basso peso molecolare (oligosaccaridi, fruttooligosaccaridi) contenuti nel latte materno e in alcuni alimenti.
Sinbiotici - combinazione di probiotici e prebiotici. Queste sostanze stimolano selettivamente la crescita e l'attività metabolica della microflora indigena. Ad esempio, il preparato Biovestinlacto contiene fattori bifidogenici e biomassa B. bifidum, L. adolescentis, L. plantarum.
Nelle gravi violazioni della microbiocenosi viene utilizzata la decontaminazione selettiva. I farmaci di scelta in questo caso possono essere farmaci antibatterici, il cui uso non viola la resistenza alla colonizzazione: fluorochinoloni, azrenam, aminoglicosidi per via orale.
4.3. Distruzione dei microbi nell'ambiente4.3.1. Disinfezione
Disinfezione (dal lat. infezione- infezione e francese. prefisso negativo des)- una serie di misure per distruggere nell'ambiente esterno non tutti, ma solo alcuni agenti patogeni di malattie infettive. Esistono metodi di disinfezione meccanici, fisici e chimici.
metodo meccanico consiste nell'eliminare i microrganismi senza che essi muoiano mediante scuotimento, espulsione, pulizia a umido e ventilazione degli ambienti, ecc. Non consente di ottenere una disinfezione completa degli oggetti trattati, tuttavia porta ad una significativa diminuzione del numero di microrganismi patogeni nell'ambiente esterno. Il metodo meccanico prevede anche l'utilizzo di filtri a membrana (vedi paragrafo 4.3.2).
metodo fisico comporta l'impatto sui microrganismi degli agenti fisici: alta temperatura, radiazioni UV.
Bollente utilizzato per disinfettare strumenti chirurgici, aghi, tubi di gomma. Tuttavia, anche la bollitura per 30 minuti in appositi sterilizzatori non distrugge le spore e alcuni virus.
Pastorizzazione - si tratta della disinfezione di molti prodotti alimentari (vino, birra, succhi), ottenendo solo una sterilità parziale; le spore di microrganismi e numerosi virus non vengono distrutti.
raggi UV utilizzato per la disinfezione dell'aria in laboratori microbiologici, box, sale operatorie. Viene effettuato, di regola, con lampade battericide al mercurio di varia potenza.
porcile (BUV-15, BUV-30, ecc.) con una lunghezza d'onda di 253-265 nm. Attualmente sono ampiamente utilizzate le lampade allo xeno pulsate, che differiscono da quelle al mercurio in quanto quando vengono distrutte, i vapori di mercurio non entrano nell'ambiente.
Nella pratica microbiologica, i metodi sono stati ampiamente utilizzati disinfezione chimica sul posto di lavoro, materiale esaurito patologico, pipette graduate e Pasteur, spatole di vetro, bicchieri.
composti alogenati. Le sostanze contenenti cloro, come gli ipocloriti (sali di sodio o di potassio dell'acido ipocloroso), i composti organici del cloro (cloramina, acido diclorizocianurico), il cloroformio e altri, hanno un pronunciato effetto antimicrobico sulla maggior parte dei batteri, virus e protozoi. L'effetto antimicrobico delle soluzioni di sostanze contenenti cloro è associato alla presenza di cloro attivo, che interagisce con le proteine microbiche, causandone il danno. La candeggina viene solitamente utilizzata solo per la disinfezione, la cloramina B sotto forma di soluzione all'1-3% viene utilizzata per la disinfezione e soluzioni più deboli vengono utilizzate come agente antisettico: soluzioni allo 0,25-0,5% per il trattamento delle mani del personale medico, 1,5- Soluzioni al 2% per lavare le ferite infette.
Ossidanti. Il meccanismo dell'azione antimicrobica degli agenti ossidanti è associato al rilascio di ossigeno atomico, che ha un forte effetto dannoso sui microrganismi. Il perossido di idrogeno (soluzione al 3%) ha un effetto antimicrobico relativamente debole e viene utilizzato nella pratica chirurgica per trattare le ferite infette come antisettico. A concentrazioni più elevate, il perossido di idrogeno distrugge quasi tutti i microrganismi e virus e può essere utilizzato per la sterilizzazione chimica.
Tensioattivi (tensioattivi) - cationici, anionici e anfoliti, il loro effetto antimicrobico è associato ad un cambiamento nella permeabilità della membrana citoplasmatica e ad uno squilibrio osmotico. I tensioattivi hanno un'attività pronunciata contro batteri, funghi, virus e alcuni protozoi.
Le sostanze cationiche hanno la più alta attività antimicrobica, di cui sono ampiamente utilizzati i composti di ammonio quaternario (cetrimide, cetilpiridinio cloruro).
e così via.). Trovano largo impiego come antisettici (per il trattamento delle mani del chirurgo e del campo operatorio, ecc.) e disinfettanti (per il trattamento degli ambienti e degli oggetti per la cura del paziente, ecc.).
Alcoli. Gli alcoli alifatici (etanolo e isopropanolo) sono spesso utilizzati in medicina come agente antisettico (alcool al 70% per il trattamento delle mani del chirurgo, alcol al 90-95% per la disinfezione degli strumenti chirurgici). Gli alcoli causano la coagulazione delle proteine delle cellule microbiche, tuttavia funghi, virus e spore batteriche sono altamente resistenti agli alcoli.
Aldeidi caratterizzato da proprietà disinfettanti, antisettiche e chemioterapiche. Il meccanismo dell'azione battericida è associato all'alchilazione dei gruppi proteici amino-, sulfidrilici e carbossilici. La formalina (soluzione acquosa di formaldeide al 40%) viene utilizzata per trattare le mani e sterilizzare gli strumenti (soluzioni allo 0,5-1%), nonché per disinfettare la biancheria, i vestiti e soprattutto le scarpe.
Fenoli. Il meccanismo della loro attività antimicrobica è associato alla denaturazione delle proteine della parete cellulare. Uno dei farmaci più conosciuti di questo gruppo è l'acido fenico (attualmente usato molto raramente). Quando si valuta l'attività antimicrobica di nuovi antisettici e disinfettanti, si utilizza il fenolo come riferimento (coefficiente di fenolo). Viene utilizzato sotto forma di miscela di sapone e fenico al 2-5% per la disinfezione di indumenti, secrezioni e articoli per la cura del paziente. Anche gli esteri dell'acido p-idrossibenzoico (parabeni) sono ampiamente utilizzati per la conservazione.
Quando si testa l'attività antimicrobica di disinfettanti e antisettici, vengono utilizzate colture di test standard di microrganismi (Staphylococcus aureus, E. coli, bacilli, micobatteri, funghi trichophyton e candida). Per determinare l'attività virucida, vengono utilizzati virus di prova dell'epatite A e della poliomielite.
4.3.2. Sterilizzazione
Sterilizzazione (dal lat. sterile- sterile) - liberazione da tutti gli esseri viventi, completa distruzione di tutti i microrganismi e delle loro spore nei materiali. Distinguere i metodi fisici, chimici e meccanici di sterilizzazione.
mediante calcinazione strumenti metallici, anse batteriologiche, aghi, pinzette, vetrini vengono sterilizzati sulla fiamma di una lampada ad alcool.
Sterilizzazione a calore secco viene utilizzato per la deposizione di vetreria, provette, beute, piastre Petri e pipette. A questo scopo vengono utilizzati forni a calore secco (forni Pasteur), in cui l'effetto desiderato si ottiene ad una temperatura di 160°C per 2 ore o ad una temperatura superiore a 170°C per 40 minuti.
I principali vantaggi del calore secco sono che non corrode i metalli e gli utensili, non danneggia le superfici vetrate; è adatto alla sterilizzazione di polveri e sostanze viscose non volatili esenti da acqua. Gli svantaggi di questo metodo includono il lento trasferimento di calore e la durata della sterilizzazione; quando si utilizza il calore secco, temperature più elevate (superiori a 170°C) possono influire negativamente su alcuni metalli e causare la carbonizzazione e l'accensione dei tamponi di cotone e della carta.
Se trattati con calore secco, i microrganismi muoiono a causa dell'ossidazione dei componenti intracellulari. Le spore batteriche sono più resistenti al calore secco rispetto alle cellule vegetative.
Sterilizzazione a pressione di vapore- uno dei metodi più efficaci basato sul forte effetto idrolizzante del vapore saturo. Il vapore sotto pressione sterilizza vari mezzi nutritivi (eccetto quelli contenenti proteine native), liquidi, elettrodomestici, oggetti in gomma, vetreria con tappi di gomma. A questo scopo vengono utilizzate sterilizzatrici a vapore (autoclavi) con caldaia verticale o orizzontale.
La maggior parte degli sterilizzatori a vapore sono gravitazionali: il vapore si muove dall'alto verso il basso sotto l'influenza della differenza di densità del vapore e dell'aria.
I terreni nutritivi, le medicazioni e la biancheria intima vengono sterilizzati a 1 atm per 15 minuti, i terreni nutritivi con carboidrati a 0,5 atm per 15 minuti, il materiale patogeno viene disinfettato a 1,5-2 atm.
Il controllo della modalità di sterilizzazione viene effettuato con l'ausilio di test chimici termici e biotest artificiali. I test chimici termici sono sostanze che cambiano colore o stato fisico durante la sterilizzazione e hanno diversi punti di fusione.
Il controllo batteriologico del regime di sterilizzazione consiste nell'applicare strisce con spore di uno o due tipi di batteri, con spore di un numero noto, con spore e una certa quantità di terreno di coltura, sospensioni di spore, ecc.
Sterilizzazione a vapore(sterilizzazione frazionata) è la decontaminazione di oggetti che vengono distrutti a temperature superiori a 100 ° C (mezzi nutritivi con sali di ammonio, latte, gelatina, patate, alcuni carboidrati). La defertilizzazione viene effettuata in uno sterilizzatore a vapore con valvola di scarico aperta e coperchio svitato o in un apparecchio Koch per 15-30 minuti per 3 giorni consecutivi. Durante la prima sterilizzazione, le forme vegetative dei microbi muoiono, mentre alcune spore rimangono e germinano in individui vegetativi durante la conservazione dei mezzi nutritivi a temperatura ambiente. La successiva sterilizzazione garantisce una decontaminazione sufficientemente affidabile dell'oggetto.
Tindalizzazione - si tratta della sterilizzazione di materiali facilmente distrutti dalle alte temperature (sieri, vitamine); la sterilità si ottiene riscaldando ripetutamente l'oggetto a 60 °C per 1 ora al giorno per 5-6 giorni consecutivi.
Sterilizzazione per radiazioni effettuato con l'aiuto della radiazione γ o con l'aiuto di elettroni accelerati, sotto l'influenza dei quali gli acidi nucleici vengono danneggiati. Viene effettuato in condizioni industriali per la sterilizzazione di strumenti monouso e biancheria intima, medicinali.
Sterilizzazione chimica prevede l'utilizzo di gas tossici: ossido di etilene, una miscela di OB (una miscela di ossido di etilene e bromuro di metile in rapporto in peso di 1:2,5) e formaldeide. La glutaraldeide dopo l'attivazione con sistemi tampone viene utilizzata per la sterilizzazione chimica di quei materiali che non possono essere sterilizzati con altri metodi. Queste sostanze sono agenti alchilanti capaci di inattivare i gruppi attivi negli enzimi, DNA, RNA, portando alla morte dei microbi. La sterilizzazione mediante gas viene effettuata in camere speciali. Viene utilizzato per la sterilizzazione di prodotti realizzati con materiali termolabili dotati di dispositivi ottici. Il metodo non è sicuro per le persone e per l'ambiente poiché gli agenti sterilizzanti rimangono sull'oggetto da sterilizzare.
Metodi meccanici di sterilizzazione. La filtrazione viene utilizzata nei casi in cui la temperatura elevata può influire notevolmente sulla qualità dei materiali sterilizzati (terreni nutritivi, sieri, antibiotici), nonché per purificare le tossine batteriche, i fagi e vari prodotti di scarto batterici. Come processo finale, è meno affidabile della sterilizzazione a vapore a causa della maggiore probabilità che i microrganismi passino attraverso i filtri.
I filtri intrappolano i microrganismi grazie alla struttura dei pori del loro materiale. Esistono due tipi principali di filtri: di profondità e a membrana.
I filtri di profondità sono costituiti da materiali fibrosi o granulari che vengono pressati, arrotolati o raggruppati in un labirinto di canali di flusso. Le particelle vengono trattenute al loro interno a causa dell'adsorbimento e della cattura meccanica nel materiale filtrante. I filtri a membrana hanno una struttura continua, sono ottenuti dalla nitrocellulosa e la cattura delle particelle da parte loro è determinata principalmente dalla dimensione dei pori. Trasmettono virus e micoplasmi, quindi la filtrazione attraverso filtri a membrana è classificata come metodo di disinfezione meccanica.
4.3.3. Asettico e antisettico
L'asepsi, il cui fondatore è D. Lister (1867), è un insieme di misure volte a impedire all'agente patogeno di entrare nella ferita, negli organi del paziente durante operazioni, procedure mediche e diagnostiche. L'asepsi viene utilizzata per combattere le infezioni esogene, le cui fonti sono pazienti e portatori di batteri. L'asepsi comprende la sterilizzazione e la conservazione della sterilità degli strumenti, delle medicazioni, della biancheria chirurgica, dei guanti e di tutto ciò che viene a contatto con la ferita, nonché la disinfezione delle mani del chirurgo, del campo operatorio, delle attrezzature, della sala operatoria e degli altri locali, l'uso di tute speciali, maschere. Le misure asettiche comprendono anche la disposizione delle sale operatorie, i sistemi di ventilazione e condizionamento dell'aria. I metodi di asepsi sono utilizzati anche nelle industrie farmaceutiche e microbiologiche, nell'industria alimentare.
Antisettici: un insieme di misure volte alla distruzione dei microbi in una ferita, in un focolaio patologico o in un organismo in
in generale, per prevenire o eliminare il processo infiammatorio. I primi elementi antisettici furono proposti da I. Semmelweins nel 1847.
Gli antisettici vengono effettuati mediante metodi meccanici (rimozione dei tessuti necrotici), fisici (drenaggio delle ferite, introduzione di tamponi, introduzione di medicazioni igroscopiche), biologici (uso di enzimi proteolitici per la lisi di cellule non vitali, uso di batteriofagi e antibiotici) e chimici (uso di antisettici).
Antisettici uccidere o inibire la crescita di microrganismi a contatto con la superficie della pelle, delle mucose e dei tessuti a contatto con esse (ferite, cavità corporee). Queste sostanze dovrebbero essere caratterizzate da un pronunciato effetto antimicrobico, ma non dovrebbero avere proprietà tossiche per il macroorganismo (non dovrebbero causare danni e irritazioni significative ai tessuti, non dovrebbero ritardare i processi rigenerativi, ecc.).
La divisione degli agenti antimicrobici in antisettici e disinfettanti è in gran parte arbitraria. Pertanto, alcuni antisettici (acqua ossigenata, ecc.) in concentrazioni più elevate possono essere utilizzati per disinfettare ambienti, biancheria, stoviglie, ecc. Allo stesso tempo, alcuni disinfettanti (cloramina, ecc.) vengono utilizzati a basse concentrazioni per l'irrigazione e il lavaggio di ferite, trattamento delle mani dei chirurghi, ecc. I seguenti gruppi di composti sono usati come antisettici.
Composti contenenti iodio hanno un ampio spettro di attività antimicrobica. Causano la coagulazione delle proteine dei microrganismi e sono usati solo come antisettici. Una soluzione alcolica di iodio (3-5%) viene utilizzata per trattare il campo chirurgico, piccoli tagli e abrasioni, la soluzione di Lugol viene utilizzata per trattare le mucose della laringe e della faringe. Negli ultimi anni nella pratica medica si sono diffusi composti complessi di iodio con tensioattivi ad alto peso molecolare (iodofori), che sono caratterizzati da un'elevata attività battericida e sporicida, non hanno proprietà coloranti, si dissolvono bene in acqua, non irritano la pelle e non provocano reazioni allergiche (iodinolo, iodonato, iodovidone). Questi preparati sono ampiamente utilizzati per il trattamento del campo chirurgico, il trattamento di ferite purulente, ulcere trofiche, ustioni, ecc.
Alcoli. Come antisettico, l'alcol al 70% viene utilizzato per trattare le mani del chirurgo.
Permanganato di Potassio(soluzioni allo 0,04-0,5%) vengono utilizzate per il risciacquo, il lavaggio e le lavande nelle malattie infiammatorie delle prime vie respiratorie, nella pratica urologica e ginecologica.
Coloranti. Questo gruppo comprende i derivati del trifenilmetano (verde brillante, blu di metilene, ecc.) e i coloranti acridinici (proflavina, aminoacrina). Sono usati principalmente come antisettici. Quindi, ad esempio, il verde brillante viene utilizzato per trattare la pelle con lievi ferite, tagli e piodermite, il blu di metilene viene utilizzato per trattare la cistite e l'uretrite.
Acidi, alcali E eteri. L'azione dei farmaci di questo gruppo è associata a un brusco cambiamento nel pH del mezzo, che ha un effetto negativo sulla maggior parte dei microrganismi. Molto spesso viene utilizzato l'acido borico (per sciacquare la bocca e la gola, lavare gli occhi), l'acido acetico (ha una buona attività contro i batteri gram-negativi, in particolare gli pseudomonadi), l'acido benzoico (è caratterizzato da un effetto antibatterico e fungicida) e acidi dell'acido salicilico (è utilizzato nella clinica delle malattie della pelle per il trattamento della dermatomicosi). Tra gli alcali, il più utilizzato è una soluzione di ammoniaca allo 0,5% utilizzata per trattare le mani del chirurgo.
Fenolo e le sostanze ad esso vicine fanno parte del catrame di betulla e dell'ittiolo, prescritte per il trattamento di ferite infette, piaghe da decubito, ustioni. I derivati del fenolo (resorcinolo, clorofene, triclosan, timolo, salolo) sono utilizzati sotto forma di unguenti, soluzioni acquose e alcoliche nel trattamento di malattie infettive e infiammatorie in dermatologia e chirurgia.
Esammina (metenamina) si divide nell'ambiente acido del fuoco dell'infiammazione con il rilascio di formaldeide. Questo farmaco viene utilizzato per via orale e per via endovenosa per il trattamento di malattie delle vie urinarie, colecistite, meningite. Al gruppo aldeidi sono anche lisoforma(per le lavande nella pratica ginecologica), ciminale(per il trattamento di ulcere trofiche, ustioni, piodermite), cimizolo(per il trattamento di ferite purulente e piaghe da decubito) e cipidolo(per il trattamento dell'uretra dopo rapporti sessuali occasionali).
Composti di metalli pesanti. I metalli pesanti causano la coagulazione delle proteine delle cellule microbiche. A causa dell'accumulo nel corpo, questi composti sono usati raramente nella pratica medica. I composti del mercurio (tiomersale, sali di fenilmercurio) sono prescritti per la blefarite e la congiuntivite; nitrato d'argento - con tracoma; protargol e collargol - per congiuntivite, cistite, uretrite e per il trattamento delle ferite purulente; ossido di zinco, cerotto di piombo, xeroformio - come agenti antisettici per malattie infiammatorie della pelle. Il sublimato a causa dell'elevata tossicità non è attualmente utilizzato per il trattamento dei pazienti.
4.4. Microbiologia sanitaria
Per sviluppare misure rispettose dell'ambiente per proteggere l'ambiente dalla contaminazione biologica da parte di microrganismi patogeni, nonché per studiare l'influenza della microflora dell'ambiente esterno sulla salute umana, è stata creata una disciplina medica e biologica indipendente: la microbiologia sanitaria.
La microbiologia sanitaria è una scienza che studia la microflora (microbiota) dell'ambiente e i suoi effetti dannosi sul corpo umano.
I compiti principali della microbiologia sanitaria
Valutazione igienica ed epidemiologica degli oggetti ambientali secondo indicatori microbiologici.
Sviluppo di standard che determinano la conformità della microflora degli oggetti studiati ai requisiti igienici.
Sviluppo ed esame di metodi per studi microbiologici e virologici di vari oggetti ambientali al fine di valutarne lo stato sanitario e igienico.
Lo studio dei modelli di attività vitale della microflora dell'ambiente sia nell'ecosistema stesso che nei rapporti con l'uomo.
Gli oggetti della ricerca sanitaria e microbiologica sono l'acqua, l'aria, il suolo e altri oggetti ambientali, nonché prodotti alimentari, attrezzature per la ristorazione, ecc.
La microbiologia sanitaria dispone di due metodi con i quali è possibile determinare lo stato sanitario ed epidemico dell'ambiente esterno:
Rilevazione diretta di microrganismi patogeni nell'ambiente esterno;
Indicazione indiretta della loro eventuale presenza nell'ambiente esterno.
Il metodo diretto è più affidabile, ma laborioso e non abbastanza sensibile. Le difficoltà nell'isolare i microrganismi patogeni dall'ambiente esterno sono dovute alla loro bassa concentrazione, distribuzione non uniforme, competizione tra microrganismi patogeni e microflora saprofita. Di grande importanza è la variabilità dell'agente patogeno nell'ambiente esterno. Pertanto, l'isolamento diretto dei microrganismi patogeni viene effettuato solo secondo indicazioni epidemiologiche.
Il secondo metodo (indicazione indiretta) è più semplice e accessibile. Ha due indicatori: criteri che consentono di determinare la situazione sanitaria ed epidemica. Questi includono il numero microbico totale e la concentrazione di microrganismi indicativi dal punto di vista sanitario.
La conta microbica totale (TMC) è il numero di tutti i microrganismi presenti in 1 cm 3 (ml) o in 1 g di substrato. Ciò si basa sul presupposto che quanti più microrganismi si trovano nell’ambiente esterno, tanto maggiore è la probabilità che questo sia contaminato da microrganismi patogeni. MCH dà quindi un’idea della situazione epidemica.
Esistono tre metodi per determinare il TMF:
Metodo ottico per il conteggio diretto dei batteri al microscopio in una camera di Goryaev;
Metodo batteriologico (meno accurato);
Misurazione della biomassa.
Metodo ottico comunemente usato negli acquedotti per valutare l'efficienza degli impianti di trattamento delle acque reflue, ma non distingue tra batteri vivi e morti. Lo studio può essere eseguito entro 1 ora, quindi il metodo è indispensabile in situazioni di emergenza. Il metodo consente di giudicare l'autodepurazione dell'acqua. Nella fase iniziale del processo di autopurificazione, ci sono più batteri gram-negativi che gram-positivi e ci sono più forme a bastoncino che cocchi. Nella fase finale, il rapporto è invertito.
metodo batteriologico identificare uno specifico gruppo fisiologico di batteri che crescono in determinate condizioni. Ad esempio, il rilevamento di forme vegetative di microrganismi in un prodotto alimentare che ha subito un trattamento termico indica una reinfezione del prodotto dopo il trattamento termico o l'inefficacia di quest'ultimo. La rilevazione delle spore conferma un trattamento termico soddisfacente.
La misurazione della biomassa può essere effettuata solo in laboratori specializzati pesando i resti della massa batterica, determinando gli indicatori del metabolismo cellulare, ecc. In pratica questo metodo non viene utilizzato.
Il criterio TMC è di grande importanza negli studi comparativi. In questi casi, un improvviso aumento del TMF indica la contaminazione microbica dell'oggetto (ad esempio, gli utensili da cucina della sala da pranzo).
Il termine “Microrganismi Indicativi Sanitari” (SPMO) si riferisce a quei microrganismi che abitano permanentemente le cavità naturali del corpo umano (animale) e vengono costantemente rilasciati nell’ambiente esterno.
Per riconoscere un batterio come SMPS è necessario soddisfare una serie di requisiti che questo microrganismo deve soddisfare.
Residenza permanente nelle cavità naturali dell'uomo e degli animali e costante rilascio nell'ambiente esterno.
Mancanza di riproduzione nell'ambiente esterno.
La durata di sopravvivenza e resistenza nell'ambiente esterno non è inferiore e nemmeno superiore a quella dei microrganismi patogeni.
L'assenza di gemelli con cui SPMO può essere confuso.
Variabilità relativamente bassa nell’ambiente esterno.
Disponibilità di metodi di indicazione facili da eseguire e allo stesso tempo affidabili.
Maggiore è la concentrazione di SPMO, maggiore è la probabilità della presenza di agenti patogeni. Il loro numero è espresso in crediti e indici.
Titolo - questa è la quantità minima di substrato (in cm 3 o g) in cui vengono ancora rilevati gli SPMO.
Indice- questa è la quantità di SPMO contenuta in 1 litro di acqua o 1 cm 3 di un altro substrato.
Il numero più probabile (MPN) indica la quantità di SPMO in 1 litro di acqua o in 1 g (cm3) di un altro substrato. Questo è un indicatore più accurato, poiché ha limiti di confidenza, entro i quali può fluttuare con una probabilità del 95%.
Caratteristiche generali dell'SPMO
Numerosi microrganismi sono stati proposti come SPMO e possono essere divisi in tre gruppi:
Indicatori di contaminazione fecale (rappresentanti della microflora intestinale umana e animale).
Indicatori di contaminazione aerea (commensali delle prime vie respiratorie).
Indicatori di processi di autodepurazione (abitanti dell'ambiente esterno).
Il primo gruppo di SPMO comprende:
Batteri del gruppo Escherichia coli (BGKP);
Enterococchi;
Clostridi solfito-riduttori;
Termofili, batteriofagi intestinali, salmonella;
Batterioidi, bifido e lattobacilli;
Pseudomonas aeruginosa;
Candida;
Acinetobacter.
Il secondo gruppo comprende streptococchi e stafilococchi. Le risposte dovrebbero indicare: è stato trovato stafilococco indicativo dal punto di vista sanitario.
Il terzo gruppo comprende:
proteoliti;
Ammonificatori e nitrificanti;
Aeromonosa e bdellovibrios;
microrganismi spore;
Funghi e attinomiceti;
Cellulosobatteri.
Gli attuali documenti normativi per il monitoraggio degli indicatori sanitari e batteriologici di acqua, cibo, suolo prevedono la contabilità del BGKP. Va notato che il concetto di BGKP è utilitaristico (sanitario-batteriologico ed ecologico), ma non tassonomico. Questo gruppo è rappresentato da microrganismi dei generi Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Serra-
tia, klebsiella, le cui caratteristiche ecologiche determinano il loro significato indicatore.
I BGKP sono bastoncini gram-negativi, corti che non formano spore, fermentano glucosio e lattosio con formazione di acido e gas a 37±0,5°C per 24-48 ore, senza attività ossidasica. Alcuni documenti ufficiali (su acqua, suolo, prodotti alimentari) hanno le proprie peculiarità nella formulazione del concetto di BGKP, che, tuttavia, non sono di fondamentale importanza.
Un altro indicatore sono i batteri coliformi totali (TCB): si tratta di bastoncini gram-negativi ossidasi-negativi che scompongono il lattosio su terreno Endo a 37 ° C per 48 ore.
Genere Escherichia, inclusa la visualizzazione del tipo Escherichia coli funge da indicatore di contaminazione fecale fresca, essendo una possibile causa di malattie di origine alimentare. Per l'identificazione vengono utilizzati test biochimici, tenendo conto della capacità di fermentare il lattosio a 44 ± 0,5 ° C e dell'assenza di crescita su terreni contenenti citrato. Nell'acqua vengono trattati come batteri coliformi termotolleranti, nei fanghi terapeutici come batteri coliformi fecali, nei prodotti alimentari come Escherichia coli.
Il significato eziologico dei batteri del genere Citrobacter dimostrato in epidemie, che si verificano come dispepsia, gastroenterocolite, intossicazione alimentare.
Le infezioni da intossicazione alimentare causate da questi microrganismi si verificano quando si mangiano cibi in cui gli agenti patogeni si sono moltiplicati per qualche tempo e si sono accumulati in quantità sufficientemente grandi. Le fonti di infezione sono solitamente portatori malati o batterici. Le malattie, di regola, si verificano dopo il consumo di cibi contaminati (carne, latticini).
Va notato che E. coli non è un SPMO ideale.
Svantaggi dell'Escherichia coli come SPMO:
L'abbondanza di analoghi nell'ambiente esterno.
Variabilità nell'ambiente esterno.
Resistenza insufficiente agli effetti avversi.
Sopravvivenza insufficientemente lunga nei prodotti rispetto a Shigella Sonne, Salmonella, Enterovirus.
La capacità di riprodursi in acqua.
Un indicatore confuso anche per la presenza di Salmonella.
Tutti questi fatti ci hanno costretto a cercare un sostituto per E. coli. Nel 1910 furono proposti gli enterococchi per il ruolo di SPMO (Enterococcus faecalis E Enterococcus faecium).
Benefici dell'Enterococcus come SPMO
Si trova costantemente nell'intestino umano e viene costantemente rilasciato nell'ambiente esterno. In cui E. faecalis Vive principalmente nell'intestino umano, quindi il suo rilevamento indica una contaminazione con feci umane. Meno comune negli esseri umani E. faecium. Quest'ultimo si trova principalmente nell'intestino degli animali, sebbene sia anche relativamente raro E. faecalis.
Non in grado di riprodursi nell'ambiente esterno. Si riproduce principalmente nell'ambiente E. faecium, ma ha un significato epidemiologico minore.
Non cambia le sue proprietà nell'ambiente esterno.
Non ha analoghi nell'ambiente esterno.
Resistente agli influssi ambientali avversi. L'Enterococco è 4 volte più resistente al cloro dell'Escherichia coli. Questo è il suo principale vantaggio. A causa di questa caratteristica, l'enterococco viene utilizzato per verificare la qualità della clorazione dell'acqua, nonché come indicatore della qualità della disinfezione. Resiste ad una temperatura di 60°C, che ne consente l'utilizzo come indicatore della qualità della pastorizzazione. Resistente alle comuni concentrazioni saline del 6,5-17%, può quindi essere utilizzato come indicatore nello studio di alimenti salati, acqua di mare, in cui l'E. coli muore o diventa atipico. Resistente al pH 3,0-12,0, il che lo rende un indicatore di contaminazione fecale durante l'esame di alimenti acidi.
Sono stati sviluppati terreni altamente selettivi per l'indicazione degli enterococchi.
Attualmente l'enterococcometria è legalizzata nello standard internazionale per l'acqua come indicatore di contaminazione fecale fresca. Quando nell'acqua vengono rinvenuti Escherichia coli atipici, la presenza di enterococchi diventa il principale indicatore di contaminazione fecale fresca. Attualmente legalizzato
enterococcometria del latte, cotolette per determinare l'efficacia del loro trattamento termico.
Per l'acqua in bacini aperti, viene determinato il rapporto FKP / FE, dove FKP è Escherichia coli fecale, FE è enterococchi fecali. Se il valore FCF/FE è ≥ 10 si sospetta lo scarico di acque reflue non clorurate nel serbatoio. Se l'indicatore è compreso tra 0,1 e 1, la clorazione delle acque reflue è sufficiente, poiché FE è 4 volte più resistente al cloro rispetto a E. coli.
Proteo. Ora è stato dimostrato che i batteri del genere Proteo si trovano nel 98% dei casi nelle secrezioni dell'intestino dell'uomo e degli animali, di cui nell'82% dei casi - P.mirabilis. Il rilevamento di proteo nell'acqua e nei prodotti indica la contaminazione di oggetti con substrati in decomposizione e indica problemi sanitari estremi. Se si trova una proteina nei prodotti alimentari, questi vengono rifiutati e l'acqua non può essere utilizzata per bere.
Clostridium perfringens. Il prossimo SPMO è C. perfrangens. Tuttavia, C. perfrangens poiché SPMO ha i suoi vantaggi e svantaggi:
Trovato in modo incoerente nell'intestino umano;
Permane a lungo nell'ambiente esterno per formazione di spore, quindi non è indice di contaminazione fecale fresca;
Questi batteri sono dannosi per la microflora che li accompagna;
Le spore sono resistenti a concentrazioni di cloro attivo pari a 1,2-1,7 mg/l di acqua;
C. perfrangens può servire come indicatore indiretto della presenza di enterovirus nell'acqua.
Affinché le spore di Clostridium possano germinare è necessario uno shock termico (riscaldamento a 75 °C per 15-20 minuti). Nel MUK 4.2.1018-01 sull'analisi sanitaria e microbiologica dell'acqua potabile è obbligatorio un campione della temperatura dell'acqua.
La determinazione del titolo di questo SPMO è raccomandata per l'attuale controllo sanitario dello stato del territorio. I test per il rilevamento dei clostridi solfito-riduttori nell'acqua prevedono gli standard di Russia, Romania e Stati Uniti. Definizione C. perfrangens effettuato nell'acqua di bacini aperti, suolo, fango terapeutico, prodotti a base di carne.
Termofili. Si tratta di un intero gruppo di SPMS, per lo più spore, che cresce a 55-60 °C. Vivono nell'ambiente esterno e sono un indicatore di inquinamento da letame e compost. Quando il letame o il compost marciscono, la temperatura sale sopra i 60°C e i termofili si moltiplicano rapidamente. Il grado di inquinamento è giudicato dal numero di termofili. In Russia, sono determinati nello studio del suolo e nel cibo in scatola come indicatore del trattamento termico, soprattutto se conservato in climi caldi.
Batteriofagi. Come SPMO vengono utilizzati batteriofagi di Escherichia coli - colifagi, fagi di Salmonella e Shigella. Si trovano dove ci sono batteri appropriati ai quali questi fagi si sono adattati. I fagi sopravvivono nell'ambiente esterno per più di 9 mesi.
I fagi sono preziosi come indicatori di contaminazione fecale, soprattutto da parte degli enterovirus, poiché vengono eliminati dalle acque reflue con la stessa frequenza degli enterovirus. In termini di resistenza al cloro, i fagi sono paragonabili agli enterovirus. Il rilevamento dei fagi con il metodo Gracia non è difficile, vengono calcolate le cosiddette unità formanti placca: PFU / cm 3, PFU / l.
In SanPiN 2.1.4.1074-01 “Acqua potabile. Requisiti igienici per la qualità dell'acqua dei sistemi centralizzati di approvvigionamento di acqua potabile. Controllo Qualità” ha introdotto la definizione di colifagi e stabilito standard.
Salmonella. Negli anni '30 del XX secolo, W. Wilson ed E. Blair proposero la salmonella come SPMO. La Salmonella, il microrganismo più comune che causa la malattia intestinale acuta (ACI), può fungere da indicatore di altri ACI con patogenesi ed epidemiologia simili. Entrano nell'ambiente esterno solo con le feci umane e animali. Si riproducono nel terreno in presenza di una grande quantità di sostanza organica al suo interno, ma possono moltiplicarsi anche in acque pulite. Quando si determina la Salmonella nell'acqua, è necessario calcolare non solo la percentuale di rilevamenti positivi, ma anche l'MPS. Questo indicatore può essere utilizzato per valutare la situazione epidemiologica.
Pseudomonas aeruginosa. Capace di riprodursi nell'ambiente. Si trova nelle feci delle persone sane nell'11%, negli animali nel 7% (cioè in modo intermittente). Le modalità di indicazione sono semplici, ma solo in relazione alle forme pigmentate, e nell'ambiente esterno prevalgono forme non pigmentate, difficilmente riconoscibili. Rileva-
riscontrabile nel 90% dei casi nelle acque reflue, nei reparti ospedalieri. La presenza di Pseudomonas aeruginosa indica una condizione sanitaria sfavorevole dell'istituto medico. Il suo ruolo è cresciuto a causa della diffusione di ceppi resistenti agli antibiotici e della comparsa di un gran numero di portatori sulla pelle e nelle urine.
Funghi del genere Candida. Sono costantemente presenti nel corpo umano: nelle feci nel 10-90% dei casi, nel muco delle prime vie respiratorie nel 15-50%, sulla pelle nell'1-100%. Si trovano ovunque siano presenti sostanze contenenti zucchero. Le fonti primarie in natura sono l'uomo e gli animali. Sono molto resistenti agli influssi ambientali avversi ancor più dei batteri patogeni. Possono essere utilizzati come indicatori dell'efficacia della decontaminazione.
È già stato menzionato sopra che i rappresentanti del secondo gruppo di SPMS sono determinati nell'aria, nei latticini e nell'acqua. Questi includono lo streptococco α-verde (S. salivario). Ha dei doppelganger come S. lactis, bovis, equinus, cremoris. Ma questi doppi si trovano raramente nelle zone residenziali. Gli enterococchi possono anche essere verdi, ma essi stessi sono SPMO. Un altro streptococco di interesse sanitario è lo streptococco β-emolitico, che si riscontra nell'80% delle persone, principalmente affette da malattie infiammatorie del tratto respiratorio superiore. Ha proprietà emolitiche.
Lo Staphylococcus aureus è anche un indicatore di problemi sanitari. È questo tipo di stafilococco che è associato alla presenza dell'uomo e di alcuni animali. In media, nelle persone sane, lo Staphylococcus aureus si trova nel 30% dei casi e nel personale medico fino al 96%. Questo tipo di stafilococco si distingue per la durata della sopravvivenza e la stabilità nell'ambiente esterno. Può essere un indicatore indiretto dell'inquinamento atmosferico da parte dei virus. L'uso dello Staphylococcus aureus come SPMO più informativo è raccomandato nello studio dell'aria negli alloggi, nei compartimenti abitativi di veicoli spaziali, sottomarini, istituzioni mediche.
Anche stafilococchi e micrococchi resistenti agli antibiotici vengono proposti per il ruolo di SPMO, un eccesso di 5-6 volte di questi SPMO nell'aria dei locali ospedalieri rispetto all'aria dei locali non ospedalieri dovrebbe essere valutato come un segno prognostico sfavorevole.
Bdellovibrios proposto come SPMO nel 1962. Si tratta di bastoncini aerobi gram-negativi, mobili, dotati di flagelli, di dimensioni 0,25-1,2 micron. Sono predatori di altri batteri e colpiscono solo i bastoncini gram-negativi. In uno dei poli del bdellovibrios è presente una cavità dove si accumulano l'esotossina e un enzima lipolitico, che dissolve la parete cellulare batterica. Si distinguono l'uno dall'altro per la loro attività litica: alcuni lisano solo pseudomonadi, mentre altri lisano solo aeromonadi. I Bdellovibrios vengono utilizzati per la depurazione biologica dell'acqua (rilasciati artificialmente nell'acqua delle piscine), vengono utilizzati anche come SPMO per l'inquinamento delle acque. Nei luoghi di scarico delle acque reflue, il numero di bdellovibrio raggiunge 3000 CFU / cm 3 e oltre lo scarico - 10 CFU / cm 3. I bdellovibrio vengono isolati secondo il metodo Grace, ma per allestire un campione è necessario disporre di un ceppo indicatore Escherichia coli K-12. Il loro numero è espresso in PFU/cm 3 .
Aeromonadi. Si trovano in grandi quantità nelle acque reflue e hanno un'elevata energia riproduttiva. Servono come indicatore del carico di acque reflue nel serbatoio e hanno la stessa importanza del TMC. Con un'alta concentrazione di aeromonadi nell'acqua, può verificarsi un'intossicazione alimentare.
4.4.1. Studio sanitario e microbiologico dell'acqua
Nell'acqua si formano alcune biocenosi con predominanza di microrganismi che si sono adattati alle condizioni del luogo, ad es. alle condizioni fisiche e chimiche, all'illuminazione, al grado di solubilità dell'ossigeno e dell'anidride carbonica, al contenuto di sostanze organiche e minerali, ecc. La microflora dell'acqua è un plancton microbico, che svolge il ruolo di fattore attivo nella sua autodepurazione dai rifiuti organici. L'utilizzo dei rifiuti organici è associato all'attività dei microrganismi che vivono permanentemente nell'acqua, ad es. costituiscono la microflora autoctona. Nei corpi d'acqua dolce sono presenti vari batteri: a forma di bastoncino (pseudomonas, aeromonadi, ecc.), Cocchi (micrococchi), contorti e filamentosi (attinomiceti). Sul fondo dei serbatoi, nel limo, aumenta il numero degli anaerobi. L'inquinamento dell'acqua da sostanze organiche si accompagna ad un aumento di batteri, funghi e protozoi. Appare altro
rappresentanti non permanenti (alloctoni) della microflora dell'acqua, che scompaiono nel processo di autodepurazione dell'acqua.
L’acqua è un fattore di trasmissione degli agenti patogeni di molte malattie infettive. Insieme alle acque piovane, di fusione e di scarico inquinate, i rappresentanti della normale microflora umana e animale (E. coli, citrobacter, enterobacter, enterococchi, clostridi) e gli agenti patogeni delle infezioni intestinali (febbre tifoide, paratifo, dissenteria, colera, leptospirosi, enterovirus infezioni) entrano in laghi e fiumi. , criptosporidiosi, ecc.). Alcuni agenti patogeni possono moltiplicarsi anche nell'acqua (Vibrio cholerae, legionella). L'acqua dei pozzi artesiani non contiene praticamente microrganismi, poiché questi ultimi vengono solitamente trattenuti dagli strati superiori del terreno.
L'acqua degli oceani e dei mari contiene anche vari microrganismi, tra cui archeobatteri, batteri luminosi e alofili (amanti del sale), come i vibrioni alofili, che infettano i molluschi e alcuni tipi di pesci che, se mangiati, sviluppano malattie di origine alimentare. Inoltre sono stati rilevati, ad esempio, numerosi nanobatteri sfingomonas, che passano attraverso un filtro con un diametro dei pori di 0,2 µm.
L'acqua è assolutamente necessaria per il normale funzionamento del corpo umano, degli animali e delle piante, poiché costituisce la base dell'ambiente interno della materia vivente. Tuttavia, è attraverso l’acqua che si possono trasmettere un’ampia varietà di malattie infettive. Quando si affronta la questione della fornitura di acqua di alta qualità alla popolazione, è necessario tenere conto della possibilità di una via di trasmissione dell'acqua rilevante per le infezioni, in particolare febbre tifoide (paratifo), dissenteria, colera, leptospirosi, tularemia, poliomielite, epatite virale A ed E. A seconda della destinazione, l'acqua può essere classificata in:
Acqua potabile della fornitura centralizzata di acqua potabile e economica;
Acqua proveniente da fonti sotterranee e superficiali di approvvigionamento idrico domestico centralizzato;
Acqua potabile decentralizzata (in caso di utilizzo di pozzi, pozzi artesiani e sorgenti);
Acqua dei corpi idrici nelle aree ricreative;
Acque di piscine con acqua dolce e marina;
Acque reflue domestiche dopo la disinfezione e la purificazione.
Per tutti i tipi di utilizzo dell'acqua esiste documentazione normativa e tecnica: standard statali (GOST), norme e regolamenti sanitari (SanPiN), linee guida (MUK), linee guida, lettere informative, ecc. La documentazione normativa e tecnica (NTD) comprende requisiti igienici, standard di qualità dell'acqua e metodi di ricerca.
Lo studio microbiologico sanitario dell'acqua comprende la determinazione sia dei microrganismi patogeni che dell'SPMO (che indica indirettamente la possibile presenza di microrganismi patogeni nell'acqua). La determinazione dei microrganismi patogeni viene effettuata secondo indicazioni epidemiologiche e, nel caso di studi sanitari e microbiologici pianificati sull'acqua proveniente da una fornitura centralizzata di acqua potabile domestica, l'analisi comprende, in conformità con i requisiti di SanPiN 2.1.4.1074-01, i seguenti indicatori (Tabella 4.1).
I colifagi vengono rilevati solo nei sistemi di approvvigionamento idrico da fonti superficiali prima che l'acqua venga immessa nella rete di distribuzione, lo stesso dicasi per la presenza di cisti di Giardia. Il contenuto di spore di clostridi solfito-riduttori viene determinato solo quando si valuta l'efficacia della tecnologia di trattamento dell'acqua. In caso di rilevamento di TKB, OKB, colifagi o almeno uno degli indicatori indicati, viene effettuato nuovamente uno studio di emergenza dell'acqua per TKB, OKB e colifagi. Parallelamente, nell'acqua viene analizzata la presenza di cloruri, azoto ammoniacale, nitrati e nitriti. Se nel campione prelevato vengono rilevati più di 2 TKB per 100 cm 3 e / o TKB e / o colifagi, viene effettuato uno studio sui batteri patogeni del gruppo intestinale e / o sugli enterovirus. La stessa ricerca
i test per gli enterobatteri e gli enterovirus patogeni vengono effettuati secondo le indicazioni epidemiologiche con decisione dei centri territoriali di Rospotrebnadzor.
Tabella 4.1. SPMO nell'acqua dell'utenza centralizzata e nella fornitura di acqua potabile
Nota. Per stimare la quantità di TCB e TCB in 100 cm 3 di acqua, è necessario analizzare almeno 3 volumi di acqua (100 cm 3 ciascuno). Quando si valuta OKB e MCH, il superamento dello standard non è consentito nel 95% dei campioni prelevati durante l'anno.
I TCB fanno parte degli OCB e ne hanno tutte le caratteristiche, ma, a differenza di questi, sono in grado di fermentare il lattosio in acido, aldeide e gas a 44 ° C per 24 ore. Pertanto, i TCB differiscono dagli OCB nella capacità di fermentare il lattosio in acido e gas a temperatura più elevata.
Gli indicatori da determinare, il numero e la frequenza degli studi dipendono dal tipo di fonte di approvvigionamento idrico, dalla dimensione della popolazione fornita di acqua da questo sistema di approvvigionamento idrico. Questi dati sono forniti in SanPiN 2.1.4.1074-01. Le linee guida per l'analisi sanitaria e microbiologica dell'acqua potabile (MUK 4.2.1018-01 del Ministero della Salute della Federazione Russa) regolano i metodi di controllo sanitario e microbiologico della qualità dell'acqua potabile.
Numero totale di microrganismi- questo è il numero totale di microrganismi mesofili (aventi una temperatura ottimale di 37°C) aerobi e anaerobi facoltativi (MAFAnM) visibili con un aumento duplice che sono in grado di formare colonie su agar nutriente a 37°C per 24 ore. questo indicatore, in una capsula Petri sterile aggiungere 1 ml di acqua e
versare l'agar carne-peptone fuso (temperatura non superiore a 50 ° C) e il giorno dopo viene contato il numero di colonie coltivate.
Determinazione di OKB e TKB con il metodo dei filtri a membrana
Il metodo si basa sul filtraggio di determinati volumi di acqua attraverso filtri a membrana. A tal fine vengono utilizzati filtri con un diametro di 35 o 47 mm con un diametro dei pori di 0,45 μm (filtri domestici "Vladipor" MFAS-OS-1, MFAS-OS-2, MFAS-MA (? 4-6) o straniero ISO 9000 o EN 29 000). I filtri a membrana sono preparati per l'analisi secondo le istruzioni del produttore.
Determinazione di OKB e TKB mediante il metodo della titolazione Il metodo si basa sull'accumulo di batteri dopo l'inoculazione di determinati volumi di acqua in terreni nutritivi liquidi, seguita dalla reinoculazione su un terreno denso differenziale con lattosio e dall'identificazione delle colonie mediante test colturali e biochimici. Nello studio dell'acqua potabile mediante un metodo qualitativo (attuale supervisione sanitaria ed epidemiologica), vengono seminati 3 volumi di 100 cm 3. Nello studio dell'acqua ai fini della determinazione quantitativa di OKB e TKB (rianalisi), vengono inoculati rispettivamente 100, 10 e 1 cm 3 - 3 volumi di ciascuna serie.
4.4.2. Studio sanitario e microbiologico del suolo
Il terreno fornisce rifugio a una varietà di microrganismi. Pertanto, il numero di soli batteri nel suolo raggiunge i 10 miliardi per 1 grammo.I microrganismi partecipano alla formazione del suolo e all'autopurificazione del suolo, alla circolazione dell'azoto, del carbonio e di altri elementi in natura. Oltre ai batteri, è abitato da funghi, protozoi e licheni, che sono una simbiosi di funghi con cianobatteri. Ci sono relativamente pochi microrganismi sulla superficie del suolo a causa degli effetti dannosi dei raggi UV, dell'essiccazione e di altri fattori. Lo strato arabile di terreno spesso 10-15 cm contiene il maggior numero di microrganismi. Man mano che la profondità si approfondisce, il numero di microrganismi diminuisce fino a scomparire a una profondità di 3-4 M. La composizione della microflora del suolo dipende dal tipo e dalle condizioni, dalla composizione della vegetazione, dalla temperatura, dall'umidità, ecc. La maggior parte dei microrganismi del suolo sono in grado di crescere a pH neutro, elevata umidità relativa, temperature da
da 25 a 45 °C.
I bastoncini sporigeni vivono nel terreno bacillo E Clostridio. Bacilli non patogeni (Bac. megaterio, Voi. subtilis ecc.), insieme a Pseudomonas, Proteus e alcuni altri batteri, sono ammonificanti, costituendo un gruppo di batteri putrefattivi che mineralizzano le sostanze organiche. I bastoncini patogeni che formano spore (agenti causali di antrace, botulismo, tetano, cancrena gassosa) sono in grado di persistere a lungo e alcuni addirittura si moltiplicano nel terreno (Clostridium botulinum). Il suolo è anche un habitat per i batteri che fissano l’azoto e che assimilano l’azoto molecolare. (Azotobacter, Azomonas, Mycobacterium e così via.). Le varietà di cianobatteri, o alghe blu-verdi, che fissano l'azoto, vengono utilizzate per migliorare la fertilità delle risaie.
Membri della famiglia dei batteri intestinali Enterobatteriacee) - E. coli, gli agenti causali della febbre tifoide, della salmonellosi e della dissenteria, una volta nel terreno con le feci, muoiono. Nei terreni puri, Escherichia coli e Proteus sono rari. Il rilevamento di batteri del gruppo Escherichia coli (batteri coliformi) in quantità significative è un indicatore di contaminazione del suolo con feci umane e animali e indica il suo svantaggio sanitario ed epidemiologico dovuto alla possibilità di trasmissione di agenti patogeni di infezioni intestinali. Il numero di protozoi nel terreno varia da 500 a 500.000 per 1 g di terreno. Nutrendosi di batteri e residui organici, i protozoi provocano cambiamenti nella composizione della materia organica del suolo. Nel terreno sono presenti anche numerosi funghi, le cui tossine, accumulandosi nel cibo umano, causano intossicazione: micotossicosi e aflatossicosi.
I risultati della ricerca sul suolo vengono presi in considerazione nel determinare e prevedere il grado di pericolo per la salute e le condizioni di vita della popolazione negli insediamenti (secondo indicazioni epidemiologiche), la prevenzione di malattie infettive e non infettive (controllo sanitario preventivo), l'attuale controllo sanitario degli oggetti che influiscono direttamente o indirettamente sull'ambiente.
Quando si effettua l'attuale controllo sanitario dello stato del suolo, si limitano a una breve analisi sanitaria e microbiologica che indica la presenza e il grado di contaminazione fecale. Anche gli indicatori inclusi in questo gruppo caratterizzano
processi di autodepurazione del suolo da inquinanti di natura organica ed enterobatteri. Un'analisi sanitaria e microbiologica completa del suolo viene effettuata sotto forma di controllo sanitario preventivo. Secondo le indicazioni epidemiologiche, viene effettuata un'indicazione del microbiota patogeno.
In laboratorio, viene preparato un campione medio da 5 campioni di terreno prelevati da un sito, accuratamente miscelati e strofinati in una tazza di porcellana sterile con un pestello di gomma per 5 minuti. Le impurità estranee (radici di piante, pietre, scheggiature) vengono rimosse setacciando il terreno attraverso un setaccio, che viene preliminarmente pulito con un batuffolo di cotone inumidito con alcool etilico al 96%. Dal campione medio (da 1 a 50-55 g, a seconda dell'elenco degli indicatori determinati) vengono prelevati campioni e viene preparata una sospensione 1:10 in acqua di rubinetto sterile (10 g di terreno per 90 cm 3 di acqua). Per il desorbimento dei microrganismi dalla superficie delle particelle di terreno, la sospensione di terreno preparata viene agitata per 3 minuti su un miscelatore dispersore meccanico. Dopo aver fatto sedimentare la sospensione per 30 s, vengono preparate successive diluizioni 10 volte del terreno ad una concentrazione di 10 -4 -10 -5 g/cm 3 .
La valutazione dei risultati dello studio sanitario e microbiologico dei suoli viene effettuata confrontando i dati ottenuti sulle aree sperimentali e di controllo di suoli della stessa composizione, situati nelle immediate vicinanze territoriali. Gli schemi per la valutazione dello stato sanitario del suolo sulla base di criteri sanitari e microbiologici individuali sono presentati nell'MU
1446-76 (Tabella 4.2).
Tabella 4.2. Schema per valutare le condizioni sanitarie del suolo secondo indicatori microbiologici (secondo MU? 1446-76)
MU 2.1.7.730-99 “Valutazione igienica della qualità del suolo nelle aree popolate” presenta uno schema per valutare il pericolo epidemico dei suoli nelle aree popolate. In questo documento, per valutare l'intensità del carico biologico sul suolo, vengono utilizzati indicatori come il CGB e l'indice degli enterococchi e per valutare il pericolo epidemico del suolo vengono utilizzati enterobatteri patogeni ed enterovirus.
4.4.3. Studio della contaminazione microbica dell'ambiente aereo
L'esame microbiologico dell'aria prevede la determinazione del contenuto totale di microrganismi e degli stafilococchi in 1 m 3 di aria. In alcuni casi, l'aria viene analizzata per individuare batteri gram-negativi, muffe e funghi simili a lieviti. Secondo le indicazioni epidemiologiche lo spettro degli agenti patogeni rilevati nell’aria può essere ampliato.
I campioni di aria vengono prelevati mediante aspirazione utilizzando l'apparato di Krotov. L'uso del metodo di sedimentazione Koch è abbastanza accettabile. Sono soggetti a studio i seguenti locali delle strutture sanitarie: sale operatorie, spogliatoi e sale di trattamento, reparti asettici (box), reparti del dipartimento di anestesia e rianimazione, reparti e corridoi dei reparti medici, locali delle farmacie, di sterilizzazione e di ostetricia. reparti ginecologici e stazioni (dipartimenti) di trasfusione di sangue. Lo studio dell'aria con il metodo Koch viene utilizzato in casi estremamente rari per una valutazione approssimativa del grado di inquinamento microbico dell'aria. Per determinare il numero totale di microrganismi nell'aria delle sale operatorie, prima di iniziare il lavoro, aprire le piastre con agar nutriente e posizionarle approssimativamente all'altezza del tavolo operatorio - 1 tazza al centro e 4 negli angoli della stanza (“ metodo della busta") per 10 minuti e per rilevare lo Staphylococcus aureus utilizzare piastre con agar tuorlo-sale (YSA) per 40 minuti. Le inoculazioni vengono incubate in termostato a 37°C per un giorno a temperatura ambiente, quindi viene contato il numero di colonie. In questo caso procedono dalla formula classica di V.L. Omelyansky: su 100 cm 2 di superficie del mezzo nutritivo per 5 minuti di esposizione, si deposita una quantità di batteri tale da essere contenuta in 10 litri di aria (1000 litri sono contenuti in 1 m 3). Allo stesso tempo, più di
5 colonie di microrganismi e Staphylococcus aureus non dovrebbero essere rilevati sulla JSA.
4.4.4. Controllo sanitario e microbiologico degli oggetti alimentari
I prodotti alimentari possono essere contaminati da vari microrganismi, il che porta al loro deterioramento, allo sviluppo di infezioni e intossicazioni tossiche alimentari, nonché infezioni come antrace, brucellosi, tubercolosi, ecc. Malattie animali, lesioni o condizioni avverse del suo mantenimento contribuiscono a la violazione delle barriere protettive dell'organismo e la traslocazione (trasferimento) di microrganismi in tessuti e organi normalmente sterili (semina intravitale). Di conseguenza, i tessuti dell'animale macellato vengono contaminati da proteine, clostridi e altri microbi e durante la mastite stafilococchi e streptococchi entrano nel latte. È anche possibile la contaminazione secondaria dei prodotti alimentari con microrganismi. In questo caso, la fonte di inquinamento sono gli oggetti ambientali (suolo, acqua, trasporti, ecc.), Così come i malati e i portatori di batteri. A una bassa temperatura di conservazione di carne e prodotti a base di carne, anche nella carne congelata possono essere presenti microbi capaci di riprodursi in condizioni psicrofile (pseudomonas, proteus, aspergillus, penicillium, ecc.). I microbi che vivono nella carne ne provocano la mucillagine; sviluppa i processi di fermentazione e decadimento causati da Clostridium, Proteus, Pseudomonas e funghi.
Colture di cereali, noci in condizioni di elevata umidità possono essere contaminate da funghi (aspergillus, penicillium, fusarium, ecc.), che causano lo sviluppo di micotossicosi alimentari.
I piatti di carne (gelatina, insalate di carne, piatti di carne macinata) possono causare malattie associate a salmonella, shigella, Escherichia coli diarroico, Proteus, ceppi enterotossigeni di stafilococchi, enterococchi, che si moltiplicano in essi, Clostridium perfringens E Bacillus cereus.
Il latte e i latticini possono essere un fattore di trasmissione della brucellosi, della tubercolosi e della shigellosi. È anche possibile lo sviluppo di intossicazioni alimentari a seguito della riproduzione
latticini di salmonella, shigella e stafilococco. Uova, uova in polvere e melange nell'infezione primaria endogena da Salmonella delle uova, in particolare delle uova di anatra, sono la causa della salmonellosi.
Il pesce e i prodotti ittici hanno maggiori probabilità di essere contaminati da batteri Clostridium botulinum E Vibrio parahaemolylicus- agenti causali di intossicazioni alimentari e tossicoinfezioni. Queste malattie si osservano anche quando si mangiano prodotti ittici contaminati da una grande quantità di salmonella, proteus, Bacillus cereus, Clostridium perfrigens.
Frutta e verdura possono essere contaminate e seminate con Escherichia coli diarroici, Shigella, Proteus, ceppi enteropatogeni di stafilococchi. I cetrioli salati possono essere la causa della tossicoinfezione causata da Vibrio parahaemolyticus.
Tutti i risultati delle analisi microbiologiche dei prodotti alimentari possono essere ottenuti non prima di 48-72 ore, vale a dire quando il prodotto può già essere venduto. Pertanto, il controllo su questi indicatori è retrospettivo e serve ai fini di una valutazione sanitaria e igienica di un'impresa che produce o vende prodotti alimentari.
Il rilevamento di una maggiore contaminazione microbica totale, batteri coliformi suggerisce una violazione del regime di temperatura durante la preparazione e/o la conservazione del prodotto finito. Il rilevamento di microrganismi patogeni è considerato un indicatore del problema epidemiologico delle mense e delle imprese commerciali.
Il razionamento degli indicatori microbiologici della sicurezza alimentare viene effettuato per la maggior parte dei gruppi di microrganismi secondo un principio alternativo, ad es. la massa del prodotto è normalizzata, in cui i batteri del gruppo Escherichia coli, la maggior parte dei microrganismi opportunisti, nonché i microrganismi patogeni, tra cui la salmonella e Listeria monocytogenes. In altri casi, lo standard riflette il numero di UFC in 1 g (cm 3) di prodotto.
Nei prodotti di consumo di massa, per i quali non esistono standard microbiologici nelle tabelle SanPiN 2.3.2.1078-01 per la sicurezza e il valore nutrizionale dei prodotti alimentari, i microrganismi patogeni, compresa la salmonella, non sono ammessi in 25 g di prodotto.
Il controllo sanitario e batteriologico deve essere soggetto agli oggetti di preparazione e vendita dei prodotti alimentari.
I dati dello studio sanitario e microbiologico consentono di valutare oggettivamente le condizioni sanitarie e igieniche degli oggetti esaminati, identificare le violazioni del regime sanitario e attuare tempestivamente misure mirate per eliminarle.
Esistono diversi metodi di campionamento da varie apparecchiature e inventari per la ricerca microbiologica: metodi di tamponi, impronte, riempimento di agar. Di questi, viene spesso utilizzato il metodo del lavaggio dei tamponi. Il controllo sanitario e microbiologico si basa sulla rilevazione di BGKP nei tamponi, indicatori di contaminazione fecale degli oggetti studiati. Gli studi sullo stafilococco aureo, i batteri patogeni della famiglia intestinale, la determinazione della contaminazione microbica totale vengono effettuati secondo le indicazioni. Ad esempio, è necessario eseguire tamponi per rilevare gli stafilococchi quando si esaminano pasticcerie, caseifici e unità alimentari di istituti medici.
Oggetti di controllo sanitario e microbiologico:
Dilavamenti dalle mani e dalle tute dei lavoratori del settore alimentare (approvvigionamento idrico);
Attrezzature, inventario, utensili e altri oggetti;
Piatti pronti, prodotti culinari e deperibili;
Materie prime e semilavorati nel corso del processo tecnologico (secondo indicazioni epidemiologiche);
Acqua potabile da fonti di approvvigionamento idrico centralizzate e soprattutto decentralizzate.
I lavaggi delle mani del personale addetto alla lavorazione delle materie prime vengono raccolti prima dell'inizio del lavoro. I tamponi vengono consegnati al laboratorio batteriologico entro 2 ore e possono essere conservati e trasportati per non più di 6 ore a 1-10 °C.
In laboratorio, i tamponi vengono inoculati su terreni Kessler con lattosio o KODA, mentre un tampone viene abbassato nella provetta con il terreno e viene trasferito il liquido di lavaggio rimanente. Le colture su terreni Kessler e KODA vengono incubate a 37°C. Dopo 18-24 ore, da tutte le provette con terreno Kessler si effettua l'inoculazione su settori di coppette con terreno Endo; dal terreno KODA si effettua l'inoculazione solo se cambia il colore del terreno (dalla
giallo o verde) o la sua torbidità. Le inoculazioni su terreno Endo vengono coltivate a 37 °C per 18-24 ore.
Gli strisci vengono preparati da colonie caratteristiche della BGKP, colorate con Gram, identificate microscopicamente, se necessario, inoltre mediante test generalmente accettati per la BGKP. Nel valutare i risultati di un esame sanitario e microbiologico, si procede dallo standard secondo cui nei tamponi prelevati dalle strutture alimentari il BGKP dovrebbe essere assente. Il rilevamento di BGKP in tamponi provenienti da superfici pulite, preparate per oggetti di lavoro, inventario, attrezzature, mani e indumenti sanitari del personale indica una violazione del regime sanitario. In caso di rilevamento ripetuto di CGB in una percentuale significativa di tamponi, si raccomanda di testare i tamponi per la presenza di enterobatteri patogeni. Allo stesso tempo, il tampone e il fluido di lavaggio vengono inoculati su terreni di arricchimento: brodo di selenite o terreno di magnesio (è possibile utilizzare terreni Muller e Kaufman). Ulteriori ricerche vengono effettuate secondo la metodologia generalmente accettata.
Studio del latte e dei suoi derivati Microflora dei latticini
Il latte è un mezzo nutritivo molto favorevole per lo sviluppo di molti microrganismi. Dopo aver mangiato latte e latticini infetti, infezioni come febbre tifoide, dissenteria, colera, escherichiosi, brucellosi, tubercolosi, scarlattina, tonsillite, febbre Q, afta epizootica, encefalite trasmessa da zecche, infezioni tossiche da salmonella, avvelenamento da enterotossine stafilococciche, eccetera.
Esistono microflora specifiche e non specifiche del latte e dei latticini. A microflora specifica il latte e i latticini contengono microbi che causano la fermentazione dell’acido lattico, dell’alcol e dell’acido propionico. I processi microbiologici dovuti all'attività vitale di questi microrganismi sono alla base della preparazione di prodotti a base di latte fermentato (ricotta, kefir, latte cagliato, acidophilus, ecc.). Vengono presi in considerazione i batteri della fermentazione dell'acido lattico microflora normale latte e latticini. Il ruolo principale nell'acidificazione del latte e dei latticini è svolto dagli streptococchi lattici. S. lactis, S. cremaris e altri Razze meno attive di streptococchi lattici (S. citrovorus, S. lactis subsp. diacetylactis) produrre volatili
acidi e aromatici e sono quindi largamente utilizzati nella produzione di formaggi. Del gruppo dei batteri lattici fanno parte anche i bastoncini di acido lattico: Lactobacterium bulgaricum, Lactobacterium casei, Lactobacterium acidophilus eccetera.
Il lievito è il principale agente causale della fermentazione alcolica nel latte e nei latticini. (Saccharomyces lactis e così via.).
Microflora aspecifica il latte è costituito da batteri putrefattivi (Proteo) bacilli aerobici e anaerobici (B. subtilis, B. megatherium, C. putrificum) e molti altri. Questi microrganismi decompongono le proteine del latte, partecipano alla fermentazione dell'acido lattico e conferiscono al latte un sapore e un odore sgradevoli. Infestazione da muffe nei latticini (Mucor, Oidio, Aspergillus ecc.) dà loro il sapore del burro rancido. I batteri del gruppo intestinale, entrando nel latte, provocano un cambiamento nel gusto e nell'odore del latte. La contaminazione microbica del latte inizia già nella mammella. Nel processo di mungitura, la sua semina aggiuntiva avviene dalla superficie della pelle della mammella, dalle mani, dalla nave in cui entra e dall'aria della stanza. L'intensità di questa semina aggiuntiva dipende generalmente dal rispetto delle condizioni sanitarie e igieniche di base durante la produzione del latte. Anche le cattive condizioni di conservazione del latte possono contribuire all'ulteriore crescita della microflora al suo interno.
1. fase battericida. Il latte appena munto, sebbene contenga già centinaia di microbi per 1 cm 3 (principalmente stafilococchi e streptococchi), ha proprietà battericide dovute alla presenza in esso di normali anticorpi, pertanto, per un certo periodo, lo sviluppo dei batteri nel latte viene ritardato. Questo periodo è chiamato fase battericida. La durata della fase battericida varia da 2 a 36 ore, a seconda delle caratteristiche fisiologiche dell'animale (nel primo periodo di lattazione l'attività battericida del latte è maggiore). La conservazione del latte ad una temperatura elevata (30-37 °C) riduce drasticamente la durata della fase battericida. Lo stesso effetto è esercitato dall'intensa contaminazione aggiuntiva del latte con microbi.
Terminata la fase battericida, inizia lo sviluppo della microflora. La sua composizione in specie cambia nel tempo sotto l'influenza di cambiamenti nelle proprietà biochimiche dell'ambiente e come risultato di relazioni antagoniste e simbiotiche tra specie microbiche.
2. Fase di microflora mista dura circa 12 ore Durante questo periodo, non si verifica ancora la predominanza di qualsiasi specie di gruppo di microbi, poiché l'abbondanza di substrato nutritivo e le possibilità spaziali consentono a molti tipi di microrganismi di svilupparsi abbastanza liberamente.
3. Fase degli streptococchi lattici. In questa fase predominano i microrganismi del gruppo indicato. (S. lactis, S. termofilus, S. cremoris e così via.). Il lattosio viene convertito intensamente da loro in acido lattico, la reazione cambia dal lato acido. L'accumulo di acido lattico porta alla morte degli streptococchi lattici e alla loro sostituzione con batteri lattici più resistenti agli acidi. Ciò avviene dopo 48 ore, segnando l'inizio della 3a fase.
4. Fase dei bastoncini di acido lattico. In esso, la posizione dominante è acquisita dalle forme bastoncellari di batteri lattici. (L. lactis, L. crusei, L. bulgaricum e così via.). La conseguente reazione acida dell'ambiente porta all'inibizione della crescita e alla morte graduale di altri tipi di batteri. Entro la fine della 3a fase, ulteriori opportunità per lo sviluppo della microflora dell'acido lattico sono esaurite e vengono sostituite dai funghi, per i quali l'acido lattico funge da substrato nutritivo.
5. Fase della microflora fungina. Durante questo periodo si sviluppano muffe e lieviti la cui attività vitale porta alla perdita del valore nutritivo del prodotto. I lieviti sono rappresentati principalmente da specie del genere Torula, alcuni tipi di saccaromiceti si trovano meno spesso. Tra gli stampi trovati muffa del latte (Oidio lattis), ricoprendo la superficie del latte cagliato e della panna acida sotto forma di lanugine, nonché di muffe di aspergillus, penicillium e mucore. L'azione della flora fungina porta alla neutralizzazione dell'ambiente, rendendolo nuovamente adatto ai batteri. Si sviluppano batteri putrefattivi che provocano la proteolisi della caseina e, infine, un gruppo di batteri butirrici anaerobici sporigeni.
L'attività della microflora mutevole si ferma solo con l'inizio della completa mineralizzazione di tutte le sostanze organiche del latte. In determinate condizioni, il processo di modifica delle biocenosi microbiche può discostarsi dallo schema sopra. Quindi i batteri lattici possono essere inibiti fin dall'inizio dai microbi del gruppo Escherichia coli, se questi ultimi sono presenti.
sono presenti in gran numero. I lieviti possono produrre notevoli concentrazioni di alcol, come nel caso di prodotti come il kefir (0,2-0,6%) e soprattutto il koumiss (0,9-2,5%). La presenza di alcol crea le condizioni per il successivo sviluppo di batteri dell'acido acetico che fermentano l'alcol in acido acetico. Anche la presenza di antibiotici e di altre sostanze che inibiscono e neutralizzano la microflora nel latte può rallentare i processi dell'acido lattico. Controllo sanitario ed igienico dei latticini I prodotti a base di latte fermentato si ottengono principalmente aggiungendo al latte speciali colture starter, che sono colture pure o miste di determinati microrganismi (ad esempio, quando si prepara il kefir, i cosiddetti grani di kefir, quando si prepara il latte acidofilo - coltura L.acidophilum).
Viene causato muco di latte B. viscosus lactis, B. cloacae, B. aerogenes, S. cremoris ecc. Il sapore del latte non cambia. Allo stesso tempo, per alcuni prodotti a base di acido lattico, la consistenza viscosa è normale. Si ottiene mediante l'introduzione artificiale di una coltura di ceppi di batteri lattici che formano muco.
Con la conservazione prolungata del latte a una temperatura relativamente bassa, i batteri lattici non possono svilupparsi e alcuni tipi di lieviti e batteri putrefattivi trovano l'opportunità di svilupparsi. Causano la peptonizzazione delle proteine, a seguito della quale il latte acquisisce un sapore amaro. (Torula amara, B. fluorescens liquifaciens, e nel latte condensato Torula lactis condensis).
L'irrancidimento della panna e del burro è dovuto all'attività vitale di microrganismi lipolitici (funghi Oidium lactis, B. fluorescens, B. liquifaciens).
Come risultato del fatto che i batteri patogeni trovano le condizioni per una riproduzione abbondante nel latte, quando si consuma latte contaminato, la dose di microrganismi che penetrano all'interno può essere enorme. Pertanto, il controllo sanitario dei latticini, compreso l’esame batteriologico, è di grande importanza preventiva.
Per conservare il latte, viene sottoposto a sterilizzazione o pastorizzazione. In questo caso, non solo la microflora del latte muore, ma vengono distrutte anche le vitamine, lo stato aggregato di proteine e grassi viene disturbato e quindi il valore nutrizionale del prodotto diminuisce.
L'efficacia della pastorizzazione dipende dal regime di temperatura specificato e dal grado di contaminazione microbica del latte. Con una contaminazione batterica molto elevata, alcuni microbi sopravvivono alla pastorizzazione, a seguito della quale il deterioramento del latte avviene più rapidamente. Il pericolo maggiore è la conservazione di enterobatteri patogeni e stafilococchi enterotossigeni nel latte pastorizzato.
Recentemente ha trovato applicazione un altro metodo di lavorazione del latte: la battofugazione, che consente il rilascio del latte dai microrganismi mediante lavorazione in apposite centrifughe.
SanPiN 2.3.2.1078-01 standardizza i seguenti indicatori che caratterizzano lo stato sanitario e batteriologico del latte e dei prodotti lattiero-caseari: MAFAnM, BGKP (coliformi) e patogeni (inclusa la salmonella). Nel gelato e in una serie di colture starter per prodotti a base di latte fermentato, anche la massa del prodotto è standardizzata, in cui il contenuto di S.aureus così come lievito e muffa.
I metodi di analisi microbiologica comprendono la determinazione dei microrganismi aerobi mesofili e anaerobi facoltativi (CFU/g) e la determinazione di BGKP.
La determinazione della quantità di MAFAnM viene effettuata secondo le regole generali mediante inoculo delle diluizioni indicate nella quantità di 1 cm 3 in piastre Petri, seguito dal riempimento con agar nutriente denso. Le colture vengono conservate in un termostato a 30 ± 1 ° C per
È stato contato il numero di colonie cresciute sulla piastra. La quantità totale in 1 cm 3 (in 1 g) si trova con la formula:
Dove N- numero di colonie contate; M- il numero di diluizioni decuplicate.
BGKP - bastoncini gram-negativi privi di spore, aerobici e anaerobici facoltativi, principalmente rappresentanti di generi Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Serratia, fermentazione del lattosio in un mezzo nutriente con formazione di acido e gas a 37 ± 1 ° C per 24 ore.Il volume (massa) dei latticini inoculati nel mezzo Kessler è presentato nella tabella. 4.3.
Tabella 4.3. La quantità di prodotto quando inoculato sul terreno Kessler per la determinazione di BGKP
Per ciascuna diluizione è stata inoculata una provetta. In presenza di formazione di gas nel più piccolo dei volumi seminati, si ritiene che in esso sia stato trovato BGKP. Per una caratterizzazione approssimativa della microflora dei prodotti a base di latte fermentato, un metodo aggiuntivo è la microscopia di uno striscio preparato con materiale intero o diluito. Gli strisci vengono fissati e colorati con blu di metilene al 10%. I prodotti a base di latte fermentato hanno una propria microflora specifica, che viene utilizzata per la loro preparazione (Tabella 4.4).
Tabella 4.4. Caratteristiche della microflora dei prodotti a base di latte fermentato
Non esistono standard per il latte crudo, ma come indicatore indiretto della contaminazione batterica viene utilizzato il test della reduttasi (GOST 9225-84). Il principio del metodo è quello nel processo
I batteri rilasciano enzimi (reduttasi) nell'ambiente. Per studiare il campione per la reduttasi, 1 cm 3 della soluzione di lavoro di blu di metilene e 20 cm 3 di latte vengono versati in provette, chiuse, le provette vengono capovolte tre volte, quindi poste a bagnomaria (38 ° C ). Il cambiamento del colore del latte viene fissato dopo 40 minuti, 2,5 e 3,5 ore.La fine dell'analisi è considerata il momento della decolorazione del colore del latte. A seconda della durata della decolorazione, il latte viene assegnato a una delle 4 classi (Tabella 4.5).
Tabella 4.5. Valutazione del test della reduttasi
Ricerca per identificare S.aureus effettuato in conformità con GOST 30347-97 e muffe e lieviti - con GOST 10444.12-88.
Nel processo di ottenimento di materie prime medicinali a base di erbe, è possibile infettarlo attraverso l'acqua, gli utensili farmaceutici non sterili, l'aria degli impianti di produzione e le mani del personale. L'inseminazione avviene anche a causa della normale microflora delle piante e dei microrganismi fitopatogeni, patogeni delle malattie delle piante. I microrganismi si trovano sulla superficie (sulle foglie, sugli steli, sui semi) e sulle radici delle piante.
I microrganismi presenti sulla superficie delle piante sono epifiti (dal greco. epi- Sopra, pitone- pianta). Non sono dannosi, sono antagonisti di alcuni microrganismi fitopatogeni, crescono a scapito delle normali secrezioni vegetali e dell'inquinamento organico delle superfici vegetali. La microflora epifita migliora l'immunità delle piante, proteggendole dai microrganismi fitopatogeni. Il maggior numero di microflora epifita sono batteri gram-negativi a forma di bastoncino. Erwinia erbacea(nuovo nome Agglomerati di Pantoea) che sono antagonisti dell'agente eziologico del marciume molle delle verdure. scoprire
batteri normali e altri - Pseudomonas fluorescens, meno spesso Bacillus mesenterico e alcuni funghi.
La composizione della microflora vegetale dipende dalla specie, dall'età della pianta, dal tipo di terreno e dalla temperatura ambiente. La violazione della superficie delle piante e dei loro semi contribuisce all'accumulo su di esse di una grande quantità di polvere e microrganismi. Con un aumento dell'umidità aumenta il numero di microrganismi epifiti, con una diminuzione dell'umidità diminuisce.
Vicino alle radici delle piante nel terreno c'è un numero significativo di microrganismi. Questa zona si chiama rizosfera(dal greco. riza- radice, spira- palla). Nella rizosfera sono spesso presenti pseudomonas e micobatteri, si trovano anche attinomiceti, batteri sporigeni e funghi. I microrganismi della rizosfera convertono vari substrati in composti disponibili alle piante, sintetizzano composti biologicamente attivi (vitamine, antibiotici, ecc.), entrano in rapporti simbiotici con le piante e hanno proprietà antagoniste contro i batteri fitopatogeni.
I microrganismi della superficie radicale delle piante (microflora del rizoplano), in misura maggiore della rizosfera, sono rappresentati da pseudomonadi. Viene chiamata la simbiosi del micelio dei funghi con le radici delle piante superiori micorrize, quelli. radice di fungo (dal greco. Mykes- fungo, riza- radice). La micorriza migliora la crescita delle piante.
Le piante dei terreni coltivati sono più contaminate da microrganismi rispetto alle piante dei boschi e dei prati. Ce ne sono molti su piante che crescono nei campi di irrigazione, nelle discariche, vicino ai depositi di letame, nelle aree di pascolo. Allo stesso tempo, le piante possono essere contaminate da microrganismi patogeni e, se le materie prime non vengono raccolte correttamente, rappresentano un buon terreno fertile per la riproduzione dei microrganismi. L'essiccazione delle piante impedisce la crescita di microrganismi al loro interno.
I microrganismi fitopatogeni comprendono batteri, virus e funghi. Si chiamano malattie causate da batteri batteriosi. Le batteriosi comprendono vari tipi di marciume, necrosi dei tessuti, appassimento delle piante, sviluppo di tumori, ecc. Tra gli agenti causali della batteriosi ci sono Pseudomonas, Mycobacteria, Ervinia, Corynebacterium, Agrobacterium, ecc. Gli agenti causali delle batteriosi vengono trasmessi attraverso infetti semi, resti di piante malate, suolo, acqua, aria o trasportati da insetti,
molluschi, nematodi. I batteri entrano nelle piante attraverso stomi, nettari e altre parti delle piante, nonché attraverso piccole lesioni. Rappresentanti del genere Erwinia causare malattie come bruciatura, avvizzimento, marciume umido o acquoso, ad es. E. amylovora- agente eziologico delle ustioni di meli e peri, E. carotovora(nuovo nome Pectobacterium carotovorum)- l'agente eziologico del marciume batterico umido. Pseudomonas (genere Pseudomonas) causare spotting batterico (R.syringae ecc.), mentre sulle foglie si formano varie macchie. Foglie e batteri del genere xanthomonas, i quali, penetrando nel sistema vascolare della pianta e bloccandone l'elemento, provocano macchie e morte della pianta. Alcuni membri del genere Corinebatterio e tipi Curtobacterium flaccumfaciens, Clavibacter michihanensis causare malattie vascolari e parenchimali delle piante. I glicopeptidi di questi batteri danneggiano le membrane cellulari dei vasi sanguigni, provocando il blocco dei vasi sanguigni e la morte della pianta. Agrobatterio del genere Agrobatterio contribuire allo sviluppo di vari tumori nelle piante (galile della corona, radice dei capelli, cancro dello stelo), dovuto a un plasmide oncogeno trasmesso dagli agrobatteri alle cellule vegetali.
Virus causare malattie delle piante sotto forma di mosaico e ittero. Con una malattia delle piante a mosaico, appare un colore a mosaico (macchiato) delle foglie e dei frutti colpiti, le piante restano indietro nella crescita. L'ittero si manifesta con il nanismo delle piante, modificato da numerosi germogli laterali, fiori, ecc.
Quando si mangia cibo a base di cereali infetti da funghi, può verificarsi un'intossicazione alimentare - micotossicosi, ad esempio, ergotismo - una malattia che si verifica quando si mangiano cibi a base di cereali infetti da segale cornuta (funghi Claviceps purpurea). Il fungo infetta le spighette dei cereali in campo: si formano gli sclerozi del fungo, detti corni. In condizioni di elevata umidità, bassa temperatura, i funghi dei generi possono svilupparsi su piante vegetative o falciate. Fusarium, Penicillium, Aspeigillus ecc., causando micotossicosi nell'uomo.
Per combattere i microrganismi fitopatogeni si coltivano piante resistenti, i semi vengono puliti e trattati, il terreno viene disinfettato, le piante colpite vengono rimosse e i vettori di agenti patogeni che vivono sulle piante vengono distrutti.
Compiti di autoformazione (autocontrollo)
UN. Segna i rappresentanti della microflora della pelle umana:
1. Batteri corineformi.
2. Stafilococco aureo epidermico.
3. Escherichia coli.
4. Funghi simili al lievito.
B. Segnare i batteri che determinano la resistenza alla colonizzazione dell'intestino:
1. Bifidobatteri.
2. Lattobacilli.
3.Candida.
4. Enterococchi.
5. Escherichia coli.
B. La preparazione Biovestin lacto è costituita da fattori bifidogenici e biomassa B. bifidum, L. plantarum. Assegna un nome al gruppo di farmaci a cui appartiene questo farmaco.
G. Controllare i processi utilizzati per la sterilizzazione:
1. Autoclavaggio.
2. Pastorizzazione.
3. Trattamento termico a secco.
4. Irradiazione con radiazioni γ.
D. Controllare le sostanze utilizzate per la disinfezione:
1. Vapori di glicole etilenico.
2. Composti dell'ammonio quaternario.
3. Candeggina.
4. Alcool etilico al 90-95%.
E. Tutti i seguenti sono organismi acquatici indicatori di salute tranne (seleziona):
1. Batteri coliformi comuni.
2. Batteri coliformi termotolleranti.
3. Colifagi.
4. Streptococchi emolitici.
E. Nel valutare la qualità dell'acqua potabile proveniente dall'approvvigionamento idrico centralizzato, vengono determinati i seguenti indicatori microbiologici:
1. Conta microbica totale.
2. Batteri coliformi comuni.
3. Batteri coliformi termotolleranti.
4. Vibrio cholerae.
Z. Con l'aiuto dell'apparato di Krotov sono stati seminati campioni d'aria. Portata di campionamento 20 l/min, tempo di funzionamento 5 min. Sulla piastra sono cresciute 70 colonie. Qual è la carica microbica totale dell'aria?
E. La contaminazione batterica totale dell’aria è il numero totale di microrganismi mesofili contenuti in:
A. Specificare la natura della contaminazione del suolo in presenza di un gran numero di enterococchi e batteri coliformi:
1. Materia fecale fresca.
2. Vecchie feci.
3. Biologico.
l. L'esame batteriologico programmato dei beni ambientali delle strutture sanitarie non prevede l'identificazione di:
1. Contaminazione microbica generale.
2. Stafilococco aureo.
3. Pseudomonas aeruginosa.
4. Microrganismi della famiglia delle Enterobacteriaceae.
M. Con l'attuale vigilanza sanitaria degli esercizi commerciali e di ristorazione pubblica, viene effettuato uno studio dei dilavamenti per la presenza di:
1. Batteri coliformi.
2. Stafilococco aureo.
3. Proteo.
4. Salmonella.
Argomento 8. Microflora normale del corpo umano.
1. Tipi di interazione nel sistema ecologico "macroorganismo - microrganismi". Formazione della normale microflora del corpo umano.
2. Storia della dottrina della microflora normale (A. Levenguk, I.I. Mechnikov, L. Pasteur)
Meccanismi di formazione della flora normale. adesione e colonizzazione. La specificità del processo di adesione. Adesine batteriche e recettori epiteliocitari.
La microflora normale è un sistema ecologico aperto. Fattori che influenzano questo sistema.
Formazione di una barriera di resistenza alla colonizzazione.
Microflora permanente e transitoria del corpo umano.
Microflora normale della pelle, mucose delle vie respiratorie, cavità orale.
Composizione e caratteristiche della microflora del tratto gastrointestinale. Gruppi permanenti (residenti) e facoltativi. Flora cavitaria e parietale.
Il ruolo degli anaerobi e degli aerobi nella normale flora intestinale.
L'importanza della microflora per il normale funzionamento del corpo umano.
Batteri della microflora normale: proprietà biologiche e funzioni protettive.
Il ruolo della flora normale nell'attivazione delle cellule presentanti l'antigene.
Microflora normale e patologia.
Il concetto di sindrome da disbatteriosi. aspetti batteriologici.
La disbatteriosi come concetto patogenetico. Il ruolo di C. difficile.
Sistema ecologico "macroorganismo - microrganismi".
Microflora normale del corpo umano.
In conformità con le idee moderne sulla microecologia del corpo umano, i microbi con cui una persona incontra durante la vita possono essere divisi in diversi gruppi.
Il primo gruppo comprende microrganismi che non sono capaci di una lunga permanenza nel corpo umano e quindi sono chiamati transitori. La loro rilevazione durante l'esame batteriologico è casuale.
Il secondo gruppo è costituito da rappresentanti della microflora normale per il corpo umano, che apportano indubbi benefici: contribuiscono alla scomposizione e all'assorbimento dei nutrienti, hanno una funzione vitaminica e, grazie alla loro elevata attività antagonista, sono uno dei fattori di protezione contro le infezioni. Tali microrganismi fanno parte dell'autoflora come suoi rappresentanti permanenti. I cambiamenti nella stabilità di questa composizione, di regola, portano a disturbi nello stato di salute umana. Rappresentanti tipici di questo gruppo di microrganismi sono i bifidobatteri.
Il terzo gruppo sono i microrganismi, che si trovano con sufficiente costanza anche nelle persone sane e si trovano in un certo stato di equilibrio con l'organismo ospite. Tuttavia, con una diminuzione della resistenza del macroorganismo, con cambiamenti nella composizione delle normali microbiocenosi, queste forme possono complicare il decorso di altre malattie umane o diventare esse stesse un fattore eziologico negli stati patologici. Mancanza di loro
nella microflora non influisce sullo stato della salute umana. Questi microrganismi si trovano spesso in persone abbastanza sane.
Rappresentanti tipici di questo gruppo di microrganismi sono gli stafilococchi. Di grande importanza è il loro peso specifico nella microbiocenosi e il rapporto con le specie microbiche del secondo gruppo.
Il quarto gruppo - agenti causali di malattie infettive. Questi microrganismi non possono essere considerati rappresentanti della flora normale.
Di conseguenza, la divisione dei rappresentanti del mondo microecologico del corpo umano in determinati gruppi è condizionata e persegue obiettivi educativi e metodologici.
Dal punto di vista dello stato funzionale di resistenza alla colonizzazione degli epiteliociti, è necessario distinguere la flora saprofita, protettiva, opportunistica e patogena, che corrisponde al primo, secondo, terzo, quarto gruppo sopra presentato.
Il meccanismo di formazione della microflora normale.
La microflora normale si forma nel processo della vita umana con la partecipazione attiva del macroorganismo stesso e di vari membri della biocenosi. La colonizzazione primaria da parte dei microbi di un organismo sterile prima della nascita avviene durante il parto, dopodiché la microflora si forma sotto l'influenza dell'ambiente che circonda il bambino e, soprattutto, a contatto con le persone che si prendono cura di lui. La nutrizione gioca un ruolo enorme nella formazione della microflora.
Poiché la normale microflora è un sistema ecologico aperto, le caratteristiche di questa biocenosi possono cambiare a seconda di molte condizioni (natura della nutrizione, fattori geografici, condizioni estreme. Uno dei fattori importanti è il cambiamento nella resistenza del corpo sotto l'influenza della fatica, sensibilizzazione, infezione, trauma, intossicazione, radiazioni, oppressione mentale.
Quando si analizzano i meccanismi di fissazione della microflora sui substrati tissutali, è necessario prestare attenzione all'importanza dei processi di adesione. I batteri aderiscono (aderiscono) alla superficie dell'epitelio delle mucose, seguita dalla riproduzione e colonizzazione. Il processo di adesione avviene solo se le strutture superficiali attive dei batteri (adesine) sono complementari (correlate) ai recettori degli epiteliociti. Esiste un'interazione specifica del ligando tra le adesine e i recettori cellulari situati sulla membrana plasmatica. Le cellule differiscono nella specificità dei loro recettori superficiali, che determina lo spettro di batteri che possono colonizzarle. La normale microflora e le adesine, i recettori cellulari e gli epiteliociti sono inclusi nel concetto funzionale della barriera di resistenza alla colonizzazione. In combinazione con le caratteristiche dell'apparato recettore dell'epitelio e dei fattori di difesa locale (immunoglobuline secretrici - sIg A, lisozima, enzimi proteolitici), la resistenza alla colonizzazione forma un sistema che impedisce la penetrazione di microbi patogeni.
Microflora delle singole parti del corpo umano.
La microflora è distribuita in modo non uniforme, anche all'interno della stessa area.
Il sangue e gli organi interni di una persona sana sono sterili. Libero da microbi e da alcune cavità che hanno una connessione con l'ambiente esterno: l'utero, la vescica.
La microflora del tratto digestivo viene analizzata in modo più dettagliato, poiché rappresenta la quota maggiore nell'autoflora umana. La distribuzione dei microbi nel tratto gastrointestinale è molto disomogenea: ogni sezione ha la propria flora relativamente costante. Numerosi fattori influenzano la formazione della microflora in ciascuna area di habitat:
la struttura degli organi e delle loro mucose (presenza o assenza di cripte e "tasche");
tipo e quantità di secrezione (saliva, succo gastrico, secrezioni pancreatiche ed epatiche);
composizione delle secrezioni, pH e potenziale redox;
digestione e adsorbimento, peristalsi, riassorbimento dell'acqua;
vari fattori antimicrobici;
Interrelazioni tra i singoli tipi di microbi.
Le parti più contaminate sono la cavità orale e l'intestino crasso.
La cavità orale è la principale via di ingresso per la maggior parte dei microrganismi. Serve anche come habitat naturale per
numerosi gruppi di batteri, funghi, protozoi. Ci sono tutte le condizioni favorevoli per lo sviluppo dei microrganismi. Sono numerosi i batteri che effettuano l’autopulizia del cavo orale. L'autoflora della saliva ha proprietà antagoniste contro i microrganismi patogeni. Il contenuto totale di microbi nella saliva varia da 10 * 7 a
10*10 in 1 ml. Tra gli abitanti permanenti del cavo orale figurano S.salivarius,
streptococchi verdi, varie forme coccaliche, batterioidi, attinomiceti, candida, spirochete e spirilla, lattobacilli. Nella cavità orale diversi autori hanno trovato fino a 100 diverse specie di microrganismi aerobici e anaerobici. Gli streptococchi "orali" (S.salivarius e altri) costituiscono la stragrande maggioranza (più dell'85%) e hanno un'elevata attività adesiva sulla superficie degli epiteliociti buccali, fornendo così resistenza alla colonizzazione di questo biotopo.
L'esofago non ha una microflora permanente e i batteri che vi si trovano sono rappresentanti del paesaggio microbico della cavità orale.
Stomaco. Un gran numero di microrganismi diversi entrano nello stomaco insieme al cibo, ma, nonostante ciò, la sua flora è relativamente povera. Nello stomaco, le condizioni per lo sviluppo della maggior parte dei microrganismi sono sfavorevoli (reazione acida del succo gastrico ed elevata attività degli enzimi idrolitici).
Intestini. Lo studio della microflora dell'intestino tenue è associato a grandi difficoltà metodologiche. Recentemente vari autori sono giunti a conclusioni inequivocabili: le sezioni alte dell'intestino tenue sono vicine allo stomaco in termini di natura della microflora, mentre nelle sezioni inferiori la microflora comincia ad avvicinarsi alla flora dell'intestino crasso. La contaminazione dell'intestino crasso è la più grande. Questa sezione del tubo digerente contiene 1-5x 10 * 11 microbi in 1 ml di contenuto, che corrisponde al 30% delle feci. La microbiocenosi dell'intestino crasso è solitamente divisa in flora permanente (obbligata, residente) e facoltativa.
Al gruppo permanente includono bifidobatteri, batterioidi, lattobacilli, E. coli ed enterococchi. In generale, nella microflora dell'intestino crasso, gli anaerobi obbligati predominano sugli anaerobi facoltativi. Attualmente sono state riviste le idee sulla posizione dominante dell'Escherichia coli nella microflora dell'intestino crasso. In termini quantitativi, rappresenta l'1% della massa totale dei batteri, significativamente inferiore agli anaerobi obbligati.
Alla flora opzionale vari membri della grande famiglia delle Enterobacteriaceae. Costituiscono il cosiddetto gruppo di batteri condizionatamente patogeni: citrobacter, enterobacter, Klebsiella, Proteus.
Pseudomonas può essere attribuito alla flora instabile: un bacillo di pus blu-verde, streptococchi, stafilococchi, neisseria, sarcini, candida, clostridi. Particolarmente degno di nota è il Clostridium difficile, il cui ruolo è stato studiato nell'ecologia microbica dell'intestino in relazione all'uso di antibiotici e alla comparsa di colite pseudomembranosa.
I bifidobatteri svolgono un ruolo importante nella microflora intestinale dei neonati. È interessante notare che la microflora intestinale dei neonati e dei bambini nutriti con latte artificiale differisce l'una dall'altra. La composizione delle specie della bifidoflora della flora è in gran parte determinata dalla natura della nutrizione. Nei bambini allattati al seno, tra tutta la bifidoflora isolata dalle feci, B.bifidi (72%) è stata riscontrata nella stragrande maggioranza, con l'alimentazione artificiale prevalevano B.longum (60%) e B.infantis (18%). Va notato che gli autoceppi dei bifidobatteri della madre e del bambino hanno la migliore capacità adesiva.
Funzioni fisiologiche della microflora normale.
Le funzioni fisiologiche della normale microflora sono la sua influenza su molti processi vitali. Agendo attraverso l'apparato recettoriale degli enterociti, fornisce resistenza alla colonizzazione, potenzia i meccanismi dell'immunità generale e locale. La microflora intestinale secerne acidi organici (lattico, acetico, formico, butirrico), che impediscono la riproduzione di batteri opportunisti e patogeni in questa nicchia ecologica.
In generale, i rappresentanti del gruppo costante (bifidobatteri, lattobacilli, colibacilli) creano un biostrato superficiale che fornisce una varietà di funzioni protettive di questo biotopo.
In violazione dell'equilibrio dinamico tra il macroorganismo e la normale microflora, sotto l'influenza di vari motivi, si verificano cambiamenti nella composizione delle microbiocenosi e si formano gradualmente sindrome da disbatteriosi.
Disbatteriosi - Questo è un processo patologico complesso causato da una violazione della relazione esistente tra macro e microrganismi. Comprende, oltre ai cambiamenti nella composizione qualitativa e quantitativa della microflora, nonché una violazione delle funzioni dell'intero sistema ecologico. La disbatteriosi è una violazione della normale microflora associata ad un indebolimento della resistenza alla colonizzazione delle mucose.
Apparentemente, la "disbatteriosi" dovrebbe essere considerata non come una diagnosi indipendente, ma come una sindrome - un complesso di sintomi osservati nei processi patologici in varie parti del tratto digestivo sullo sfondo di problemi ambientali.
Con grave disbatteriosi osservata:
1. Cambiamenti nella normale microflora del corpo - sia qualitativi (cambiamento di specie) che quantitativi (la predominanza di specie che di solito sono isolate in piccole quantità, ad esempio batteri di un gruppo opzionale).
2. Cambiamenti metabolici - invece degli anaerobi obbligati predominano i microrganismi con un diverso tipo di respirazione (processi energetici) - anaerobici facoltativi e persino aerobici.
3. Cambiamenti nelle proprietà biochimiche (enzimatiche, sintetiche) - ad esempio, la comparsa di Escherichia con una ridotta capacità di fermentare il lattosio; ceppi emolitici, con attività antagonista indebolita.
4. Sostituzione dei tradizionali microrganismi sensibili agli antibiotici con batteri multiresistenti, cosa particolarmente pericolosa se si considera la comparsa di infezioni opportunistiche (ospedaliere) negli ospedali.
Cause della disbatteriosi.
1. Indebolimento del macroorganismo (sullo sfondo di infezioni virali e batteriche, malattie allergiche e oncologiche, immunodeficienze secondarie, durante l'assunzione di citostatici, radioterapia, ecc.).
2. Violazione delle relazioni all'interno delle microbiocenosi (ad esempio, sullo sfondo dell'assunzione di antibiotici). Ciò porta ad un'eccessiva riproduzione di microbi, che normalmente costituiscono una parte insignificante della microflora, nonché alla colonizzazione della mucosa intestinale da parte di batteri, funghi, ecc., insolita per questa nicchia.
La sindrome da disbatteriosi nelle fasi iniziali dello sviluppo viene rilevata durante gli studi batteriologici e, in casi relativamente rari, se persistono le cause che ne hanno provocato la comparsa, passa in forme clinicamente significative (colite pseudomembranosa). Le manifestazioni cliniche della disbatteriosi si presentano il più delle volte come endogene o autoinfezioni. Dal punto di vista clinico, la disbatteriosi è una patologia della normale microflora, irta del pericolo di infezioni endogene. Il grado delle manifestazioni cliniche della disbatteriosi (il più delle volte c'è disfunzione intestinale - diarrea, metiorismo, stitichezza; i bambini possono avere manifestazioni allergiche) dipende dallo stato del macroorganismo, dalla sua reattività.
Principi di prevenzione e terapia della sindrome da disbatteriosi intestinale.
1. Terapia sostitutiva con batteri vivi della flora normale che popolano l'intestino crasso.
Preparazioni commerciali: colibacterin (Escherichia coli vivo, che ha proprietà antagoniste contro i batteri opportunisti), bifidumbacterin (bifidobatteri), lattobatterini (lattobacilli) e loro combinazioni (bifikol, bifilakt). Vengono utilizzati sotto forma di batteri vivi liofilizzati, nonché sotto forma di prodotti preparati dalla fermentazione del latte con questi batteri (yogurt, latte cotto fermentato, ecc.).
(La questione dei meccanismi d'azione di questi farmaci è ancora in discussione: o per l'"attecchimento" nell'intestino di ceppi introdotti artificialmente, oppure per la creazione da parte dei prodotti metabolici di questi ceppi di condizioni per la sopravvivenza e la colonizzazione dell'intestino con batteri della propria microflora normale).
Per i bambini dei primi anni di vita, succhi e alimenti per l'infanzia vengono prodotti con l'aggiunta di batteri vivi della normale microflora (bifidobatteri, lattobacilli).
2. Preparati contenenti prodotti metabolici purificati di batteri della microflora normale (con pH ottimale), ad esempio Hilak-Forte. Questi farmaci creano le condizioni necessarie nell'intestino per la colonizzazione della sua normale autoflora e impediscono la riproduzione di batteri opportunistici putrefattivi.
14. Microflora umana normale
La normale microflora umana è un insieme di molti microbiocenosi caratterizzati da determinate relazioni e habitat.
Tipi di microflora normale:
1) residente - permanente, caratteristico di questa specie;
2) transitorio - temporaneamente intrappolato, insolito per un dato biotopo; Non si riproduce attivamente.
Fattori che influenzano lo stato della microflora normale.
1. Endogeno:
1) funzione secretoria del corpo;
2) background ormonale;
3) stato acido-base.
2. Condizioni di vita esogene (climatiche, domestiche, ambientali).
Nel corpo umano, il sangue, il liquido cerebrospinale, il liquido articolare, il liquido pleurico, la linfa del dotto toracico, gli organi interni: cuore, cervello, parenchima del fegato, reni, milza, utero, vescica, alveoli polmonari sono sterili.
La microflora normale riveste le mucose sotto forma di biofilm. Questa struttura è costituita da polisaccaridi di cellule microbiche e mucina. Lo spessore del biofilm è 0,1–0,5 mm. Contiene da diverse centinaia a diverse migliaia di microcolonie.
Fasi di formazione della normale microflora del tratto gastrointestinale (GIT):
1) semina accidentale della mucosa. Lattobacilli, clostridi, bifidobatteri, micrococchi, stafilococchi, enterococchi, Escherichia coli, ecc. entrano nel tratto gastrointestinale;
2) la formazione di una rete di batteri a nastro sulla superficie dei villi. Su di esso sono fissati principalmente batteri a forma di bastoncino, il processo di formazione del biofilm è costantemente in corso.
La microflora normale è considerata un organo extracorporeo indipendente con una struttura e funzioni anatomiche specifiche.
Funzioni della microflora normale:
1) partecipazione a tutti i tipi di scambio;
2) disintossicazione in relazione a eso ed endoprodotti, trasformazione e rilascio di sostanze medicinali;
3) partecipazione alla sintesi delle vitamine (gruppi B, E, H, K);
4) protezione:
a) antagonista (associato alla produzione di batteriocine);
b) resistenza alla colonizzazione delle mucose;
5) funzione immunogenica.
La contaminazione più elevata è caratterizzata da:
1) intestino crasso;
2) cavità orale;
3) sistema urinario;
4) tratto respiratorio superiore;
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La microflora umana è un insieme di biocenosi microbiche presenti nel corpo di persone sane e formate nel processo di evoluzione. Queste biocenosi sono caratterizzate da una relativa costanza, tuttavia, la composizione qualitativa e quantitativa della microflora del corpo umano cambia nel corso della vita e dipende dal sesso, dall'età, dalla nutrizione, dal clima, ecc. Inoltre, i cambiamenti nelle biocenosi microbiche possono essere dovuti al comparsa di malattie, uso di agenti chemioterapici e immunologici.
I microrganismi abitano la pelle e le mucose di numerosi organi e cavità che comunicano con l'ambiente esterno. Sangue, linfa, organi interni, cervello e midollo spinale, liquido cerebrospinale sono sterili.
La microflora del corpo umano può essere divisa in due gruppi: obbligata (o residente, autoctona) e facoltativa (o transitoria). La microflora obbligata comprende microrganismi che sono massimamente adattati all'esistenza nel corpo umano e presenti naturalmente nei suoi organi e cavità. La microflora facoltativa è temporanea, facoltativa ed è determinata dalla contaminazione microbica dell'ambiente e dallo stato di resistenza del corpo umano. La composizione della microflora residente e transitoria comprende microrganismi saprofiti e condizionatamente patogeni.
Recentemente, le infezioni nosocomiali o contratte in ospedale, i cui agenti causali sono microrganismi opportunisti appartenenti alla microflora umana residente, sono diventate sempre più importanti nella patologia umana. La loro patogenicità si realizza quando la resistenza del macroorganismo viene indebolita.
La microflora dei singoli biotopi del corpo umano è diversa e richiede una considerazione separata.
Microflora cutanea
La superficie della pelle umana, in particolare le sue parti aperte, è contaminata da vari microrganismi; qui vengono determinati da 25.000.000 a 1.000.000.000 di microbi.
La microflora della pelle umana è rappresentata da sarcini, stafilococchi, difteroidi, alcuni tipi di streptococchi, bacilli, funghi, ecc.
Oltre alla microflora caratteristica della pelle, qui possono essere presenti microrganismi transitori che scompaiono rapidamente sotto l'influenza delle proprietà battericide della pelle. La pelle puramente lavata ha una grande capacità di auto-pulizia. L'attività battericida della pelle riflette la resistenza generale dell'organismo.
La pelle intatta per la maggior parte dei microrganismi, compresi gli agenti patogeni, è impenetrabile. Se la loro integrità viene violata e la resistenza del corpo diminuisce, possono verificarsi malattie della pelle.
Esame sanitario e batteriologico della pelle
L'esame sanitario e batteriologico della pelle viene effettuato con due metodi:
1. Semina delle impronte su MPA in piastre Petri con successivo esame macroscopico e microscopico delle colonie coltivate.
2. Tamponi di semina dalla pelle per determinare la conta microbica totale e l'Escherichia coli.
Con un tampone imbevuto di 10 ml di soluzione salina sterile, pulire accuratamente i palmi, gli spazi subungueali e interdigitali di entrambe le mani. Il tampone viene risciacquato in una provetta con soluzione salina e durante il lavaggio iniziale viene esaminata la conta microbica totale e la presenza di Escherichia coli.
Determinazione del numero microbico totale
1 ml del lavaggio viene posto in una piastra Petri sterile, vengono versati 12-15 ml di liquido fuso e raffreddato a 450 MPa, il contenuto della piastra viene miscelato e, dopo che l'agar si è solidificato, le inoculazioni vengono incubate a 370 C per 24-48 ore produrre con una lente d'ingrandimento.
Definizione di Escherichia coli
La quantità rimanente di lavaggio viene posta in una provetta con terreno peptone glucosio. Le inoculazioni vengono incubate per 24 ore a 43° C. In presenza di formazione di gas, l'inoculazione viene effettuata sul terreno Endo. La crescita di colonie rosse su questo terreno indicherà la presenza di Escherichia coli nel lavaggio, indicando la contaminazione fecale delle mani.
La microflora del cavo orale
Nella cavità orale ci sono condizioni favorevoli per lo sviluppo di microrganismi: presenza di nutrienti, temperatura ottimale, umidità, reazione alcalina della saliva.
Nel mantenimento della costanza qualitativa e quantitativa della normale microflora del cavo orale, il ruolo principale è svolto dalla saliva, che possiede attività antibatterica grazie agli enzimi in essa contenuti (lisozima, lattoferrina, perossidasi, nucleasi) e alle immunoglobuline secretrici.
Streptococchi, Neisseria, lattobacilli, funghi simili a lieviti, attinomiceti si trovano nella cavità orale dei neonati entro la fine della prima settimana. La composizione quantitativa e specifica dei microbi orali dipende dalla dieta e dall'età del bambino. Durante la dentizione compaiono gli anaerobi gram-negativi obbligati.
Nella cavità orale si trovano più di 100 tipi di microrganismi, la maggior parte dei quali sono aerobi e anaerobi facoltativi.
La maggior parte dei microrganismi orali è localizzata nella placca: 1 mg di massa secca di placca contiene circa 250 milioni di cellule microbiche. Un gran numero di microrganismi si trovano sul collo del dente, nello spazio tra i denti e in altre parti della cavità orale, inaccessibili al lavaggio con la saliva, così come sulle mucose delle tonsille faringee. Le fluttuazioni individuali nella composizione qualitativa e quantitativa della microflora orale dipendono dall'età, dalla dieta, dalle capacità igieniche, dalla resistenza della mucosa e dalla presenza di processi patologici nei denti e nelle gengive.
Il gruppo residente dei batteri orali è costituito da streptococchi (Streptococcus salivarius), stafilococchi non patogeni, Neisseria saprofita, corinobatteri, lattobacilli, batterioidi, batteri fusiformi, funghi simili a lieviti, attinomiceti, micoplasmi (M. orule), protozoi (Entamoeba buccalis).
I microrganismi facoltativi includono enterobatteri (genere Esherichia, Klebsiella, Enterobacter, Proteus), Pseudomonas aeruginosa, batteri sporigeni (genere Bacillus, Clostridium), microrganismi del genere Campylobacter (C. consicus, C. sputorum).
Per uno studio qualitativo e quantitativo della microflora del cavo orale vengono utilizzati metodi di ricerca batterioscopica e batteriologica.
metodo batterioscopico. Il materiale indagato è la placca dentale. Lo striscio viene colorato secondo Gram o Burri e si studiano le proprietà morfologiche e tintoriali dei microrganismi.
metodo batteriologico. Il materiale per lo studio è il muco faringeo, che viene prelevato con un tampone di cotone sterile. La semina con lo stesso tampone viene effettuata con colpi su una piastra Petri con agar sangue. Dopo un'incubazione giornaliera a 37°C, dalle colonie cresciute vengono preparati degli strisci, colorati secondo Gram e vengono studiate le proprietà morfologiche e tintoriali della coltura isolata di microrganismi.
Microflora del tratto gastrointestinale
Con il normale funzionamento dello stomaco, la microflora in esso contenuta è quasi assente, a causa della reazione acida del succo gastrico e dell'elevata attività degli enzimi idrolitici. Pertanto, nello stomaco si possono trovare specie resistenti agli acidi in una piccola quantità: lattobacilli, lievito, Sarcina ventriculi, ecc. (10 6 -10 7 cellule per 1 ml di contenuto).
Nel duodeno e nelle sezioni superiori dell'intestino tenue sono presenti pochi microrganismi, nonostante l'ambiente acido dello stomaco sia sostituito da uno alcalino. Ciò è dovuto agli effetti negativi sui microbi degli enzimi qui presenti. Qui si trovano enterococchi, batteri lattici, funghi, difteroidi (10 6 cellule per 1 ml di contenuto). Nelle parti inferiori dell'intestino tenue, arricchendosi gradualmente, la microflora si avvicina alla microflora dell'intestino crasso.
La microflora dell'intestino crasso è la più diversificata in termini di numero di specie (più di 200 specie) e numero di microbi rilevati (10 9 -10 11 cellule per 1 ml di contenuto). I microbi costituiscono 1/3 della massa secca delle feci.
La microflora obbligata è rappresentata da batteri anaerobici (batterioidi, bifidumbatteri, velalonella) (96-99%) e anaerobi facoltativi (E. coli, enterococchi, lattobacilli - 1-4%).
La microflora transitoria è rappresentata dai seguenti generi e specie: Proteus, Klebsiella, Clostridia, Pseudomonas aeruginosa, Campylobacter, funghi simili a lieviti del genere Candida, ecc. Microrganismi del genere Campylobacter (C. fennelliae, C. cinaedi, C. hyointestinalis) si trovano nell'intestino crasso umano in condizioni di immunodeficienza di diversa natura.
La composizione della microflora intestinale cambia nel corso della vita di una persona.
Nei neonati, nelle prime ore dopo la nascita, il meconio è sterile, una fase asettica. La seconda fase è la fase di crescente contaminazione (i primi tre giorni di vita del bambino). Durante questo periodo nell'intestino predominano Escherichia, stafilococchi, enterococchi e funghi simili a lieviti. La terza fase è la fase di trasformazione della flora intestinale (a partire dal 4° giorno di vita). Vengono stabiliti la microflora dell'acido lattico, i lattobacilli, i batteri acidofili.
Dopo la fine dell'allattamento al seno, inizia gradualmente a formarsi una biocenosi permanente nel tratto digestivo.
Nella microflora del tratto gastrointestinale sono presenti la microflora della mucosa (M) e del lume (P), la cui composizione è diversa. La flora M è strettamente associata alla mucosa, è più stabile ed è rappresentata da bifidumbatteri e lattobacilli. M-flora impedisce la penetrazione nella mucosa da parte di microrganismi patogeni e opportunistici. La flora P, insieme al bifido e ai lattobacilli, comprende altri abitanti permanenti dell'intestino.
Per studiare la microflora dell'intestino crasso si esaminano le feci, che vengono prelevate con una bacchetta di legno o di vetro sterile e poste in una provetta con un conservante. Il materiale viene consegnato al laboratorio entro 1 ora, poiché la conservazione a lungo termine interrompe in modo significativo la relazione tra le specie.
Gli strisci e le feci colorati con Gram vengono esaminati al microscopio e le feci vengono inoculate su terreni nutritivi: Endo, agar sangue, agar latte-sale, agar Sabouraud. La semina viene effettuata in modo tale che sia possibile contare il numero di colonie con caratteristiche diverse e determinare il numero di cellule microbiche di diversi tipi di microrganismi in un dato campione. Se necessario vengono effettuate l'identificazione biochimica e la tipizzazione sierologica delle specie.
La microflora delle vie respiratorie
Le particelle di polvere e i microrganismi entrano nelle vie respiratorie insieme all'aria, di cui 3/4-4/5 vengono trattenuti nella cavità nasale, dove dopo poco muoiono a causa dell'azione battericida del lisozima e della mucina, funzione protettiva dell'epitelio e l'attività dei fagociti. La composizione della microflora obbligata dei passaggi nasali comprende stafilococchi, corinebatteri. La microflora facoltativa è rappresentata da Staphylococcus aureus, streptococchi, Neisseria non patogena. La microflora del rinofaringe è rappresentata da streptococchi, batterioidi, neisseria, velalonella, micobatteri.
La mucosa della trachea e dei bronchi è sterile. I piccoli bronchi, gli alveoli e il parenchima polmonare umano sono esenti da microrganismi.
Per l'esame microbiologico, il materiale viene prelevato dal naso con un tampone sterile e dal rinofaringe con un tampone faringeo posteriore sterile. Effettuare la semina su agar sangue e agar tuorlo-sale. La coltura isolata viene identificata. Il materiale rimanente sul tampone viene utilizzato per preparare strisci colorati secondo Gram e Neisser.
Microflora della congiuntiva
In una percentuale significativa di casi la microflora della congiuntiva è assente, a causa delle proprietà battericide del liquido lacrimale. In alcuni casi, sulla congiuntiva dell'occhio possono essere rilevati stafilococchi, corinebatteri (Corinebacterium xerosis), micoplasmi. Con una diminuzione delle difese naturali dell'organismo, disturbi della vista, ipovitaminosi, la normale microflora delle mucose degli occhi può causare varie malattie: congiuntivite, bleforite e altri processi suppurativi.
Microflora dell'orecchio
Nel canale uditivo esterno si trovano stafilococchi non patogeni, corinebatteri, funghi simili a lieviti e muffe (Aspergillus), che in determinate condizioni sono gli agenti causali dei processi patologici. L'orecchio interno e medio normalmente non contengono microbi.
Microflora del sistema genito-urinario
I reni, gli ureteri e l'urina nella vescica sono sterili. Stafilococchi, difteroidi, batterioidi, micobatteri, batteri gram-negativi non patogeni vivono nell'uretra degli uomini. L'uretra femminile è sterile.
Sui genitali esterni di uomini e donne si trovano micobatteri smegmy (M. smegmatis), stafilococchi, corinebatteri, micoplasmi (M. hominis), treponemi saprofiti.
La composizione della microflora vaginale è varia, variabile e dipende dal livello di glicogeno nelle cellule epiteliali e dal pH della secrezione vaginale, che è associato alla funzione ovarica.
La colonizzazione della vagina da parte dei lattobacilli avviene immediatamente dopo la nascita. Quindi gli enterococchi, gli streptococchi, gli stafilococchi, i corinebatteri sono inclusi nella microbiocenosi. La flora coccalica diventa la principale e caratteristica per il periodo dell'infanzia fino all'inizio della pubertà. Con l'inizio della pubertà, i batteri lattici aerobici e anaerobici predominano nella composizione della microflora e domina il gruppo di batteri Doderlein.
Esistono diverse categorie di pulizia vaginale di donne sane: 1a categoria - i bastoncini di Doderlein si trovano nei preparati per strisci, non ci sono quasi altri tipi di microrganismi; 2a categoria - oltre ai batteri lattici, esiste un piccolo numero di diplococchi gram-positivi; 3a categoria: diminuisce il numero di batteri lattici, aumenta il numero di leucociti e altra microflora; 4a categoria: un numero abbondante di leucociti e varia microflora, i bastoncini di Doderlein sono quasi assenti. Le categorie 1 e 2 si osservano nelle donne sane, 3 e 4 - nelle donne con processi infiammatori nella vagina. La cavità uterina nelle donne sane è sterile.
Il valore della normale microflora del corpo umano
La relazione evolutiva tra una persona e la sua microflora gioca un ruolo importante nel normale funzionamento del corpo.
Il ruolo positivo della normale microflora è associato a proprietà vitaminizzanti, enzimatiche, antagoniste e di altro tipo.
La microflora obbligata (E. coli, lattobacilli, bifidumbatteri, alcuni tipi di funghi) ha proprietà antagoniste pronunciate contro alcuni agenti patogeni di malattie infettive.
Le proprietà antagoniste della normale microflora sono associate alla formazione di sostanze antibiotiche, batteriocine, alcoli, acido lattico e altri prodotti che inibiscono la riproduzione di specie microbiche patogene.
Alcuni enterobatteri (E. coli) sintetizzano le vitamine del gruppo B, la vitamina K, gli acidi pantotenico e folico, di cui il macroorganismo ha bisogno. I batteri lattici sono anche attivi produttori di vitamine.
Il ruolo della microflora nella formazione della resistenza dell'organismo è grande. In caso di violazione della composizione della normale microflora negli gnotobionti (animali privi di microbi), si osserva ipoplasia del tessuto linfoide, diminuzione dei fattori di immunità cellulare e umorale.
La microflora del tratto gastrointestinale influenza la struttura morfologica della mucosa intestinale e la sua capacità di adsorbimento; Scomponendo le sostanze organiche complesse, questi microrganismi favoriscono la digestione.
È stato stabilito che un abitante permanente dell'intestino come C. perfrigens ha la capacità di produrre enzimi digestivi.
Per il normale funzionamento del corpo umano è importante il rapporto tra il macroorganismo e la microflora che lo abita. In caso di violazione delle relazioni esistenti, la cui causa può essere ipotermia, surriscaldamento, radiazioni ionizzanti, influenze mentali, ecc., I microbi si diffondono dai loro habitat abituali, penetrando nell'ambiente interno e causando processi patologici.
Disbiosi
La disbiosi è una violazione qualitativa e quantitativa dell'equilibrio ecologico tra le popolazioni microbiche nella composizione della microflora del corpo umano. La disbiosi si verifica in caso di esposizione a fattori destabilizzanti, come l'uso irrazionale di antibiotici ad ampio spettro, antisettici, una forte diminuzione della resistenza del corpo dovuta a infezioni croniche, radiazioni, ecc.
Con la disbiosi vengono soppressi i microbi antagonisti, che regolano la composizione della biocenosi microbica e la riproduzione dei microrganismi opportunisti. In questo modo si registra un aumento e una diffusione di microrganismi dei generi Pseudomonas, Klebsiella, Proteus, che sono causa di infezioni nosocomiali, funghi simili a lieviti Candida albicans, che causano candidosi, E. coli, che è l'agente eziologico della colienterite , eccetera.
Per il trattamento della disbiosi vengono utilizzati gli eubiotici, preparati ottenuti da microrganismi viventi, rappresentanti della normale microflora del corpo umano. Questi farmaci includono colibacterin (batteri vivi di Escherichia coli, ceppo M-17), bifidumbacterin (sospensione di B. bifidum vivo, ceppo n 1), lactobacterin (sospensione di ceppi vivi di Lactobacterium), bificol (una preparazione complessa costituita da una sospensione di bifidumbatteri vivi, ceppo n 1 ed Escherichia coli, ceppo M-17).
Il corpo umano è abitato (colonizzato) da circa 500 specie di microrganismi che costituiscono la sua normale microflora, sotto forma di comunità di microrganismi ( microbiocenosi ). Sono in uno stato di equilibrio eubiosi ) tra loro e con il corpo umano. La maggior parte di questi microrganismi sono commensali che non danneggiano l’uomo. La microflora colonizza la superficie del corpo e le cavità che comunicano con l'ambiente. Normalmente, i microrganismi sono assenti nei polmoni, nell'utero e negli organi interni. Esistono microflora permanenti e transitorie. La microflora permanente (residente, indigena o autoctona) è rappresentata da microrganismi costantemente presenti nell'organismo. La microflora transitoria (non permanente o alloctona) non è in grado di esistere a lungo termine nel corpo.
La microflora permanente può essere divisa in obbligata e facoltativa. La microflora obbligata (bifidobatteri, lattobacilli, peptostreptococchi, Escherichia coli, ecc.) è la base della microbiocenosi, mentre la microflora facoltativa (stafilococco, streptococco, klebsiella, clostridi, alcuni funghi, ecc.) comprende una parte minore della microbiocenosi.
Il numero di microrganismi in un adulto è di circa 1014 individui, con una predominanza di anaerobi obbligati. I microrganismi che compongono la normale microflora sono racchiusi in una matrice di esopolisaccaride-mucina altamente idratata, formando un film biologico resistente a vari influssi.
Microflora cutanea . Sulla pelle, nei suoi strati più profondi (follicoli piliferi, dotti sebacei e ghiandole sudoripare), sono presenti da 2 a 10 volte più anaerobi che aerobi. La pelle è colonizzata da batteri gram-positivi (propionibatteri, batteri corineformi, stafilococchi epidermici e altri stafilococchi coagulasi-negativi*, micrococchi, peptostreptococchi, streptococchi, Dermabacter hominis), funghi simili a lieviti del genere Malassezia; microflora transitoria meno comune (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, ecc.). Quando il corpo è indebolito, aumenta il numero di batteri gram-negativi sulla pelle.
Normalmente ci sono meno di 80.000 microrganismi per 1 cm2 di pelle e questo numero non aumenta per l'azione dei fattori battericidi sterilizzanti. Ad esempio, nel sudore della pelle si trovano: immunoglobuline A e B, transferrina, lisozima, acidi organici e altre sostanze antimicrobiche. Anche il basso pH (5,5) e la bassa temperatura cutanea limitano la crescita di microrganismi. Le zone più umide della pelle sono colonizzate dal maggior numero di microrganismi (10˄6 per 1 cm˄2), ad esempio nelle pieghe inguinali, negli spazi interdigitali, nelle ascelle. L'aumento della crescita dei microrganismi si verifica quando la pelle è contaminata; quando il corpo è indebolito, i microrganismi che vi si moltiplicano determinano l'odore del corpo.
Microflora cutaneaè di grande importanza nella diffusione dei microrganismi nell’aria. A causa della desquamazione della pelle, diversi milioni di scaglie, ciascuna contenente diversi microrganismi, inquinano l'ambiente.
Microflora della congiuntiva . Sulla congiuntiva dell'occhio è presente una piccola quantità di batteri corineformi e stafilococchi. Un piccolo numero di microbi sulla congiuntiva è dovuto all'azione del lisozima e di altri fattori battericidi nel liquido lacrimale.
Microflora delle prime vie respiratorie .
Le particelle di polvere cariche di microrganismi entrano nel tratto respiratorio superiore, la maggior parte dei quali viene trattenuta e muore nel rinofaringe e nell'orofaringe. Qui crescono batterioidi, batteri corineformi, bacilli emofili, lattobacilli, stafilococchi, streptococchi, neisseria, peptococchi, peptostreptococchi, ecc .. Trachea, bronchi e alveoli sono generalmente sterili.
Microflora del tratto gastrointestinale . La microflora del tratto digestivo è la più rappresentativa in termini di composizione qualitativa e quantitativa. I microrganismi vivono liberamente nella cavità del tubo digerente e colonizzano anche le mucose sotto forma di film biologico.
* S. hominis, S. haemolyticus. S. warneri, S. capitis (sulla fronte, viso), S. saprophyticus. S. caprae, S. saccarolitico
S. pasteun, S. lugdunensis, S. simulans, S. xylosis. S. auric jularis colonizza il canale uditivo esterno. J
Tabella 7.5. Caratteristiche dei principali immunomodulatori utilizzati in clinica
| Nome del farmaco |
Applicazione del farmaco |
|
I. Preparati di origine microbica |
|
|
Prodigiosan (lipopolisaccaride di B. prodigiosum) |
Infezioni croniche (stimolazione dell'interferonogenesi, genesi degli anticorpi, attività della fagocitosi) |
|
Pirogeno (lipopolisaccaride di Pseudomonas aeruginosa) |
Infezioni croniche, talvolta con allergie, dermatosi |
|
Malattie con danno all'immunità umorale (immunomodulazione del sistema B dei linfociti) |
|
|
Immunofan (esapeptide, derivato sintetico della timopoietina) |
Prevenzione e trattamento delle immunodeficienze, con tumori |
|
Kemantan (composti contenenti adamantantano) |
Immunodeficienze, sindrome da stanchezza cronica |
|
Leacadina (2-carbamoilaziridina) |
Leucopenia, trombocitopenia |
|
Diucifon (para-para-(2,4-diosso-b-metilpirimidinil- |
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Bocca . Nella cavità orale vivono numerosi microrganismi. In 1 ml di saliva vivono fino a decine di batteri. Ciò è facilitato dai resti di cibo in bocca, da una temperatura favorevole (37 ° C) e da una reazione alcalina dell'ambiente. Ci sono più anaerobi che aerobi, 100 volte o più. Qui vivono una varietà di batteri: batterioidi, prevotella, porphyromonas, bifidobatteri, eubatteri, fusobatteri, lattobacilli, attinomiceti, bastoncini emofilici, leptotrichia, neisseria, spirochete, streptococchi, stafilococchi, peptococchi, peptostreptococchi, velalonella, ecc. funghi del genere Candida e protozoi (Entamaeba gingivaLis, Trichomonas tenax).
I batteri hanno una distribuzione topografica definita. Quindi, gli streptococchi si trovano diversamente: sull'epitelio delle guance - S. mitior, sulle papille della lingua, nella saliva - S. salivarius, sui denti - S. mutans. Gli attinomiceti sono presenti in gran numero sulla lingua, nelle tasche gengivali, nella placca dentale e nella saliva. I soci della normale microflora e i loro prodotti metabolici formano la placca.
La composizione della microflora della bocca regolato dall'azione meccanica della saliva e della lingua; i microrganismi vengono lavati via con la saliva dalla mucosa e dai denti (una persona ingoia circa un litro di saliva al giorno). I componenti antimicrobici della saliva, in particolare il lisozima, gli anticorpi (IgA secretorie), inibiscono l'adesione di microbi estranei agli epiteliociti. D'altra parte, i batteri formano polisaccaridi: S. sanguis e S. mutans convertono il saccarosio in un polisaccaride extracellulare (glucani, destrani) coinvolto nell'adesione alla superficie del dente. La colonizzazione da parte di una parte costante della microflora è facilitata dalla fibronectina, che riveste gli epiteliociti delle mucose. Ha un'affinità per i batteri Gram-positivi. Quando i livelli di fibronectina sono bassi, i batteri gram-positivi vengono sostituiti da quelli gram-negativi.
Microflora della vagina comprende lattobacilli, bifidobatteri, batterioidi, propionibatteri, porfirinomonas, prevotella, peptostreptococchi, batteri corineformi, ecc. Predominano gli anaerobi: il rapporto anaerobi/aerobi è 10/1. Durante il periodo riproduttivo della vita predominano i batteri gram-positivi e durante la menopausa vengono sostituiti da batteri gram-negativi. Circa il 5-60% delle donne sane ha Gardnerella vaginalis; 15-30% - Mycoplasma hominis; Il 5% ha batteri del genere Mobiluncus.
La composizione della microflora dipende da molti fattori: il ciclo mestruale, la gravidanza, ecc. Nelle cellule dell'epitelio vaginale si accumula il glicogeno (contributo degli estrogeni endogeni), che viene scomposto dai lattobacilli per formare acido lattico. Gli acidi organici risultanti acidificano il mezzo a pH 4-4,6. L'acidificazione delle secrezioni vaginali da parte dei lattobacilli, la loro produzione di perossido di idrogeno e batteriocine porta alla soppressione della crescita della microflora estranea.
Cavità uterina e vescica urinaria normalmente sterile.
Il valore della microflora del corpo umano
La microflora normale è uno dei fattori di resistenza non specifica dell'organismo. Ha proprietà antagoniste nei confronti della microflora patogena e putrefattiva, poiché produce acidi lattici, acetici, antibiotici, batteriocine; compete con la microflora estranea a causa del maggiore potenziale biologico.
- La microflora normale è coinvolta nel metabolismo del sale marino, nella regolazione della composizione del gas intestinale, nel metabolismo delle proteine, dei carboidrati, degli acidi grassi, del colesterolo, degli acidi nucleici, nonché nella produzione di composti biologicamente attivi: antibiotici, vitamine (K, gruppo B , ecc.), tossine, ecc.
- La microflora normale è coinvolta nella digestione e nella disintossicazione dei substrati e dei metaboliti esogeni, il che è paragonabile alla funzionalità epatica.
- La normale microflora è coinvolta nel riciclaggio degli ormoni steroidei e dei sali biliari a seguito dell'escrezione dei metaboliti dal fegato all'intestino e del successivo ritorno ad esso.
- La microflora normale svolge un ruolo morfocinetico nello sviluppo di vari organi e sistemi del corpo, partecipa all'infiammazione fisiologica della mucosa e al cambiamento dell'epitelio.
- La microflora normale svolge una funzione antimutagena, distruggendo le sostanze cancerogene nell'intestino. Allo stesso tempo, alcuni batteri possono produrre forti agenti mutageni. Gli enzimi dei batteri intestinali convertono il dolcificante artificiale ciclomato in un agente cancerogeno attivo per la vescica (cicloesamina).
- Gli esopolisaccaridi (glicocalix) dei microrganismi, che fanno parte del film biologico, proteggono le cellule microbiche da varie influenze fisiche e chimiche. Anche la mucosa intestinale è protetta da una pellicola biologica.
- La microflora intestinale ha un impatto significativo sulla formazione e sul mantenimento dell'immunità. L'intestino contiene circa 1,5 kg di microrganismi i cui antigeni stimolano il sistema immunitario. Il muramil dipeptide, che è formato dal peptidoglicano batterico sotto l'influenza del lisozima e di altri enzimi litici nell'intestino, è uno stimolante naturale non specifico dell'immunogenesi. Di conseguenza, si verifica un'abbondante saturazione del tessuto intestinale con linfociti e macrofagi, cioè normalmente l'intestino si trova, per così dire, in uno stato di infiammazione cronica. Gli gnotobionti animali cresciuti in un ambiente privo di microrganismi differiscono dagli animali normali per il tessuto linfoide poco sviluppato. Si distingue particolarmente la sottile lamina propria. Il tessuto intestinale è scarsamente saturo di linfociti e macrofagi, per cui gli gnotobionti animali sono instabili alle infezioni.
- La funzione più importante della microflora normale è la sua partecipazione alla resistenza alla colonizzazione. La resistenza alla colonizzazione è una combinazione di fattori protettivi del corpo e proprietà competitive, antagoniste e di altro tipo della normale microflora (principalmente anaerobi) dell'intestino, che conferiscono stabilità alla microflora e impediscono la colonizzazione delle mucose da parte di microrganismi estranei. Con una diminuzione della resistenza alla colonizzazione, aumenta il numero e lo spettro dei microbi opportunisti aerobici. La loro traslocazione attraverso le mucose può portare allo sviluppo di un processo pioinfiammatorio endogeno. Per prevenire complicanze infettive, con diminuzione della resistenza corporea e aumento del rischio di autoinfezione (in caso di lesioni estese, ustioni, terapia immunosoppressiva, trapianto di organi e tessuti, ecc.), è consigliabile mantenere o ripristinare la resistenza alla colonizzazione mediante decontaminazione selettiva . La decontaminazione selettiva è la rimozione selettiva di batteri e funghi aerobici dal tratto digestivo per aumentare la resistenza dell'organismo agli agenti infettivi. La decontaminazione selettiva viene effettuata prescrivendo farmaci chemioterapici scarsamente assorbiti per somministrazione orale che sopprimono la parte aerobica della microflora e non influenzano gli anaerobi (ad esempio la complessa somministrazione di vancomicina, gentamicina e nistatina).
- I rappresentanti della normale microflora, con una diminuzione della resistenza del corpo, causano processi infiammatori purulenti, cioè la normale microflora può diventare una fonte di autoinfezione o infezione endogena. Quando i microbi commensali si trasferiscono in habitat sconosciuti, possono causare vari disturbi. Ad esempio, i batterioidi normalmente presenti nell’intestino possono causare ascessi infiltrandosi in vari tessuti a seguito di traumi o interventi chirurgici. Lo Staphylococcus aureus, normalmente presente sulla pelle, tende a colonizzare i cateteri endovenosi, causando disturbi del flusso sanguigno. Commensali intestinali come l'Escherichia coli colpiscono il sistema urinario (cistite, ecc.).
- Come risultato dell'azione delle decarbossilasi microbiche e dell'LPS, viene rilasciata ulteriore istamina, che può causare condizioni allergiche.
- La microflora normale è un deposito e una fonte di geni cromosomici e plasmidici, in particolare di geni per la resistenza ai farmaci agli antibiotici.
- I singoli rappresentanti della microflora normale vengono utilizzati come microrganismi indicativi sanitari, indicando l'inquinamento ambientale (acqua, suolo, aria, cibo, ecc.) Con secrezioni umane e, quindi, il loro pericolo epidemiologico.
Disbatteriosi
Le condizioni che si sviluppano a seguito della perdita delle normali funzioni della microflora sono chiamate disbatteriosi e disbiosi. Questi disturbi si verificano sotto l'influenza di fattori ambientali, influenze stressanti, uso diffuso e incontrollato di farmaci antimicrobici, radioterapia e chemioterapia, malnutrizione, interventi chirurgici, ecc. Con la disbatteriosi si verificano cambiamenti quantitativi e qualitativi persistenti nei batteri che fanno parte della normale microflora. Con la disbiosi si verificano cambiamenti anche in altri gruppi di microrganismi (virus, funghi, ecc.). La disbiosi e la disbatteriosi possono portare a infezioni endogene. La disbiosi è classificata per eziologia (fungina, stafilococco, proteica, ecc.) e localizzazione (disbiosi della bocca, dell'intestino, della vagina, ecc.). I cambiamenti nella composizione e nelle funzioni della normale microflora sono accompagnati da vari disturbi: sviluppo di infezioni, diarrea, stitichezza, sindrome da malassorbimento, gastrite, colite, ulcera peptica, neoplasie maligne, allergie, urolitiasi, ipo e ipercolesterolemia, ipo e ipertensione, carie, artrite, danni al fegato, ecc.
Per ripristinare la normale microflora si effettua: a) decontaminazione selettiva; b) prescrivere preparati probiotici* ( eubiotici
) ottenuto da batteri viventi liofilizzati - rappresentanti della normale microflora intestinale - bifidobatteri (bifidumbacterin), E. coli (colibacterin), lattobacilli (lattobatterino), ecc.
* Probiotici - farmaci che, assunti per via orale, hanno un effetto normalizzante sull'organismo umano e sulla sua microflora.
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