Il contenuto di emoglobina, la velocità di eritrosedimentazione (ESR), il numero di eritrociti e leucociti in 1 μl di sangue, la formula dei leucociti (la percentuale di vari gruppi di leucociti), nonché l'indicatore di colore (un coefficiente che indica il grado di saturazione di erythrocytes con emoglobina) costituiscono i dati di un esame del sangue clinico generale.
Il sangue per l'analisi viene prelevato al mattino (non necessariamente prima di colazione), ma in condizioni policliniche il sangue deve essere prelevato dopo un riposo di 10-15 minuti.
Per la ricerca, il sangue viene prelevato dall'anulare della mano sinistra dopo un attento trattamento con alcol. Viene praticata una puntura sulla superficie laterale della parte carnosa della prima falange con un ago scarificatore sterile e il piano dell'ago deve essere perpendicolare al modello della pelle del dito - in questo caso, la ferita si apre e il sangue viene rilasciato per un a lungo.

Determinazione della concentrazione di emoglobina

Tra i metodi per determinare l'emoglobina, i metodi basati sulla colorimetria, ovvero la determinazione dell'intensità del colore, sono i più utilizzati.
Il più semplice di questi è la determinazione dell'emoglobina mediante colorimetria visiva nell'emometro Saly, che è un supporto di legno con una provetta graduata centrale, ai lati della quale sono presenti provette di vetro sigillate con uno standard di colore (ematina cloridrato in glicerina).
Una soluzione allo 0,1% di acido cloridrico viene preliminarmente versata nella provetta centrale fino alla tacca corrispondente a 2 o 3 g%, quindi vengono aggiunti con attenzione (esattamente!) 0,02 ml di sangue prelevato da un dito con una pipetta speciale attaccata all'emometro . Lo strato superficiale di acido viene lavato con una pipetta e, dopo aver mescolato il sangue e l'acido con una bacchetta di vetro, lasciare agire per 5 minuti per formare ematina cloridrato. Quindi, aggiungendo acqua distillata e mescolando continuamente con un bastoncino, il colore del liquido nel tubo centrale corrisponde completamente agli standard. La concentrazione di emoglobina corrisponde alla tacca di livello della soluzione sul menisco inferiore. La concentrazione di emoglobina può essere espressa in g% di emoglobina o in unità convenzionali. 16,67 g di emoglobina sono presi come 100 unità.
La concentrazione di emoglobina nel sangue nelle donne va da 11,7 a 15,8 g ° / o o da 117 a 158 g / l, negli uomini - da 13,3 a 18 g% o da 133 a 180 g / l.

Prelievo di sangue per contare gli elementi formati

Per contare gli elementi formati, il sangue viene diluito in miscelatori (melangers) o provette, che recentemente è diventato più diffuso.
Per contare i globuli rossi, il sangue viene diluito 200 volte con una soluzione di cloruro di sodio al 3%; se per prelevare il sangue usiamo una pipetta da un emometro, il cui volume è di 0,02 ml, allora dobbiamo prendere 4 ml di soluzione di cloruro di sodio.
Per contare i leucociti, il sangue viene diluito 20 volte, quindi vengono prelevati 0,02 ml di sangue e 0,38 ml di una soluzione colorata al 3% di acido acetico blu di metilene, necessaria per provocare la distruzione dei globuli rossi.
La raccolta del sangue deve essere effettuata con grande precisione, poiché a volumi così piccoli l'ingresso di una bolla d'aria o di un residuo di sangue all'esterno della pipetta porta ad un aumento dell'errore di determinazione.
Prima di riempire la camera, è necessario strofinare il vetro lucido nella camera in modo che appaiano anelli iridescenti.
Prima di riempire la camera, il sangue diluito viene accuratamente miscelato, poiché le cellule si depositano sulle pareti della provetta o dell'ampolla del miscelatore, dopodiché una goccia di sangue viene posta sotto il vetro smerigliato della camera e lasciata riposare per 1 minuto. cellule.
Il conteggio degli elementi formati viene effettuato a basso ingrandimento del microscopio (obiettivo 8X, oculare 15X o 10X) in un campo visivo oscurato.

Gli eritrociti vengono contati in 5 quadrati grandi (16x5 = 80 quadratini) situati in diverse parti della camera, puoi prendere quadrati posizionati in diagonale.
Gli eritrociti che si trovano all'interno del quadrato, e quelli che si trovano sui suoi lati superiore e sinistro, sono soggetti a conteggio; gli eritrociti che si trovano sui lati inferiore e destro non vengono contati, poiché appartengono già ad altri quadrati.
Dopo aver contato il numero di eritrociti (A) in 5 quadrati grandi, trovano il numero medio aritmetico di eritrociti in un quadratino A / 80, cioè in 1/4000 μl. Pertanto, per trovare il numero di globuli rossi in 1 µl, dobbiamo moltiplicare il numero ottenuto dalla divisione per 4000 e per 200 (diluizione).

Otteniamo quindi la seguente formula:

X=LA*4000*200/80,

dove X è il numero di eritrociti in 1 µl e A è il numero di eritrociti in 5 quadrati grandi.
Se contassimo i globuli rossi in 5 quadrati grandi e il sangue diluito 200 volte, il fattore totale per il numero A sarebbe 10.000.
Il contenuto normale di eritrociti nel sangue delle donne è 4-5 * 10 6 , uomini - 4,5-5,5 * 10 6 .
I leucociti vengono contati in 100 quadrati grandi, non divisi in piccoli, che corrispondono a 1600 piccoli. Pertanto, il numero di leucociti trovati in 100 quadrati viene diviso per 1600, moltiplicato per 4000 e 20 (diluizione). In questo caso, per ottenere il risultato, è sufficiente moltiplicare per 50 il numero di leucociti contati. Il contenuto normale di leucociti nel sangue è 5 * 10 3 - 8 * 10 3 in 1 μl.

Indicatore di colore del sangue. L'indice di colore del sangue è un numero che mostra la saturazione media dell'emoglobina di un singolo eritrocita di un dato sangue rispetto alla saturazione di un singolo eritrocita di sangue normale.
Per il contenuto normale di emoglobina vengono prese 100 unità e il numero normale di globuli rossi è 5.000.000.
Il valore dell'indice di colore delle persone sane varia da 0,9 a 1,1.
Esame di uno striscio di sangue periferico. Negli strisci di sangue si studia la morfologia degli eritrociti e si considera la formula dei leucociti, cioè il rapporto percentuale tra i diversi tipi di leucociti.
Per avere successo, la preparazione, la fissazione e la colorazione degli strisci di sangue devono essere eseguite con grande cura.
Per preparare uno striscio, la superficie di un vetro pulito e privo di grassi a una distanza di 0,5 cm dal bordo del vetrino viene toccata con una goccia di sangue nel sito di puntura sul dito, quindi viene posizionato il vetrino coprioggetto lucidato ad un angolo di 45° rispetto al vetrino e il primo viene portato alla goccia di sangue in modo che si diffonda lungo il bordo posteriore del coprioggetto e faccia uno striscio con un leggero movimento, senza una forte pressione. Lo striscio dovrebbe terminare sul vetrino con una “pannocchia”. Lo striscio viene asciugato all'aria, una volta essiccato, uno striscio buono e sottile ha un colore giallo.
Con una semplice matita appuntita al centro dello striscio si incidono il nome del paziente e la data dello studio, dopodiché gli strisci vengono fissati in alcool metilico per almeno 5 minuti e colorati secondo il metodo Romanovsky-Giemsa.

La vernice è costituita da una miscela di coloranti acidi (eosina) e basici (Azur II). Questo metodo di colorazione consente di differenziare le cellule. Il primo passo per lavorare con uno striscio è valutare la morfologia dei globuli rossi. Per fare ciò, scegli un punto sottile in cui le celle giacciono separatamente e non sotto forma di colonne di monete. Gli eritrociti normali sono cellule prive di nucleo, di colore rosa, arrotondate, approssimativamente dello stesso diametro - 7,5 micron, gli eritrociti hanno la forma di un disco biconcavo, quindi, nello striscio hanno illuminazione al centro e una periferia più intensamente macchiata.

(modulo direct4)

Preparare una goccia densa

Per testare il sangue per la malaria da Plasmodium, viene fatta una goccia spessa. Il sangue viene prelevato nel solito modo dalla polpa del dito. Una goccia di sangue che fuoriesce dal sito di iniezione viene toccata con la superficie di un vetrino. 2-3 gocce applicate separatamente vengono imbrattate con l'angolo di un altro bicchiere. Una macchia asciutta viene versata (senza fissazione) con la vernice di Romanovsky per 30-40 minuti, quindi la goccia colorata viene accuratamente risciacquata con acqua e la preparazione viene asciugata in posizione verticale.

Dati di analisi del campione

Un numero maggiore di eritrociti ed emoglobina nel sangue può essere associato a una malattia dei globuli rossi - eritremia, quindi il numero di eritrociti arriva fino a 9-106 o più.
Un aumento del contenuto di globuli rossi nel sangue può verificarsi secondariamente, cioè quando non vi è alcuna malattia del lenzuolo rosso dell'emopoiesi e il numero di globuli rossi aumenta a causa di una malattia di altri organi e sistemi (con pneumosclerosi diffusa scompensata, enfisema, alcuni tipi di difetti cardiaci congeniti, sistema di sclerosi vascolare dell'arteria polmonare, difetti del cuore destro, insufficienza circolatoria di III grado, ecc.). Questo sintomo è chiamato eritrocitosi.
Eritrociti morfologicamente alterati compaiono nell'anemia ipercromica (megaloblastica). Allo stesso tempo, nel sangue si trovano grandi eritrociti con un alto contenuto di emoglobina (macrociti), eritrociti embrionali (megaloblasti), che di solito non si trovano nel sangue periferico. Anche la morfologia degli eritrociti cambia con l'anemia ipocromica: compaiono eritrociti piccoli (microciti), alterati nella forma (poichilociti) ed eritrociti con un basso contenuto di emoglobina (eritrociti ipocromici).

Conta leucocitaria

Quando si calcola la formula dei leucociti, è necessario determinare le caratteristiche strutturali del citoplasma e dei nuclei cellulari. L'appartenenza di una cellula a un particolare gruppo è determinata sulla base della totalità di tutti i segni del citoplasma e del nucleo.
Quando si calcola la formula, è necessario attenersi allo stesso metodo per spostare il vetro al microscopio. Molto spesso, il metodo della microscopia viene utilizzato in 4 punti dello striscio. È noto che i leucociti sono distribuiti in modo non uniforme nello striscio: ci sono meno linfociti ai bordi che al centro e ci sono più monociti alla fine dello striscio che all'inizio. Pertanto, quando si calcola la formula dei leucociti, è meglio spostarsi lungo una linea tratteggiata, contando tutte le cellule incontrate.
Un conteggio di 200 cellule è un minimo pratico per gli studi clinici di routine.
I leucociti del sangue periferico, a seconda della presenza o assenza di granularità nel citoplasma, si dividono in granulociti (neutrofili, eosinofili, basofili) e agranulociti (monociti e linfociti).
Neutrofili. La dimensione della cella è di 10-12 micron. Il citoplasma delle cellule è di colore rosa pallido con granularità fine, abbondante, viola. Normalmente, nel sangue si trovano neutrofili stab (2-4%) e segmentati (60-65%).
Eosinofili. Le cellule hanno le stesse dimensioni dei neutrofili, a volte un po' più grandi, il citoplasma è pieno di grandi granuli rosso-giallastri, il nucleo ha solitamente due segmenti della stessa dimensione. Gli eosinofili sono normali 2-4%.
Basofili. È il granulocita più piccolo per dimensione. Il nucleo è irregolare, multilobato, occupa quasi tutta la cellula, il citoplasma rosa pallido contiene grossi granuli viola scuro. I granuli basofili si dissolvono in acqua e talvolta, a seguito del lavaggio durante la colorazione del preparato, al posto dei granuli rimangono cellule incolori. Normalmente, i basofili sono dello 0,1%.
Linfociti. La dimensione delle celle varia da 7 a 10 µm. Il nucleo è compatto, arrotondato oa forma di fagiolo. Il citoplasma delle cellule è azzurro pallido con una zona di illuminazione attorno al nucleo (perinucleare), a volte nel citoplasma sono presenti grani azzurrofili separati di colore rosso-viola. Il sangue periferico contiene normalmente il 20-35% di linfociti.
Monociti. La dimensione delle celle varia da 12 a 20 µm. Il nucleo è spesso a forma di ferro di cavallo, a volte di forma irregolare. Il citoplasma è più esteso di quello dei linfociti, di colore azzurro cenere con granularità fine, delicata, rossastra.
I monociti sono normali 6-8%.
Un contenuto aumentato di leucociti nel sangue è chiamato leucocitosi e un contenuto ridotto è chiamato leucopenia.

Colorazione e conteggio dei reticolociti

I reticolociti sono globuli rossi giovani con una sottile retina blu o granularità nel citoplasma. Queste cellule caratterizzano l'attività dell'emopoiesi rossa.
Per rilevare il conteggio dei reticolociti, viene utilizzato il metodo della colorazione sopravitale (a vita). Su vetrini in alcool assoluto si fanno degli strisci di vernice blu cresile brillante, quindi si fa uno striscio di sangue sul vetro colorato nel solito modo e si pone in una camera umida per 3-5 minuti, dopo di che si asciuga e si microscopica con un lente ad immersione. Normalmente si trovano 8-10 reticolociti per 1000 eritrociti, il loro numero è solitamente espresso in percentuale (0,8-1%) o in ppm (8-10% o) rispetto agli eritrociti.
I reticolociti sono cellule che caratterizzano l'aumentata produzione di globuli rossi nel midollo osseo.
Compaiono in una grande percentuale nel sangue periferico con anemia ipocromica ("anemia maligna"), con anemia emolitica e altre malattie. Un ridotto contenuto di reticolociti e la loro completa scomparsa nel sangue periferico si osservano durante l'esacerbazione dell'anemia ipercromica.

Per prevenire l'aggregazione (incollaggio) delle piastrine, viene praticata una puntura cutanea attraverso una goccia di soluzione di solfato di magnesio al 14% applicata al dito. Il sangue viene mescolato con magnesia e vengono preparati sottili strisci su vetrini, che vengono poi fissati e colorati secondo Romanovsky per 2 ore.
Viene determinato il numero di piastrine per 1000 eritrociti e, conoscendo il numero di eritrociti in 1 μl, viene contato il numero di piastrine in 1 μl di sangue. Le piastrine normali contengono da 250.000 a 400.000.
Un aumento del contenuto di piastrine nel sangue si riscontra con eritremia, con malattie della milza, con alcune forme di malattie maligne (ad esempio il pancreas). Un basso numero di piastrine si verifica con l'anemia.

Definizione di VES

La velocità di eritrosedimentazione viene determinata nel sangue miscelato in rapporto 4:1 con citrato di sodio.
La reazione è inserita nell'apparato di Panchenkov. Il capillare di Panchenkov viene lavato con citrato di sodio, quindi il citrato viene aspirato fino al segno 50, dove si trova la lettera R (reagente) e soffiato in una provetta di Vidalevsky. Lo stesso capillare viene utilizzato per prelevare il sangue due volte fino al segno K (sangue) e mescolarlo con citrato. Lo stesso capillare viene riempito di sangue misto a citrato a divisione 0 e posto verticalmente su un treppiede per un'ora. Un'ora dopo, viene annotato il valore in millimetri della colonna di plasma formata sopra gli eritrociti sedimentati, che è una misura della velocità di eritrosedimentazione.
La VES normale negli uomini è di 10 mm/h, nelle donne è di 14 mm/h.
La velocità di eritrosedimentazione aumenta nelle malattie infiammatorie, acute e croniche, nei tumori maligni e in altre malattie.

Test di compatibilità del fattore Rh

2-3 ml di sangue del ricevente vengono prelevati in una provetta senza citrato, dopo la coagulazione del sangue, il coagulo viene cerchiato con una bacchetta di vetro e il sangue viene centrifugato. Due gocce di siero da questa provetta vengono applicate a una capsula di Petri, vi viene aggiunta mezza goccia del sangue del donatore, mescolata e la capsula viene posta a bagnomaria (42-45 °). Dopo 10 minuti, la coppetta viene rimossa e osservata alla luce con un leggero dondolio. La comparsa di agglutinazione indicherà l'inammissibilità di questa trasfusione di sangue.

I vantaggi dei metodi automatizzati per determinare la formula dei leucociti sono la velocità e la riproducibilità. Tuttavia, come già accennato, nessuno dei metodi automatizzati è in grado di distinguere i granulociti neutrofili come un tipo separato di leucociti. Non è ancora chiaro quanto sia importante questa mancanza. La determinazione automatizzata della formula leucocitaria è attualmente un metodo di screening: quando si ottengono risultati del tutto normali, difficilmente vale la pena calcolare manualmente la formula al microscopio o, comunque, difficilmente vale la pena ripeterla. Tuttavia, con l'aiuto

i metodi automatizzati non riescono a rilevare malattie rare e varianti morfologiche. Per rilevare tali anomalie, è necessario esaminare uno striscio di sangue periferico.

STRISCIO DI SANGUE PERIFERICO

L'esame dello striscio di sangue periferico rimane una parte importante dell'esame ematologico. Il medico dovrebbe notare che ha senso procedere con lo studio di uno striscio dopo aver ricevuto i risultati di un esame del sangue automatizzato. Il tempo impiegato per esaminare lo striscio è per ottenere informazioni aggiuntive, non per duplicare i dati di analisi automatizzate. In generale, l'analisi del sangue automatizzata è molto più efficace dei metodi manuali nel determinare i valori medi e le caratteristiche quantitative convenzionali: indici eritrocitari, conta cellulare, dimensioni delle piastrine e percentuale di linfociti e granulociti. Tuttavia, un analizzatore automatico è nel migliore dei casi inaffidabile e spesso del tutto inadatto a rilevare anomalie rare: cellule nucleate eritroidi, granulociti immaturi e frammenti di eritrociti.

globuli rossi

Il rilevamento di globuli rossi sotto forma di colonne di monete può essere il primo impulso all'identificazione di disordini linfocitici o plasmacitici. I frammenti di eritrociti possono essere rilevati se costituiscono almeno lo 0,5% di tutte le cellule. Approssimativamente allo stesso livello del loro contenuto, le deviazioni vengono rilevate anche sull'istogramma degli eritrociti. Pertanto, entrambi i metodi si completano a vicenda. Le anomalie della forma possono indicare malattie specifiche, come le emoglobinopatie a forma di falce, mentre le cellule "a goccia" indicano l'infiltrazione del midollo osseo da parte di un tumore o mielofibrosi. Gli eritrociti bersaglio e cote sono anomalie meno specifiche. L'anomalia morfologica più comune è descritta come "moderata anisocitosi, moderata poichilocitosi". Sfortunatamente, questa anomalia è così aspecifica che la sua individuazione è inutile anche per risolvere il problema della presenza di una malattia ematologica.

La policromasia deve essere quantificata e i medici devono essere consapevoli del fatto che vari gradi di policromasia indicano vari gradi di stimolazione del midollo osseo. La granularità basofila è un'altra indicazione della presenza di RNA residuo; può verificarsi con qualsiasi forma di stimolazione del germe eritroide. Gli eritrociti nucleati devono essere ricercati con attenzione, poiché la loro presenza indica una marcata stimolazione del germe eritroide, insufficienza della funzione splenica o infiltrazione del midollo osseo da parte delle cellule tumorali.

Attualmente, lo studio più utilizzato dell'analisi del sangue generale, che consente di valutare la composizione qualitativa e quantitativa del sangue. La norma ematologica è un indicatore statistico e riflette il valore medio osservato in una popolazione di individui sani.

Il prelievo di sangue per l'analisi viene effettuato da un dito o da una vena. L'analisi è data al mattino, a stomaco vuoto. Entro 8 ore prima del test non è consentita l'assunzione di cibo, inclusi succhi, tè, caffè, alcol. Puoi bere acqua naturale.

Il numero di eritrociti, leucociti e piastrine può essere contato utilizzando un microscopio e una fotocamera Goryaev-Rosenthal e moderni emoanalizzatori. Allo stesso tempo, lo studio di uno striscio di sangue può aiutare nella diagnosi di processi patologici in cui il contenuto quantitativo delle cellule può rimanere normale.

globuli rossi

Gli eritrociti costituiscono la maggior parte delle cellule del sangue. Nell'uomo mancano di nucleo e hanno una forma biconcava.

Una diminuzione del numero di eritrociti è la più comune nella pratica clinica ed è uno dei segni di una sindrome anemica. Ma va ricordato che si può osservare una relativa diminuzione del numero di globuli rossi con un aumento del volume plasmatico (idremia), a causa di un aumento dell'afflusso di fluido tissutale durante la convergenza dell'edema cardiaco e renale, con l'introduzione di una grande quantità di liquido per via endovenosa.

Un aumento del numero di globuli rossi si osserva con l'eritremia (malattia di Wakez), così come con l'eritrocitosi assoluta e relativa secondaria.

L'eritrocitosi assoluta si verifica quando:

• broncopneumopatia cronica ostruttiva,
• difetti cardiaci congeniti o acquisiti,
• ipertensione polmonare primaria,
• sindrome di pickwick,
• rimani sugli altopiani,
• stenosi delle arterie renali,
• malattia policistica renale,
• idronefrosi,
• neoplasie maligne (ad esempio ghiandole surrenali),
• Malattia e sindrome di Cushing
• trattamento steroideo.

L'eritrocitosi relativa si verifica con vomito indomabile, diarrea, ustioni massicce e shock.

Nello studio dei cambiamenti patologici nella morfologia degli eritrociti, è possibile identificare:

• cellule di varie forme (poichilocitosi),
• cellule di diversi colori (anisocromia),
• cellule di diverse dimensioni (anisocitosi),
• varie inclusioni intracellulari.

La dimensione degli eritrociti normali (normociti) è di 7,2 - 8,0 micron di diametro. L'anisocitosi è una condizione patologica in cui vi è un cambiamento nella dimensione dei globuli rossi:

• la microcitosi (meno di 7,0 micron di diametro) è osservata con anemia da carenza di ferro, emoglobinopatie;
• macrocitosi (più di 8,0 micron di diametro) - con anemia nelle donne in gravidanza, carenza di vitamina B 12 e acido folico, nonché con malattie del fegato, alcolismo e neoplasie maligne;
• megalocitosi (diametro superiore a 11 micron) - con carenza di vitamina B 12 e acido folico, anemia nelle donne in gravidanza, invasioni da elminti.

Nel sangue di una persona sana, il contenuto di normociti non supera il 70% del volume totale, mentre microciti e macrociti rappresentano fino al 15%. Un cambiamento in questo rapporto, che può essere determinato da un esame del sangue, indica lo sviluppo di anisocitosi. I sintomi clinici dell'anisocitosi sono simili a quelli dell'anemia o dell'insufficienza cardiaca e sono caratterizzati da affaticamento, perdita di forza, palpitazioni e mancanza di respiro. Il trattamento dell'anisocitosi, di regola, si riduce all'eliminazione della causa del suo verificarsi.

L'anisocitosi e la poichilocitosi si trovano in quasi tutti i tipi di anemia. In questo caso, la forma degli eritrociti può essere:

• sferico (malattia di Minkowski-Choffard),
• a forma di falce (anemia emolitica ereditaria a cellule falciformi),
• ovale (con ovalocitosi ereditaria),
• a forma di bersaglio (con talassemia e avvelenamento da piombo).

Il colore dei globuli rossi può anche cambiare:

• l'ipocromia (diminuzione dell'intensità del colore degli eritrociti) è caratteristica di numerose anemie da carenza di ferro, talassemia, avvelenamento da piombo;
• l'ipercromia (aumento della saturazione dei globuli rossi con l'emoglobina) si verifica con una carenza di vitamina B 12 e acido folico, alcolismo, gravidanza.

I policromatofili (eritrociti con accumulo insufficiente di emoglobina e resti di una sostanza basofila) sono osservati sia in condizioni normali che con un aumento dell'attività rigenerativa del midollo osseo durante la perdita di sangue acuta, emolisi massiccia.

Indicatori stimati

Quando si conducono ricerche con l'ausilio di analizzatori automatici, vengono spesso utilizzati valori calcolati.

indicatore di colore

Indice di colore ( processore) riflette il contenuto medio di emoglobina nell'eritrocita ed è determinato dalla formula:

CP \u003d Hb × 3 11 / Er, dove Hb è l'emoglobina (g / l), Er è il numero di globuli rossi in 1 litro di sangue.

Le norme dell'indice di colore sono 0,82 - 1,05. In base alla dimensione dell'indice di colore dell'anemia, sono suddivisi in:

• ipocromico (0,82 e inferiore),
• normocromico (0,82 - 1,05),
• ipercromico (1.1 e oltre).

Valore dell'ematocrito

Determinazione dell'ematocrito ( ht) viene effettuato mediante microcentrifugazione o metodo automatico. Il valore dell'ematocrito dà un'idea del rapporto tra i volumi di plasma e di elementi formati (principalmente eritrociti) ottenuti dopo la centrifugazione del sangue. Espresso in percentuale e calcolato con la formula:

Ht \u003d 11,72 + 5,045 × Er / 10 11, dove Er è il numero di globuli rossi in 1 litro di sangue.

La norma dell'ematocrito negli uomini è del 40,7-50,3%, nelle donne - 36,1-44,3%. Questo indicatore cambia sia verso l'alto che verso il basso.

• Si osserva un aumento con la disidratazione del corpo, una diminuzione del VCP (massicce ustioni, shock), eritrocitosi primaria e secondaria.
• La diminuzione può essere con l'iperidratazione del corpo, un aumento del VCP.

Volume medio degli eritrociti

Volume medio degli eritrociti ( MARE) è determinato utilizzando un analizzatore ematologico e calcolato dalla formula:

SEA = Ht / Er × 10 -9 , dove Ht è l'ematocrito, Er è il numero di eritrociti in 1 µl di sangue.

L'unità di SEA è il femtolitro (fl). Questa cifra è in media la stessa per uomini e donne: 80-94 fl.

• Una diminuzione della SEA si verifica nell'anemia microcitica.
• Aumento dell'anemia macrocitica e megaloblastica.

SSGE = Hb / Er, dove Hb è il contenuto di emoglobina (g/l), Er è il numero di eritrociti in 1 litro.

La concentrazione media di emoglobina nell'eritrocita

La concentrazione media di emoglobina in un eritrocita ( SAGGIO) riflette il grado di saturazione dell'eritrocita con l'emoglobina, espresso in g/dcl. Calcolato secondo la formula:

SGE = Hb / Ht, dove Hb è il contenuto di emoglobina (g/l), Ht è l'ematocrito (%).

Il valore normale di questo indicatore è 34,4 g / dcl (30 - 38,5). L'SCE può diminuire solo nelle anemie ipocromiche e ipercromiche.

reticolociti

I reticolociti sono forme giovani di eritrociti formati da normoblasti dopo la perdita del loro nucleo. Normalmente, il loro numero è dello 0,5-1,5% nel sangue periferico. La reticolocitosi riflette l'attività eritropoietica del midollo osseo.

• Si osserva un aumento del numero di reticolociti con una maggiore rigenerazione del midollo osseo, ad esempio con perdita di sangue acuta, anemia emolitica.
• Diminuzione - con anemia ipo e aplastica, anemia da carenza di vitamina B12, metastasi del midollo osseo, che indicano una diminuzione della funzione rigenerativa del midollo osseo.

Un indicatore ancora più accurato dell'eritropoiesi è l'indice dei reticolociti ( R.I), che viene calcolato tenendo conto dell'ematocrito secondo la formula:

RI = R × Ht / 45 × 1,85, dove R è il numero di reticolociti (%), Ht è l'ematocrito del paziente (%), 45 è il normale ematocrito umano, 1,85 è il numero di giorni necessari ai nuovi reticolociti per entrare nel sangue periferico.

Indicatore RI:

• meno di 2 - indica una ridotta produzione di globuli rossi,
• più di 2-3 - prova di un aumento della formazione di globuli rossi.

Velocità di sedimentazione eritrocitaria

Velocità di sedimentazione eritrocitaria ( VES) dipende dal contenuto di proteine ​​nel plasma sanguigno, principalmente fibrinogeno e γ-globuline, costituite principalmente da immunoglobuline, e dal numero di elementi formati.

Le ragioni principali dell'aumento della VES sono i processi infiammatori batterici e asettici, accompagnati da cambiamenti nello spettro proteico del plasma sanguigno (malattie sistemiche del tessuto connettivo, epatite cronica e cirrosi epatica, infarto miocardico, ecc.).

Nelle neoplasie maligne, un aumento della VES è dovuto allo stesso motivo. Un aumento significativo della VES viene rilevato con un aumento della concentrazione plasmatica di paraproteine ​​nel mieloma multiplo e nella macroglobulinemia di Waldenström. Con tutti i tipi di anemia, si verifica un aumento della VES.

Una diminuzione della VES è un segno di un aumento della viscosità del sangue nelle malattie e nelle sindromi accompagnato da un aumento del numero di globuli rossi.

piastrine

Le piastrine svolgono un ruolo importante nel mantenimento dell'equilibrio tra i sistemi di coagulazione del sangue e anticoagulanti, essendo un importante collegamento nel meccanismo piastrinico-vascolare dell'emostasi. La normale conta piastrinica è di 180-320×10 9 /l.

Nella pratica clinica si possono osservare condizioni caratterizzate sia da un aumento del numero di piastrine (trombocitosi) che da una diminuzione (trombocitopenia), nonché da una violazione delle funzioni adesive, di aggregazione e di coagulazione delle piastrine (trombocitopatia).

La trombocitosi è divisa in:

• primaria (leucemia megacariocitica idiopatica, essenziale e cronica),
• secondarie (le cui cause sono anemia sideropenica, splenectomia, neoplasie maligne, collagenosi, malattia infiammatoria cronica intestinale, mielosi subleucemica, eritremia, ecc.)

La trombocitopenia si verifica anche:

• primaria (porpora trombocitopenica idiopatica acuta o cronica),
• secondari, che si sviluppano se esposti a:
  • fattori fisici - radiazioni ionizzanti e danni meccanici alle piastrine;
  • fattori biologici - anticorpi immunitari, fattori citolitici delle cellule tumorali, trasfusione di sangue "vecchio" conservato, malattie virali;
  • fattori chimici - prodotti chimici industriali e domestici, droghe.

Leucociti

I leucociti - cellule del sangue formate nel midollo osseo e nei linfonodi, sono caratterizzati da un'organizzazione e specializzazione strutturale elevata e complessa. Normalmente, il numero di leucociti è 4,0-8,8×10 9 /l.

Esistono 5 tipi di leucociti: granulociti (neutrofili, eosinofili, basofili) e agranulociti (monociti e linfociti). La funzione principale dei leucociti è proteggere il corpo da antigeni estranei (inclusi microrganismi, cellule tumorali, cellule trapiantate).

La leucocitosi (un aumento del numero di globuli bianchi) può verificarsi in persone sane dopo aver consumato un pasto ricco di proteine; duro lavoro fisico e durante lo stress; dopo il surriscaldamento o il raffreddamento. In patologia, le principali cause di leucocitosi sono:

• infezioni acute,
• eventuali malattie infiammatorie acute o croniche,
• malattie accompagnate da rottura dei tessuti (infarto miocardico, ictus, necrosi pancreatica, ecc.) e / o grave intossicazione (uremia, chetoacidosi),
• condizioni patologiche, che sono caratterizzate da grave ipossiemia (perdita di sangue acuta),
• l'azione di sostanze tossiche (monossido di carbonio, mercurio) e fattori fisici (radiazioni ionizzanti),
• neoplasie maligne,
• leucemie acute e croniche, accompagnate dalla proliferazione di uno dei germogli ematopoietici,
• policitemia,
• malattie caratterizzate da disturbi immunitari (collagenosi, malattia da siero e altri).

La reazione leucemoide è una leucocitosi persistente fino a 30-50×10 9 /lo più, si sviluppa con infezione, neoplasie maligne, intossicazioni esogene ed endogene e altre condizioni. Contrariamente alla leucemia, i neutrofili normali, prevalentemente maturi, circolano nel sangue durante una reazione leucemoide.

Nei pazienti anziani, debilitati e debilitati con lo sviluppo di una serie di malattie caratterizzate da leucocitosi, può essere assente a causa di una diminuzione della resistenza immunitaria del corpo.

La leucopenia (diminuzione del numero di leucociti) si verifica nelle seguenti condizioni patologiche:

• infezione virale,
• alcune infezioni batteriche e protozoiche,
• ipoplasia e aplasia del midollo osseo,
• effetti collaterali di farmaci citostatici, antibiotici, sulfamidici, FANS,
• splenomegalia.

Formula dei leucociti

La formula dei leucociti (leucogramma) è la percentuale di diversi tipi di leucociti nel sangue periferico. Con varie malattie, può verificarsi un cambiamento nella formula dei leucociti a causa di:

• un aumento o una diminuzione di qualsiasi tipo di leucociti;
• la comparsa di vari cambiamenti degenerativi nel nucleo e nel citoplasma delle cellule leucocitarie mature;
• la comparsa nel sangue periferico di giovani leucociti immaturi.

Nella pratica clinica, il leucogramma è di grande importanza. Secondo il leucogramma, si può giudicare il decorso del processo patologico, la comparsa di complicanze e prevedere l'esito della malattia. Questi leucogrammi dovrebbero essere confrontati con le manifestazioni cliniche della malattia.

Neutrofili

I neutrofili sono una sottospecie dei leucociti granulocitici, che hanno principalmente funzioni battericide e disintossicanti. Il meccanismo principale della loro funzione immunitaria è la fagocitosi. Sono microfagi, cioè sono in grado di assorbire solo particelle o cellule estranee relativamente piccole.

A seconda del grado di maturità e della forma del nucleo nel sangue periferico, vengono isolati neutrofili stab (giovani, immaturi) e segmentati (maturi). Le cellule più giovani della serie neutrofila - metamielociti, mielociti, promielociti - compaiono nel sangue periferico in caso di patologia e sono la prova della stimolazione della formazione di cellule di questo tipo. La durata della circolazione dei neutrofili nel sangue è in media di circa 6,5 ​​ore, quindi migrano verso i tessuti.

I neutrofili segmentati sono normalmente il principale tipo di leucociti circolanti nel sangue umano, rappresentando il 45-70% del numero totale di leucociti del sangue. I neutrofili stab normalmente costituiscono l'1-6%.

La neutrofilia - un aumento del numero di neutrofili superiore a 6,0 × 10 9 /l - è un riflesso di una sorta di protezione del corpo contro gli effetti di fattori esogeni ed endogeni, solitamente combinati con leucocitosi e ha le stesse cause.

Quando si valuta il significato diagnostico e prognostico di uno shift neutrofilo, è importante determinare la percentuale di neutrofili immaturi e maturi.

• Lo spostamento della formula a sinistra è un aumento del sangue periferico dei neutrofili pugnalati (con processi infiammatori purulenti, infezioni acute) e (meno spesso) la comparsa di granulociti immaturi in un piccolo numero.
• Lo spostamento della formula a destra è un aumento del sangue periferico dei neutrofili segmentati maturi e una diminuzione o scomparsa dei neutrofili pugnalati, di regola, indica un decorso favorevole della malattia.

La neutropenia - una diminuzione del contenuto di neutrofili al di sotto di 1,5 × 10 9 /l - indica un'inibizione funzionale o organica dell'ematopoiesi del midollo osseo o un'intensa distruzione dei neutrofili. Solitamente associato a leucopenia.

Eosinofili

Gli eosinofili sono una sottospecie di leucociti granulocitici. Hanno proprietà fagocitiche, ma questa proprietà viene utilizzata principalmente per partecipare al processo allergico. Fagocitano il complesso antigene-anticorpo formato principalmente da Ig E. Il contenuto normale di eosinofili nel sangue è dello 0-5%.

Eosinopenia - una diminuzione del numero di eosinofili, si verifica nei processi infettivi, purulenti-infiammatori e nell'assunzione di glucocorticoidi. L'eosinopenia più pronunciata viene rilevata con l'endocardite di Loeffler, la leucemia eosinofila e la sindrome ipereosinofila, assumendo glucocorticoidi.

Basofili

I basofili sono granulociti molto grandi: sono più grandi dei neutrofili e degli eosinofili. I granuli basofili contengono grandi quantità di istamina, serotonina, leucotrieni, prostaglandine e altri mediatori di allergia e infiammazione. I basofili sono coinvolti nei processi infiammatori e allergici nel corpo. Contenuto normale di basofili nel sangue: 0-1%.

La basofilia (un aumento del numero di basofili) è rara, ad esempio, nei processi mieloproliferativi (leucemia mieloide cronica, policitemia, mielofibrosi), ipotiroidismo, linfogranulomatosi. La basopenia (diminuzione del numero di basofili) non ha valore diagnostico.

Linfociti

I linfociti sono le principali cellule del sistema immunitario, che sono un tipo di leucociti del gruppo degli agranulociti. I linfociti forniscono immunità umorale (produzione di anticorpi), immunità cellulare (interazione di contatto con cellule bersaglio) e regolano anche l'attività di altri tipi di cellule. Il normale contenuto di linfociti nel sangue: 18-40%.

La linfocitosi è un aumento del numero di linfociti nel sangue periferico. Questo aumento può essere assoluto (più di 3,5×10 9 /l) nelle infezioni acute, nella tubercolosi, nell'ipertiroidismo, nella leucemia linfatica e nel linfosarcoma. Ma la linfocitosi relativa è più comune (un aumento della percentuale di linfociti con un numero assoluto normale o ridotto). Questa condizione si verifica con infezioni virali, processi infiammatori purulenti che si verificano con ridotta resistenza corporea, febbre tifoide, agranulocitosi.

La linfocitopenia è una diminuzione del numero di linfociti nel sangue periferico. La linfocitopenia assoluta (il numero di cellule è inferiore a 1,2 × 10 9 /l) può indicare una deficienza del sistema T dell'immunità (immunodeficienza) ed è anche caratteristica della tubercolosi miliare, del linfoma, della malattia da radiazioni acuta e cronica, del mieloma multiplo . La linfocitopenia relativa non ha significato indipendente.

Monociti

I monociti sono grandi leucociti mononucleati maturi del gruppo degli agranulociti. Il meccanismo principale della loro funzione immunitaria è la fagocitosi. Sono macrofagi, cioè possono assorbire particelle e cellule estranee relativamente grandi (o un gran numero di piccole particelle) e, di norma, non muoiono dopo la fagocitizzazione (ma la morte dei monociti è possibile se il materiale fagocitato ha qualche proprietà citotossiche per il monocita). In questo differiscono dai microfagi: neutrofili ed eosinofili, in grado di assorbire solo particelle estranee relativamente piccole e, di regola, muoiono dopo la fagocitosi.

La durata della circolazione dei monociti nel sangue è in media di circa 2-3 giorni, quindi la maggior parte di essi muore per apoptosi o diventa macrofagi (ad esempio nell'intestino). Contenuto normale di monociti nel sangue: 2-9%.

La monocitosi è un aumento del numero di monociti nel sangue periferico. Si presenta sotto forma di monocitosi assoluta in alcune infezioni (mononucleosi infettiva, endocardite settica subacuta, infezioni virali, fungine, rickettsie e protozoarie), malattie infiammatorie purulente a lungo termine, tumori solitari maligni, malattie del sangue: leucemia monocitica acuta, mieloide cronica leucemia, mieloma multiplo, linfogranulomatosi, anemia aplastica.

La monocitopenia (diminuzione o assenza di monociti nel sangue periferico) si sviluppa con gravi processi infettivi (sepsi).

N.Puletti

Fare strisci di sangue è tecnicamente semplice e veloce. Per ottenere il massimo delle informazioni, la valutazione delle cellule del sangue deve essere sistematizzata.

Preparazione e colorazione di strisci di sangue

Quando si preleva materiale da un animale idealmente calmo con un diametro medio di allargamento della vena, il sangue dovrebbe fluire rapidamente in una provetta contenente un anticoagulante. L'EDTA (etilendiamminotetraacetato) è più spesso usato, perché questo anticoagulante consente di preservare meglio le cellule del sangue studiate. Tuttavia, per prevenire vari tipi di degradazione morfologica delle cellule, l'intervallo di tempo tra il prelievo di sangue fresco e ben omogeneizzato e la preparazione del preparato dovrebbe essere il più breve possibile (J.W. Harvey, 2001; D. Walker, 2008).

La colorazione classica è diversa dalla colorazione veloce. In tempi recenti, i metodi di colorazione rapida come Diff-Quick® si sono rivelati vantaggiosi perché sono resistenti alle variazioni di pH e alla formazione di depositi di macchie. Tuttavia, sono meno efficaci per rilevare policromatofili e macchiare male granuli di basofili e mastociti (J.W. Harvey, 2001; D. Walker, 2008). Per ottenere un quadro visivo specifico dei reticolociti, è necessario colorare con il nuovo blu di metilene (NBM). In un tubo di plastica, una goccia di sangue viene mescolata con due gocce di NBM. Il tubo viene lasciato a temperatura ambiente per 10 minuti. Una piccola goccia dopo la miscelazione viene posta su un vetrino e spalmata allo stesso modo di quando si esegue uno striscio di sangue. Quindi il vetrino viene rapidamente asciugato all'aria ed esaminato al microscopio ad alto ingrandimento (× 50–× 100).

Esame sistematico degli strisci di sangue

Quando si valuta uno striscio di sangue, è molto importante essere guidati da un unico schema di ricerca.

Uno striscio di sangue costituito da uno strato sottile (monocellulare) con un'estremità arrotondata si ispessisce verso la base. Le cellule del sangue vengono valutate su uno strato sottile, perché uno strato spesso contiene poche informazioni. A basso ingrandimento (x10 o x20), la parte marginale dello striscio, principalmente la sua estremità arrotondata, viene solitamente esaminata per rilevare aggregati piastrinici o cellule atipiche larghe (linfoblasti o cellule dendritiche) (foto 4). Gli aggregati piastrinici dopo la loro attivazione si formano in vitro. Questo fenomeno a volte si verifica a causa di un difficile prelievo di sangue, che, ad esempio, è più spesso notato nei gatti (E. Duan Lassen, G. Weiser, 2006; S.L. Stockhman, M.A. Skottt, 2008; D. Walker, 2008).

Foto 4. Microscopia di uno striscio di sangue di un cane sano (× 1000). Coaguli di piastrine

Lo striscio di sangue è un metodo abbastanza comune per diagnosticare rapidamente molti disturbi comuni nei cani e nei gatti. Le condizioni principali per l'uso efficace di questo metodo diagnostico sono la stretta aderenza alla tecnica di preparazione dello striscio e uno studio sistematico in conformità con l'algoritmo di studio.

Punti chiave

Dopo il prelievo, il sangue deve essere rapidamente posto in una provetta con anticoagulante per mantenere la qualità delle cellule.

La colorazione con il nuovo blu di metilene consente l'identificazione dei reticolociti.

La valutazione viene eseguita su uno strato sottile di uno striscio di sangue con una lettura al microscopio a livello delle sue trecce.

Il test sistematico dello striscio di sangue si riferisce all'algoritmo APEL.

SVM n. 5/2010