RD-APK 3.10.07.02-09

MINISTRO DELL'AGRICOLTURA
FEDERAZIONE RUSSA

Mosca 2009

Sviluppato da: Ph.D. s.-x. Scienze, arte. scientifico collaboratore P.N. Vinogradov, Ph.D. tech. Scienze S.S. Shevchenko, O.L. Sedov, E.S. Garafutdinova, M.F. Malygin (SPC "Giproniselkhoz"); dottor veterinario. scienze, prof. V.G. Tyurin (GNU VNIIVSGE)

INTRODOTTO: SPC "Giproniselkhoz".

APPROVATO E ATTUATO: Vice Ministro dell'Agricoltura della Federazione Russa A.I. Belyaev 1 dicembre 2009

PROGETTATO PER LA PRIMA VOLTA.

Data di introduzione 15/12/2009

1. Disposizioni generali

1.1. Queste linee guida si applicano a tutte le organizzazioni di ricerca e istituzioni educative del complesso agroindustriale della Russia, indipendentemente dalla loro forma organizzativa e giuridica, che utilizzano animali da laboratorio (sperimentali, sperimentali) nel loro lavoro.

In conformità con la legge federale "Sulla regolamentazione tecnica" (adottata dalla Duma di Stato il 15 dicembre 2002 e approvata dal Consiglio della Federazione il 18 dicembre 2002), fino all'adozione dei regolamenti pertinenti, la regolamentazione tecnica nel campo della presa le misure veterinarie e sanitarie vengono eseguite in conformità con la legge della Federazione Russa "Sulla medicina veterinaria (approvata il 14 maggio 1993, n. 4979-1).

1.2. Le linee guida si applicano sia alle strutture di nuova concezione per l'allevamento e il lavoro con animali da laboratorio - cliniche biologiche sperimentali, vivari, ecc., sia a quelle esistenti e ricostruite.

1.3. Gli oggetti per l'allevamento e il lavoro con animali da laboratorio sono unità di supporto scientifico di organizzazioni di ricerca, istituti di istruzione e sono creati per l'allevamento e, se necessario, l'allevamento di animali da laboratorio utilizzati in lavori sperimentali e di ricerca. In queste strutture è anche possibile svolgere lo sviluppo indipendente di singole questioni scientifiche.

1.4. Le norme e i requisiti stabiliti nelle presenti linee guida per la progettazione, costruzione e funzionamento di strutture per la detenzione di animali da laboratorio hanno lo scopo di garantire la sicurezza del personale che lavora con gli animali e della popolazione generale dall'insorgenza di antropozaonosi e altre malattie.

1.5. Lo sviluppo, il coordinamento, l'approvazione e la composizione della documentazione di progetto per la costruzione di strutture per l'allevamento di animali da laboratorio vengono effettuati in conformità con i requisiti di SNiP 11.01-2003.

1.6. Un oggetto per la custodia degli animali da laboratorio (di seguito denominato vivaio) si trova in un edificio separato (complesso di edifici) o ai piani superiori degli edifici di laboratorio delle istituzioni scientifiche statali veterinarie, nonché sul territorio delle istituzioni educative.

1.7. I vivai dovrebbero essere dotati di acqua potabile, compresa acqua calda, elettricità, dotati di fognature (tubi con un diametro di almeno 100 mm), ventilazione di alimentazione e scarico, riscaldamento, sicurezza e allarmi antincendio, e avere comode strade di accesso.

1.8. La distanza tra l'edificio separato del vivaio e le strutture degli istituti di ricerca, che includono questo vivaio, deve essere almeno pari alla distanza delle barriere tagliafuoco stabilite dalle attuali norme di sicurezza antincendio nella Federazione Russa.

1.9. Gli edifici separati dei vivari dovrebbero essere recintati con una recinzione cieca e separati dall'area residenziale da una zona di protezione sanitaria. Il territorio dovrebbe essere paesaggistico.

Le dimensioni della zona di protezione sanitaria sono determinate dai requisiti di SanPiN 2.2.1 / 2.1.1.1200-03.

1.10. Le dimensioni della zona di protezione sanitaria per i vivari situati in edifici amministrativi e industriali separati e con un'uscita isolata sono concordate caso per caso con le autorità statali di controllo sanitario e veterinario.

2. Composizione, disposizione reciproca e norme sull'area dei locali del vivaio

2.1. Ogni vivaio dovrebbe includere locali progettati in conformità con gli attuali codici e regolamenti edilizi in conformità con gli attuali requisiti veterinari e sanitari e gli standard zooigienici, tra cui:

sala personale con armadietti individuali per tute;

locali per l'accoglienza e la quarantena degli animali appena entrati nel vivaio;

isolante;

locali per la detenzione di animali da esperimento (separati per ciascuna specie) o (in accordo con le autorità veterinarie e sanitarie statali di controllo) suddivisi in sezioni secondo la specie animale;

una sala di sterilizzazione o una scatola per i ricercatori che lavorano con animali non infetti, con una stanza per la dissezione degli animali e un frigorifero per la conservazione temporanea dei cadaveri;

stanze isolate per tenere animali da esperimento infetti da colture di agenti patogeni di infezioni particolarmente pericolose o sostanze radioattive (separatamente) con una sala operatoria in ciascuna stanza isolata con un frigorifero e l'attrezzatura necessaria per infettare e sezionare animali;

cucina per la preparazione del mangime (dovrebbe essere dotata di fornello e frigorifero);

reparto di disinfezione e lavaggio per lavaggio con acqua calda, disinfezione e asciugatura di gabbie e altre attrezzature;

un magazzino di scorte di ricambio pulite (decontaminate): gabbie, abbeveratoi, ecc.;

blocco sanitario (doccia e WC);

una stanza dotata di forno per la combustione delle salme degli animali;

una cella frigorifera comune per la conservazione dei cadaveri di animali;

magazzino mangimi;

magazzino dei rifiuti;

in una stanza separata o in un edificio separato - un'unità tecnica per condizionatori d'aria, ventilazione, impianti elettrici e altri impianti speciali.

2.2. Ogni vivaio dovrebbe avere una stanza per ricevere gli animali in arrivo. Nei vivari dove vengono tenuti piccoli roditori, davanti al reparto di accoglienza è installato un vestibolo isolato, nel quale entra e scarica un'auto con gli animali arrivati.

Quando il vivaio è situato ai piani superiori degli edifici dei laboratori, l'area reception e il vestibolo coibentato si trovano al primo piano dell'edificio dei laboratori e sono collegati al vivaio tramite un ascensore utilizzato solo per il sollevamento degli animali da laboratorio.

2.3. La sala di ricevimento è una stanza di 12,5 - 18 m 2 con illuminazione naturale e artificiale a seconda delle esigenze.

L'altezza di tutte le stanze del vivaio è di 3 - 3,5 m.

2.4. La stanza di quarantena è composta da diverse stanze isolate con una superficie di 12,5 - 18 m 2 ed è isolata dalle stanze che contengono animali che hanno superato la quarantena e vengono per esperimenti.

2.5. Accanto ai locali di quarantena è situata una stanza di isolamento per animali malati e con sospette malattie. Le aree delle stanze di isolamento sono simili a quelle delle stanze di quarantena.

2.6. I locali destinati alla detenzione di animali da esperimento possono condurre ad un corridoio comune o trovarsi tra due corridoi e avere uscite su ciascuno di essi. Con una disposizione a corridoio singolo, i servizi "sporchi" e "puliti" si trovano alle estremità diverse del corridoio.

Con un sistema a due corridoi, il mangime e gli animali in quarantena arrivano lungo un corridoio (“pulito”), i dipendenti entrano con tute pulite e scarpe sostituibili prima di iniziare a lavorare con gli animali. In un altro corridoio (“sporco”) vengono rimossi i mangimi e il letame non consumati, vengono portati fuori i cadaveri degli animali, i dipendenti escono dopo aver lavorato con gli animali.

Se è impossibile isolare i flussi "sporchi" e "puliti", è consentito utilizzare la stessa stanza per uno o un altro scopo, a condizione che venga disinfettata ogni volta dopo che il flusso "sporco" la attraversa.

2.7. L'area dei locali per l'allevamento di alcuni tipi di animali da esperimento è di 12,5 - 18 m 2 ; l'area dei locali per la custodia degli animali da esperimento, divisa in sezioni, è determinata mediante calcolo.

2.8. L'area della sala di sterilizzazione o della scatola per il lavoro dei ricercatori con animali non infetti è determinata mediante calcolo, in base alle specificità del lavoro proposto.

2.9. Le aree delle stanze isolate per lavorare con animali da esperimento infetti da agenti patogeni di infezioni particolarmente pericolose e per lavorare con animali da esperimento contaminati da sostanze radioattive, nonché le aree delle sale operatorie in ciascuna stanza isolata, sono determinate mediante calcolo, in base al condizioni delle attrezzature tecnologiche e speciali utilizzate per effettuare le manipolazioni necessarie.

2.10. La superficie totale dei locali occupati dalla cucina dei mangimi, dal reparto di disinfezione e lavaggio e dal deposito di attrezzature di ricambio pulite dovrebbe essere circa il 50% della superficie totale dei locali occupati dagli animali (nei grandi vivari questa percentuale può essere leggermente ridotto).

La cucina del mangime è composta da due locali adiacenti destinati alla lavorazione e preparazione del mangime. Ogni stanza deve avere accesso al corridoio.

Il reparto di lavaggio-disinfezione (uno o più) è costituito da due locali collegati da un'autoclave calpestabile o da una camera di calore secco calpestabile.

Il dispositivo del reparto di disinfezione-lavaggio dovrebbe prevedere una diversa sequenza del suo lavoro:

in presenza di materiale infetto - sterilizzazione preliminare dell'inventario e della biancheria da letto con ulteriore pulizia meccanica di quest'ultima in un'altra stanza;

sterilizzazione dopo la pulizia meccanica delle gabbie e dell'inventario, quando non vi è pericolo di materiale contaminato.

Indipendentemente dall'ubicazione del vivaio (in un edificio separato o al piano superiore dell'edificio del laboratorio), il reparto di disinfezione e lavaggio deve essere dotato di uno scivolo per i rifiuti per rimuovere la lettiera sporca e di sollevamento meccanizzato di materiali e attrezzature.

Accanto al reparto di disinfezione e lavaggio si trova il magazzino per le scorte e le attrezzature pulite.

2.11. Per la conservazione della lettiera (trucioli, segatura, torba, ecc.), sono assegnate due stanze: una per i contenitori sterilizzati e confezionati utilizzati da questo vivaio, l'altra per la conservazione della lettiera appena acquistata.

2.12. Quando si progettano i locali del vivaio, è necessario fornire il massimo isolamento:

tutti i suoi locali da altre divisioni facenti parte dell'istituto di ricerca;

locali del reparto di isolamento e quarantena da altri locali del vivaio;

tra la cucina del mangime, le stanze degli animali e il reparto di disinfezione e lavaggio.

2.13. In ogni caso, l'area occupata dalla cucina dei mangimi, dal reparto di disinfezione e lavaggio e dal magazzino per le scorte di ricambio pulite è determinata in base all'attrezzatura utilizzata, al grado di meccanizzazione dei processi produttivi e ai tipi di mangime per animali da esperimento.

Le dimensioni delle aree dei suddetti locali sono indicate nell'incarico di progettazione.

3. Requisiti veterinari-sanitari e tecnologici per soluzioni costruttive per locali di vivaio e attrezzature di ingegneria

Gli apparecchi e gli apparecchi di illuminazione di tipo chiuso devono essere accessibili per la pulizia a umido.

3.5. I locali del vivaio, in cui sono tenuti gli animali da laboratorio, sono dotati di un sistema di ventilazione forzata e di scarico che garantisce la frequenza dello scambio d'aria e le condizioni di temperatura e umidità secondo i dati riportati in Tabella. .

Specie animali	Temperatura, °С		Umidità relativa, %		Concentrazione massima consentita nell'aria
Specie animali	fluttuazioni	media	fluttuazioni	media	ammoniaca, mg/l	anidride carbonica in volume,%	cappuccio	afflusso
Topi	18 - 22		50 - 65		0,01	0,15
Ratti	18 - 22		50 - 65		0,01	0,15
Criceti	18 - 22		50 - 65		0,01	0,15
porcellini d'India	15 - 18		50 - 65		0,01	0,15
conigli	15 - 18		50 - 65		0,01	0,15
Cani	18 - 22		50 - 65		0,01	0,15
gatti	18 - 22		50 - 65		0,01	0,15

3.6. Il regime di temperatura e umidità nelle altre stanze del vivaio dovrebbe essere fornito secondo i dati riportati nella tabella. .

camera

Temperatura nel periodo freddo e di transizione dell'anno, °С

Tasso di ricambio d'aria (volumi orari)

afflusso

cappuccio

1. Per il personale

2. Per accogliere animali

3. Per la ricerca

4. Lavaggio-sterilizzazione

1 - 2

2 - 3

5. Per l'eutanasia (eutanasia)

6. Apertura

7. Riciclaggio

Per calcolo

8. Per tenere animali da fattoria sperimentali

3.11. Per la rimozione e raccolta delle acque reflue dopo il lavaggio e la disinfezione delle attrezzature di processo e dei pavimenti, è necessario prevedere l'installazione di vaschette rivestite con piastre forate rimovibili e scalette. La pendenza dei vassoi deve essere almeno 0,02.

3.12. Quando si progetta il sistema fognario locale dei vivari, è necessario osservare i seguenti requisiti:

le acque reflue provenienti dalle stanze per la combustione dei cadaveri sono soggette a sterilizzazione a Manzhus con vapore vivo a una temperatura di 120 ° C per 30 minuti o in un impianto a getto di vapore a una temperatura di 110 ° C per 10 minuti; in presenza di infezioni particolarmente pericolose, le acque reflue vengono sterilizzate a 140° e 130°C rispettivamente per 20 e 60 minuti;

le acque reflue industriali e domestiche derivanti dal lavaggio dei pavimenti e dalle apparecchiature di processo di lavaggio e disinfezione devono essere raccolte in un apposito ricevitore e disinfettate con preparati contenenti cloro prima di essere scaricate nella rete fognaria;

i drenaggi dal territorio di vivari indipendenti sfavorevoli dal punto di vista veterinario e sanitario sono soggetti a disinfezione con prodotti chimici;

i fanghi di depurazione meccanici e biologici risultanti vengono inceneriti.

3.13. I condotti principali di alimentazione e ventilazione di scarico, i tubi di alimentazione elettrica, di approvvigionamento idrico e di fognatura devono essere posizionati in apposite nicchie nei corridoi e avere libero accesso per l'ispezione e la riparazione.

3.14. Le stanze isolate per la conservazione degli animali da esperimento infetti da colture di agenti patogeni di infezioni particolarmente pericolose o sostanze radioattive e la stanza di isolamento sono dotate di sistemi di ventilazione locale con filtri che forniscono purificazione e disinfezione al 100% dell'aria emessa. Il sistema di ventilazione dovrebbe garantire in queste stanze una pressione atmosferica ridotta (di 3 - 5 mm Hg) rispetto alle altre stanze del vivaio. In tali locali è vietata la ventilazione mediante l'apertura delle finestre.

4. Attrezzature del vivario e condizioni di sistemazione degli animali

4.1. Topi, ratti, criceti, porcellini d'India e conigli sono alloggiati in gabbie montate su scaffalature metalliche.

4.2. Le rastrelliere a muro o di altro tipo dovrebbero essere dotate di staffe rimovibili e ripiani mobili, che consentano loro di essere convertite in gabbie di varie dimensioni con diversi tipi di animali da laboratorio.

4.3. Per calcolare l'area di produzione è necessario procedere dai seguenti standard per la messa in gabbia degli animali (tabella).

Specie animali	Superficie minima del fondo della gabbia per animale, cm2	Numero di animali
Specie animali	Superficie minima del fondo della gabbia per animale, cm2	massimo consentito in una gabbia	per 1 m 2 di superficie
Topi			65 adulti o 240 animali giovani
Ratti			20 adulti o 100 animali giovani
Criceti			30 - 40
porcellini d'India			15 - 18
conigli	2000		3 - 4

Appunti.

1. Per una determinazione approssimativa dell'area di produzione, si dovrebbe procedere dal calcolo che 1 cm 2 della superficie del fondo della gabbia dovrebbe rappresentare 1 g di peso dell'animale.

2. Le scaffalature si trovano principalmente lungo le pareti e dovrebbero occupare circa il 40% dell'area di produzione.

4.4. I cani vengono sistemati in cabine separate (box) rigorosamente individualmente. Le dimensioni del box devono corrispondere alla lunghezza e all'altezza degli animali.

Dimensioni della boxe per cani grandi di peso superiore a 22,5 kg - 1,2 × 1,8 m = 2,2 m 2, medi di peso 16 - 22,5 kg - 1,2 × 1,5 m = 1,8 m 2, piccoli di peso 4,5 - 16 kg - 0,9 × 1,2 m = 1,1 m 2 . Lo spazio tra le barre è di 4,5 - 5,5 cm, il diametro delle barre di metallo è di 0,5 - 0,6 cm Le pareti laterali sono massicce. Sulla parete inferiore (pavimento) sono posti degli scudi in legno.

Alimentazione e abbeveraggio - nella boxe. I recinti per le passeggiate sono organizzati individualmente, in ragione di un massimo di 2 m 2 per animale. Tempo di percorrenza - almeno 2 volte al giorno, durata - almeno 20 minuti. Dovrebbe essere previsto un allevamento in sezioni separate dei maschi dalle femmine, dei cuccioli e degli animali aggressivi.

4.5. Sul territorio del vivaio per cani si stanno costruendo stanze speciali, dotate di cabine. Le cabine (passeggiate) sono collegate alle cabine. Ogni cane dovrebbe avere il proprio recinto.

Dimensioni cabina, m: lunghezza - 2; larghezza - 1,5; l'altezza della parete anteriore - 2,5 e quella posteriore - 1,5 - 2; altezza della porta della cabina - 1,7, larghezza - 0,7. Sopra la porta della cabina è installata una cornice vetrata. Nella parte inferiore della porta, installata nella parete posteriore della cabina, che è la parete anteriore del recinto, viene praticato un foro nel recinto di 40 × 50 cm, che viene appeso con un telo spesso per la protezione invernale dalle intemperie. Freddo.

Dimensioni della custodia, m: lunghezza - 3, larghezza - 2, altezza - 2,2. Nella sua parete frontale è realizzata una porta con dimensioni di 1,8 × 0,7 m.

4.6. I gatti sono alloggiati in recinti a cinque teste, dove sono forniti scaffali (letti), con una superficie sufficiente per ospitare tutti gli animali. L'area della gabbia all'aperto per un gatto è di 0,5 m2. Davanti all'ingresso della voliera è attrezzato un vestibolo in rete.

4.7. Se gli animali da allevamento e gli uccelli vengono collocati nei vivari per scopi scientifici, i loro locali sono costruiti secondo gli attuali standard di progettazione tecnologica nel rispetto degli standard zooigienici stabiliti in tali standard.

5. Ammissione degli animali al vivaio

5.1. Il rifornimento del vivaio con animali e uccelli viene effettuato da vivai specializzati esenti da malattie infettive.

L'acquisto di animali e uccelli in altre organizzazioni e individui è consentito se non è possibile acquistarli nei vivai e se per ogni acquisto è presente un certificato veterinario di benessere dell'organizzazione (azienda agricola, privato) per malattie infettive.

5.2. Gli animali sono ammessi al vivaio con certificato veterinario o documenti accompagnatori del vivaio.

5.3. Gli animali ricevuti dal vivaio vengono posti in sezioni isolate per un periodo di tre giorni per adattarsi alle nuove condizioni. I successivi periodi di isolamento o quarantena per questi animali sono determinati in base alle condizioni di detenzione degli animali, alla natura dei prossimi esperimenti, alla distanza, alle condizioni di trasporto, ecc.

5.4. Per gli animali non provenienti da vivai sono stabiliti i seguenti termini della loro quarantena:

per topi e ratti - 14 giorni, porcellini d'India e conigli - 21, cani e gatti - 30, per altri animali e uccelli - 21 giorni.

In alcuni casi, quando negli esperimenti vengono utilizzati femmine gravide, neonati e animali giovani, nonché in esperimenti a breve termine, la durata della quarantena può essere ridotta se questi animali vengono collocati in stanze isolate e sotto adeguata supervisione.

5.5. Durante il periodo di quarantena gli animali sono sottoposti ad osservazione clinica quotidiana: termometria e registrazione delle condizioni generali degli animali su un apposito diario.

5.6. Nelle sezioni di quarantena e sperimentali, gli animali vengono posti in gabbie pulite e pre-disinfettate (autoclavate).

5.7. Gli animali nell'edificio di quarantena sono accuditi dal personale assegnato a questi locali.

5.8. È vietato portare cibo, tute e attrezzature dai locali di quarantena ad altri locali e sezioni per animali da esperimento.

5.9. Durante il periodo di quarantena viene effettuato un cambio periodico delle gabbie. Al termine della quarantena, le gabbie e l'inventario liberati vengono trasferiti al reparto di disinfezione e lavaggio.

La pulizia e il lavaggio delle celle e delle altre attrezzature dalle sezioni di quarantena possono essere effettuati nel reparto di disinfezione e lavaggio generale del vivaio solo dopo la disinfezione preliminare. Anche i rifiuti devono essere decontaminati o inceneriti. Le modalità di disinfezione, disinfestazione e modalità di autoclavaggio vengono stabilite caso per caso, a seconda delle specificità dell'istituto.

5.10. Durante il periodo di adattamento o quarantena, gli animali con sospetta malattia infettiva vengono sottoposti ad esame batteriologico. Quando viene confermata una malattia infettiva, topi, ratti, criceti, porcellini d'India e conigli dell'intero lotto in arrivo vengono distrutti e per cani, gatti e altri animali il periodo di quarantena viene prolungato a seconda della malattia accertata.

5.11. Le stanze di quarantena dopo ogni lotto di animali trasferiti per l'esperimento e dopo ogni caso di rilevamento di malattie infettive vengono accuratamente disinfettate.

5.12. In caso di malattie di massa tra gli animali osservati in quarantena o se durante gli esperimenti vengono rilevati singoli casi di malattie infettive particolarmente pericolose per gli animali da laboratorio e per l'uomo, nel vivaio viene attuata la necessaria serie di misure preventive. In questo caso gli esperimenti sugli animali vengono temporaneamente sospesi.

5.13. Al termine del periodo di quarantena gli animali vengono trasferiti nelle sezioni sperimentali.

6. Modalità di funzionamento e regole di base per la custodia degli animali

6.1. Si consiglia di tenere animali di una sola specie in ogni stanza separata. Se, a seconda delle condizioni dell'esperimento, è necessario tenere animali da laboratorio di specie diverse in una sezione, è necessario posizionarli su scaffali diversi.

6.2. Ogni gabbia (box, voliera, ecc.) dovrà avere un'etichetta indicante i dati dell'animale e la tempistica dell'esperimento.

6.3. Gli animali da laboratorio e gli uccelli sono tenuti in gabbie con fondo solido su una lettiera o in gabbie con fondo in rete - pavimento. Come lettiera vengono utilizzati trucioli di legno, trucioli o torba da lettiera. La lettiera viene preventivamente autoclavata o conservata in un armadio a calore secco (a 150 - 180 ° C per 15 - 20 minuti). Lo spessore dello strato di lettiera nella gabbia è di 5 - 10 mm. Quando gli animali sono tenuti in gabbie con fondo in rete, la lettiera viene versata in un vassoio (vassoio) situato sotto il fondo in rete.

6.4. Tutto il lavoro sulla cura e il mantenimento degli animali da laboratorio è costruito in conformità con la routine quotidiana e il programma di lavoro approvato dal capo di questa istituzione. La routine quotidiana prevede tempo per la sanificazione dei locali e delle attrezzature, la distribuzione del mangime e lo svolgimento di lavori sperimentali e manipolazioni.

6.5. L'alimentazione degli animali da laboratorio viene effettuata in conformità con gli standard esistenti.

6.6. Mangimi e prodotti semilavorati vengono stoccati in un locale appositamente adibito a tale scopo. La distribuzione del mangime viene effettuata secondo le modalità prescritte.

Nella mensa del vivaio è consentita la conservazione di scorte di cibo per non più di due o tre giorni. Quando si alimentano gli animali con mangime granulare e se nelle gabbie sono presenti tramogge di mangime, è consentita la ricezione anticipata del mangime dal magazzino per un periodo compreso tra sette e dieci giorni.

6.7. Nella cucina del mangime e nella dispensa del vivaio sono attrezzate cassapanche speciali (in metallo o imbottite con lamiera all'interno) per conservare la scorta di mangime. Gli alimenti deperibili vengono conservati nel frigorifero. La consegna dei mangimi dal magazzino viene effettuata da personale appositamente incaricato (lavoratori che non sono direttamente coinvolti nella cura degli animali).

6.8. La distribuzione del mangime nei locali-sezioni viene effettuata da operai o personale di cucina appositamente addetto a tale scopo in stoviglie (contenitori) disinfettate assegnate a ciascuna sezione. La cancellazione del mangime viene effettuata secondo le modalità prescritte in base all'effettiva disponibilità degli animali per ciascun giorno.

6.9. È vietato l'ingresso nella mensa al personale che si prende cura degli animali da laboratorio e alle persone non autorizzate.

6.10. L'approvvigionamento di acqua potabile per gli animali da laboratorio avviene tramite la rete idrica, la qualità dell'acqua deve essere conforme a SanPiN 2.1.4.1074-01.

6.11. La germinazione del grano sulla massa verde per l'alimentazione degli animali da laboratorio viene effettuata in locali appositamente designati a tale scopo. È consentito nutrire gli animali con la massa radicale delle piante in assenza di muffe.

6.12. La distribuzione del mangime e l'abbeveraggio degli animali deve essere effettuata solo dopo aver pulito i locali, pulito o cambiato le gabbie e rimosso le attrezzature sporche, i pallet con la lettiera e altri materiali da disinfettare o smaltire dalle sezioni.

6.13. La pulizia delle gabbie e la pulizia delle stanze viene effettuata con l'ausilio dell'inventario rigorosamente assegnato a ciascuna stanza.

6.14. Con un cambio periodico delle gabbie, gli animali vengono trapiantati 1-2 volte a settimana in gabbie pre-disinfettate con lettiera, mangiatoie e abbeveratoi preparati. Le gabbie sporche, insieme a lettiere, mangiatoie e abbeveratoi, vengono trasferite al reparto di disinfezione e lavaggio per la successiva lavorazione.

6.15. Le celle vengono pulite quotidianamente. Allo stesso tempo, la lettiera contaminata e gli altri rifiuti delle gabbie vengono raccolti in speciali serbatoi metallici con coperchio. I serbatoi vengono chiusi ermeticamente e trasferiti al reparto di disinfezione e lavaggio.

6.16. Quando si utilizzano gabbie con fondo in rete e vassoi isolati dalle gabbie, questi ultimi vengono periodicamente (almeno una volta alla settimana) sostituiti con nuovi. I pallet sporchi con la lettiera vengono trasferiti al reparto di disinfezione e lavaggio per l'ulteriore lavorazione.

6.17. Quando un lavoratore serve diversi tipi di animali da laboratorio, vengono prima lavorate le gabbie con le cavie, poi le gabbie con topi, ratti e conigli e infine le stanze dove vengono tenuti cani e gatti.

6.18. È vietato lavare e disinfettare gabbie, mangiatoie e abbeveratoi direttamente nelle sezioni.

6.19. Prima della fine della giornata lavorativa nelle sezioni, il pavimento viene pulito con acqua utilizzando una soluzione all'1% di cloramina o un altro disinfettante. Almeno una volta al mese si tiene una giornata sanitaria durante la quale tutti i locali vengono puliti. L'ordine della giornata sanitaria è determinato dal capo del vivaio.

6.20. La disinfezione, pulizia e lavaggio di gabbie, mangiatoie, abbeveratoi e altre attrezzature viene effettuata da addetti appositamente addetti al reparto di disinfezione e lavaggio. Il controllo sull'efficacia della pulizia e della disinfezione dell'inventario è affidato al veterinario del vivario.

6.21. Le condizioni per la raccolta, lo stoccaggio, la rimozione (o lo smaltimento) dei rifiuti (rifiuti, letame, residui di mangime, ecc.) devono essere determinate caso per caso in accordo con le autorità e le istituzioni locali di Rospotrebnadzor. Quando si lavora con materiale infetto è necessario decontaminare i rifiuti mediante autoclavaggio o trattamento con soluzioni disinfettanti.

6.22. Nelle sezioni con animali da esperimento, dovrebbe essere effettuato un monitoraggio costante del regime di temperatura e umidità. Per controllare la qualità dell'aria ambiente nei locali in cui vengono tenuti gli animali, si consiglia di determinare periodicamente (2-3 volte al mese) la concentrazione di gas nocivi (biossido e ammoniaca).

6.23. Il trasferimento degli animali per esperimenti viene effettuato secondo i requisiti una tantum secondo la domanda annuale dei laboratori, approvata dal capo dell'istituto. Il lavoro con gli animali è consentito solo negli orari previsti dalla routine quotidiana del vivaio.

6.24. Se nelle sezioni vengono trovati animali malati, questi ultimi, con la consapevolezza dello sperimentatore, vengono distrutti o trasferiti in un reparto di isolamento. La questione dell'ulteriore utilizzo di animali malati viene risolta entro non più di due giorni.

6.25. I cadaveri degli animali vengono conservati in un frigorifero speciale per non più di un giorno prima dell'autopsia patoanatomica, dopodiché sono soggetti a smaltimento. È severamente vietato conservare i cadaveri degli animali nelle gabbie e sul pavimento delle sezioni sperimentali.

6.26. L'autopsia anatomica patologica degli animali viene eseguita dallo sperimentatore. In caso di morte di un animale, indipendentemente dall'esperimento, all'autopsia è presente un veterinario di vivario.

6.27. Ogni caso di morte o macellazione forzata di animali deve essere registrato in un apposito giornale.

6.28. È vietato visitare il vivaio a persone non autorizzate senza autorizzazione speciale. I dipendenti dell'istituzione che svolgono lavori nel vivaio sono tenuti a:

osservare le regole stabilite della routine quotidiana e il programma di lavoro del vivaio;

condurre osservazioni sistematiche dei loro animali da esperimento;

mantenere la documentazione primaria, compilando tempestivamente le etichette sulle gabbie con animali da esperimento;

visitare solo i locali del vivaio in cui sono presenti animali assegnati a questo dipendente;

al termine degli esperimenti o di qualsiasi altro lavoro in corso con animali da esperimento, lasciare il posto di lavoro nell'ordine corretto;

monitorare la tempestiva cancellazione degli animali da esperimento che hanno lasciato l'esperimento, sono caduti o sono stati costretti a ucciderli;

informare gli specialisti del vivaio su tutti i casi osservati di malattie degli animali da esperimento, nonché informare tempestivamente gli specialisti del vivaio sulle presunte condizioni patologiche degli animali in conformità con le condizioni dell'esperimento.

6.29. Ai dipendenti dell'istituzione che lavorano nel vivaio con animali da esperimento è vietato dare istruzioni ai lavoratori sulla modifica delle modalità di custodia e alimentazione degli animali senza il consenso degli specialisti del vivaio.

6.30. Quando i dipendenti di questa istituzione conducono ricerche congiunte sugli animali in altre istituzioni, per il momento è vietato a questi dipendenti lavorare nel vivaio (clinico) del loro istituto (istituzione).

6.31. Tutte le azioni che possono causare dolore agli animali da laboratorio (interventi chirurgici, dissanguamento totale, impianto di sensori, ecc., nonché la macellazione forzata degli animali) devono essere eseguite utilizzando anestetici. Se, secondo le condizioni dell'esperimento, l'uso dell'anestesia è controindicato, tutte le azioni sopra indicate devono essere eseguite il prima possibile.

6.32. Durante l'esperimento, il dipendente che conduce questo esperimento deve necessariamente osservare le seguenti regole per il trattamento umano degli animali da laboratorio (sperimentali).

Nei casi in cui è previsto un intervento chirurgico o un esperimento con stimolazione del dolore, l'anestesia deve essere somministrata prima che l'animale venga legato alla macchina.

Il calcolo della quantità di anestetico deve essere effettuato per 1 kg o 1 g di peso dell'animale. Il nome della sostanza e la sua quantità devono essere registrati non solo nel protocollo dell'esperimento, ma anche in una mappa speciale.

Durante l'esperimento, quando risulta essere più lungo di quanto inizialmente previsto, è obbligatoria la somministrazione aggiuntiva di anestetici.

Se l'esperimento acuto dovesse concludersi con la morte dell'animale, lo sperimentatore dovrà uccidere l'animale prima che finisca l'effetto dell'anestetico.

Dopo la fine dell'intervento chirurgico, l'animale deve essere trasferito nella sala postoperatoria su una barella speciale, che esclude la possibilità di spostamento dei tessuti, divergenza delle suture, ecc.

Lo sperimentatore deve prevedere la possibilità della comparsa di dolore nell'animale nel periodo postoperatorio e prescrivere antidolorifici.

7. Numero di addetti al vivario

7.1. Il numero degli addetti al vivaio è determinato in base al volume e alla natura degli studi sperimentali, nonché al numero di animali da laboratorio. In questo caso, è necessario procedere dalle seguenti norme per il carico di animali della stessa specie per operatore sanitario (tenendo conto delle norme per la messa in gabbia degli animali).

Specie animali	Numero
Specie animali	animali	cellule

Topi	800 - 1000	80 - 100
Ratti	600 - 700	80 - 100
Criceti		60 - 70
porcellini d'India		50 - 70
conigli
Cani	18 - 20	18 - 20
gatti	35 - 40

Quando una persona serve animali di diverse specie, il calcolo viene effettuato in base agli standard di cui sopra. In ciascun caso specifico, quando si stabiliscono le norme sul carico di cura degli animali per lavoratore, è necessario tenere conto del tipo di gabbie, del grado di meccanizzazione dei processi produttivi, del tipo di alimentazione (mangime naturale o mangime granulare), del frequenza, natura e caratteristiche della ricerca, ecc.

7.2. Quando si lavora con sostanze radioattive o infezioni particolarmente pericolose, nonché quando si allevano specie animali non elencate nella tabella. , gli standard di servizio sono stabiliti dal capo di un'istituzione scientifica in base ai tempi delle singole operazioni e tenendo conto degli standard attuali per la manutenzione degli animali da allevamento.

8. Norme di igiene personale per i dipendenti del vivaio

8.1. Il personale del Vivarium dovrà essere dotato di tuta, scarpe antinfortunistiche, sapone e asciugamani secondo le normative vigenti.

8.2. Nelle stanze con animali, nella mensa, nel reparto di disinfezione e lavaggio, è necessario disporre di soluzioni disinfettanti per la disinfezione delle mani.

8.3. Il personale del vivario deve:

prima di iniziare il lavoro, rimuovere gli indumenti esterni, le scarpe, indossare tute, scarpe antinfortunistiche;

al termine del lavoro (preferibilmente prima dell'inizio del lavoro), sottoporsi a cure nel blocco sanitario (fare la doccia o il bagno);

appendere gli indumenti domestici e le tute solo in sezioni diverse di un singolo armadio;

periodicamente (ma almeno una volta al mese) disinfettare i propri armadietti individuali;

al termine di ogni singola fase di lavoro secondo la routine quotidiana, nonché prima di mangiare, assicurarsi di lavarsi e disinfettarsi le mani.

8.4. È severamente vietato mangiare e fumare nei locali di produzione del vivaio.

8.5. Le persone appena assunte per lavorare con animali da laboratorio devono sottoporsi a una visita medica, che comprende test per la presenza di agenti patogeni della tubercolosi e dell'intero gruppo di infezioni intestinali. Gli esami di follow-up vengono effettuati almeno una volta all'anno. I pazienti affetti da tubercolosi, malattie veneree, della pelle e altre malattie contagiose non sono autorizzati a lavorare nel vivaio.

8.6. Quando conducono esperimenti su animali con agenti patogeni infettivi pericolosi per l'uomo, gli addetti al vivaio sono sottoposti a immunizzazione profilattica.

Metodo di fissaggio

Bestiame

L'animale viene domato stringendo il setto nasale con le dita, una pinza di Garms, Nikolaev, anelli al naso o limitando il movimento tenendolo per le corna con una corda, per il collo, la testa e il secondo anello attorno al naso. Gli arti posteriori sono fissati con un cappio di corda, che viene applicato ad entrambi gli arti leggermente sopra i garretti. Quando si puliscono e si tagliano gli zoccoli sugli arti pelvici degli animali, è possibile dare una svolta alla parte inferiore della gamba.

I tori sono fissati con anelli al naso e un forte collare con una catena.

I tori da riproduzione, indipendentemente dalla loro disposizione, vengono portati per l'esame solo su una cavezza e utilizzano sempre un bastone da trasporto (moschettone) lungo circa 2 m, che è attaccato all'anello nasale, che impedisce all'animale di attaccare improvvisamente una persona.

I vitelli vengono tenuti con le mani per il collo, le orecchie o con l'aiuto di un anello cieco per il collo con un nodo speciale e legati con una corda alla rastrelliera.

Maiali

Gli animali vengono fissati in posizione eretta catturando la mascella superiore con un cavo metallico e un supporto per maniglia o in una macchina dal design semplice.

È conveniente tenere gli animali giovani e le scrofette da ingrasso con le pinze proposte da K.P. Solovyov. Bisogna fare attenzione quando si maneggiano verri, maiali vecchi e scrofe in lattazione, specialmente quelli fissati nei recinti.

Capre e pecore

Gli animali vengono tenuti per le corna o per il collo. Se necessario fissarlo in posizione supina sul lettino.

Cavalli

I cavalli sono fissati in modo che non possano colpire con gli arti anteriori e posteriori o mordere. I cavalli dovrebbero essere avvicinati leggermente di lato, in direzione della spalla e della scapola, preferibilmente dal lato sinistro, poiché il cavallo si abitua a questo durante il funzionamento. Si avvicinano alla testa, prendono la cavezza, la briglia o la criniera con la mano sinistra, e con la mano destra accarezzano e picchiettano sul collo, sul garrese, poi sulla scapola e sulla spalla. Se l'animale è tenuto senza guinzaglio in una stalla, allora dovrebbe essere chiamato per attirare l'attenzione su di sé, richiamarlo, pronunciando parole affettuose. È necessario che il cavallo stia con la testa rivolta verso la persona.

Un animale che si trova nella macchina o su una postazione di aggancio non deve essere avvicinato da dietro, ma piuttosto di lato dal lato verso cui guarda.

Durante la termometria, l'esame rettale e varie manipolazioni mediche, al fine di garantire la sicurezza del lavoro di uno specialista veterinario, è necessario sollevare l'arto toracico dal lato da cui lo specialista manipola o mette su una o entrambe le zampe posteriori arti.

L'arto toracico viene fissato sollevandolo con la spazzola o la parte presunta e piegandolo all'altezza dell'articolazione carpale. Allo stesso tempo, stanno sul lato dell'animale con le spalle alla testa. L'arto sollevato viene tenuto con due mani e durante le manipolazioni prolungate con l'aiuto di uno stucco o di una corda lanciata sulla schiena. Non puoi mettere l'arto sollevato dell'animale sul ginocchio, poiché l'animale ha un quarto punto di supporto, che non è sicuro per l'uomo. La corda non deve essere legata a nessun oggetto o avvolta attorno al corpo dell'animale, poiché in caso di caduta inaspettata il cavallo non sarà in grado di rilasciare rapidamente l'arto. Quando si esaminano le parti posteriori del corpo, l'arto pelvico è fisso. In piedi davanti alla groppa del cavallo di fronte alla coda, con una mano si appoggiano al maklok e con l'altra picchiettano leggermente la gamba dall'alto verso il basso, la sollevano, allacciano la cintura di mastice o mettono un anello di corda, che è poi passato tra gli arti anteriori, circondato attorno al collo e legato con un cappio non allungabile. Nello studio dei cavalli ostinati e per domare i cavalli irrequieti vengono utilizzate torsioni e pinze per labbra. Per applicare una torsione, è necessario inserire la mano nell'anello della torsione. Afferra il labbro superiore, tiralo in avanti, sposta l'anello di torsione sul labbro con la mano sinistra e ruotalo saldamente. Gli animali possono essere fissati in modo sicuro in macchine speciali. Nella macchina si consiglia di legare il cavallo al tratto e all'animale ostinato, in modo che non crolli, portare le cinture sotto lo stomaco.

cammelli

I cammelli vengono portati per la ricerca su una cavezza. I cammelli dovrebbero essere avvicinati con attenzione, preferibilmente di lato (dal lato degli arti toracici). I metodi per addomesticare questi animali sono gli stessi dei bovini e dei cavalli. È necessario tenere conto delle caratteristiche specifiche del comportamento di questi animali. È auspicabile che il personale che si prende cura di loro costantemente sia coinvolto nella riparazione dei cammelli.

Uccello

L'uccello viene fissato, tenendolo in posizione naturale per gli arti e le ali, senza comprimere il petto per evitare il soffocamento. Quando si lavora con uccelli acquatici (oche, anatre), è necessario tenere la testa per evitare un colpo agli occhi ed eseguire manipolazioni a distanza di un braccio.

animali da pelliccia

Gli animali vengono tenuti con pinze speciali o guanti con le mani in tela (con fodera di cotone). Lo mettono sul tavolo e lo tengono con una mano per il collo, con l'altra per il busto. La cavità orale può essere aperta con l'aiuto degli sbadigli ideati da V.L. Berestov, si consiglia di utilizzare museruole speciali. Puoi fissare gli animali in trappole a rete, utilizzare agenti analgesici o tranquillanti con anestetici locali, nonché un agente anestetico.

Cani

Con l'aiuto del proprietario, gli animali vengono messi con la museruola o le loro bocche vengono legate con una forte treccia. A questo scopo viene applicata una treccia alle mascelle dall'alto, legata con un nodo semplice sotto la mascella inferiore, quindi fissata infine sulla nuca con un nodo marino. Se si sospetta la rabbia, così come i cani arrabbiati e irrequieti, è meglio metterli in una speciale gabbia di metallo, un lato della quale si muove e lo pizzica. Per fissare i cani in posizione supina, viene utilizzato un tavolo operatorio per piccoli animali, che consente di assegnare loro qualsiasi posizione comoda per il lavoro.

gatti

Durante le manipolazioni dolorose, gli animali vengono fissati in un'apposita manica di stoffa o avvolti in un asciugamano, lasciando libera una parte del corpo da esaminare. Il muso può essere legato come quello di un cane e le zampe possono essere fissate con le mani, indossando guanti di pelle o di gomma.

SNiP 11.01-2003. Istruzioni sulla procedura per lo sviluppo, l'approvazione, l'approvazione e la composizione della documentazione di progetto per la costruzione di imprese, edifici e strutture.

. SanPiN 2.2.1/2.1.1.1200-03. Zone di protezione sanitaria e classificazione sanitaria di imprese, strutture e altri oggetti (Nuova edizione. Approvato con decreto del medico capo sanitario della Federazione Russa n. 74 del 25 settembre 2007, registrato dal Ministero della Giustizia della Federazione Russa n. 10995 del 25 gennaio 2008).

Bevendo acqua. Requisiti igienici per la qualità dell'acqua dei sistemi centralizzati di approvvigionamento di acqua potabile. Controllo di qualità.

Il vivaio è una parte importante di istituti di ricerca, laboratori e altre istituzioni in cui viene condotta la ricerca sugli animali. Seminterrati o locali non idonei (capannoni, annessi, ecc.) con elevata umidità e correnti d'aria sono del tutto inadatti per un vivaio. La costruzione di un vivaio, così come di un vivaio per animali da riproduzione, dovrà essere realizzata in luogo elevato e asciutto, con annesso un terreno di terreno. Il vivaio dovrebbe avere abbastanza luce solare, l'area adiacente ai locali dovrebbe essere protetta dal vento. Il territorio del vivaio è circondato da una recinzione cieca; i recinti sono disposti in prossimità della stanza principale.

L'edificio del vivaio è costituito dai locali principali, dove vengono tenuti gli animali da laboratorio, e da quelli accessori. Ogni stanza del vivaio dovrebbe contenere animali della stessa specie. Di norma, i grandi animali da laboratorio (scimmie, cani) vengono tenuti in stanze diverse e anche i gatti vengono tenuti separatamente. I piccoli animali (cavie, ratti, topi) vengono solitamente collocati nella stessa stanza. Cani e conigli possono essere tenuti all'aperto, in gabbie sotto una tettoia o in voliere.

Una parte importante e necessaria del vivaio sono i locali di servizio: cucina, stanza del personale, quarantena, stanza di isolamento, lavaggio. La cucina per la preparazione del mangime è dotata di fornello e frigorifero con fornitura di acqua calda e fredda. La cucina si trova nello stesso edificio del vivaio accanto alle dispense per i cibi. La sala del personale di servizio è dotata di armadietti individuali per riporre tute e calzature speciali. Adiacente ad esso dovrebbe essere presente una doccia per il personale del vivaio. Tutti gli animali che entrano nel vivaio vengono trasferiti nel reparto principale solo dopo essere stati in quarantena. La stanza di quarantena deve essere isolata e disporre di tutto il necessario per la cura degli animali. Insieme a questo, è necessario disporre di una stanza di isolamento per animali da laboratorio malati o sospetti, nonché di una stanza per l'autopsia. È previsto un locale per il lavaggio, la disinfezione e l'asciugatura delle gabbie e delle altre attrezzature del vivaio, nonché delle tute per i dipendenti. Il vivaio dovrebbe avere un inceneritore e una vasca per il bagno degli animali.

Una parte essenziale del vivaio è la clinica per animali. Di solito i cani vengono ricoverati in clinica dopo le operazioni; ci restano finché non escono da una condizione grave dopo l'intervento. La clinica è dotata di celle speciali o di celle del tipo abituale; dovrebbe essere dotato di acqua calda e fredda, gas, cassetta di pronto soccorso con i medicinali necessari per l'allattamento degli animali. A seconda della natura della ricerca, la clinica è dotata di macchine speciali per il fissaggio degli animali.

I pavimenti del vivaio, in particolare del vano principale, devono essere stagni e inclinati verso la fognatura. I pavimenti sono ricoperti di piastrelle di plastica, metlakh, cementate o, in casi estremi, asfaltate. Le pareti ad un'altezza di 2 m dal pavimento sono ricoperte con piastrelle smaltate, plastica o dipinte con colori ad olio. Il sistema fognario dovrebbe avere scarichi ampi per evitare intasamenti, coperti da una grata metallica. Le acque reflue devono essere neutralizzate prima di entrare nella pubblica fognatura.

Nei locali del vivaio, oltre alla ventilazione naturale (finestre, traversi, finestre apribili), è predisposta la ventilazione di mandata e di scarico con molteplici ricambi d'aria. Il riscaldamento del vivaio deve essere centralizzato, è necessario evitare la comparsa di umidità e mantenere la temperatura entro 12-18°.

A seconda del profilo dell'istituto di ricerca (chirurgia sperimentale, fisiologia normale e patologica, microbiologia, tossicologia, ecc.), quando si progetta un vivaio dovrebbero essere previsti gli spazi aggiuntivi speciali necessari. In alcuni casi, vengono assegnate stanze isolate per tenere animali da laboratorio infetti da colture di agenti patogeni di infezioni particolarmente pericolose e sostanze radioattive, con una sala operatoria in ciascuna di queste stanze. Ogni stanza dovrebbe avere un frigorifero e l'attrezzatura necessaria per infettare gli animali e sezionare i cadaveri.

Il vivaio dovrebbe essere gestito da uno specialista del bestiame addestrato nella zootecnia di animali da laboratorio.

Cani. Quando i cani vengono tenuti in gabbia nella parte principale del vivaio, non dovrebbe esserci affollamento, poiché ciò crea condizioni sanitarie ed epidemiologiche sfavorevoli con il pericolo di una rapida diffusione dell'infezione a un folto gruppo di animali. È meglio posizionare i cani in piccole stanze separate con un dispositivo in ciascuna di esse 5-6 gabbie.

Se è necessario raccogliere l'urina, i cani vengono posti nelle cosiddette gabbie di scambio, il cui pavimento è costituito da una rete e da un vassoio mobile con scarico.

Cani che abbaiano silenziosamente. Poiché il mantenimento di un gran numero di cani è associato a determinate difficoltà a causa del rumore prodotto dagli animali che abbaiano, in alcuni casi si ricorre alla legatura dei nervi ricorrenti del collo su entrambi i lati, a seguito della quale le corde vocali vengono staccate. denervati e i cani perdono la capacità di abbaiare.

Tecnica operativa. Gli animali vengono operati in anestesia con morfina con l'aggiunta di anestesia locale (soluzione di novocaina allo 0,5 o 0,25%) o in anestesia con etere. Viene eseguita un'incisione cutanea lunga 8-10 cm lungo la linea mediana del collo dal bordo inferiore della cartilagine tiroidea verso il basso. Sezionare la fascia insieme al muscolo cutaneo del collo. Entrambi i muscoli sternoioidei sono separati in modo netto, il muscolo sinistro è spinto verso l'esterno (Fig. 1). Una soluzione di novocaina viene iniettata nel tessuto tra il muscolo sternoioideo sinistro e la trachea. Il ramo ricorrente del nervo vago passa in uno stretto spazio tra la trachea e l'esofago ed è adiacente alla superficie postero-laterale della trachea. Il nervo viene rinvenuto nel tessuto a livello del 6-10° anello tracheale, portato nella ferita con un uncino smusso e incrociato o resecato per 1 cm, si asportano gli uncini e si posiziona il muscolo sternoioideo sinistro. Allo stesso modo, il ramo ricorrente del nervo vago si incrocia a destra. Bisogna tenere conto che a livello degli anelli tracheali superiori il ramo ricorrente del nervo vago si divide in rami terminali ed assume un tipo lasso. Non è possibile attraversare tutti i piccoli rami nervosi durante l'operazione e l'operazione potrebbe non dare il risultato desiderato.

Nei cani, dopo la sezione dei nervi ricorrenti, si osserva insufficienza respiratoria, che li rende inadatti a operazioni sperimentali complesse (L. M. Nagibin et al., 1967; N. A. Super et al., 1967).

gatti. Tenere i gatti in un vivaio è difficile perché non tollerano le gabbie. Ai gatti viene assegnata una stanza speciale dove hanno libertà di movimento. In queste condizioni possono vivere a lungo in un vivaio. La stanza dovrebbe essere luminosa, calda, ben ventilata, con scaffali su cui far sedere i gatti. Sul pavimento della stanza è disposta una latrina, che è una scatola piena di sabbia secca, torba, segatura. Il cassetto va pulito frequentemente, l'odore nella stanza può essere eliminato con il permanganato di potassio.

Conigli e piccoli animali da laboratorio. Gli animali sono tenuti in gabbie poste su rastrelliere montate sotto forma di batterie o in serie di gabbie posizionate su ruote. Le gabbie sono installate su rack a una distanza di 30-50 cm dalle pareti, la fila inferiore di celle deve essere posizionata a 50-70 cm dal pavimento. Tra i rack è lasciato un passaggio di almeno 1 m.I pavimenti delle celle dei rack o delle batterie sono isolati tra loro con materiale impermeabile, che impedisce agli escrementi di entrare nelle celle situate sotto.

A seconda del tipo di animale, si consigliano le seguenti dimensioni delle cellule (V.N. Ivanov, 1967): per topi (10-20 animali) - 200X300X150 mm, per ratti (10-15 animali) - 334X450X200 mm, per porcellini d'India (5- 10 animali) - 486X450X200 mm, per conigli (1-2 a seconda dell'età e della razza) - 486X450X300 mm.

Le celle sono realizzate con vari materiali: stagno, filo, acciaio,
compensato, plastica, ecc. Devono essere durevoli ed economici, facili da pulire, resistenti ai disinfettanti e al trattamento termico. Le gabbie in acciaio inossidabile sono le più adatte per lavorare con isotopi radioattivi.

Riso. 1. L'operazione di isolare e tagliare i rami dei nervi ricorrenti per creare un abbaiare silenzioso nei cani.
1 lobo sinistro della ghiandola tiroidea; 2 - ramo dell'età del nervo vago; 3 - muscolo sternoioideo sinistro (disegnato con un gancio); 4 - esofago; 5-trachea.

Sulla parete anteriore della gabbia è installata una mangiatoia, un bevitore automatico ed è appeso un cartello su cui sono inseriti i dati di base sull'animale, il tipo di intervento chirurgico, ecc.

Conigli e porcellini d'India vengono spesso tenuti fuori dal vivaio. Per questo vengono utilizzate le celle, posizionandole su più livelli, sotto un tetto comune. L'allevamento all'aperto contribuisce alla coltivazione di conigli sani e più resistenti a varie malattie ed è diffuso soprattutto negli asili nido.

La stanza in cui si trovano le gabbie con gli animali dovrebbe essere ben ventilata, l'umidità relativa dell'aria dovrebbe essere compresa tra il 40 e il 45%. Anche in presenza di ventilazione di mandata e di scarico, al fine di ridurre il contenuto di ammoniaca e rifiuti animali nell'aria, si consiglia di utilizzare lettiera di torba o segatura con aggiunta di perfosfato. Il processo di raccolta delle cellule può essere automatizzato; la pulizia viene effettuata 1-2 volte al giorno.
Sulla parete anteriore della gabbia è installata una mangiatoia, un bevitore automatico ed è appeso un cartello su cui sono inseriti i dati di base sull'animale, il tipo di intervento chirurgico, ecc.
Conigli e porcellini d'India vengono spesso tenuti fuori dal vivaio. Per questo vengono utilizzate le celle, posizionandole su più livelli, sotto un tetto comune. L'allevamento all'aperto contribuisce alla coltivazione di conigli sani e più resistenti a varie malattie ed è diffuso soprattutto negli asili nido.

4.3. Gli animali ricevuti da un asilo nido specializzato (situato nella stessa città, distretto) vengono collocati per un periodo di tre giorni per adattarsi alle nuove condizioni. I successivi periodi di isolamento o quarantena per questi animali, così come per gli animali ottenuti da un asilo nido in altre città, sono determinati in base alle condizioni di detenzione degli animali, alla natura dei prossimi esperimenti, alla distanza e alle condizioni di trasporto, ecc. .

4.4. Per gli animali non provenienti da vivai specializzati è stabilito il seguente periodo di quarantena:

Per topi e ratti - 14 giorni;

Per porcellini d'India e conigli - 21 giorni;

Per cani e gatti - 30 giorni;

Per altri animali e uccelli - 21 giorni.

In alcuni casi, per l'utilizzo in esperimenti su suini gravidi, neonati e animali giovani, nonché in esperimenti a breve termine, il periodo di quarantena può essere ridotto, a condizione che questi animali siano collocati in stanze isolate e adeguatamente monitorati.

4.5. Durante il periodo di quarantena, gli animali sono sottoposti all'osservazione clinica quotidiana, alla termometria e alla registrazione delle condizioni generali degli animali in un giornale speciale secondo il modulo conforme all'appendice n. 5.

4.6. Nelle sezioni di quarantena e sperimentali, gli animali vengono posti in gabbie pulite e pre-disinfettate (autoclavate).

4.7. Gli animali in quarantena sono accuditi dal personale addetto a tali locali.

4.8. È vietato portare cibo, tute e attrezzature dai locali di quarantena ad altri locali e sezioni per animali da esperimento.

4.9. Durante il periodo di quarantena viene effettuato un cambio periodico di celle (bagni). Al termine della quarantena, le gabbie e l'inventario liberati vengono trasferiti al reparto di disinfezione e lavaggio.

La pulizia e il lavaggio delle celle e delle altre attrezzature dalle sezioni di quarantena possono essere effettuati nel reparto di disinfezione e lavaggio generale del vivaio solo dopo la disinfezione preliminare. Anche i rifiuti devono essere disinfettati e inceneriti. Le modalità di disinfezione, disinfestazione, modalità di autoclavaggio vengono stabilite caso per caso, a seconda delle specificità dell'istituto.

4.10. Durante il periodo di adattamento o quarantena, un animale sospettato di malattie infettive viene sottoposto ad esame batteriologico. Quando viene confermata una malattia infettiva, topi, ratti, criceti, porcellini d'India e conigli vengono distrutti nell'intero lotto, mentre per cani, gatti e altri animali domestici il periodo di quarantena viene prolungato a seconda della malattia accertata.

4.11. Le stanze di quarantena dopo ogni lotto di animali trasferiti per l'esperimento e dopo ogni caso di rilevamento di malattie infettive vengono accuratamente disinfettate.

4.12. In caso di insorgenza di malattie di massa tra gli animali che erano in quarantena o se durante l'esperimento vengono rilevati singoli casi di malattie infettive particolarmente pericolose per gli animali da laboratorio e per l'uomo, nel vivaio viene eseguita la necessaria serie di misure preventive. In questo caso gli esperimenti sugli animali vengono temporaneamente sospesi.

4.13. Al termine del periodo di quarantena gli animali vengono trasferiti nelle sezioni sperimentali.

V. Modalità di funzionamento e regole di contenuto di base

animali da laboratorio

5.1. Si consiglia di tenere animali di una sola specie in ogni stanza separata. Se, a seconda delle condizioni dell'esperimento, è necessario tenere animali da laboratorio di specie diverse in una sezione, è necessario posizionarli su scaffali diversi.

5.2. Ogni gabbia (box, voliera, ecc.) deve avere un'etichetta indicante i dati dell'animale e la tempistica dell'esperimento (un'etichetta campione è indicata nell'Appendice n. 6).

5.3. Gli animali da laboratorio e gli uccelli sono tenuti in gabbie con fondo solido su una lettiera o in gabbie con fondo in rete - pavimento. Come lettiera vengono utilizzati trucioli di legno, trucioli o torba da lettiera. La lettiera viene preventivamente autoclavata o conservata in una cabina a calore secco (a T 150 - 180 gradi C per 15 - 20 minuti). Lo spessore dello strato di lettiera nella gabbia è di 5 - 10 mm. Quando si tengono gli animali in gabbie con fondo a rete, la lettiera viene cosparsa in un vassoio (teglia).

5.4. Tutto il lavoro sulla cura e il mantenimento degli animali da laboratorio è costruito in conformità con la routine quotidiana e il programma di lavoro approvato dal capo di questa istituzione. La routine quotidiana prevede tempo per la sanificazione dei locali e delle attrezzature, la distribuzione del mangime e lo svolgimento di lavori sperimentali e manipolazioni.

5.5. L'alimentazione degli animali da laboratorio viene effettuata in conformità con gli standard approvati dall'Ordine del Ministro della Sanità dell'URSS del 10 marzo 1966 N 163.

5.6. Mangimi e prodotti semilavorati vengono immagazzinati in un locale (magazzino) appositamente designato a questo scopo. La distribuzione del mangime viene effettuata secondo le modalità prescritte.

Nella cucina del vivaio è consentita la conservazione di scorte di cibo per non più di 2-3 giorni. In caso di alimentazione degli animali con mangime granulare e in presenza di mangiatoie bunker nelle gabbie, è consentita la ricezione anticipata del mangime dai magazzini per 7-10 giorni.

5.7. Nella cucina del mangime e nella dispensa del vivaio sono attrezzate cassapanche speciali (in metallo o imbottite con lamiera all'interno) per conservare la scorta di mangime. Gli alimenti deperibili vengono conservati nel frigorifero. La consegna dei mangimi dai magazzini viene effettuata da personale appositamente incaricato (lavoratori che non sono direttamente coinvolti nella cura degli animali).

5.8. La distribuzione del mangime nei locali-sezioni viene effettuata da operai o personale di cucina appositamente addetto a tale scopo in stoviglie (contenitori) disinfettate assegnate a ciascuna sezione. Il mangime viene stornato secondo la procedura stabilita in base all'effettiva disponibilità degli animali per ciascun giorno con la presentazione alla contabilità dell'istituto degli atti dei laboratori sugli animali che hanno abbandonato l'esperimento o sono stati costretti ad ucciderli.

5.9. È vietato l'ingresso nella mensa al personale che si prende cura degli animali da laboratorio e alle persone non autorizzate.

5.10. La fornitura di acqua potabile agli animali da laboratorio viene effettuata da un sistema di approvvigionamento idrico, la qualità dell'acqua deve essere conforme a GOST "Acqua potabile".

5.11. La germinazione del grano sulla massa verde per l'alimentazione degli animali da laboratorio viene effettuata in locali appositamente designati a tale scopo. È consentito nutrire gli animali con la massa radicale delle piante in assenza di muffe.

5.12. La distribuzione del mangime e l'abbeveraggio degli animali deve essere effettuata solo dopo aver pulito i locali, pulito o cambiato le gabbie e rimosso dai reparti le attrezzature sporche, i vassoi con la lettiera e gli altri materiali da disinfettare o da smaltire.

5.13. La pulizia delle gabbie e la pulizia delle stanze viene effettuata con l'ausilio dell'inventario rigorosamente assegnato a ciascuna stanza.

5.14. Con un cambio periodico delle gabbie, gli animali vengono trapiantati 1-2 volte a settimana in gabbie pre-disinfettate con mangiatoia, abbeveratoi e lettiera predisposti. Le gabbie sporche, insieme a lettiere, mangiatoie e abbeveratoi, vengono trasferite al reparto di disinfezione e lavaggio per la successiva lavorazione.

5.15. Le celle vengono pulite quotidianamente. Allo stesso tempo, la lettiera contaminata e gli altri rifiuti delle gabbie vengono raccolti in speciali serbatoi metallici con coperchio. I serbatoi con coperchio vengono chiusi ermeticamente e trasferiti al reparto di disinfezione e lavaggio.

5.16. Quando si utilizzano gabbie con fondo in rete e vassoi isolati dalle gabbie, questi ultimi vengono periodicamente (almeno una volta alla settimana) sostituiti con nuovi. I pallet sporchi con la lettiera vengono trasferiti al reparto di disinfezione e lavaggio per l'ulteriore lavorazione.

5.17. Quando si servono diversi tipi di animali da laboratorio da parte di un lavoratore, vengono prima lavorate le gabbie con porcellini d'India, poi le gabbie con topi, ratti e conigli. Non ultimi, vengono trattati i locali dove vengono tenuti cani e gatti.

5.18. È vietato lavare e disinfettare gabbie, mangiatoie, abbeveratoi direttamente nelle sezioni.

5.19. Prima della fine della giornata lavorativa, nelle sezioni viene eseguita la pulizia a umido utilizzando una soluzione all'1% di cloramina o altro disinfettante. Almeno una volta al mese si tiene una giornata sanitaria durante la quale tutti i locali vengono puliti. L'ordine della giornata sanitaria è determinato dal capo della clinica (vivarium).

5.20. La disinfezione, pulizia e lavaggio di gabbie, mangiatoie, abbeveratoi e altre attrezzature viene effettuata da addetti appositamente addetti al reparto di disinfezione e lavaggio. Il controllo sull'efficacia della pulizia e della disinfezione dell'inventario è affidato al veterinario del vivario.

5.21. Le condizioni per la raccolta, lo stoccaggio, la rimozione (o lo smaltimento) dei rifiuti (rifiuti, letame, residui di mangimi, ecc.) devono essere determinate caso per caso in accordo con le autorità locali e le istituzioni del servizio sanitario ed epidemiologico. Quando si lavora con materiale infetto, è necessario neutralizzare i rifiuti mediante autoclavaggio o trattamento con soluzioni disinfettanti.

5.22. Nelle sezioni con animali da laboratorio è necessario stabilire un controllo costante delle condizioni di temperatura e umidità. Per controllare la qualità dell'aria ambiente nei locali in cui vengono tenuti gli animali, si consiglia di determinare periodicamente (2-3 volte al mese) la concentrazione di gas nocivi (anidride carbonica e ammoniaca).

5.23. Il trasferimento degli animali per esperimenti viene effettuato secondo i requisiti una tantum secondo la domanda annuale dei laboratori, approvata dal capo dell'istituto. Il lavoro con gli animali è consentito solo negli orari previsti dalla routine quotidiana del vivaio.

5.24. Se nelle sezioni vengono trovati animali malati, questi ultimi, con la consapevolezza dello sperimentatore, vengono distrutti o trasferiti in un reparto di isolamento. La questione dell'ulteriore utilizzo di animali malati viene risolta entro non più di 2 giorni.

5.25. I cadaveri degli animali vengono conservati in un apposito frigorifero della sala diagnostica per non più di un giorno prima dell'autopsia patoanatomica, dopodiché sono soggetti a smaltimento. È severamente vietato conservare i cadaveri degli animali nelle gabbie e sul pavimento delle sezioni sperimentali.

5.26. L'autopsia anatomica patologica degli animali viene eseguita dallo sperimentatore. In caso di morte di un animale, indipendentemente dall'esperimento, all'autopsia è presente un rappresentante della clinica (vivarium).

5.27. Ogni caso di morte o macellazione forzata di un animale deve essere registrato in un registro speciale secondo il modulo conforme all'appendice n. 7.

5.28. È vietato visitare la clinica (vivarium) da persone non autorizzate senza autorizzazione speciale. I dipendenti dell'istituzione che svolgono lavori nella clinica (vivarium) sono tenuti a:

A) osservare le regole stabilite della routine quotidiana e dell'orario di lavoro;

B) condurre un monitoraggio sistematico dei loro animali da esperimento;

C) conservare la documentazione primaria, compilando tempestivamente le etichette sulle gabbie con animali da esperimento;

D) visitare solo i locali del vivaio in cui sono presenti animali assegnati a questo dipendente;

E) al termine degli esperimenti o di qualsiasi altro lavoro in corso con animali da laboratorio, lasciare il posto di lavoro nell'ordine corretto;

E) monitorare la tempestiva cancellazione degli animali da esperimento che hanno abbandonato l'esperimento o sono stati costretti a ucciderli;

G) informare gli specialisti della clinica (vivarium) su tutti i casi osservati di malattie tra gli animali da esperimento, nonché informare tempestivamente gli specialisti del vivarium sulle presunte condizioni patologiche degli animali in conformità con le condizioni dell'esperimento.

5.29. Ai dipendenti dell'istituzione che lavorano nel vivaio con animali da esperimento è vietato dare istruzioni ai lavoratori sulla modifica delle modalità di custodia e alimentazione degli animali senza il consenso degli specialisti del vivaio.

5.30. Quando si conducono ricerche congiunte su animali in altre istituzioni, ai dipendenti di laboratorio è vietato lavorare nella clinica (vivarium) del proprio istituto (istituzione) per questo periodo.

5.31. Tutte le azioni che possono causare dolore agli animali da laboratorio (interventi chirurgici, dissanguamento totale, impianto di sensori, ecc., nonché macellazione forzata di animali) devono essere eseguite utilizzando anestetici. Se, nelle condizioni dell'esperimento, l'uso dell'anestesia è controindicato, tutte le azioni di cui sopra devono essere eseguite il prima possibile, guidate dalle Regole per il trattamento umano degli animali da laboratorio (Appendice N 8).

VI. Norme di igiene personale

6.1. Tutto il personale del vivaio deve essere dotato di tute, scarpe antinfortunistiche, sapone e asciugamani in conformità con le norme e i regolamenti applicabili.

6.2. Nelle stanze con animali, una cucina per mangimi, un reparto di disinfezione e lavaggio, una sala operatoria e una sala diagnostica, è necessario disporre di soluzioni disinfettanti per la disinfezione delle mani.

6.3. Il personale del vivario deve:

A) quando si viene al lavoro, togliersi indumenti esterni e scarpe e indossare tuta, scarpe antinfortunistiche;

B) al termine del lavoro (preferibilmente prima dell'inizio del lavoro), sottoporsi a cure nel blocco sanitario (fare una doccia o un bagno);

C) è obbligatorio appendere gli indumenti e le tute domestiche in sezioni diverse di un armadio individuale;

D) disinfettare periodicamente (ma almeno una volta al mese) i propri armadietti individuali;

E) al termine di ogni singola fase di lavoro secondo la routine quotidiana, nonché prima di mangiare, assicurarsi di lavarsi e disinfettarsi le mani.

6.4. È severamente vietato mangiare e fumare in tutti i locali industriali della clinica (vivarium).

6.5. Tutte le persone che lavorano con animali da laboratorio devono sottoporsi ad una visita medica, compreso uno studio sui bacilli portatori degli agenti patogeni della tubercolosi e sull'intero gruppo di infezioni intestinali. Gli esami di follow-up vengono effettuati almeno una volta all'anno. I pazienti affetti da tubercolosi, malattie veneree, malattie della pelle e altre malattie contagiose non sono autorizzati a lavorare nel vivaio.

6.6. Quando conducono esperimenti su animali con agenti patogeni infettivi pericolosi per l'uomo, gli addetti al vivaio sono sottoposti a immunizzazione profilattica.

6.7. Tutti i dipendenti neoassunti nel vivaio vengono istruiti sulla tutela e la sicurezza del lavoro, sui regolamenti interni, a seconda del lavoro svolto. La responsabilità di condurre il briefing spetta al responsabile del vivaio. È vietato l’accesso al lavoro senza istruzione. In futuro, almeno una volta all'anno, verrà effettuato un briefing ripetuto. I risultati del briefing sono registrati in un giornale speciale nella forma stabilita dall'Appendice n. 5 dell'Ordine del Ministro della Sanità dell'URSS del 20 giugno 1968 N 494.

attuale

MUK 4.2.2939-11

ISTRUZIONI METODOLOGICHE

4.2. METODI DI CONTROLLO. FATTORI BIOLOGICI E MICROBIOLOGICI

La procedura per l'organizzazione e la conduzione della diagnostica di laboratorio della tularemia per i laboratori a livello territoriale, regionale e federale

Data di introduzione: dal momento dell'approvazione

1. Sviluppato dall'Istituto sanitario statale federale "Istituto russo di ricerca anti-peste "Microbe" di Rospotrebnadzor (V.V. Kutyrev, I.N. Sharova, N.A. Osina, E.S. Kazakova, E.A. Plotnikova, S. A. Piontkovsky, T. Yu. Krasovskaya, D. V. Utkin, S. A. Shcherbakova); M.V. Chesnokova, A.V. Mazepa, S.A. Tatarnikov); Istituto sanitario statale federale "Stavropol Research Anti-Plague Institute" di Rospotrebnadzor (A.N. Kulichenko, O.V. Maletskaya, T.V. Taran , A.P. Beyer, A.V. Taran); Sanità statale federale Istituto "Istituto di ricerca anti-peste di Volgograd" di Rospotrebnadzor (V.V. Alekseev, A.V. Lipnitsky, V.A. Antonov, D.V. Viktorov); Istituto sanitario statale "Istituto di ricerca anti-peste di Rostov sul Don" di Rospotrebnadzor (N.V. Pavlovich, N.L. Pichurina, N.V. Aronova, N.N. Onoprienko, M.V. Tsimbalistova, A.S. Vodopyanov); Istituto sanitario statale federale "Centro anti-peste" di Rospotrebnadzor (V.E. Bezsmertny, S.M. Ivanova); Istituto federale di assistenza sanitaria di bilancio "Centro federale di igiene ed epidemiologia" di Rospotrebnadzor (V.G. Sennikova, M.V. Zarochentsev, V.V. Mordvinova); Istituto statale federale della scienza "Centro scientifico statale per la microbiologia applicata e la biotecnologia" di Rospotrebnadzor (I.A. Dyatlov, A.N. Mokrievich, S.F. Biketov, M.V. Khramov, N.I. Luneva); Istituzione di bilancio dello Stato federale "GISK intitolata a L.A. Tarasevich" del Ministero della sanità e dello sviluppo sociale (I.V. Borisevich, L.V. Sayapina).

3. Approvato dal capo del Servizio federale per la supervisione della tutela dei diritti dei consumatori e del benessere umano, capo medico sanitario statale della Federazione Russa G.G. Onishchenko il 14 luglio 2011

1 zona di utilizzo

1.1. Queste linee guida definiscono la procedura per organizzare e condurre la diagnostica di laboratorio della tularemia per i laboratori a livello territoriale, regionale e federale, le forme e i metodi della loro interazione, la nomenclatura e l'ambito dello studio, i requisiti per i laboratori, gli specialisti e il personale coinvolto nella allo svolgimento degli studi, alla logistica della ricerca, alla sicurezza biologica del lavoro.

1.2. Le presenti linee guida sono destinate agli specialisti dei laboratori batteriologici degli istituti che esercitano la sorveglianza sanitaria ed epidemiologica statale della tularemia nella Federazione Russa, agli istituti di cura e profilassi e anti-peste.

2. Riferimenti normativi

2.1. Legge federale del 03/03/1999 N 52-FZ "Sul benessere sanitario ed epidemiologico della popolazione" .
______________
Legge federale del 30 marzo 1999 N 52-FZ "Sul benessere sanitario ed epidemiologico della popolazione" . - Nota del produttore del database.

2.2. Decreto del governo della Federazione Russa del 29 ottobre 2007 N 720 * "Sulle modifiche alla clausola 5 del regolamento sulle attività di licenza relative all'uso di agenti di malattie infettive", approvato con decreto del governo della Federazione Russa di gennaio 22, 2007 N. 31*.
________________
* Il documento è diventato invalido sulla base del Decreto del Governo della Federazione Russa del 16 aprile 2012 N 317

2.3. Decreto del Capo Sanitario dello Stato della Federazione Russa del 24 febbraio 2009 N 11 "Sulla presentazione di rapporti straordinari su situazioni di emergenza nel campo della sanità pubblica di natura sanitaria ed epidemiologica" (registrato presso il Ministero della Giustizia della Federazione Russa il 10 aprile 2009 N 13745).

2.4. Ordinanza del Ministero della Sanità e dello Sviluppo Sociale della Federazione Russa del 7 luglio 2009 N 415n "Approvazione dei requisiti di qualificazione per specialisti con istruzione medica e farmaceutica superiore e post-laurea nel campo dell'assistenza sanitaria" (registrata presso il Ministero della Giustizia Federazione Russa il 9 luglio 2009 N 14292).

2.6. SP 1.2.036-95 "Procedura per la contabilità, conservazione, trasferimento e trasporto di microrganismi dei gruppi di patogenicità I-IV" (approvato dalla Risoluzione del Comitato di Stato per la supervisione sanitaria ed epidemiologica della Federazione Russa del 28 agosto 1995 N 14 ).

2.7. SP 3.1.7.2642-10 "Prevenzione della tularemia" (approvato con decreto del capo sanitario statale della Federazione Russa del 31 maggio 2010 N 61 "Sull'approvazione di SP 3.1.7.2642-10". Registrato presso il Ministero della Giustizia della Federazione Russa del 7 luglio 2010 N 7745).

2.8. SP 1.3.1285-03 "Sicurezza nel lavorare con microrganismi dei gruppi I-II di patogenicità (pericolo)" (approvato con decreto del capo sanitario statale della Federazione Russa del 15 aprile 2003 N 42 "Sulla promulgazione di Norme sanitarie ed epidemiologiche SP 1.3.1285-03". Registrata presso il Ministero della Giustizia della Federazione Russa il 10 maggio 2003 N 4545).

2.9. SP 1.3.1318-03* "La procedura per emettere una conclusione sanitaria ed epidemiologica sulla possibilità di lavorare con agenti patogeni di malattie infettive umane dei gruppi di patogenicità (pericolo) I-IV, microrganismi geneticamente modificati, veleni di origine biologica ed elminti" ( approvato con decisione del Capo Sanitario dello Stato della Federazione Russa del 30 aprile 2003 N 85 "Sulla messa in atto delle norme sanitarie ed epidemiologiche SP 1.2.1318-03" Registrato presso il Ministero della Giustizia della Federazione Russa a maggio 19, 2003 N 4558).
______________
*Probabilmente un errore originale. Dovrebbe leggere: SP 1.2.1318-03. - Nota del produttore del database.

2.12. SP 3.4.2318-08 "Protezione sanitaria del territorio della Federazione Russa" (approvato con decreto del capo sanitario statale della Federazione Russa del 22 gennaio 2008 N 3 "Sull'approvazione delle norme sanitarie ed epidemiologiche SP 3.4 .2318-08". Registrato presso il Ministero della Giustizia della Federazione Russa 3.04 .2008 N 11459).

2.13. SanPiN 2.1.7.2790-10 "Requisiti sanitari ed epidemiologici per la gestione dei rifiuti sanitari" (approvato con decreto del capo sanitario statale della Federazione Russa del 9 dicembre 2010 N 163. Registrato presso il Ministero della Giustizia della Russia Federazione il 17 febbraio 2011 N 19871).

2.14. SanPiN 2.1.3.2630-10 "Requisiti sanitari ed epidemiologici per le organizzazioni impegnate in attività mediche" (approvato con decreto del capo sanitario statale della Federazione Russa del 18 maggio 2010 N 58. Registrato presso il Ministero della Giustizia della Russia Federazione il 9 agosto 2010 N 18094).

2.15. Norme sanitarie per la sistemazione, l'attrezzatura e la manutenzione delle cliniche biologiche sperimentali (vivari) (approvate dal capo sanitario statale dell'URSS del 6 aprile 1973 N 1045-73).

2.16. MU 3.1.2007-05 “Sorveglianza epidemiologica della tularemia”.

2.17. MU 3.3.2.2124-06 "Controllo di terreni nutritivi diagnostici per indicatori biologici di agenti patogeni di peste, colera, carbonchio, tularemia".

2.18. MUK 4.2.2316-08 "Metodi per il monitoraggio dei terreni nutritivi batteriologici".

2.19. MU 1.3.2569-09 "Organizzazione del lavoro dei laboratori che utilizzano metodi di amplificazione degli acidi nucleici quando si lavora con materiale contenente microrganismi dei gruppi di patogenicità I-IV".

2.20. MU 4.2.2495-09 "Determinazione della sensibilità degli agenti patogeni di pericolose infezioni batteriche (peste, antrace, colera, tularemia, brucellosi, morva e melioidosi) ai farmaci antibatterici."

3. Elenco delle abbreviazioni

LPS - lipopolisaccaride

MPU - istituzione medica e preventiva

OOI - infezioni particolarmente pericolose

SP - norme sanitarie ed epidemiologiche

SanPiN - norme e regolamenti sanitari ed epidemiologici

MU - linee guida

PBA - agente biologico patogeno

AMF - metodo degli anticorpi fluorescenti

ELISA - test immunoenzimatico

PCR - reazione a catena della polimerasi

RA - reazione di agglutinazione

RNGA - reazione di emoagglutinazione indiretta

RTNHA - reazioni di inibizione dell'emoagglutinazione indiretta

RNAt - reazione di neutralizzazione degli anticorpi

MIS - magnoimmunosorbenti

RLA - reazione di agglutinazione al lattice

IC - immunocromatografia

Test IC - test immunocromatografico

4. Disposizioni generali

Caratteristiche della malattia e agente eziologico della tularemia

La tularemia è una malattia infettiva batterica focale naturale sistemica zoonotica caratterizzata da sintomi di intossicazione generale, febbre, alterazioni infiammatorie nell'area della porta dell'infezione, linfoadenite regionale e tendenza a un decorso prolungato.

I principali serbatoi e fonti dell'agente eziologico della tularemia in condizioni naturali sono gli animali selvatici (circa 50 specie), principalmente vari tipi di roditori e lepri. Sul territorio dei focolai naturali di tularemia possono essere infettati pecore, suini e bovini. Il serbatoio e i portatori dell'agente patogeno sono anche artropodi succhiatori di sangue: acari ixodid e gamasid, zanzare, tafani, pulci. Una persona malata non rappresenta un pericolo epidemiologico.

Come tutte le zoonosi, la tularemia è caratterizzata da una pluralità di meccanismi (aspirazione, contatto, oro-fecale, trasmissibili), nonché da vie e fattori di trasmissione. In conformità con la Classificazione statistica internazionale delle malattie e dei problemi sanitari correlati (Decima revisione. Ginevra, 2003, (ICD-10), e in base alla localizzazione del processo patologico principale, si distinguono le seguenti forme di tularemia:

A21.0 - ulceroglandulare (ulcera-bubbonica);

A21.1 - oculo-ghiandolare (oculo-bubbonico);

A21.2 - polmonare;

A21.3 - gastrointestinale (addominale);

A21.7 - generalizzato;

A21.8 - altre forme di tularemia (anginoso-bubbonica);

5.1.1. Requisiti per i laboratori delle istituzioni mediche che effettuano ricerche sulla tularemia

Le istituzioni mediche i cui laboratori eseguono test diagnostici per la tularemia devono avere una licenza per svolgere attività legate all'uso di agenti patogeni dei gruppi di patogenicità (pericolo) III-IV.

I laboratori delle strutture sanitarie devono avere una conclusione sanitaria ed epidemiologica sulla possibilità di lavorare con microrganismi dei gruppi di patogenicità (pericolo) III-IV in conformità con l'attuale SP sulla procedura per emettere una conclusione sanitaria ed epidemiologica sulla possibilità di lavorare con agenti patogeni delle malattie infettive umane dei gruppi di patogenicità (pericolo) I-IV ), microrganismi geneticamente modificati, veleni di origine biologica ed elminti.

La contabilità, la conservazione, il trasferimento e il trasporto di colture isolate di vibrioni di colera (sospetti) devono essere effettuati in conformità con gli attuali documenti normativi sulla procedura di registrazione, conservazione, trasferimento e trasporto di microrganismi dei gruppi di patogenicità I-IV.

Lo svolgimento della ricerca in tutte le fasi - campionamento, conservazione, consegna al laboratorio, registrazione, procedura di ricerca, emissione dei risultati, interazione con le istituzioni Rospotrebnadzor - deve rispettare i requisiti degli attuali documenti normativi e amministrativi.

I test per la tularemia possono essere eseguiti da specialisti di età non inferiore a 18 anni con istruzione medica e biologica superiore e secondaria, che hanno completato corsi di formazione nella specialità "Batteriologia" con lo sviluppo di metodi per lavorare in sicurezza con agenti patogeni di malattie infettive di III- Gruppi di patogenicità IV (pericolo), che hanno il permesso di lavorare con i gruppi di patogenicità PBA III-IV sulla base dell'ordine del capo dell'istituto. Gli specialisti che eseguono esami diagnostici per la tularemia devono possedere le competenze professionali necessarie secondo la nomenclatura degli esami eseguiti (Appendice 8).

Gli specialisti impegnati in attività legate all'uso di agenti patogeni di malattie infettive devono migliorare le proprie qualifiche almeno una volta ogni cinque anni e possedere un certificato specialistico.

Il controllo di qualità degli studi diagnostici per la tularemia nei laboratori delle strutture sanitarie comprende:

Regole di documentazione

Per prelevare materiale ed effettuare esami diagnostici per la tularemia nei laboratori batteriologici, le strutture sanitarie devono disporre di:

Il personale deve essere dotato di tute e dispositivi di protezione individuale (per campionare materiale clinico e condurre reazioni immunosierologiche).

5.1.2. Nomenclatura e ambito di ricerca

Le strutture cliniche selezionano materiale clinico da persone sospettate di avere tularemia, pazienti con varie forme di tularemia e vaccinati, nonché materiale sezionale da persone decedute.

Nei laboratori batteriologici delle strutture sanitarie, i sieri del sangue di pazienti affetti da tularemia e vaccinati contro la tularemia vengono testati con metodi immunosierologici e allergologici:

1) rilevazione di anticorpi in sieri accoppiati;

2) effettuare la reazione di lisi dei leucociti.

Il medico infettivologo della struttura sanitaria valuta lo stato allergologico dei pazienti effettuando un test allergico con tularina.

5.1.3. L'ordine della diagnosi di laboratorio della tularemia nei laboratori delle istituzioni mediche

Campionamento e trasporto di campioni di materiale clinico

Il materiale dei pazienti viene prelevato dal personale medico della struttura sanitaria al momento del ricovero del paziente, prima dell'inizio del trattamento con farmaci antibatterici. Il campionamento viene effettuato da due operatori sanitari, uno dei quali è uno specialista in malattie infettive o un terapista (chirurgo), addestrato nella diagnosi di infezioni particolarmente pericolose e nel rispetto dei requisiti di sicurezza biologica quando si lavora con materiale clinico sospettato di contenere agenti patogeni di malattie infettive di Gruppi di patogenicità I-II. Il materiale proveniente dalle persone vaccinate viene prelevato dal personale medico delle strutture sanitarie

Il materiale sezionale viene prelevato dagli operatori sanitari dei dipartimenti di patologia e anatomia (o BSME) in presenza di uno specialista in infezioni particolarmente pericolose, guidati dalle attuali linee guida metodologiche per l'organizzazione e l'attuazione delle misure antiepidemiche primarie in caso di rilevamento di un paziente (cadavere) sospettato di malattie infettive che causano situazioni di emergenza in aree di benessere sanitario ed epidemiologico della popolazione, in conformità con i requisiti regolamentati di sicurezza biologica quando si lavora con agenti biologici patogeni dei gruppi I-II.

Per essere inviati ai laboratori batteriologici delle istituzioni Rospotrebnadzor, prendono:

da malati, a seconda della forma clinica della malattia: contenuto del bubbone, materiale dalla gola, dalla congiuntiva dell'occhio, secrezione di ulcera, espettorato, sangue;

da persone morte: linfonodi ingrossati, aree alterate di polmoni e milza, trachea;

da persone vaccinate: sangue.

Il campionamento di tutti i tipi di materiale viene effettuato in piastre sterili di vetro o plastica corrispondenti al volume dei campioni.

Punteggiato da bubbone assumere fino a 14-20 giorni di malattia con una siringa con capacità di almeno 5 ml. La pelle nel sito destinato alla puntura viene trattata con alcol al 70%, quindi lubrificata con una soluzione di iodio al 5% e nuovamente asciugata con alcol al 70%. L'ago viene inserito in modo tale che la sua punta raggiunga la parte centrale del bubbone, dopodiché, tirando il pistone fino alla rottura, l'ago viene lentamente estratto. Il contenuto viene trasferito in una provetta sterile con tappo a vite. È possibile introdurre nel bubbone 0,3-0,5 ml di soluzione sterile di cloruro di sodio allo 0,9% prima di prelevare il materiale e quindi selezionare il contenuto. Quando il bubbone viene aperto, il materiale viene prelevato separatamente dalla parte densa periferica e dalla fistola staccabile.

Prima di prendere ulcera staccabile, papule, vescicole o escara distaccata con una salvietta disinfettante pre-iniezione pulire accuratamente la pelle attorno alla zona interessata, se necessario rimuovere le masse necrotiche e il pus con una garza sterile. Facendo rotolare il tampone sulla superficie della ferita dal centro verso la periferia, il materiale viene assorbito dal tampone per 5-10 secondi. Il tampone con il materiale viene inserito in una provetta o in un terreno di trasporto. Quando si utilizza una siringa, l'ago viene inserito sul bordo della vescicola (pustola) e poi fatto avanzare verso il centro. Nelle ulcere viene perforato un bordo denso.

Catarro raccolti in appositi contenitori a bocca larga con coperchio a vite.

Mucosa faringea staccabile assunto a stomaco vuoto o 3-4 ore dopo aver mangiato. Premendo delicatamente la lingua con una spatola, si inserisce un tampone tra le arcate tonsillari e la lingua (non si possono toccare le labbra, le guance, la lingua con il tampone) e si raccoglie il materiale dalla parte posteriore della faringe, dalle tonsille e dalle aree di infiammazione o ulcerazione della mucosa. Il tampone con il materiale viene posto in una provetta sterile o in una provetta con un mezzo di trasporto o nutriente.

Sangue per la ricerca vengono prelevati nel rispetto delle norme di asepsi e delle misure di protezione personale. Il sangue viene prelevato dalla vena cubitale nella quantità di 10-20 ml con una siringa monouso e trasferito in una provetta per l'inoculazione su terreni nutritivi e infezione di animali da saggio biologico, in una provetta con un anticoagulante (soluzione di citrato di sodio al 4% in un rapporto di 1:10 rispetto al volume di sangue o una soluzione al 6% di EDTA in un rapporto di 1:20 rispetto al volume di sangue) per l'analisi PCR, in una provetta per ottenere siero per reazioni immunosierologiche.

Per innescare una reazione di agglutinazione delle gocce di sangue e una reazione di leucocitolisi, il sangue viene prelevato da un dito.

Secrezione della congiuntiva dell'occhio deve essere assunto fino al 17° giorno di malattia con un tampone sterile pre-inumidito con soluzione di cloruro di sodio allo 0,9%. I campioni da ciascun occhio vengono raccolti con tamponi separati con due o tre movimenti circolari lungo la mucosa dell'occhio. Il tampone con il materiale viene inserito in una provetta sterile o in un terreno di trasporto. In presenza di abbondante secrezione purulenta con un tampone di cotone asciutto sterile, si preleva il pus dalla superficie interna della palpebra inferiore spostandosi verso l'angolo interno della fessura palpebrale. È necessario assicurarsi che le ciglia non tocchino il tampone (tenere la palpebra con la mano). Consegna del materiale al laboratorio entro 1 ora, se vengono utilizzati mezzi di trasporto speciali - entro un giorno.

I contenitori con i campioni vengono etichettati, trattati esternamente con una soluzione disinfettante, confezionati in un sacchetto di plastica con cerniera e posti in un contenitore per il trasporto di materiale biologico per la ricerca. Il contenitore con il materiale imballato viene sigillato e inviato al laboratorio tramite corriere con apposito mezzo di trasporto. La superficie del tavolo dopo aver imballato i campioni viene trattata con una soluzione disinfettante.

Per i campioni consegnati al laboratorio, compilare la direzione (Appendice 1), che indica: l'indirizzo dell'istituzione a cui inviare il campione (i campioni); cognome, nome, patronimico del paziente (deceduto); sesso, età, luogo di residenza, data della malattia, data della richiesta di assistenza medica, data del ricovero ospedaliero, diagnosi preliminare; caratteristiche della storia epidemiologica; se al paziente è stata somministrata una terapia antibatterica prima di assumere il materiale (quando, quali farmaci sono stati utilizzati, a quale dosaggio); tipo di materiale prelevato per l'esame batteriologico; scopo dello studio; data e ora del ritiro del materiale; l'indirizzo al quale riportare i risultati dell'esame batteriologico; nome dell'istituzione, posizione, cognome e iniziali della persona che invia il campione (campioni), firma; tempi di consegna del campione; posizione, cognome e iniziali della persona che ha prelevato i campioni.

Il materiale viene trasportato al laboratorio in una borsa termica. In assenza di condizioni per conservare il materiale al freddo, il tempo dal momento della presa del materiale all'inizio dello studio non deve superare le 5-6 ore.

L'impostazione e la registrazione delle reazioni immunosierologiche viene effettuata nel laboratorio batteriologico della struttura sanitaria secondo le istruzioni per l'uso dei preparati diagnostici. Nella dinamica della malattia, i sieri accoppiati vengono esaminati con un intervallo di 7-10 giorni. Un aumento di 4 volte o più del titolo anticorpale è affidabile dal punto di vista diagnostico.

L'ipersensibilità negli individui malati e vaccinati è determinata da in vitro

La formulazione e la registrazione dei risultati di un test allergico con tularemia (allergene liquido della tularemia, sospensione per applicazione di scarificazione cutanea) in persone infette o sospettate di essere infette da tularemia viene effettuata da uno specialista in malattie infettive presso una struttura sanitaria in conformità con istruzioni per l'uso del farmaco.

Va ricordato che il test allergico rimane positivo nelle persone che hanno avuto la tularemia.

5.1.4. Registrazione dei risultati della ricerca

La registrazione dei risultati dei test sierologici e allergici sui sieri per la tularemia nei laboratori batteriologici delle strutture sanitarie viene effettuata secondo i moduli contabili stabiliti nell'istituzione. Emissione di risposte per casi clinici - secondo moduli unificati.

5.1.5. La procedura per l'interazione delle istituzioni mediche con le organizzazioni di Rospotrebnadzor

5.2. La procedura per l'organizzazione e la conduzione della diagnostica di laboratorio della tularemia per le filiali del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ nel comune (la città e i distretti amministrativi in questione, uniti su base territoriale) nell'oggetto della Federazione Russa

5.2.1. Requisiti per i laboratori delle filiali del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ nei comuni dell'entità costituente della Federazione Russa che svolgono ricerche sulla tularemia

Disponibilità di permessi e documenti normativi

Il "Centro di igiene ed epidemiologia" del FBUZ nell'entità costituente della Federazione Russa, sulla base delle cui filiali operano i laboratori batteriologici, deve avere una licenza per svolgere attività relative all'uso di agenti patogeni di II-IV (o III-IV ) gruppi di patogenicità (pericolo).

I laboratori delle filiali del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ in un comune di un'entità costituente della Federazione Russa che svolgono ricerche sulla tularemia devono avere una conclusione sanitaria ed epidemiologica sulla possibilità di lavorare con microrganismi dei gruppi III-IV di patogenicità (pericolo) in conformità con l'attuale SP sulla procedura per l'emissione di conclusioni sanitarie ed epidemiologiche sulla possibilità di svolgere lavori con agenti patogeni di malattie infettive umane dei gruppi di patogenicità (pericolo) I-IV, microrganismi geneticamente modificati, veleni di origine biologica ed elminti.

I laboratori delle filiali del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ in un comune di un'entità costituente della Federazione Russa devono essere accreditati per la competenza tecnica secondo le modalità prescritte in conformità con l'attuale quadro legislativo della Federazione Russa.

La contabilità, la conservazione, il trasferimento e il trasporto dei campioni di materiale clinico devono essere effettuati in conformità con l'attuale SP sulla procedura di registrazione, conservazione, trasferimento e trasporto dei microrganismi dei gruppi di patogenicità I-IV.

Lo smaltimento dei rifiuti deve essere effettuato in conformità con le vigenti prescrizioni sanitarie ed epidemiologiche per il trattamento dei rifiuti sanitari.

Requisiti degli specialisti e del personale coinvolto nello svolgimento della ricerca sulla tularemia

I test per la tularemia possono essere eseguiti da specialisti di età non inferiore a 18 anni con istruzione medica e biologica superiore e secondaria, che hanno completato corsi di formazione nella specialità "Batteriologia" con lo sviluppo di metodi per lavorare in sicurezza con agenti patogeni di malattie infettive di III- Gruppi di patogenicità (pericolo) IV, che hanno il permesso di lavorare con i gruppi PBA III-IV sulla base dell'ordine del capo dell'istituzione. Gli specialisti che eseguono esami diagnostici per la tularemia devono possedere le competenze professionali necessarie secondo la nomenclatura degli esami eseguiti (Appendice 8).

Gli specialisti impegnati in attività legate all'uso di agenti patogeni di malattie infettive devono possedere un certificato specialistico e migliorare le proprie competenze almeno una volta ogni cinque anni.

Requisiti per garantire la sicurezza del personale

Ogni laboratorio che esegue test per la tularemia deve disporre di un pacchetto di documenti che determinano il regime di lavoro sicuro per i dipendenti, tenendo conto della natura del lavoro, delle caratteristiche tecnologiche e delle proprietà dei microrganismi. I documenti devono essere coordinati con la commissione per il monitoraggio del rispetto dei requisiti di sicurezza biologica, specialisti in protezione del lavoro, misure antincendio e approvati dal capo dell'istituto. I risultati della verifica della conoscenza delle norme di sicurezza del personale durante il lavoro sono registrati in un apposito giornale.

Tutti i dipendenti devono rispettare i requisiti per garantire la sicurezza del lavoro con materiale sospetto o infetto da agenti patogeni di malattie infettive dei gruppi di patogenicità (pericolo) III-IV, in conformità con i documenti normativi vigenti.

I dipendenti dell'istituzione coinvolta nell'esame epizootico del territorio enzootico dovrebbero essere vaccinati contro la tularemia, seguito dal monitoraggio del livello di immunità e dalla registrazione dei risultati in un giornale speciale.

La procedura per organizzare il controllo di qualità interno dei test di laboratorio

Il controllo di qualità dei test diagnostici per la tularemia nei laboratori comprende:

controllo di qualità di preparati diagnostici e sistemi di test, acqua distillata, reagenti chimici e disinfettanti;

verifica tempestiva degli strumenti di misura, certificazione delle apparecchiature di prova;

controllo qualità della sterilizzazione della vetreria da laboratorio;

controllo del funzionamento degli sterilizzatori a vapore e ad aria secca;

controllo del funzionamento delle lampade germicide;

controllo della temperatura dei frigoriferi;

controllo della temperatura dei termostati;

controllo dello stato dell'aria dei locali e dei box industriali, della temperatura, dell'umidità;

ispezione delle condizioni igienico-sanitarie dei locali, comprese le condizioni di pulizia, disinfezione, controllo degli scarichi delle superfici e delle attrezzature.

I risultati dei controlli vengono registrati su appositi giornali.

Regole di documentazione

La conservazione della documentazione di laboratorio, compresa la registrazione e i registri di lavoro, viene effettuata in conformità con i requisiti degli attuali documenti normativi e metodologici.

Fabbisogno di risorse materiali necessarie per eseguire accertamenti diagnostici per la tularemia

Per eseguire test diagnostici per la tularemia nei laboratori batteriologici delle sedi del Centro di Igiene ed Epidemiologia, deve essere disponibile:

preparati diagnostici, sistemi di test registrati secondo la procedura stabilita (Appendice 3);

reagenti chimici (appendice 4);

dispositivi, attrezzature, materiali di consumo (Appendice 5, 6).

Si consiglia di munirsi di un kit medico per il prelievo del materiale (imballaggio universale per il prelievo del materiale dalle persone e dagli oggetti ambientali per effettuare test su malattie infettive particolarmente pericolose).

Il personale deve essere dotato di tute e dispositivi di protezione individuale.

5.2.2. Nomenclatura e ambito di ricerca

I laboratori delle filiali del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ nei comuni dell'entità costituente della Federazione Russa, quando esercitano la sorveglianza epidemiologica, monitorano lo stato dell'immunità antitularemia nelle persone vaccinate.

La ricerca viene svolta nel seguente ambito:

1) rilevazione di anticorpi;

2) stadiazione della reazione di lisi dei leucociti.

Se il laboratorio della struttura sanitaria non esegue test sierologici per la tularemia, il siero dei pazienti o di quelli con sospetto di questa malattia viene esaminato presso la filiale del "Centro di Igiene ed Epidemiologia" della FBUZ in materia della Federazione Russa (a cura di accordo).

5.2.3. La procedura per la diagnosi di laboratorio della tularemia nei laboratori delle filiali del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ in un comune di un'entità costituente della Federazione Russa

Lo stato di immunità nelle persone vaccinate viene controllato 5 anni dopo la vaccinazione e successivamente - 1 volta in 2 anni.

Il controllo dello stato di immunità antitularemia viene effettuato utilizzando un metodo allergologico (reazione di leucocitolisi) o uno dei metodi di ricerca sierologica (RA, reazione di agglomerazione volumetrica, RNHA, ELISA). In questo caso, è preferibile utilizzare metodi di ricerca sierologici. Il materiale per lo studio è il sangue e il siero sanguigno dei vaccinati. Se necessario, è possibile utilizzare una reazione a goccia di sangue, che consente di dare una risposta entro 5 minuti e può essere somministrata con una goccia di sangue secca.

Di pazienti o persone con sospetta tularemia nella dinamica della malattia, vengono esaminati sieri accoppiati ad un intervallo di 7-10 giorni. Un aumento di 4 volte o più del titolo anticorpale è affidabile dal punto di vista diagnostico.

L'ipersensibilità negli individui vaccinati e malati è determinata da in vitro nella reazione di leucocitolisi in accordo con le attuali linee guida per la sorveglianza epidemiologica della tularemia.

5.2.4. Registrazione dei risultati della ricerca

La registrazione dei risultati della ricerca nei laboratori delle filiali del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ in un comune di un'entità costituente della Federazione Russa viene effettuata secondo i moduli contabili stabiliti nell'istituzione. Emissione di risposte - secondo moduli unificati.

5.2.5. La procedura per l'interazione delle filiali del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ in un comune di un'entità costituente della Federazione Russa con altre organizzazioni di Rospotrebnadzor

Le informazioni sui risultati della diagnosi di laboratorio della tularemia nel laboratorio della filiale del Centro di igiene ed epidemiologia della FBUZ nell'entità costituente della Federazione Russa vengono trasmesse in conformità con gli attuali documenti normativi.

5.3. La procedura per l'organizzazione e la conduzione della diagnostica di laboratorio della tularemia per il "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ in un'entità costituente della Federazione Russa

5.3.1. La procedura per l'organizzazione e la conduzione della diagnostica di laboratorio della tularemia per il "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ nel territorio della Federazione Russa, nella cui struttura non esistono dipartimenti e laboratori di infezioni particolarmente pericolose

La procedura per l'organizzazione e la conduzione della diagnostica di laboratorio della tularemia per i laboratori del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ negli enti costituenti della Federazione Russa, nella cui struttura non esistono dipartimenti o laboratori di infezioni particolarmente pericolose, corrisponde alla procedura per l'organizzazione e la conduzione della diagnostica di laboratorio della tularemia per i laboratori delle filiali del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ in un'entità costituente della Federazione Russa (sezione 5.2).

5.3.2. La procedura per l'organizzazione e la conduzione della diagnostica di laboratorio della tularemia per i laboratori di infezioni particolarmente pericolose del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ nell'ambito della Federazione Russa

5.3.2.1. Requisiti per i laboratori di infezioni particolarmente pericolose FBUZ "Centro di igiene ed epidemiologia" nel soggetto della Federazione Russa, che effettua ricerche sulla tularemia.

Disponibilità di permessi e documenti normativi

Il "Centro di igiene ed epidemiologia" del FBUZ nell'entità costituente della Federazione Russa, sulla base del quale operano laboratori di infezioni particolarmente pericolose, che svolgono ricerche sulla tularemia, deve avere una licenza per svolgere attività legate all'uso di agenti patogeni di II -IV gruppi di patogenicità (pericolo).

I laboratori del "Centro di igiene ed epidemiologia" dell'OOI FBUZ in un'entità costituente della Federazione Russa che svolgono ricerche sulla tularemia devono avere una conclusione sanitaria ed epidemiologica sulla possibilità di lavorare con microrganismi dei gruppi di patogenicità (pericolo) II-IV in conformità con l'attuale SP sulla procedura per l'emissione di conclusioni sanitarie ed epidemiologiche sulla possibilità di svolgere lavori con agenti patogeni di malattie infettive umane dei gruppi di patogenicità (pericolo) I-IV, microrganismi geneticamente modificati, veleni di origine biologica ed elminti.

I laboratori del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ in un'entità costituente della Federazione Russa devono essere accreditati per la competenza tecnica secondo le modalità prescritte in conformità con l'attuale quadro legislativo della Federazione Russa.

La contabilità, la conservazione, il trasferimento e il trasporto di colture isolate sospette dell'agente causale della tularemia e/o campioni di materiale clinico devono essere effettuate in conformità con l'attuale SP sulla procedura di registrazione, conservazione, trasferimento e trasporto di microrganismi di gruppi di patogenicità I-IV.

Lo smaltimento dei rifiuti deve essere effettuato in conformità con i requisiti sanitari ed epidemiologici regolamentati per il trattamento dei rifiuti sanitari.

Lo svolgimento della ricerca in tutte le fasi: campionamento, conservazione, consegna al laboratorio, registrazione, procedura di ricerca, emissione dei risultati, interazione con le organizzazioni Rospotrebnadzor deve essere conforme ai requisiti degli attuali documenti normativi.

Requisiti degli specialisti e del personale coinvolto nello svolgimento della ricerca sulla tularemia

Gli studi sulla tularemia possono essere eseguiti da specialisti di età non inferiore a 18 anni con istruzione medica e biologica superiore e secondaria, che hanno completato corsi di formazione nella specialità "Batteriologia" con le basi del lavoro sicuro con agenti biologici patogeni (PBA) dei gruppi I -II, che hanno il permesso di lavorare con i gruppi PBA II - IV sulla base dell'ordine del capo dell'istituzione. Gli specialisti che conducono ricerche sulla tularemia devono possedere le competenze professionali necessarie (Appendice 8).

Gli specialisti che svolgono attività legate all'uso di agenti patogeni di malattie infettive devono possedere certificati e migliorare le proprie competenze almeno una volta ogni cinque anni.

Requisiti per garantire la sicurezza del personale

Ogni laboratorio che conduce ricerche sulla tularemia deve disporre di un pacchetto di documenti che determinano il regime di lavoro sicuro per i dipendenti, tenendo conto della natura del lavoro, delle caratteristiche tecnologiche e delle proprietà dei microrganismi. I documenti devono essere coordinati con la commissione per il monitoraggio del rispetto dei requisiti di sicurezza biologica, specialisti in protezione del lavoro, misure antincendio e approvati dal capo dell'istituto. I risultati della verifica della conoscenza delle norme di sicurezza del personale durante il lavoro sono registrati in un apposito giornale.

Gli specialisti che effettuano l'esame epizootico del territorio enzootico per la tularemia e il relativo supporto di laboratorio dovrebbero essere vaccinati contro la tularemia, seguiti dal monitoraggio del livello di immunità e dalla registrazione dei risultati in un giornale speciale.

Tutti i dipendenti devono rispettare i requisiti per garantire la sicurezza del lavoro con materiale sospetto o infetto da agenti patogeni di malattie infettive dei gruppi di patogenicità (pericolo) I-II, in conformità con i documenti normativi vigenti.

La procedura per organizzare il controllo di qualità interno dei test di laboratorio

Il controllo di qualità degli studi diagnostici per la tularemia nei laboratori del "Centro di igiene ed epidemiologia" dell'OOI FBUZ comprende:

controllo di qualità di terreni nutritivi, preparati diagnostici e sistemi di test, dischi con preparati antibatterici, acqua distillata, reagenti chimici e disinfettanti;

verifica tempestiva degli strumenti di misura, certificazione delle apparecchiature di prova;

controllo qualità della sterilizzazione della vetreria da laboratorio;

controllo del funzionamento degli sterilizzatori a vapore e ad aria secca;

controllo del funzionamento delle lampade germicide;

controllo della temperatura dei frigoriferi;

controllo della temperatura dei termostati;

controllo dello stato dell'aria dei locali e dei box industriali, della temperatura, dell'umidità;

ispezione delle condizioni igienico-sanitarie dei locali, comprese le condizioni di pulizia, disinfezione, controllo degli scarichi delle superfici e delle attrezzature.

I risultati dei controlli vengono registrati su appositi giornali.

Regole di documentazione

La conservazione della documentazione di laboratorio, compresa la registrazione e i registri di lavoro, viene effettuata quotidianamente in conformità con i requisiti degli attuali documenti metodologici.

Fabbisogno di risorse materiali necessarie per eseguire accertamenti diagnostici per la tularemia

Per condurre test diagnostici per la tularemia, i laboratori devono disporre di:

mezzi nutritivi registrati secondo le modalità prescritte (appendice 2);

preparati diagnostici, sistemi di test, preparati antibatterici registrati secondo la procedura stabilita (Appendice 3, 7);

reagenti chimici (appendice 4);

strumenti, attrezzature, materiali di consumo (Appendice 5, 6);

kit medico (imballaggio universale per prelevare materiale da persone e oggetti ambientali per testare malattie infettive particolarmente pericolose).

I terreni nutritivi sono soggetti a controllo obbligatorio in conformità con le attuali linee guida per il controllo dei terreni nutritivi diagnostici per gli indicatori biologici (per l'agente eziologico della tularemia).

5.3.2.2. Nomenclatura e ambito di ricerca.

I laboratori del "Centro di igiene ed epidemiologia" dell'OOI FBUZ nelle entità costituenti della Federazione Russa effettuano:

studio di materiale proveniente da pazienti e deceduti con sospetta tularemia;

studio di materiale proveniente da persone sottoposte ad esame per tularemia in conformità con i requisiti di sorveglianza epidemiologica (come concordato);

studio dei campioni raccolti durante l'indagine epizootologica del territorio;

studio di campioni provenienti da oggetti ambientali;

identificazione di colture isolate dell'agente eziologico della tularemia secondo uno schema abbreviato;

controllo di qualità e proprietà inibitorie dei mezzi nutritivi.

Gli studi diagnostici del materiale sono condotti nel seguente volume:

a) indicazione dell'agente patogeno nel materiale nativo mediante metodi di diagnostica rapida e accelerata (MFA, PCR, ELISA, RA, RNHA, RNAb, concentrazione selettiva su MIS seguita da ELISA);

b) allestire un campione biologico;

c) semina su terreni nutritivi per isolare una coltura pura dell'agente patogeno;

d) rilevazione di anticorpi contro l'agente eziologico della tularemia;

e) identificazione della coltura selezionata secondo lo schema ridotto.

5.3.2.3. L'ordine di studi diagnostici per la tularemia nei laboratori di infezioni particolarmente pericolose del "Centro di igiene ed epidemiologia" della FBUZ nell'ambito della Federazione Russa.

Procedura per lo studio del materiale clinico

La selezione del materiale viene effettuata conformemente al paragrafo 5.1.

Per identificare l'agente eziologico della tularemia, vengono utilizzati preparati diagnostici e terreni complessi di agar o tuorlo con l'aggiunta di cisteina, estratti di tessuto, sangue defibrinato, glucosio, registrati nel modo prescritto. Ogni lotto di agar deve essere testato per la sensibilità alla crescita del microbo tularemia in conformità con gli attuali documenti normativi e metodologici. Per sopprimere la crescita della microflora estranea, penicillina (100 unità/ml), ampicillina (100 unità/ml), polimixina B (50-100 µg/ml), kefzol (o cefalexina), amfotericina B (o anfoglucamina), ristomicina solfato vengono utilizzati e alcuni altri farmaci antibatterici.

Gli oggetti con i raccolti vengono incubati a una temperatura di 37 °C. I raccolti vengono visionati dopo 24-48 ore (di seguito - quotidianamente per 10 giorni dal momento della semina).

La preparazione dei campioni per la PCR viene effettuata in conformità con i requisiti delle linee guida per l'organizzazione del lavoro dei laboratori utilizzando metodi di amplificazione degli acidi nucleici quando si lavora con materiale contenente microrganismi dei gruppi di patogenicità I-IV.

Esame del materiale di una persona malata (cadavere)

Fase I:

preparazione di strisci, colorazione di strisci fissati secondo Gram, Romanovsky-Giemsa, immunoglobuline fluorescenti per tularemia;

Impostazione della PCR;

impostazione di reazioni immunosierologiche per rilevare antigeni e anticorpi contro l'agente eziologico della tularemia (RA, MFA, RNGA, RNAt, ELISA, ecc.);

impostazione della reazione della leucocitolisi (sangue del paziente);

infezione di animali per test biologici (cavie per via intraperitoneale; topi bianchi per via intraperitoneale o sottocutanea (sangue, bubbone puntato), per via sottocutanea (espettorato, tampone faringeo, bubbone aperto, secrezione di ulcera, congiuntiva);

semina su terreni nutritivi densi (sangue, bubbone punteggiato);

semina su terreni nutritivi solidi con inibitori della flora estranea (espettorato, tampone faringeo, substrato da un bubbone aperto, secrezione da un'ulcera, congiuntiva).

II stadio(2-6 ore dall'inizio dello studio):

contabilizzazione dei risultati di MFA, ELISA, PCR;

tenere conto dei risultati di RA, RPGA e RNAt dopo 18-24 ore;

estradizione risposta positiva preliminare in base alla presenza negli strisci di piccoli bastoncini coccoidi di colore gram-negativi o lilla quando colorati secondo Romanovsky-Giemsa, la loro luminescenza specifica quando colorati con immunoglobuline fluorescenti per tularemia, un risultato PCR positivo, reazioni immunosierologiche positive con controlli negativi.

Fase III(48-72 ore dall'inizio dello studio):

visualizzazione di raccolti di materiale nativo su piastre di agar;

batterioscopia di strisci da colonie sospette (colorazione di Gram);

realizzazione di un test IC per l'identificazione espressa di un microbo di tularemia con materiale proveniente da colonie sospette;

screening di colonie sospette del microbo della tularemia su agar nutriente per isolare una coltura pura;

estradizione conferma di una risposta preliminare positiva basato sulla presenza di crescita caratteristica su terreni nutritivi densi, sulla presenza di piccoli bastoncini coccici gram-negativi negli strisci delle colonie, un test IC positivo per la rapida identificazione del microbo tularemia.

IV stadio(3-5 giorni dall'inizio dello studio):

dopo l'accumulo di una cultura pura, ponendo prove per la sua identificazione. L'identificazione della coltura isolata viene effettuata secondo i seguenti test:

morfologia cellulare, natura della colorazione di Gram e immunoglobuline fluorescenti della tularemia;

la natura della crescita su terreno nutritivo FT-arape o su terreno tuorlo piegato di McCoy;

mancanza di crescita su terreni nutritivi semplici (agar peptone di carne e/o brodo);

agglutinazione di colture con siero specifico per tularemia o RLA con una coltura isolata;

identificazione espressa del microbo della tularemia mediante il test IC;

identificazione di bersagli di DNA specie-specifici mediante PCR;

autopsia di animali morti per test biologici, inoculazione di organi e sangue su terreni nutritivi solidi, preparazione ed esame di strisci-impronte di organi, PCR con sospensioni di organi.

Fase V(5-15 giorni dall'inizio dello studio):

contabilizzazione dei risultati dell'identificazione delle colture;

visualizzazione di raccolti di materiale proveniente da animali morti per test biologici;

autopsia ed esame degli animali biotest macellati;

estradizione risposta finale positiva viene effettuata sulla base dell'isolamento di una coltura pura del microbo della tularemia da colture di materiale nativo, della sua identificazione mediante proprietà morfologiche e culturali, risultati positivi delle reazioni immunosierologiche, presenza di DNA patogeno, nonché sulla base dell'isolamento di colture identiche provenienti da animali da laboratorio morti o macellati.

Secondo gruppo. Mammiferi altamente sensibili, ma insensibili (si infettano quando singole cellule microbiche dell'agente causale della tularemia entrano nel corpo, si ammalano gravemente, ma si liberano rapidamente del microbo, acquisendo un'immunità stabile). Questo gruppo comprende topi di campagna, tutti i tipi di ratti e scoiattoli di terra, scoiattoli, scoiattoli, castori, ricci, topi muschiati, toporagni d'acqua, toporagni e alcune altre specie di mammiferi.

Terzo gruppo. Mammiferi malosensibili e praticamente insensibili. Questi includono la maggior parte dei mammiferi predatori e degli animali da fattoria.

Schema di studio del materiale di campo

La ricerca di laboratorio sul materiale sul campo inizia immediatamente dopo la sua ricezione. La sua conservazione a breve termine (non più di 20 ore) è consentita a una temperatura compresa tra 4 e 6 °C. Quando gli animali vengono sottoposti ad autopsia nel sito di raccolta, gli organi possono essere conservati e consegnati al laboratorio in un conservante. Come conservante può servire una miscela di vaselina e paraffina (1 parte di paraffina e 10 parti di olio di vaselina vengono mescolate e sterilizzate per 45 minuti riscaldando a bagnomaria bollente), una soluzione al 5% di sale comune, inoltre, il congelamento in viene utilizzato azoto liquido, ecc .. Nei conservanti e a bassa temperatura, gli organi animali possono essere conservati per un mese.

Lo studio viene effettuato mediante metodi biologici, batterioscopici (microscopia ottica e luminescente), batteriologici (inoculazione su terreni nutritivi, isolamento di colture pure e loro identificazione), genetici molecolari (analisi PCR) e immunosierologici (RA, RLA, RNGA, RNAt, RNAg , metodi ELISA). Lo schema di studio del materiale dipende dal gruppo di sensibilità degli animali e dalla forma in cui il materiale è stato consegnato.

piccoli mammiferi, prelevati in natura con attrezzi da pesca o vivi, vengono esaminati con un metodo di gruppo, combinando in un campione gli organi di più animali (5-10) della stessa specie e catturati in un unico luogo.

Per la ricerca vengono prelevati pezzi di milza, fegato, linfonodi, sangue o "dilavamenti" dalla cavità toracica. Il materiale viene esaminato con metodi biologici, genetici molecolari e immunosierologici.

La sospensione d'organo viene utilizzata per infettare gli animali sottoposti a test biologico e per rilevare gli antigeni e il DNA dell'agente causale della tularemia. Il siero del sangue o i "lavaggi" della cavità toracica vengono esaminati per la presenza di anticorpi contro l'agente eziologico della tularemia.

Cadaveri di animali sono sottoposti a ricerca individuale quelli morti in natura, morti in laboratorio, o animali in cui all'autopsia sono stati riscontrati cambiamenti patologici e anatomici caratteristici della tularemia. Pezzi di milza, fegato, reni, linfonodi, midollo osseo vengono esaminati con metodi biologici, batteriologici, genetici molecolari e immunosierologici.

In condizioni di epizoozia consolidata, quando si studiano animali del primo gruppo, ci si può limitare a seminare organi su terreni nutritivi e batterioscopia di strisci di organi, mantenendone alcuni al freddo fino all'ottenimento dei risultati degli studi. Nei casi dubbi ricorrere al metodo biologico. Gli animali del secondo e terzo gruppo vengono esaminati senza fallo con il metodo biologico.

La probabilità di rilevare l'agente eziologico della tularemia negli organi degli animali del primo gruppo durante l'esame microscopico (è meglio usare la microscopia a fluorescenza) è molto più elevata che durante la batterioscopia di strisci dagli organi dei cadaveri degli animali del secondo gruppo .

Animali domestici(bovini, suini, ovini, renne) sono specie insensibili alla tularemia (terzo gruppo). Nel loro studio vengono utilizzati principalmente metodi immunosierologici (RA, RNGA, ELISA), meno spesso - un test intradermico con tularina. I metodi batteriologici e biologici vengono utilizzati solo quando si esaminano animali morti, macellati o malati. Esaminare principalmente i linfonodi e la milza. In uno studio sierologico si dovrebbe tener conto della possibilità di individuare reazioni crociate con Brucella e con la flora microbica dell'intestino degli animali. Si consiglia di testare i sieri degli animali domestici in almeno due test sierologici. Le reazioni positive nell'RNGA devono essere monitorate nell'RTGA.

Pellet di rapaci e sterco di mammiferi predatori si consiglia di studiare individualmente. La morte del microbo della tularemia nei pellet e negli escrementi avviene rapidamente (il primo giorno; a temperature negative, forse più lentamente), e quindi gli studi biologici e batteriologici su questo materiale non sono appropriati. Campioni di pellet e lettiera vengono utilizzati per ricercare l'antigene dell'agente eziologico della tularemia mediante metodi immunosierologici e il DNA mediante PCR.

Insetti succhiatori di sangue e altri invertebrati vengono esaminati con un metodo di gruppo, insetti o invertebrati della stessa specie (genere) e prelevati dallo stesso luogo vengono combinati in un unico campione.

Le zecche ixodid adulte combinano fino a 50 individui.

Le larve sono riunite in 100-200 esemplari, le ninfe in 50-100 esemplari, a seconda del grado di grasso. Il lavaggio delle larve e delle ninfe delle zecche ixodidi nell'alcool non viene effettuato perché. questo può danneggiare l'analisi.

Pulci, acari gamasidi, pidocchi vengono ordinati per specie (genere), nonché per specie di animali da cui sono stati raccolti, posti in provette sterili e quindi sottoposti a lavorazione allo stesso modo delle larve e ninfe delle zecche ixodidi .

Gli insetti ditteri succhiatori di sangue vengono soppressi con vapori di etere per limitare la mobilità. Nei tafani, gli arti e le ali vengono preliminarmente tagliati, le zanzare e i moscerini vengono esaminati nel loro insieme. In un'analisi vengono inclusi fino a 25-50 tafani o fino a 100 zanzare o fino a 250 moscerini.

Idrobionti: tricopi, anfipodi, dafnie, ciclopi e altri prima dello studio vengono lavati in più porzioni di acqua e 1-2 porzioni di acqua distillata sterile. Negli animali dotati di coperture o conchiglie, queste ultime, se possibile, vengono rimosse. Gli animali vengono riuniti in gruppi di 5-10-50 esemplari, a seconda delle dimensioni degli individui delle singole specie.

La rilevazione del microbo della tularemia o del suo DNA negli invertebrati è più efficace quando si utilizza il metodo biologico e la PCR. È anche possibile rilevare l'antigene specifico della tularemia LPS utilizzando il test IC.

Campioni d'acqua(100-200 ml) vengono prelevati da vari bacini idrici: fiumi, ruscelli, stagni, laghi, paludi, pozzi, ecc. Lo studio più efficace dell'acqua nei nomi dei focolai paludosi di tularemia in inverno. I campioni vengono prelevati in un luogo ombreggiato, ad una profondità di 10-20 cm dalla superficie dell'acqua stagnante o poco scorrevole. Da ogni punto devono essere prelevati 2 campioni. I campioni vengono prelevati negli habitat degli animali (vicino a mangiatoie, tane, capanne di castori o topi muschiati). Per concentrare l'agente patogeno vengono utilizzati filtrazione, centrifugazione, assorbenti magnetici e altri metodi. Per lo studio viene utilizzato un metodo biologico (un topo bianco viene iniettato per via sottocutanea fino a 1 ml e una cavia - fino a 5 ml di acqua), metodi genetici molecolari e immunosierologici volti a rilevare il DNA e gli antigeni dell'agente causale di tularemia.

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