Ceppi di Escherichia coli. Centro di medicina polare

Ceppi di Escherichia coli.  Centro di medicina polare

Escherichia coli - malattie, vie di trasmissione, sintomi di infezioni intestinali e malattie del tratto genito-urinario (nelle donne, uomini, bambini), metodi di trattamento. Rilevazione di batteri nei test delle urine e negli strisci vaginali

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Escherichia coli in latino si chiama Escherichia coli (Escherichia coli) ed è un tipo batteri, che comprende varietà patogene e non patogene. Le varietà patogene di Escherichia coli causano malattie infettive e infiammatorie del tratto digestivo, del sistema urinario e riproduttivo negli uomini e nelle donne. E le specie di batteri non patogene vivono nell'intestino umano come rappresentanti della normale microflora.

Brevi caratteristiche e tipi di E. coli

I batteri del tipo E. coli sono eterogenei, poiché comprendono circa 100 specie, la maggior parte delle quali non patogene e costituiscono la normale microflora intestinale dell'uomo e di alcuni mammiferi. Le varietà patogene (ceppi) causano malattie infettive e infiammatorie degli organi in cui entrano. E poiché gli E. coli patogeni entrano più spesso nel tratto gastrointestinale e nel sistema genito-urinario, di solito causano malattie infiammatorie di questi organi. Tuttavia, quando i neonati o le donne in travaglio vengono infettati, l’E. coli patogeno può entrare nel sangue e viaggiare attraverso il sangue fino al cervello, causando meningite o sepsi (avvelenamento del sangue).

Tutte le varietà di E. coli sono resistenti ai fattori ambientali e quindi possono rimanere vitali per lungo tempo nell'acqua, nel suolo e nella materia fecale. Allo stesso tempo, l'E. coli viene ucciso mediante bollitura ed esposizione a formaldeide, candeggina, fenolo, sublimato, idrossido di sodio e soluzione di acido carbolico all'1%.

I batteri si moltiplicano rapidamente e bene negli alimenti, soprattutto nel latte, e quindi il consumo di alimenti contaminati e contaminati da E. coli provoca un'infezione con il successivo sviluppo di una malattia infettiva-infiammatoria.

Le varietà non patogene di Escherichia coli (Escherichia coli) fanno parte della normale microflora dell'intestino umano. Appaiono nell'intestino umano nei primi giorni dopo la nascita durante il processo di colonizzazione con la normale microflora e persistono per tutta la vita. Normalmente, il contenuto dell'intestino crasso umano dovrebbe contenere 10 6 -10 8 CFU/g di E. coli, mentre nelle feci - 10 7 -10 8 CFU/g di E. coli tipico e non più di 10 5 CFU/g delle sue varietà lattosio-negative. Inoltre, l'E. coli emolitico dovrebbe essere normalmente assente sia nel contenuto del colon che nelle feci. Se il contenuto di batteri è superiore o inferiore agli standard specificati, ciò indica disbatteriosi.

Sebbene la quota di E. coli tra tutti gli altri rappresentanti della microflora sia solo dell'1%, il ruolo di questi batteri è molto importante per il normale funzionamento del tratto digestivo. In primo luogo, l'Escherichia coli, colonizzando l'intestino, compete con altri microrganismi patogeni e opportunisti, impedendone l'insediamento nel lume del colon, prevenendo così varie malattie intestinali infettive e infiammatorie.

In secondo luogo, l'E. coli utilizza l'ossigeno, che è distruttivo e dannoso per i lattobacilli e i bifidobatteri, che costituiscono il resto della microflora intestinale. Cioè, grazie all'E. coli, è assicurata la sopravvivenza dei lattobacilli e dei bifidobatteri, che a loro volta sono vitali per il funzionamento dell'intestino e la digestione del cibo. Dopotutto, se non ci sono lattobacilli e bifidobatteri, il cibo non sarà completamente digerito e inizierà a marcire e fermentare nel lume intestinale, il che porterà a gravi malattie, esaurimento e, alla fine, alla morte.

In terzo luogo, E. coli, come risultato della loro attività vitale, produce sostanze vitali per il corpo, come le vitamine del gruppo B (B 1, B 2, B 3, B 5, B 6, B 9, B 12), vitamina K e biotina , nonché acido acetico, formico, lattico e succinico. La produzione di vitamine ci consente di soddisfare la maggior parte del fabbisogno giornaliero del corpo, grazie al quale tutte le cellule e gli organi funzionano normalmente e nel modo più efficiente possibile. Gli acidi acetico, formico, lattico e succinico, da un lato, forniscono l'acidità dell'ambiente necessaria per la vita dei bifidobatteri e dei lattobacilli e, dall'altro, vengono utilizzati nei processi metabolici. Inoltre, l'E. coli è coinvolto nel metabolismo del colesterolo, della bilirubina, della colina, degli acidi biliari e favorisce l'assorbimento del ferro e del calcio.

Purtroppo tra le varietà di Escherichia coli ce ne sono anche di patogene che, quando entrano nell'intestino, causano malattie infettive e infiammatorie.

Escherichia coli al microscopio - video

Specie patogene di batteri

Attualmente esistono quattro gruppi principali di E. coli patogeni:
  • Escherichia coli enteropatogeno (EPEC o ETEC);
  • Escherichia coli enterotossigenico (ETC);
  • Escherichia coli enteroinvasivo (EIEC);
  • Escherichia coli enteroemorragico (emolitico) (EHEC o EHEC).
Escherichia coli enteropatogeno il più delle volte causano malattie infettive e infiammatorie dell'intestino tenue nei bambini di età inferiore a un anno, nonché "diarrea del viaggiatore" negli adulti e nei bambini di età superiore a un anno.

La "diarrea del viaggiatore" si manifesta con feci acquose e molli e si sviluppa molto spesso nelle persone che si trovano nei paesi in via di sviluppo durante la stagione calda, dove non esistono normali standard sanitari per la conservazione e la preparazione del cibo. Questo intestinale infezione dopo pochi giorni scompare da solo e non richiede cure, poiché il sistema immunitario del corpo umano distrugge con successo l'E. coli patogeno.

Escherichia coli enteroemorragica (emolitica, emolizzante). provoca colite emorragica nei bambini e negli adulti o sindrome emolitica uremica (SEU). Entrambe le malattie richiedono un trattamento.

Escherichia coli: caratteristiche del genoma, cause di epidemie di malattie intestinali, come i batteri acquisiscono proprietà patogene - video

Quali malattie causa l’Escherichia coli?

Viene chiamato l'insieme delle malattie infettive e infiammatorie causate da Escherichia coli in vari organi e sistemi Escherichiosi O infezioni da Coli(dal nome latino del batterio - Escherichia coli). L'escherichiosi ha un decorso e una localizzazione diversi, a seconda dell'organo in cui è entrato l'Escherichia coli.

Le varietà patogene di Escherichia coli, quando entrano nel tratto gastrointestinale, causano infezioni intestinali e sindrome emolitico-uremica nei bambini e negli adulti. Le infezioni intestinali possono manifestarsi come colite emorragica, enterite, intossicazione alimentare o diarrea del viaggiatore.

In cui Escherichia coli enteropatogeno (EPEC) causano prevalentemente enterocoliti (infezioni intestinali) nei bambini del primo anno di vita e l'infezione, di regola, si presenta sotto forma di un'epidemia negli istituti prescolari, negli ospedali di maternità e negli ospedali. I ceppi patogeni di Escherichia coli si trasmettono ai bambini per contatto e contatto domestico attraverso le mani delle puerpere e del personale medico, nonché con strumenti non sterili (spatole, termometri, ecc.). Inoltre, le varietà enteropatogene di Escherichia coli possono causare intossicazione alimentare nei bambini del primo anno di vita allattati artificialmente se entrano nel latte artificiale preparato senza rispetto degli standard sanitari e delle norme igieniche.

Escherichia coli enteroinvasivo (EIEC) causare infezioni intestinali nei bambini di età superiore a un anno e negli adulti, che si manifestano come dissenteria. La trasmissione avviene solitamente attraverso acqua e cibo contaminati. Molto spesso, tali infezioni simili alla dissenteria si verificano nella stagione calda, quando aumenta la frequenza del consumo o dell'ingestione accidentale di acqua sporca e non bollita e di alimenti preparati e conservati in violazione degli standard sanitari.

Causano infezioni intestinali nei bambini di età superiore ai 2 anni e negli adulti, simili al colera. Di norma, queste infezioni sono diffuse nei paesi con climi caldi e cattive condizioni igieniche di vita della popolazione. Nei paesi dell’ex Unione Sovietica tali infezioni vengono solitamente importate, vengono “portate” da persone che tornano dalle vacanze o dai viaggi di lavoro in zone calde. Tipicamente, l'infezione da queste infezioni intestinali avviene attraverso il consumo di acqua e cibo contaminati.

L'E. coli enteropatogeno, enteroinvasivo ed enterotossigeno, quando le infezioni intestinali che causano sono gravi, può portare allo sviluppo di complicanze come otite media, cistite, pielonefrite, meningite e sepsi. Di norma, tali complicazioni si verificano nei bambini nel primo anno di vita o negli anziani, il cui sistema immunitario non distrugge efficacemente i microbi patogeni.

Escherichia coli enteroemorragica (emolitica). causare gravi infezioni intestinali nei bambini di età superiore a un anno e negli adulti, che si manifestano come colite emorragica. Nei casi gravi di colite emorragica, può svilupparsi una complicazione: la sindrome emolitico-uremica (SEU), caratterizzata da una triade: anemia emolitica, insufficienza renale e una diminuzione critica del numero di piastrine nel sangue. La SEU si sviluppa solitamente 7-10 giorni dopo un’infezione intestinale.

Inoltre, l'E. coli emolitico può portare allo sviluppo di neuriti e malattie renali nei bambini e negli adulti se entra nel tratto urinario o nel flusso sanguigno. L'infezione avviene attraverso l'acqua e il cibo.

Oltre alle infezioni intestinali, E. coli può causare malattie del sistema urinario e riproduttivo negli uomini e nelle donne, a condizione che si rivolgano alle autorità competenti. Inoltre, le malattie del sistema genito-urinario negli uomini e nelle donne possono essere causate non solo da varietà patogene, ma anche non patogene di Escherichia coli. Di norma, E. coli entra negli organi genitali e urinari a causa del mancato rispetto delle norme di igiene personale, dell'uso di biancheria intima attillata o dei rapporti anali.

Quando l'E. coli entra nelle vie urinarie sia degli uomini che delle donne, si sviluppano malattie infiammatorie dell'uretra, della vescica e dei reni, come uretrite, cistite e pielonefrite.

L'ingresso di E. coli nell'uretra maschile porta allo sviluppo di malattie infiammatorie non solo degli organi urinari, ma anche del sistema riproduttivo, poiché i microbi possono ascendere attraverso l'uretra fino ai reni, ai testicoli e alla prostata. Di conseguenza, l'infezione dell'uretra maschile con E. coli in futuro può portare a prostatite cronica, orchite (infiammazione dei testicoli) ed epididimite (infiammazione dell'epididimo).

L'ingresso di E. coli nella vagina delle donne provoca malattie infiammatorie degli organi genitali interni. Inoltre, prima di tutto, l'Escherichia coli provoca colpite o vulvovaginite. In futuro, se l'E. coli non viene distrutto e rimosso dalla vagina, i batteri possono risalire nell'utero, da dove viaggiano attraverso le tube di Falloppio fino alle ovaie. Se E. coli entra nell'utero, la donna svilupperà endometrite; se entra nelle ovaie, annessite. Se grandi quantità di E. coli entrano nella cavità addominale dalle tube di Falloppio, ciò può portare allo sviluppo di peritonite.

Le malattie degli organi urinari e genitali causate da E. coli possono durare anni e sono difficili da trattare.

Vie di trasmissione

L'E. coli si trasmette principalmente per via oro-fecale o, meno comunemente, attraverso il contatto domestico. Con la via oro-fecale trasmissione, E. coli penetra nell'acqua o nel terreno con le feci, nonché sulle piante agricole. Ulteriori infezioni possono verificarsi in vari modi, ad esempio quando si ingerisce acqua sporca, i batteri entrano nel corpo e portano allo sviluppo di infezioni intestinali. In altri casi, una persona tocca piante o terreno contaminati con le mani e trasferisce l'E. coli al cibo o direttamente nel corpo mangiando o leccandosi le mani senza prima lavarle.

Contatto e percorso familiare la diffusione di Escherichia coli è meno comune e gioca il ruolo maggiore nello sviluppo di focolai di escherichiosi in gruppi, ad esempio negli ospedali, nelle maternità, negli asili nido, nelle scuole, nelle famiglie, ecc. Attraverso il contatto e il contatto domestico, l'E. coli può essere trasmesso dalla madre al neonato quando quest'ultimo attraversa il canale del parto contaminato da batteri. Inoltre, le mani non lavate possono trasferire batteri su vari oggetti (ad esempio piatti, spatole, ecc.), Il cui utilizzo porta all'infezione di bambini e adulti.

Escherichia coli nelle donne

Quando le varietà patologiche di Escherichia coli entrano nel tratto digestivo delle donne, si sviluppano infezioni intestinali, che, di regola, hanno un decorso benigno e scompaiono da soli entro 2-10 giorni. Queste infezioni intestinali sono le malattie più comuni causate da E. coli nelle donne. Tuttavia, le infezioni intestinali, di regola, non causano complicazioni e non causano malattie croniche a lungo termine, quindi la loro importanza per le donne non è troppo grande.

Importante per le donne sono infezioni genito-urinarie, causati anche da E. coli, poiché sono di lunga durata, dolorosi e difficili da trattare. Cioè, oltre alle infezioni intestinali, l'E. coli patologico e non patologico può causare gravi malattie croniche a lungo termine degli organi urinari e genitali nelle donne, nonché avvelenamento del sangue o meningite, a condizione che entrino nell'uretra, vagina o flusso sanguigno. L'E. coli può penetrare negli organi genito-urinari dalle feci, che normalmente lo contengono in quantità piuttosto elevate.

L’E. coli può entrare nell’uretra e nella vagina nei seguenti modi:

  • Mancanza di igiene (la donna non si lava regolarmente, si accumulano residui fecali sulla pelle del perineo, dell'ano e dei genitali dopo i movimenti intestinali, ecc.);
  • Indossare biancheria intima troppo stretta (in questo caso la pelle del perineo suda e le particelle di feci rimaste sulla pelle dell'ano dopo la defecazione si spostano verso l'ingresso della vagina, finendo infine in essa);
  • Tecnica di lavaggio errata (la donna lava prima la zona anale, e poi lava i genitali esterni con la stessa mano sporca);
  • Una tecnica specifica di rapporto sessuale in cui la penetrazione avviene prima nel retto e poi nella vagina (in questo caso, sul pene o sui giocattoli sessuali rimangono particelle fecali con E. coli dopo la penetrazione nel retto, che vengono trasportate nella vagina) ;
  • Rapporto vaginale normale con eiaculazione nella vagina con un uomo affetto da prostatite cronica, orchite o epididimite causata da E. coli (in questo caso, l'E. coli, portato dal suo partner sessuale, entra nella vagina della donna con lo sperma).
Dopo la penetrazione nella vagina e nell'uretra, l'Escherichia coli provoca rispettivamente colpite acuta e uretrite. Se queste malattie infettive e infiammatorie non vengono curate, l'E. coli rimarrà nel tratto genitale o nell'uretra, poiché il batterio è in grado di attaccarsi alla mucosa e quindi non viene lavato via dal flusso di urina o dalle perdite vaginali. E rimanendo nell'uretra o nella vagina, l'E. coli può raggiungere gli organi sovrastanti del sistema urinario e riproduttivo: vescica, reni, utero, tube di Falloppio, ovaie e causare malattie infiammatorie in essi (cistite, pielonefrite, endometrite, salpingite , annessite). Secondo le statistiche, circa l'80% di tutte le cistiti nelle donne sono causate da E. coli, e la causa di quasi tutti i casi di pielonefrite o batteriuria (batteri nelle urine) nelle donne in gravidanza è anche E. coli.

Le malattie infiammatorie degli organi genito-urinari nelle donne, provocate da E. coli, richiedono molto tempo, sono soggette a cronicità e sono difficili da trattare. Spesso nel corpo si verifica un processo infiammatorio subacuto, in cui non ci sono sintomi chiari e evidenti, a seguito dei quali la donna si considera sana, sebbene in realtà sia portatrice di un'infezione cronica. Con un decorso dell'infezione così subacuto e cancellato, qualsiasi minima ipotermia del corpo, stress o altro impatto improvviso che porta a una diminuzione dell'immunità sarà l'impulso affinché l'infiammazione si trasformi in una forma attiva e evidente. È il portatore di E. coli che spiega la cistite cronica ricorrente, la pielonefrite, la colpite e l'endometrite, che peggiorano nelle donne con il minimo raffreddore e non scompaiono per molti anni, nonostante la terapia.

Escherichia coli negli uomini

Negli uomini, come nelle donne, l'Escherichia coli può causare infezioni intestinali e malattie infiammatorie degli organi genitali. In questo caso, le infezioni intestinali sono causate solo da varietà patogene di batteri, procedono in modo relativamente favorevole e, di norma, scompaiono da sole entro 3-10 giorni. In linea di principio, ogni uomo sperimenta più volte nella sua vita infezioni intestinali causate da Escherichia coli, e queste malattie non sono di grande importanza, non sono pericolose e non lasciano conseguenze.

E qui malattie infiammatorie degli organi genito-urinari causati da E. coli svolgono un ruolo molto più importante nella vita di un uomo, poiché influiscono negativamente sulla qualità della vita e causano un progressivo deterioramento della funzione sessuale e urinaria. Sfortunatamente, queste malattie sono quasi sempre croniche, lente e molto difficili da curare.

Le malattie infiammatorie degli organi genito-urinari negli uomini sono causate da E. coli se riesce a penetrare nell'uretra (uretra) del pene di un uomo. In genere, ciò si verifica durante il sesso anale senza preservativo o durante il rapporto vaginale con una donna la cui vagina è contaminata da E. coli.

Dopo la penetrazione nell'uretra, l'Escherichia coli provoca un'uretrite acuta, che scompare senza trattamento entro pochi giorni, ma ciò non accade perché avviene l'autoguarigione, ma perché l'infezione diventa cronica e la gravità dei sintomi semplicemente diminuisce. Cioè, se l'uretrite acuta causata da E. coli in un uomo non viene curata, l'infezione diventerà cronica e i batteri non rimarranno solo nell'uretra, ma si diffonderanno ad altri organi del sistema riproduttivo e urinario.

È necessario capire che l'Escherichia coli non può essere rimossa dall'uretra senza trattamento solo con la minzione regolare, poiché il batterio è in grado di attaccarsi saldamente alla mucosa e non essere lavato via da un flusso di urina. Con il passare del tempo, l'E. coli sale dall'uretra agli organi sovrastanti dell'uomo, come la vescica, i reni, la prostata, i testicoli e l'epididimo, provocando in essi un processo infiammatorio cronico.

Negli uomini, l'E. coli penetra più spesso dall'uretra negli organi genitali piuttosto che negli organi urinari. Di conseguenza, hanno molte meno probabilità rispetto alle donne di soffrire di cistite e pielonefrite causata da E. coli. Ma gli uomini molto spesso soffrono di prostatite, orchite ed epididimite cronica, prolungata e difficile da trattare, causata anche dal fatto che l'E. coli è penetrato in questi organi dall'uretra e provoca periodicamente esacerbazioni. Basti pensare che almeno 2/3 delle prostatiti croniche negli uomini sopra i 35 anni sono causate da E. coli.

Se l'Escherichia coli è presente nei genitali di un uomo, proprio come nelle donne, si attiverà dopo il minimo episodio di ipotermia o stress, provocando un'esacerbazione della prostatite, dell'orchite o dell'epididimite. Tali malattie infiammatorie sono difficili da trattare e l'uomo ne è il portatore costante, sperimentando episodiche esacerbazioni dolorose che ostinatamente non scompaiono, nonostante la terapia.

Un uomo che è diventato portatore di infezione cronica da coli degli organi genitali è anche una fonte di infezione e causa di frequenti cistiti, pielonefriti e colpite nei suoi partner sessuali. Il fatto è che nella prostatite cronica causata da E. coli, quest'ultimo finisce sempre nello sperma insieme ad altri componenti prodotti dalla prostata. E come risultato dell’eiaculazione di tale sperma infetto nella vagina di una donna, l’E. coli viene introdotto nel suo tratto genitale. Successivamente, l'E. coli entra nell'uretra o rimane nella vagina e causa rispettivamente cistite o colpite. Inoltre, dopo quasi ogni rapporto sessuale con un partner maschile il cui sperma è contaminato da E. coli compaiono episodi di cistite o colpite.

Le statistiche degli ultimi 30-40 anni indicano che il 90-95% di tutte le cistiti da deflorazione che si verificano dopo il primo rapporto sessuale di una ragazza nella sua vita sono causate da E. coli. Ciò significa che una ragazza vergine, al suo primo rapporto sessuale, viene infettata da E. coli dallo sperma di un uomo che ne è portatore, a seguito della quale sviluppa cistite, poiché la vescica è l'organo in cui i batteri possono più facilmente proliferare. accedere.

Escherichia coli durante la gravidanza

Nelle donne in gravidanza, l'E. coli viene spesso rilevato negli strisci vaginali e nelle urine. Inoltre, molte donne affermano che prima della gravidanza il batterio non era mai stato trovato nei test. Ciò non significa che la donna abbia contratto l'infezione durante la gravidanza. Al contrario, il rilevamento di Escherichia coli indica che una donna è da tempo portatrice di E. coli, ma durante la gravidanza il suo sistema immunitario non riesce più a sopprimere l'attività di questo microbo, per cui si è moltiplicato così tanto che potrebbe essere rilevato nei test.

La comparsa di batteri non significa che una donna sia necessariamente malata, ma indica che il suo tratto genitale o il suo sistema urinario sono contaminati da E. coli, che può provocare un processo infiammatorio in qualsiasi momento. Pertanto, anche in assenza di sintomi della malattia, i ginecologi che gestiscono la gravidanza prescrivono antibiotici per distruggere i batteri. Dopotutto, se E. coli rimane nelle urine, prima o poi ciò porterà a pielonefrite o cistite in una donna incinta. Se E. coli rimane nella vagina, ciò può portare a colpite che, come è noto, può provocare una rottura prematura del liquido amniotico. Inoltre, la presenza di E. coli nella vagina prima della nascita rappresenta un pericolo per il feto, poiché il bambino può essere infettato dal microbo mentre attraversa il canale del parto della madre. E una tale infezione del bambino può portare allo sviluppo di malattie gravi, come sepsi, meningite, otite media o infezioni intestinali, che sono mortali per il neonato.

Pertanto, è ovvio che la rilevazione di E. coli in uno striscio vaginale o nelle urine di una donna incinta richiede un trattamento obbligatorio, anche se non vi sono sintomi di un processo infiammatorio nei reni, nella vescica, nell'uretra o nella vagina. Durante la gravidanza, i seguenti antibiotici possono essere utilizzati per uccidere l’E. coli:

  • Amoxiclav: può essere utilizzato durante la gravidanza;
  • Cefotaxime - può essere utilizzato solo dalla 27a settimana di gravidanza fino al parto;
  • Cefepime – può essere utilizzato solo dalla 13a settimana di gravidanza fino al parto;
  • Ceftriaxone – può essere utilizzato solo dalla 13a settimana di gravidanza fino alla nascita;
  • Furagin - può essere utilizzato fino alla 38a settimana di gravidanza, ma dalla 38a settimana al parto - non può essere utilizzato;
  • Tutti gli antibiotici del gruppo delle penicilline.
Gli antibiotici vengono assunti per 3-10 giorni, dopodiché viene effettuato un esame delle urine. 1 - 2 mesi dopo la fine del trattamento, viene eseguita un'urinocoltura batterica e, se risulta negativa, la terapia viene considerata completata, poiché l'Escherichia coli non viene rilevato. Ma se nella coltura batterica delle urine viene rilevato E. coli, il trattamento viene ripetuto, cambiando l'antibiotico.

Escherichia coli nei neonati

Quando si esegue il test per la disbatteriosi o il coprogramma (scatologia), nelle feci dei neonati si trovano spesso due tipi di E. coli: emolitici e lattosio-negativi. In linea di principio, l'Escherichia coli emolitico non dovrebbe essere presente nelle feci né di un neonato né di un adulto, poiché è un microbo puramente patogeno e causa infezioni intestinali che si manifestano come colite emorragica.

Tuttavia, se viene rilevato E. coli emolitico in un bambino, non dovresti affrettarti a iniziare il trattamento con antibiotici. Per capire se il tuo bambino ha bisogno di essere curato, dovresti valutare oggettivamente le sue condizioni. Quindi, se un bambino aumenta di peso normalmente, si sviluppa, mangia bene e non soffre di feci gialle e acquose che escono letteralmente dall'ano del bambino, allora non è necessario curare il bambino, poiché la terapia è necessaria solo se ci sono sintomi, e non i numeri nei test. Se un bambino perde o non aumenta di peso, oppure ha feci acquose, gialle e maleodoranti che fuoriescono in un ruscello, allora ciò indica un'infezione intestinale e in questo caso l'E. coli rilevato negli esami deve essere trattato.

L'Escherichia coli lattosio-negativo può essere presente nelle feci di un bambino, poiché è un componente della normale microflora e normalmente può rappresentare fino al 5% della quantità totale di tutti gli Escherichia coli presenti nell'intestino. Pertanto, la rilevazione di Escherichia coli lattosio-negativo nelle feci di un bambino non è pericolosa, anche se la sua quantità supera i limiti indicati dal laboratorio, a condizione che il bambino stia ingrassando e si sviluppi normalmente. Di conseguenza, non è necessario trattare l'Escherichia coli lattosio-negativo rilevato nei test su un neonato se è in fase di crescita e sviluppo. Se il bambino non aumenta o non perde peso, è necessario trattare l'E. coli lattosio-negativo.

Sintomi di infezione

L'Escherichia coli può causare varie infezioni intestinali e malattie del tratto genito-urinario. Le malattie infettive e infiammatorie degli organi genito-urinari si sviluppano, di regola, negli uomini e nelle donne adulti, e i loro sintomi sono abbastanza tipici, come quando vengono infettati da altri microbi patogeni. Le manifestazioni cliniche di cistite, uretrite, vaginite, annessite, pielonefrite, prostatite, orchite ed epididimite causate da Escherichia coli sono abbastanza standard, quindi le descriveremo brevemente.

E le infezioni intestinali causate da varietà patogene di Escherichia coli possono verificarsi in diversi modi, quindi descriveremo i loro sintomi in dettaglio. Inoltre, in questa sezione descriveremo i sintomi che si manifestano negli adulti e nei bambini di età superiore ai tre anni, poiché è da questa età che le infezioni intestinali nei bambini procedono allo stesso modo degli adulti. Separatamente, nelle sezioni seguenti descriveremo i sintomi delle infezioni intestinali causate da varietà patogene di Escherichia coli nei bambini di età inferiore a 3 anni, poiché non procedono allo stesso modo degli adulti.

COSÌ, colpite, provocato da E. coli, procede in modo abbastanza tipico: una donna avverte abbondanti perdite vaginali maleodoranti, dolore durante i rapporti sessuali e una sensazione spiacevole durante la minzione.

Cistite sia gli uomini che le donne hanno anche un decorso tipico: dolore e dolore compaiono quando si tenta di urinare e si avverte un frequente bisogno di urinare. Quando si va in bagno viene rilasciata una piccola quantità di urina, a volte mescolata con sangue.

Pielonefrite Si verifica più spesso nelle donne e si manifesta con dolore nella zona dei reni e fastidio durante la minzione.

Uretrite sia gli uomini che le donne hanno anche un decorso tipico: appare prurito nell'uretra, la pelle attorno ad essa diventa rossa e durante la minzione si avverte un dolore acuto e una sensazione di bruciore.

Prostatite negli uomini è caratterizzata da dolore nella zona della prostata, difficoltà a urinare e deterioramento della funzione sessuale.

Le infezioni intestinali causate da diversi tipi di E. coli patogeni si verificano con sintomi diversi, quindi le considereremo separatamente.

COSÌ, infezioni intestinali causate da Escherichia coli enteropatogeno, negli adulti e nei bambini sopra i 3 anni, si verificano in base al tipo di salmonellosi. Cioè, la malattia inizia in modo acuto, compaiono nausea, vomito, dolore addominale e la temperatura corporea aumenta moderatamente o leggermente. Le feci diventano fluide, acquose e abbondanti e il paziente va in bagno 2-6 volte al giorno. Durante la defecazione, le feci schizzano letteralmente fuori. L'infezione dura in media dai 3 ai 6 giorni, dopodiché avviene la guarigione.

Escherichia coli enterotossigena causare infezioni intestinali chiamate "diarrea del viaggiatore", e si manifesta come la salmonellosi o una forma lieve di colera. Una persona sviluppa dapprima segni di intossicazione (febbre, mal di testa, debolezza generale e letargia), espressi moderatamente, e in un breve periodo di tempo sono accompagnati da dolore addominale allo stomaco e all'ombelico, compaiono nausea, vomito e feci molli abbondanti. Le feci sono acquose, senza alcuna mescolanza di sangue o muco, abbondanti, escono dall'intestino in un ruscello. Se l'infezione si è verificata in paesi con clima tropicale, la persona potrebbe avvertire febbre, brividi, dolori muscolari e articolari. Un'infezione intestinale dura in media 1-5 giorni, dopodiché avviene la guarigione.

Escherichia coli enteroinvasiva provocare infezioni intestinali simili in corso alla dissenteria. La temperatura corporea di una persona aumenta moderatamente, compaiono mal di testa e debolezza, l'appetito scompare e si sviluppa un forte dolore nell'addome inferiore sinistro, che è accompagnato da abbondanti feci acquose miste a sangue. A differenza della dissenteria, le feci sono abbondanti, non scarse, con muco e sangue. L'infezione dura 7-10 giorni, dopodiché avviene la guarigione.

Causano infezioni intestinali che si presentano come colite emorragica e si riscontrano soprattutto nei bambini. L'infezione inizia con un moderato aumento della temperatura corporea e intossicazione (mal di testa, debolezza, perdita di appetito), seguita da nausea, vomito e feci acquose. Nei casi più gravi, al 3°-4° giorno della malattia, si sviluppa dolore addominale, le feci rimangono liquide, ma si verificano molto più spesso e nelle feci compaiono strisce di sangue. A volte le feci sono costituite interamente da pus e sangue senza materia fecale. In genere, l'infezione dura una settimana, dopodiché avviene l'autoguarigione. Ma nei casi più gravi, la sindrome emolitico-uremica può svilupparsi 7-10 giorni dopo la fine della diarrea.

Sindrome emolitico-uremica (SEU) manifestato da anemia, la conta piastrinica diminuisce a livelli critici e compare insufficienza renale acuta. La HUS è una grave complicanza dell'infezione intestinale, poiché oltre all'anemia, all'insufficienza renale e alla diminuzione del numero delle piastrine, una persona può sviluppare crampi alle gambe e alle braccia, rigidità muscolare, paresi, stupore e coma.

Le complicanze delle infezioni intestinali causate dall'Escherichia coli patogeno negli adulti e nei bambini di età superiore ai 3 anni si verificano molto raramente. Inoltre, nella maggior parte dei casi, le complicanze derivano dall'infezione da Escherichia coli enteroemorragico e si verificano in circa il 5% dei casi. Le complicanze delle infezioni intestinali causate da E. coli comprendono malattie renali, porpora emorragica, crampi, paresi e rigidità muscolare.

Escherichia coli - sintomi nei bambini

Poiché i bambini praticamente non hanno malattie infiammatorie degli organi genitourinari causate da E. coli, la maggior parte dei bambini soffre di infezioni intestinali provocate da varietà patogene di Escherichia coli. Pertanto, in questa sezione esamineremo i sintomi delle infezioni intestinali nei bambini di età inferiore a 3 anni causate da E. coli patogeno.

Escherichia coli enteropatogeno ed enterotossigeno sono la causa di infezioni intestinali nei bambini piccoli situati in gruppi, ad esempio negli ospedali, nelle maternità, ecc. L'infezione causata da questi tipi di E. coli è caratterizzata da un graduale peggioramento della condizione e da un aumento della gravità di 4-5 giorni. La temperatura corporea del bambino aumenta inizialmente moderatamente (non superiore a 37,5 o C) o rimane normale, quindi compaiono frequenti rigurgito e vomito. Le feci diventano frequenti, feci gialle mescolate a muco o particelle di cibo non digerito. Ad ogni nuovo movimento intestinale, le feci diventano più liquide e la quantità di acqua al loro interno aumenta. Le feci possono fuoriuscire in un forte flusso. Il bambino è irrequieto, ha la pancia gonfia.

Con un'infezione lieve, il vomito si verifica 1-2 volte al giorno e le feci 3-6 volte e la temperatura corporea non supera i 38 o C. Con un'infezione moderata, il vomito più di 3 volte al giorno, le feci fino a 12 volte al giorno e la temperatura può salire fino a 39 o C. Nei casi gravi della malattia, le feci si verificano fino a 20 volte al giorno e la temperatura sale a 38 - 39 o C.

Se un bambino che ha una tale infezione intestinale non riceve abbastanza liquidi per reintegrare le sue perdite con la diarrea, come complicazione può sviluppare la sindrome DIC (sindrome della coagulazione intravascolare disseminata) o shock ipovolemico con insufficienza miocardica e paresi intestinale.

Inoltre, nei bambini con un sistema immunitario indebolito, l'E. coli, a causa del danno alla parete intestinale, può entrare nel flusso sanguigno e diffondersi ad altri organi, causando pielonefrite, otite purulenta, meningite o sepsi.

L'infezione causata da E. coli enteropatogeno ed enterotossigeno è più grave nei bambini di età compresa tra 3 e 5 mesi. Inoltre, un'infezione causata da E. coli enterotossigeno nei bambini del primo anno di vita, di regola, scompare entro 1 - 2 settimane, dopo di che si verifica il completo recupero. E la malattia causata dai bacilli enteropatogeni nei bambini del primo anno di vita dura a lungo, poiché dopo il recupero può ripresentarsi entro 1 o 2 settimane. In totale, l'infezione può durare da 1 a 3 mesi, quando periodi di recupero si alternano a riacutizzazioni. Nei bambini di età compresa tra 1 e 3 anni, le infezioni causate da Escherichia coli sia enteropatogeno che enterotossigeno durano 4-7 giorni, dopo i quali avviene l'autoguarigione.

Infezione causata da Escherichia coli enteroinvasiva, nei bambini sotto i 3 anni, inizia con sintomi di intossicazione moderata (febbre, mal di testa, debolezza, perdita di appetito), che è accompagnata da diarrea. Le feci sono liquide, di consistenza simile alla panna acida e contengono impurità di muco e talvolta sangue. Prima della voglia di defecare, appare il dolore addominale. La malattia dura solitamente dai 5 ai 10 giorni, dopo i quali avviene l'autoguarigione.

Escherichia coli enteroemorragica causare infezioni intestinali che si verificano ugualmente nei bambini di qualsiasi età. All'inizio della malattia, la temperatura corporea aumenta moderatamente e compaiono sintomi di intossicazione (mal di testa, debolezza, perdita di appetito), poi compaiono nausea, vomito e feci molli. Le feci sono acquose, molto liquide, e vengono spruzzate in un ruscello. Se l'infezione è grave, entro 3-4 giorni compare dolore addominale, le feci diventano più frequenti e si riscontra sangue nelle feci. In alcuni casi, le feci scompaiono completamente dalle feci e le feci sono costituite interamente da sangue e pus.

Nei casi lievi, l'infezione dura 7-10 giorni, dopodiché avviene l'autoguarigione. E nei casi più gravi, in circa il 5% dei casi, si sviluppa una complicanza: la sindrome emolitico-uremica (SEU). La SEU si manifesta con insufficienza renale, anemia e una forte diminuzione del numero di piastrine nel sangue. A volte con la SEU compaiono anche crampi, rigidità e paresi muscolare e si sviluppa stupore o coma.

Cosa significa il rilevamento di E. coli in vari test?

E. coli nelle urine o nella vescica

Il rilevamento di E. coli nelle urine è un segnale allarmante, che indica che gli organi urinari sono infetti da questo microbo e hanno un processo infiammatorio lento che non manifesta sintomi clinici. Se E. coli viene trovato nella vescica, ciò indica che solo questo organo è infetto e che in esso è presente anche un processo infiammatorio, che è lento e subacuto, senza sintomi clinici. L'attivazione di E. coli e lo sviluppo di infiammazione con sintomi clinici in qualsiasi organo del sistema urinario o specificamente nella vescica in una situazione del genere è solo questione di tempo. L'infiammazione può diventare acuta e manifestare sintomi, ad esempio durante l'ipotermia o lo stress, quando il sistema immunitario si indebolisce, a seguito del quale E. coli si moltiplica e provoca la malattia.

Pertanto, il rilevamento di E. coli nelle urine o nella vescica è un segnale per iniziare la terapia antibatterica con antibiotici al fine di distruggere il microbo patogeno ed eliminare il rischio di sviluppare una malattia infiammatoria acuta degli organi genito-urinari. Affinché il trattamento sia efficace, è necessario innanzitutto eseguire un esame delle urine per la coltura batterica per identificare a quali antibiotici è sensibile l'E. coli che vive nel tratto genito-urinario di una determinata persona. Sulla base dei risultati dell'urinocoltura batteriologica, viene selezionato un antibiotico efficace e viene eseguito un ciclo di terapia. Dopo 1 - 2 mesi, l'urina viene nuovamente sottoposta a coltura batteriologica e se i risultati non rivelano E. coli, il trattamento viene considerato efficace. Se, secondo i risultati di un'urinocoltura di controllo, viene nuovamente rilevato E. coli, viene ripreso un ciclo di un altro antibiotico, al quale anche il batterio è sensibile.

E. coli in uno striscio (nella vagina)

Il rilevamento di E. coli nella vagina è un allarme per una donna, poiché questo batterio non dovrebbe trovarsi nel tratto genitale. E se è nella vagina, prima o poi l'Escherichia coli causerà una malattia infettiva e infiammatoria di qualsiasi organo genitale femminile. Nel migliore dei casi, E. coli provocherà colpite e, nel peggiore dei casi, penetrerà dalla vagina nell'utero e ulteriormente nelle ovaie, causando endometrite o annessite. Inoltre, i batteri della vagina possono entrare nella vescica e causare cistite.

Pertanto, se in uno striscio vaginale viene rilevato E. coli, è necessario sottoporsi a un ciclo di trattamento antibiotico per distruggere questo batterio nel tratto genitale. Affinché la terapia sia efficace è necessario sottoporre prima le secrezioni vaginali ad una coltura batteriologica per identificare a quali antibiotici è sensibile l'E. coli trovato nella vagina di una determinata donna. Solo dopo aver identificato la sensibilità, viene selezionato un antibiotico che sarà efficace e inizia la sua somministrazione. 1 – 2 mesi dopo il trattamento viene effettuata una coltura batterica di controllo e se, secondo i risultati, l'E. coli è assente, la terapia ha avuto successo. Se nella coltura viene nuovamente rilevato E. coli, dovrai sottoporsi a un nuovo ciclo di terapia antibiotica, ma con una diversa.

Escherichia coli nel mare

Se, secondo studi epidemiologici, E. coli si trova nel mare, allora è meglio non nuotare in tali acque, poiché l'ingestione accidentale può portare a infezioni con lo sviluppo di un'infezione intestinale. Se, nonostante la presenza di E. coli, decidete di fare il bagno in mare, dovreste farlo con cautela, cercando di non ingoiare l'acqua, per non contrarre un'infezione intestinale.

Escherichia coli nel Mar Nero: nel 2016, il numero di infezioni da infezione intestinale batte i record - video

Test dell'escherichia coli

Per rilevare l'E. coli in vari organi, attualmente vengono eseguiti i seguenti test:
  • Coltura batteriologica di feci, urina, vomito, secrezioni genitali. Durante l'analisi, i fluidi biologici vengono seminati su un mezzo nutritivo, la cui composizione è adatta alla crescita di E. coli. Se sul terreno crescono colonie di E. coli, il risultato del test è considerato positivo e significa che l'organo da cui sono state prelevate le secrezioni biologiche contiene E. coli.
  • Coprogramma o analisi delle feci per la disbatteriosi. Questi test rivelano quali microrganismi sono contenuti nelle feci e in quali quantità. Se, secondo i risultati di un coprogramma o di un'analisi per la disbatteriosi, viene rilevato E. coli patogeno, ciò significa che la persona ha un'infezione intestinale. Se i risultati del test rivelano E. coli non patogeno, ma in quantità anormali, ciò indica disbatteriosi.

Escherichia coli normale

Nelle feci umane, il numero totale di E. coli tipici dovrebbe essere 10 7 -10 8 CFU/g. Il numero di Escherichia coli lattosio-negativi non deve essere superiore a 10,5 CFU/g. L'E. coli emolitico dovrebbe essere assente nelle feci di qualsiasi persona, sia adulti che bambini.

Trattamento

Trattamento delle malattie del tratto genito-urinario negli uomini e nelle donne causata da E. coli viene effettuata con l'aiuto di antibiotici. In questo caso, viene prima eseguita una coltura batteriologica per determinare la sensibilità agli antibiotici al fine di determinare quale farmaco sarà più efficace in questo caso particolare. Successivamente, scegli uno degli antibiotici a cui l'E. coli è sensibile e prescrivilo per un ciclo di 3-14 giorni. 1-2 mesi dopo la fine del ciclo di uso di antibiotici, viene eseguita una coltura batteriologica di controllo. Se i risultati non rivelano E. coli, il trattamento ha avuto successo e la persona è completamente guarita, ma se vengono rilevati batteri, è necessario assumere nuovamente qualche altro antibiotico a cui il microbo è sensibile.

I seguenti antibiotici sono più efficaci nel trattamento delle infezioni del tratto genito-urinario causate da E. coli:

  • cefotaxima;
  • ceftazidima;
  • Cefepima;
  • Imipenem;
  • Meropenem;
  • Levofloxacina;
Trattamento delle infezioni intestinali causate da Escherichia coli, nei bambini e negli adulti si esibiscono secondo le stesse regole. L'unica differenza nell'approccio terapeutico è che i bambini di età inferiore a un anno devono essere ricoverati in un ospedale per malattie infettive, mentre gli adulti e i bambini di età superiore a un anno con infezione moderata e lieve possono essere curati a casa.

Quindi, con le infezioni intestinali, ai bambini e agli adulti viene prescritta una dieta delicata composta da zuppe mucose, porridge a base d'acqua, pane bianco raffermo, bagel, cracker, verdure bollite, pesce magro bollito o carne. Dalla dieta sono escluse spezie, cibo affumicato, grasso, fritto, salato, in salamoia, in scatola, latte, zuppe ricche, pesce e carne grassi e frutta fresca.

Dal momento in cui compaiono diarrea e vomito fino alla completa cessazione, assicurati di bere soluzioni reidratanti che reintegrano la perdita di liquidi e sali. È necessario bere 300–500 ml per ogni episodio di diarrea o vomito. Le soluzioni di reidratazione vengono preparate da polveri farmaceutiche (Regidron, Trisol, Glucosolan, ecc.) O da sale normale, zucchero, bicarbonato di sodio e acqua pulita. I preparati farmaceutici vengono semplicemente diluiti con acqua pulita nella quantità specificata nelle istruzioni. Una soluzione di reidratazione fatta in casa viene preparata come segue: un cucchiaio di zucchero e un cucchiaino di sale e bicarbonato di sodio vengono sciolti in 1 litro di acqua pulita. Se per qualche motivo è impossibile acquistare o preparare da soli soluzioni di reidratazione, è necessario bere qualsiasi bevanda disponibile in casa, come tè con zucchero, composta, succo di frutta, ecc. Ricorda che durante la diarrea e il vomito è meglio bere almeno qualcosa piuttosto che niente, poiché è necessario reintegrare la perdita di liquidi e sali.
Furazolidone, che è prescritto sia agli adulti che ai bambini. Tra gli antibiotici, la ciprofloxacina, la levofloxacina o l'amoxicillina sono spesso prescritti per il trattamento dell'Escherichia coli. Gli antibiotici e il Furazolidone vengono prescritti per 5-7 giorni.

Oltre agli antibiotici, attualmente, i batteriofagi possono essere utilizzati per distruggere l'E. coli fin dai primi giorni della malattia: coli batteriofago liquido, intestibatteriofago, coliproteus batteriofago, piobatteriofago liquido combinato, piobatteriofago liquido combinato polivalente, ecc. I batteriofagi, a differenza degli antibiotici, agiscono solo sui bacilli intestinali patogeni e non distruggono i bifidobatteri e i lattobacilli della normale microflora. Pertanto possono essere assunti fin dai primi giorni della malattia.

Dopo la guarigione da un'infezione intestinale, si consiglia di assumere probiotici (Bifikol, Bifidumbacterin) per 2-3 settimane

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  • L'invenzione riguarda la biotecnologia e riguarda la produzione di produttori di preparati probiotici - preparati batterici basati su colture vive di microrganismi simbionti utilizzati per la prevenzione e il trattamento della disbatteriosi e di altri disturbi del tratto gastrointestinale. Al ceppo M17 di Escherichia coli, produttore del farmaco probiotico colibatterina, è stato introdotto un plasmide non coniugativo e non mobilizzabile p Colap, contenente geni per la produzione di colicina E1 e determinanti della resistenza all'ampicillina in dosi fino a 150 mg /l. Il ceppo risultante è privo di un fenotipo adesivo indesiderato inattivando il gene dell'adesina fimH pili tipo 1 integrando il gene della resistenza alla kanamicina - neomicina npt. Il ceppo di E. coli M17 fim H::Kan/p Colap è stato depositato nel VKPM con il numero B-7448. Ciò consente di creare un preparato probiotico con una ridotta capacità di colonizzare nicchie diverse da quella intestinale, con aumento dell’attività antagonista e residente durante la terapia antibiotica. I tratti introdotti nel ceppo costruito sono stabilmente preservati nella popolazione. Ciò facilita la produzione di un farmaco standard basato sul ceppo e garantisce che l'eliminazione del plasmide non avvenga quando un paziente assume il farmaco senza una concomitante terapia antibiotica. 4 illustrazioni, 1 tab.

    La presente invenzione riguarda il settore delle biotecnologie e riguarda la creazione di un ceppo migliorato di Escherichia coli, utilizzabile per ottenere probiotici, preparati batterici a base di colture vive di microrganismi simbionti. I probiotici (altri nomi per i farmaci di questo gruppo: flora normale, eubiotici, microbiotici) sono un mezzo efficace per la prevenzione e il trattamento della disbiosi intestinale. La disbatteriosi è un cambiamento pronunciato nelle specie e nel rapporto quantitativo dei microbi, che si manifesta nel rapido sviluppo di microrganismi opportunistici, in particolare batteri del gruppo intestinale (Enterobacteriaceae), ed è accompagnato da varie manifestazioni dolorose. Una causa importante di disbiosi è l'uso di antibiotici e altri farmaci antimicrobici [Krasnogolovets V.N. "Significato clinico della disbiosi intestinale che si è sviluppata a seguito dell'uso di antibiotici". Nel libro. "L'uso del colibacterin per la prevenzione e il trattamento delle malattie intestinali e la tecnologia della sua produzione." M., 1967, pag. 223 - 243]. Attualmente in Russia sono noti i preparati probiotici “Colibacterin” e “Bifikol”, ottenuti sulla base del ceppo di Escherichia coli M17, che è essenzialmente un derivato del ceppo di E. coli isolato da A. Nissle e utilizzato per ottenere il farmaco “Mutaflor” (Germania) [Peretz L.G. "Colibacterin secco. Nuovi metodi di diagnosi, cura e prevenzione delle malattie intestinali." Nel libro. "Tesi di relazione al Plenum del Consiglio medico accademico del Ministero della sanità della RSFSR." M., 1961, pag. 52-54]. Tuttavia, a differenza del ceppo originale, il ceppo di E. coli M17 ha perso la capacità di sintetizzare la colicina B e, quindi, ha ridotto la sua attività antagonista nei confronti dei batteri intestinali [Shemchuk L.F. "Standardizzazione dei colibatteri", abstract. Candidato di Scienze Biologiche, M., 1983, p. 16]. Un altro svantaggio del ceppo di E. coli M17 e del suo predecessore è la presenza di un fenotipo di fimbrie Mn di tipo 1 altamente adesivo, che è insolito e indesiderabile per un ceppo intestinale. Questo fenotipo si trova spesso in ceppi isolati dal macroorganismo durante infezioni del tratto urinario e polmonite acquisita in ospedale [Sokurenko E.V., Chesnokova V.L. "Un metodo per modificare il fenotipo adesivo degli isolati selvatici di E. coli applicato ai ceppi che producono il farmaco colibacterin." Bollettino di Biologia e Medicina Sperimentale, 1997, Volume 124, N. 9, p. 334 - 338]. Uno svantaggio del ceppo E. coli M17 è anche la sua sensibilità agli antibiotici. Pertanto, i farmaci basati su di esso non possono essere efficaci durante l'assunzione di antibiotici. Nel frattempo, l’uso simultaneo di antibiotici e probiotici può prevenire lo sviluppo della disbiosi e quindi aumentare l’efficacia delle misure terapeutiche e ridurre i tempi di trattamento. L'obiettivo dell'invenzione è quello di creare un ceppo di E. coli - un derivato di E. coli M17, che elimini gli svantaggi sopra menzionati del noto ceppo di E. coli M17, vale a dire: attività antagonista ridotta, fenotipo adesivo indesiderato, sensibilità a antibiotici. Il risultato tecnico consiste nella costruzione di un ceppo con aumentata attività antagonista, ridotta capacità di colonizzare nicchie diverse da quella intestinale primaria nel macroorganismo e resistenza a dosi moderate di antibiotici penicillinici. Questo obiettivo viene raggiunto utilizzando metodi genetici e di ingegneria genetica per costruire il ceppo di E. coli M17 fimH::kan/pColap, che produce colicina E1, è resistente a concentrazioni moderate di ampicillina (fino a 150 U/ml) e contiene un agente inattivato gene fimH, che codifica per l'adesione fimbriale. Il ceppo di E. coli M17 fimH::kan/pColap è stato depositato nella Collezione panrussa di microrganismi industriali con il numero di registrazione B-7448. Il design brevettato del ceppo si basa sulle seguenti disposizioni. Abbiamo dimostrato per la prima volta che l'inattivazione del gene dell'adesina fimH pili tipo 1 nel genoma del ceppo di Escherichia coli M17 e l'introduzione nel ceppo di Escherichia coli M17 del plasmide non coniugativo e non mobilizzabile pColap, contenente i geni per la produzione di colicina E1 e determinanti di resistenza all'ampicillina in dosi fino a 150 mg/l permette di realizzare un preparato probiotico con ridotta capacità di colonizzare nicchie diverse da quella intestinale, con aumentata attività antagonista e residente durante la terapia antibiotica . L'essenza della soluzione brevettata di ingegneria genetica è illustrata dai disegni, dove: FIG. La Figura 1 mostra uno schema per ottenere un ceppo ricombinante di E. coli M17fimH::kan/pColap con un difetto nel gene di adesione pili fimH di tipo 1; 2 - schema di costruzione del plasmide ibrido pColap, FIG. La Figura 3 mostra i risultati di uno studio sull'attività adesiva del ceppo costruito di Escherichia coli M17 fimH::kan/pColap, Fig. 4 - risultati di uno studio di stabilità del ceppo costruito di Escherichia coli M17 fimH::kan/pColap. Quando si è ottenuto il ceppo di E. coli M17 fimH::kan/pColap, il suo analogo più vicino, il ceppo di E. coli M17, è stato utilizzato come punto di partenza. Per eliminare l'adesina fimbriale, che conferisce un fenotipo Mn altamente adesivo indesiderato alle cellule M17 di E. coli, è stato ottenuto un ceppo ricombinante in cui il gene di resistenza alla kanamicina-neomicina npt è stato integrato nel gene cromosomico fimH che codifica l'adesina. A questo scopo abbiamo utilizzato il plasmide pCH103, un derivato del plasmide R6K, che ha un sistema di replicazione pir-dipendente e può essere mantenuto solo in ceppi contenenti il ​​gene pir, che ne garantisce la replicazione [Sokurenko E.V., Chesnokova V.L. "Un metodo per modificare il fenotipo adesivo degli isolati selvatici di E. coli applicato ai ceppi che producono il farmaco colibacterin." Bollettino di Biologia e Medicina Sperimentale, 1997, Volume 124, N. 9, p. 334 - 338]. Il plasmide pCH103 trasporta il gene di resistenza all'ampicillina e un frammento cromosomico contenente i geni del cluster fim, in cui l'integrità del gene fimH viene interrotta dall'inserimento del gene di resistenza alla kanamicina (neomicina) npt. Dopo la sua trasformazione nel ceppo di E. coli M17, non può essere mantenuto nelle cellule e possono formarsi trasformanti resistenti alla kanamicina quando è completamente integrato nel cromosoma come risultato di un singolo incrocio o come risultato di un doppio incrocio sopra (Fig. 1). I trasformanti della seconda classe rimangono sensibili all'ampicillina. Tra questi, è stato selezionato un ceppo denominato E. coli M17fimH::kan (o M17 fimH::npt). Lo studio ha confermato l'assenza di adesione sensibile al mannosio nel ceppo risultante, vale a dire FimH - fenotipo. Per aumentare l'attività antagonista del ceppo di E. coli M17 e conferirgli resistenza all'ampicillina basata sul plasmide ColE1 utilizzando metodi noti ["Metodi di genetica molecolare e ingegneria genetica", 1990, Novosibirsk, "Nauka", Siberian Branch, p. 7-10, 39-44] è stato costruito un plasmide ibrido pColap (Fig. 1). Il plasmide ColE1 originale, isolato da un ceppo di E. coli non patogeno, è stato studiato in dettaglio. Ha una gamma piuttosto ristretta di ospiti (principalmente ceppi di E. coli) ed è mantenuto stabilmente nelle cellule batteriche. Si conosce la sua sequenza nucleotidica completa, le funzioni di tutti i suoi elementi genetici e la regolazione della loro attività. Il plasmide determina la sintesi della colicina E1, che ha un effetto dannoso sulle cellule dei batteri correlati. Lo svantaggio del plasmide ColE1 è la sua capacità di essere mobilizzato in altre cellule utilizzando plasmidi coniugativi, dovuta alla presenza della regione mob nella sua struttura. Utilizzando l'endonucleasi di restrizione BspLu11.1, questa regione è stata completamente rimossa e altri elementi genetici del plasmide non sono stati praticamente influenzati. Quindi, utilizzando l'endonucleasi di restrizione BspH1, un frammento contenente il gene b1a che codifica per la sintesi della lattamasi è stato tagliato dal noto vettore pUC19 e legato con un frammento del plasmide ColE1 privo della regione mob. Come risultato è stato ottenuto il plasmide pColap. Questo plasmide non è coniugativo e non mobilizzabile e quindi praticamente non può essere trasferito nelle cellule di altri batteri. A differenza del vettore pUC19 e di altri plasmidi, pColap fornisce solo un moderato livello di resistenza all'ampicillina ai ceppi di E. coli da esso trasformati (Tabella 1). Questo deterioramento nell'espressione del gene della lattamasi è osservato a causa di disturbi nella regione del promotore del gene (Hilbert box) e nella regione 5" che aumenta l'efficienza dell'espressione, verificatisi a seguito di manipolazioni genetiche durante la costruzione del gene della lattamasi plasmide ricombinante pColap. La sensibilità dei ceppi portatori di pColap ad elevate concentrazioni di antibiotico deve essere considerata un fattore favorevole, quindi se per qualche motivo la presenza di ceppi contenenti questo plasmide nell'intestino del paziente diventa indesiderabile, o se, a seguito di qualche evento eccezionale , il plasmide viene trasferito ad un altro ceppo, quindi tutte le cellule che lo contengono possono essere eliminate dall'organismo utilizzando antibiotici β-lattamici ad alte concentrazioni. Il ceppo di E. coli M17 fimH::kan è stato trasformato con il plasmide pColap e il ceppo di E. coli È stato ottenuto il ceppo M17 fimH::kan/pColap. Il ceppo ha le seguenti caratteristiche: Morfologia: bastoncini sottili Gram-negativi, debolmente mobili, con estremità arrotondate di 1,5 - 2 micron di lunghezza. Caratteristiche culturali e fisiologiche. Agar peptone di carne e brodo di agar Hotinger. Dopo 36 ore di crescita a 37°C forma colonie rotonde biancastre traslucide con diametro di 1,5 - 2,5 mm, la superficie delle colonie è liscia, i bordi sono regolari, la struttura è omogenea, la consistenza è pastosa, sono facilmente emulsionabile. Agar terreno minimo M9 con glucosio (0,2%). Dopo 40 ore di crescita forma colonie di 1-2 mm di diametro, grigio-biancastre, traslucide, rotonde, convesse, con bordi lisci. Brodo di carne-peptone e brodo Hotinger. Dopo 18-24 ore di crescita a 37°C si osserva una forte torbidità uniforme, un leggero sedimento ed un odore caratteristico. Terreno minimo liquido M9 con glucosio (0,2%). Dopo 20-24 ore di crescita con aerazione si osserva una forte torbidità uniforme, l'odore è debole o assente. Crescita mediante iniezione in agar carne-peptone. Buona crescita durante tutta l'iniezione. Il microrganismo è un anaerobio facoltativo. Relazione con la temperatura e il pH dell'ambiente. Cresce bene a temperature da 30 a 42 o C e pH 6,8 - 7,2. Proprietà biochimiche. Ben assimila glucosio, saccarosio, lattosio, fruttosio, mannosio, xilosio, mannitolo e sorbitolo con formazione di acido e gas. Ramnosio, galattosio e arabinosio - con debole formazione di acido; salicina - con formazione ritardata di acido e gas; raffinosio - solo con formazione di acido. L'inositolo non viene assorbito. Non forma idrogeno solforato; produce indolo. Atteggiamento verso gli antibiotici. Resistente all'ampicillina a concentrazioni nel mezzo fino a 150 mg/l. Produzione di batteriocine. Produce la colicina E1. Contenuto dei plasmidi. Le cellule contengono un plasmide multicopia non coniugativo e non mobilizzabile pColap (5239 bp), che determina la resistenza all'ampicillina e alla sintesi della colicina E1. Il ceppo ha una formula antigenica O2:L1:H6 ed è agglutinato dal siero con un titolo sierico di almeno 1:64000. L'invenzione è illustrata da esempi che caratterizzano la resistenza di ceppi portatori di vari plasmidi all'ampicillina e la stabilità delle loro caratteristiche durante la coltivazione. Esempio 1. Studio della crescita del ceppo di E. coli M17 e dei suoi derivati ​​contenenti plasmidi su terreni con diverse concentrazioni di ampicillina (Tabella 1). I ceppi di E. coli studiati (Tabella 1) sono stati coltivati ​​per 18 ore in brodo Luria (LB - 10 g di triptone, 5 g di estratto di lievito, 5 g di NaCl per 1 litro di acqua distillata) a 37 o C con aerazione. Successivamente sono state preparate diluizioni seriali di colture batteriche a 10 -7 in soluzione fisiologica e ciascuna coltura è stata seminata su piastre con LA (LB + 1,6% agar) contenente ampicillina nelle seguenti concentrazioni (μg/ml): 5, 50, 75, 100 , 125, 150, 200, 250. La crescita della colonia è stata valutata dopo 18-24 ore. I risultati sono presentati nella Tabella 1. Come si può vedere dalla Tabella 1, il ceppo originale di Escherichia coli M17 mostra un'elevata sensibilità all'ampicillina. Il plasmide pUC19 contenuto nel ceppo M17/pUC19, che era la fonte del gene della lattamasi per il plasmide pColap che abbiamo costruito, conferisce alla cellula batterica resistenza a concentrazioni di ampicillina fino a 2 g/l. Allo stesso tempo, il plasmide pColap contenuto nel ceppo M17 fimH::kan/pColap fornisce resistenza a concentrazioni di ampicillina non superiori a 150 mg/l. Pertanto, i ceppi risultanti hanno un livello moderato di resistenza all’ampicillina. Esempio 2. Studio delle proprietà adesive e determinazione del fenotipo adesivo del ceppo M17 di E. coli e dei suoi derivati. Il fenotipo adesivo è stato determinato mediante il metodo standard dello "studio della crescita". Da una coltura fresca dei ceppi batterici studiati è stata preparata una sospensione di cellule batteriche in soluzione fisiologica con una densità ottica di 1,0 ad una lunghezza d'onda di 540 nm. Parallelamente, sono state preparate piastre per microtitolazione con pozzetti a fondo piatto con substrati di adesione immobilizzati nei pozzetti, vale a dire MN (mannano di lievito), RN (RNasi B bovina) e BSA (albumina sierica bovina). La sospensione batterica è stata quindi posta nei pozzetti e incubata per 40 minuti. Le cellule batteriche non legate sono state lavate accuratamente con soluzione salina. Un ricco mezzo nutriente è stato aggiunto ai pozzetti e incubato con agitazione costante a 37°C per 2,5 - 3 ore fino alla comparsa di torbidità nei pozzetti. La densità ottica in ciascun pozzetto è stata registrata utilizzando un lettore automatico di micropiastre (Molecular Devices, Inc., Menlo Park, California, USA). In questo esperimento sono stati studiati i seguenti ceppi di E. coli: M17 - ceppo originale; M17 fimH::kan - ceppo M17 con un gene dell'adesina fimH inattivato: M17 fimH: : kan/pPKL91 - ceppo fimH::kan, trasformato con il plasmide pPKL91 contenente il gene regolatore fimB, inclusa l'espressione dei pili di tipo 1 da parte di una cellula batterica ; ceppo M17fimH::kan/pColap - ceppo M17 fimH::kan, trasformato con il plasmide pColap da noi costruito, portante determinanti della resistenza all'ampicillina e della produzione di colicina E1. I risultati di uno studio sull'attività adesiva dei ceppi di E. coli M17 e dei derivati ​​del ceppo di E. coli M17, valutati utilizzando il metodo dello "studio della crescita", sono presentati in Fig. 3 (in ordinata sono riportati i valori di densità ottica alla lunghezza d'onda di 540 nm; in ascissa sono riportati i ceppi di E. coli studiati: 1 - M17; 2 - M17 fimH::kan, 3 - M17fimH::kan/pPKL91, 4 - M17 fimH ::kan/pColap). Come si può vedere dalla figura. 3, il ceppo originale di E. coli M17 si lega bene sia alla RNasi B che al mannano, il che indica un fenotipo adesivo MN, indesiderabile per il ceppo intestinale di Escherichia coli. Il ceppo ricombinante M17 fimH::kan che abbiamo ottenuto mostra attività adesiva pari a zero sia da solo che dopo l'introduzione in esso di un plasmide che include l'espressione dei pili di tipo 1. L'attività adesiva nulla rimane in questo ceppo anche dopo l'introduzione del plasmide pColap (ceppo M17 fimH::kan/pColap). Esempio 3. Studio della stabilità dei tratti del ceppo di Escherichia coli M17 fimH::kan/pColap, determinati dal plasmide pColap. Il plasmide pColap che abbiamo costruito garantisce la produzione di colicina E1 e resistenza all'ampicillina. La conservazione di queste caratteristiche dipende dalla stabilità del mantenimento del plasmide nelle cellule batteriche: la perdita del plasmide si accompagna alla perdita delle caratteristiche corrispondenti. La stabilità nel mantenimento della resistenza all'ampicillina e la colicinogenicità dei ceppi risultanti è stata determinata quando sono stati coltivati ​​in un mezzo nutriente liquido in assenza di un agente selettivo per 100 generazioni. Il plasmide originale ColE1 è stato utilizzato come controllo positivo e il plasmide pBR322, un derivato ColE1 che non contiene il cer locus, che influisce sulla stabilità dei plasmidi, è stato utilizzato come controllo negativo. Le colture dei ceppi M17 fimH::kan/pColap, M17/ColE1 e M17/pBR322 sono state coltivate per 18 ore con maggiore aerazione a 37 oC in LB con ampicillina (100 μg/ml). Il ceppo M17/ColE1 è stato coltivato nelle stesse condizioni, ma senza ampicillina. Le colture risultanti contenevano circa 10 o cellule batteriche per ml. Quindi 10 µl (10 6) della corrispondente coltura batterica sono stati aggiunti a provette con 10 ml di LB (senza aggiunta di antibiotico). La sospensione risultante è stata coltivata come descritto sopra. Con questa coltivazione le cellule batteriche sono riuscite a subire 10 divisioni. Ripetendo questa operazione 10 volte, abbiamo ottenuto una coltura batterica che aveva attraversato 100 generazioni dal primo inoculo in un terreno privo di agente selettivo. Prima di ogni inoculazione, sono stati prelevati campioni di colture batteriche e testati per la resistenza all'ampicillina e la produzione di colicina. Per fare ciò, le sospensioni cellulari sono state piastrate su piastre LA fino all'ottenimento delle singole colonie. Quindi, 100 colonie di ciascun ceppo sono state testate per verificarne la capacità di crescere sullo stesso terreno in presenza di ampicillina (100 μg/ml). Inoltre, è stata testata la capacità delle colonie di produrre colicina E1. A tale scopo è stato utilizzato un test con l'applicazione di top agar (Miller J. "Experiments in molecolare genetics", M., "Mir", 1976, pp. 183-189). Il test è il seguente: le colonie test vengono seminate su piastre con un terreno nutritivo solido contenente l'1,6% di agar utilizzando un replicatore o uno stuzzicadenti. Le piastre vengono incubate a 37 oC per 3-4 ore, la produzione di colicina viene indotta mediante irradiazione ultravioletta per 4-5 secondi e incubate nelle stesse condizioni durante la notte. Le cellule vengono quindi lisate con vapore di cloroformio a temperatura ambiente per 30-40 minuti. È importante assicurarsi che nella fase successiva tutto il cloroformio sia evaporato dalla tazza. Strato 3 - 5 ml di agar semiliquido (0,7%) contenente 10 7 /ml di cellule batteriche del ceppo di prova E. coli (sensibile alla colicina E1) sullo strato inferiore dell'agar. Incubare per una notte a 37 o C. Viene registrata la presenza di zone schiarite nello strato di coltura in esame attorno alle macchie dei ceppi studiati. I risultati dello studio della stabilità del ceppo di Escherichia coli costruito M17/pColap sono mostrati in Fig. 2 (ColE1 corrisponde al ceppo M17/ColE1, pBR322 al ceppo M17/pBR322, pColap al ceppo M17/pColap). La presenza di un plasmide in una cellula batterica deriva dalla conservazione delle sue proprietà originali (colicinogenicità e/o resistenza all'ampicillina). I risultati dell’esperimento (Fig. 2) indicano che il plasmide pBR322, privo del cer locus, viene rapidamente eliminato dalla popolazione batterica se coltivato in un ambiente privo di antibiotici, mentre gli altri due plasmidi (l’originale ColE1 e il ricombinante pColap ) vengono ereditati stabilmente dalle cellule in queste condizioni. Questa proprietà è uno degli importanti vantaggi del nostro progetto poiché, da un lato, facilita la produzione di un farmaco standard basato su un ceppo contenente pColap e, dall'altro, garantisce che quando il farmaco viene assunto da un ceppo paziente senza concomitante terapia antibiotica, il plasmide non verrà eliminato. Applicabilità industriale. La descrizione fornita del metodo per costruire il ceppo brevettato di Escherichia coli M17 rimH::kan/pColap è sufficiente per ottenere nuovamente il ceppo utilizzando metodi, reagenti e apparecchiature standard utilizzati nella ricerca di ingegneria genetica.

    Reclamo

    Ceppo batterico di Escherichia coli M 17 fim H::kan/p Colap VKPM B-7448, utilizzato per ottenere un preparato probiotico.

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    L'invenzione riguarda la biotecnologia, in particolare l'ingegneria genetica e la medicina, in particolare la virologia medica e l'immunologia, e può essere utilizzata per l'immunodiagnosi della febbre emorragica di Marburg, nonché per ottenere anticorpi specifici contro il virus di Marburg e vaccini geneticamente modificati contro la febbre di Marburg virus

    Il caso si è diffuso in Germania dalla settimana scorsa e giovedì sera un'altra donna è stata contagiata, ha detto un portavoce dell'ospedale universitario Eppendorf di Amburgo, citato dal canale televisivo N-24. L'infezione in Germania è stata causata dal cosiddetto batterio enteroemorragico Escherichia coli (Escherichia coli).

    Il batterio Escherichia coli (E. coli) è stato riconosciuto come un problema di salute pubblica dal 1982, a seguito di un’epidemia negli Stati Uniti.

    L'E. coli si trova spesso nell'intestino degli esseri umani e degli animali a sangue caldo. La maggior parte dei ceppi di E. coli sono innocui. Tuttavia, alcuni ceppi, come l’E. coli enteroemorragico (EHEC), possono causare gravi malattie di origine alimentare. Questo batterio si trasmette all'uomo principalmente attraverso il consumo di alimenti contaminati, come carni crude o poco cotte o latte crudo.

    L'EHEC produce tossine conosciute come verotossine o tossine Shiga, così chiamate per la loro somiglianza con le tossine prodotte dai batteri della dissenteria Shigella.

    Il numero di batteri EHEC può aumentare a temperature comprese tra +7 e +50°C (temperatura ottimale +37°C). Alcuni batteri EHEC possono aumentare negli alimenti acidi.

    I batteri vengono uccisi mediante una cottura accurata dei prodotti, ovvero riscaldando tutte le parti del prodotto a una temperatura di 70°C o superiore.

    Malattie causate da EHEC

    I sintomi delle malattie causate dai batteri EHEC comprendono crampi addominali (spasmi della muscolatura liscia degli organi addominali) e diarrea, che in alcuni casi può diventare diarrea con sangue (colite emorragica). Sono possibili febbre e vomito.

    Il periodo di incubazione dura dai tre agli otto giorni, con una durata media di tre o quattro giorni. La maggior parte dei pazienti guarisce entro 10 giorni, ma in un piccolo numero di pazienti (soprattutto bambini piccoli e anziani) la malattia può diventare grave e pericolosa per la vita: sindrome emolitica uremica (SEU). La SEU è caratterizzata da insufficienza renale acuta, anemia emolitica (anemia in cui la distruzione dei globuli rossi (eritrociti) avviene più velocemente della loro produzione da parte del midollo osseo) e trombocitopenia (una diminuzione del numero di piastrine - meno di 200 mila al 1 mm cubi - nel sangue periferico).

    Si stima che il 10% dei pazienti con infezione da EHEC possa sviluppare SEU, con un tasso di mortalità compreso tra il 3 e il 5%. In tutto il mondo, la SEU è la causa più comune di insufficienza renale acuta nei bambini piccoli. Può portare a complicazioni neurologiche (come convulsioni, ictus e coma) nel 25% dei pazienti e a malattia renale cronica, solitamente lieve, in circa il 50% dei pazienti sopravvissuti.

    L’incidenza delle infezioni da EHEC varia in base alla fascia di età. Il maggior numero di casi segnalati di malattia si verifica nei bambini sotto i 15 anni di età. Il 63-85% dei casi di malattia si verifica a seguito dell'esposizione a microrganismi patogeni contenuti nei prodotti alimentari. La percentuale di infezioni da EHEC che portano allo sviluppo della SEU è del 3-7% nei casi sporadici e del 20% o più nelle epidemie.

    Fonti di infezione

    Il serbatoio di questo microrganismo patogeno è costituito principalmente dai bovini e da altri ruminanti, come i cammelli. Si trasmette agli esseri umani principalmente attraverso il consumo di alimenti contaminati, come carni crude o poco cotte e latte crudo.

    Anche la contaminazione fecale dell’acqua e di altri prodotti alimentari, nonché la contaminazione incrociata durante la preparazione del cibo (attraverso carne bovina e altri prodotti a base di carne, superfici di lavoro e utensili da cucina contaminati) possono portare a malattie.

    Un numero crescente di focolai sono associati al consumo di frutta e verdura (germogli, lattuga, cavoli, insalate), che molto probabilmente derivano dal contatto con feci di animali domestici e selvatici in alcune fasi della loro coltivazione o lavorazione. I batteri EHEC sono stati trovati anche in corpi idrici (stagni, fiumi), pozzi e abbeveratoi per il bestiame. Possono rimanere vitali per diversi mesi nel letame che finisce in questi specchi d'acqua e nei sedimenti sul fondo degli abbeveratoi. La trasmissione è stata segnalata sia attraverso l'acqua potabile contaminata che attraverso le acque ricreative.

    I contatti stretti tra le persone rappresentano una delle principali vie di trasmissione dell'infezione (via di infezione oro-fecale). Sono stati segnalati portatori asintomatici, cioè individui che non mostrano sintomi clinici della malattia ma sono capaci di infettare altre persone.

    Il periodo di eliminazione dei batteri EHEC dall’organismo negli adulti dura una settimana o meno. Nei bambini, questo periodo può essere più lungo. Importanti fattori di rischio includono anche la visita alle fattorie e ad altri luoghi in cui sono tenuti animali dove è possibile un contatto diretto con loro.

    Metodi di controllo e prevenzione

    Per prevenire l’infezione, è necessario seguire misure di controllo in tutte le fasi della catena alimentare: dalla produzione agricola nelle aziende agricole alla manipolazione, lavorazione e preparazione degli alimenti sia negli stabilimenti commerciali che a casa.

    Genetika svolge attività di ricerca scientifica nel campo delle biotecnologie microbiche e delle colture cellulari principalmente sotto forma di progetti di ricerca richiesti dall'industria. I nostri risultati sono disponibili sotto forma di brevetti, licenze e know-how. Fin dalla sua fondazione (1968) Genetika è stato uno dei centri di ricerca russi più importanti nel campo della genetica microbica e della biologia molecolare e allo stesso tempo è stato la principale fonte di nuovi ceppi e processi per l'industria biotecnologica russa.

    Le tecnologie sviluppate in Genetika (treonina - 1979, riboflavina - 1991, acrilammide - 2000, fitasi - 2008) sono utilizzate in tutto il mondo dalle principali aziende biotecnologiche. La ricerca di base concessa dal governo e la collaborazione con altre organizzazioni di ricerca russe e internazionali aiutano a colmare il divario tra ricerca applicata e ricerca di base. Una serie di progetti di ricerca interdisciplinari stanno portando avanti lo sviluppo innovativo. Ora Genetika è pronta a perseguire l'implementazione della ricerca innovativa in applicazioni industriali e sociali in tutto il mondo.more

    Nuovo articolo su CELL dei ricercatori Genetika Alex Mironov e Svetlana Eremina.

    L'ossido nitrico batterico prolunga la durata della vita di C. elegans (scarica l'articolo)

    Ivan Gusarov, Laurent Gautier, Olga Smolentseva, Ilya Shamovsky, Svetlana Eremina, Alexander Mironov, Evgeny Nudler.,

    RIASSUNTO L'ossido nitrico (NO) è un'importante molecola di segnalazione negli organismi multicellulari. La maggior parte degli animali produce NO dalla L-arginina attraverso una famiglia di enzimi dedicati noti come NO sintasi (NOS). Una rara eccezione è il nematode Caenorhabditis elegans, che non ha una propria NAS. Tuttavia, nel suo ambiente naturale, C. elegans si nutre di bacilli che possiedono NOS funzionale. Qui, dimostriamo che l'NO di derivazione batterica migliora la longevità e la resistenza allo stress di C. elegans attraverso un gruppo definito di geni che funzionano sotto il doppio controllo dei fattori di trascrizione HSF-1 e DAF-16. Il nostro lavoro fornisce un esempio di segnalazione interspecie tramite una piccola molecola e illustra il valore permanente dei batteri commensali per il loro ospite.

    Nuovo articolo di revisione "Produttori microbici di butanolo" ( Scarica l'articolo)

    O. V. Beresina, N. V. Zakharova, C. V. Yarotsky e V. V. Zverlov

    Riassunto: questa recensione è stata scritta a causa di un crescente interesse per la produzione di vettori energetici e substrati di base dell’industria chimica da risorse naturali rinnovabili. In questa recensione, vengono riflessi gli aspetti microbiologici della produzione di biobutanolo e vengono caratterizzati i produttori microbici di butanolo (sia naturali, cioè membri del genere Clostridium, sia ricombinanti), ottenuti mediante modificazione genetica di Clostridia e altri microrganismi.


    L'Escherichia coli è un microrganismo abbastanza comune che causa numerosi problemi al tratto digestivo, al sistema urinario e riproduttivo negli esseri umani e ha la capacità di essere presente sulla pelle e sulle mucose di vari sistemi corporei come una variante normale.

    L'Escherichia coli (Escherichia coli o E. coli) è un batterio Gram-negativo (non colorato negli strisci con colorazione di Gram), appartenente alla Famiglia delle Enterobacteriaceae, a forma di bastoncello, anaerobio facoltativo (si sviluppa cioè principalmente senza la presenza di ossigeno, ma in determinate condizioni anche quando viene fornito ossigeno non perde la sua vitalità). L'Escherichia coli fu scoperto nel 1885 dal batteriologo tedesco Theodor Escherich. Le aste hanno estremità arrotondate, dimensioni da 0,4 a 3 micron. Alcuni ceppi sono mobili a causa della presenza di flagelli, mentre altri sono immobili.

    La temperatura ottimale di crescita per E. coli è 37°. L'E. coli è abbastanza stabile nell'ambiente esterno; in ambienti come l'acqua, il suolo e le feci rimane vitale per lungo tempo. Hanno la capacità di riprodursi nei prodotti alimentari (ad esempio il latte). Quando viene bollito, muore quasi immediatamente, ad una temperatura di 60º per 15 minuti, i disinfettanti (soluzioni di cloramina, formaldeide, ecc.) Hanno un effetto dannoso su E. coli per un breve periodo.

    Esistono numerosi ceppi (varietà) di Escherichia coli, la maggior parte dei quali sono innocui e in condizioni normali si trovano sulle mucose del tratto digestivo, principalmente nelle sue parti inferiori.

    L'Escherichia coli è normale

    In condizioni normali l'E. coli popola l'intestino umano (ceppi sicuri), la quantità media varia da 10 6 a 10 8 CFU/g di contenuto intestinale distale (CFU - unità formanti colonie). Il contenuto di E.coli nell'altra microflora intestinale non è superiore all'1%. In condizioni normali, l'E. coli prende parte al normale funzionamento dell'intestino, sintetizzando le vitamine K, B1, B2, B3, B5, B6, B9, B12. Una funzione molto importante è l'interazione competitiva con la flora intestinale opportunistica (limitando la proliferazione di microrganismi opportunisti).

    Il ceppo non patogeno Nissle 1917 (Mutaflor) viene utilizzato a scopo medicinale nei bambini come probiotico per la disbiosi intestinale. Nell'intestino sono più utili i cosiddetti E. coli lattosio positivi, il contenuto di quelli lattosio negativi non deve superare le 10 5 CFU/g e l'E. coli emolitico deve essere completamente assente.

    La composizione qualitativa e quantitativa dell'E.coli nell'intestino crasso in persone sane di diverse età, sia nei bambini di età inferiore a un anno che in quelli di età superiore ai 60 anni, non differisce. Per l'E.coli tipico questo è 10 7 -10 8 CFU/g feci, gli E.coli sono lattosio negativi< 10 5 , гемолитические кишечные палочки в норме отсутствуют. Состав остальной флоры кишечника отличается по возрастам по другим параметрам.

    Vengono chiamate deviazioni nel contenuto di ceppi non patogeni di Escherichia coli nell'intestino disbatteriosi e hanno diversi titoli di studio.

    Gradi di disturbi microbiologici di E. coli nella disbiosi intestinale

    1° grado di disturbi microbiologici: Escherichia tipica fino a 10 6 -10 5 CFU/g, è possibile aumentare il contenuto di Escherichia tipica fino a 10 9 - 10 10 CFU/g
    2° grado di disturbi microbiologici: aumento del contenuto di Escherichia emolitica ad una concentrazione di 10 5 -10 7 CFU/g
    3° grado di disturbi microbiologici: rilevamento di E.coli in associazione con altri microrganismi opportunisti ad una concentrazione di 10 6 -10 7 CFU/g e superiore

    Escherichia coli patogeno

    Esistono più di 100 ceppi di E. coli patogeni, raggruppati in 4 classi:
    - E. Coli enteropatogeno (ETEC);
    - E. coli enterotossigenico;
    - E. coli enteroinvasivo (EIEC);
    - E.coli enteroemorragico (EHEC).

    Morfologicamente non sono diversi. Una caratteristica dei ceppi patogeni è la capacità, quando entrano nel corpo umano, di produrre enterotossine (termostabili o resistenti alle alte temperature e termolabili o rapidamente degradanti), a causa delle quali si verifica la diarrea. Ad esempio, E. coli O157:H7, che produce tossine simili. Inoltre, ogni gruppo ha le proprie caratteristiche dei sintomi della malattia.

    Danni al tratto gastrointestinale da Escherichia coli

    Escherichiosi– malattie derivanti dall’ingestione di ceppi patogeni di Escherichia coli nel corpo, caratterizzate da intossicazione e danni principalmente al tratto gastrointestinale, ma talvolta colpiscono il sistema urinario, le vie biliari e altri organi con possibilità di sepsi in alcuni pazienti.

    Il meccanismo di infezione è nutrizionale, la via oro-fecale. I fattori di trasmissione includono acqua e cibo contaminati. Si ammalano soprattutto i bambini piccoli.

    Il periodo di incubazione (dal momento dell'infezione fino alla comparsa del quadro clinico) è molto spesso compreso tra 48 e 72 ore (meno spesso ridotto a 1 giorno o esteso a 10 giorni).

    Escherichiosi causata da Escherichia coli enteropatogeno: Sono colpiti più spesso i neonati e i bambini del primo anno di vita. Causano diarrea negli ospedali di maternità. Nei pazienti giovani, vomito o rigurgito, frequenti feci molli senza impurità patologiche (sangue), forti dolori addominali, irrequietezza del bambino, rifiuto di mangiare, sonno disturbato.

    Escherichiosi causata da Escherichia coli enterotossigenico: Questi ceppi hanno la capacità di attaccarsi alle cellule epiteliali intestinali, compromettendone significativamente la funzione e provocando una grave diarrea acquosa. Spesso si manifesta anche nei bambini, negli adulti e con la cosiddetta “diarrea del viaggiatore”. I pazienti presentano feci acquose, senza sangue, vomito e dolore addominale.

    Escherichiosi causata da Escherichia coli enteroemorragico: provoca colite emorragica, nei casi gravi manifestazioni di sindrome emolitico-uremica (SEU). A colite emorragica I pazienti hanno una temperatura elevata fino a 39-39,5º, sintomi di intossicazione, crampi (o crampi) dolori addominali, nonché la comparsa di feci acquose miste a sangue. Le complicanze possono includere lo sviluppo di anemia emolitica, insufficienza renale acuta e sindrome emorragica.
    Sindrome emolitico-uremica (SEU)- una sindrome specifica caratterizzata da una triade di sintomi: anemia emolitica, insufficienza renale acuta e calo critico della conta piastrinica. Si verifica più spesso nei bambini di età compresa tra 6 mesi e 4 anni, così come nei pazienti anziani. Nel 90% dei casi si verifica nelle infezioni intestinali (E.coli produttore di verotossina, Shigelle e altre). Il motivo è il danno alle cellule endoteliali vascolari. Si verifica in media una settimana dopo l'infezione. Clinicamente possono comparire ittero color limone, alterato deflusso delle urine, gonfiore, emorragie sulla pelle e altre manifestazioni gravi. Tuttavia, quando compaiono questi sintomi, possiamo parlare di un quadro clinico dettagliato della SEU. I suoi primi segni sono gli esami di laboratorio: la comparsa di proteine ​​nelle urine - proteinuria, la comparsa di globuli rossi nelle urine - eritrocituria, un aumento della creatinina sierica, nonché una diminuzione dei globuli rossi e dell'emoglobina nel sangue.

    Escherichiosi causata da Escherichia coli enteroinvasivo: in termini di proprietà biochimiche, gli E. coli enteroinvasivi sono simili alla Shigella, l'agente eziologico della dissenteria; in particolare hanno la capacità di penetrare nelle cellule epiteliali di una certa parte dell'intestino (colon) e di moltiplicarsi lì. Ciò spiega la comparsa di alcuni sintomi con tale escherichiosi: dolore nella regione iliaca sinistra (addome inferiore sinistro), feci abbondanti e acquose miste a sangue. A differenza della dissenteria, più spesso si tratta ancora di feci acquose e non povere di muco e sangue (come nella shigellosi).
    Riassumendo quanto sopra, è chiaro che non esiste un quadro specifico dell'escherichiosi; i reclami dei pazienti possono essere diversi: febbre, vomito, feci acquose senza impurità e con sangue, dolori addominali dolorosi di diversa localizzazione.

    Infezione da Escherichia coli delle vie urinarie

    Il meccanismo dell'infezione è spesso associato all'ingresso diretto di E. coli dall'intestino crasso a causa di inosservanza o insufficiente igiene personale, nonché attraverso l'uso di metodi non convenzionali di contatto sessuale (uso del sesso anale).

    Fino all'80-85% delle infezioni del tratto urinario sono dovute a E. coli. Più del 60% dei processi acuti durante l'infiammazione della prostata sono associati a questo agente patogeno. La stragrande maggioranza delle prostatiti croniche è associata a E. coli.

    Le forme cliniche di danno al sistema urinario sono diverse. Questi possono essere uretrite, cistite, pielonefrite, prostatite.

    Infezione da Escherichia coli del sistema riproduttivo

    La maggior parte dei processi infiammatori nell'epididimo (epididimite), l'infiammazione del testicolo (orchite), così come le loro lesioni combinate, l'infiammazione delle ovaie (annessite) sono specificamente associati all'E. coli.

    Diagnosi delle infezioni causate da Escherichia coli

    1) Metodo batteriologico– semina di materiale biologico su speciali terreni nutritivi. Il materiale utilizzato per le infezioni intestinali sono le feci e il vomito, per le infezioni del sistema urinario - l'urina, per le infezioni del sistema riproduttivo - strisci e raschiature dalle mucose degli organi genitali. Dopo aver identificato l'agente patogeno, si esegue un antibiogramma (determinazione della sensibilità agli antibiotici).
    Se il contenuto di E. coli nelle feci è anormale, viene diagnosticato un certo grado di disturbi microbiologici (disbatteriosi) o vengono rilevati ceppi patogeni di E. coli. La presenza di E.coli nelle urine è chiamata batteriuria. In assenza di sintomi, la diagnosi viene posta quando i microrganismi compaiono in quantità pari o superiori a 10 5 CFU/ml di urina. Se il loro numero è inferiore, questo è considerato un segno di contaminazione (contaminazione delle urine durante la raccolta). Se i sintomi della malattia sono chiaramente espressi, sono sufficienti 10 2 -10 4 CFU/ml di urina.

    2) Metodi generali di ricerca clinica(coprogramma, analisi generale delle urine, del sangue, analisi del sangue biochimiche e altri) sono aggiuntivi.
    3) Metodi di ricerca strumentale(sigmoidoscopia, urografia, ecografia e altri).

    Principi generali per il trattamento delle infezioni da E. coli

    1. Misure organizzative e di regime (ospedalizzazione per indicazioni cliniche), regime dietetico in base al danno a determinati sistemi corporei (tabella n. 4 per danno intestinale, tabella n. 7 per danno al sistema genito-urinario).

    2. La terapia farmacologica comprende la terapia etiotropica (antibiotici, batteriofagi), la terapia patogenetica (solitamente terapia infusionale) e la terapia sindromica.

    Terapia antibatterica deve essere effettuata tenendo conto dell'antibiogramma dell'Escherichia coli isolato. Più spesso, viene rilevata la sensibilità di E. coli ai farmaci del gruppo dei fluorochinoloni (ciprofloxacina, levofloxacina), amoxicillina, nitrofurani e altri. Il farmaco stesso, la sua dose e la durata del ciclo di trattamento sono prescritti solo da un medico. L'automedicazione per prevenire lo sviluppo della resistenza dell'E. coli agli antibiotici è inaccettabile!

    Inoltre, i batteriofagi (usati per il danno intestinale) sono abbastanza efficaci contro l'E. coli: si tratta del batteriofago coli liquido, dell'intestibatteriofago, del batteriofago coliproteico, del piobatteriofago liquido combinato, del piobatteriofago liquido combinato polivalente e altri.

    Ceppi di Escherichia coli appositamente ottenuti sono inclusi in alcuni farmaci utilizzati per la disbatteriosi con mancanza di Escherichia coli nell'intestino (Helak Forte, Bificol, Colibacterin). Inoltre, per la disbatteriosi con crescita eccessiva di E. coli, vengono prescritti probiotici (Linnex, Acipol, Acylact, Lactobacterin, Bifiform, Bifistim e altri).

    Terapia patogenetica si riduce alla terapia per infusione - introducendo varie soluzioni di un certo volume e concentrazione nel flusso sanguigno allo scopo di disintossicarsi e reintegrare le perdite di liquidi in caso di danno al tratto gastrointestinale, nonché di disintossicazione del corpo in caso di rene danno.

    Terapia sindromica prescritto da un medico individualmente a seconda della sindrome principale della malattia.

    Peculiarità del trattamento per bambini e donne incinte: in questi gruppi di pazienti i regimi di trattamento iniziano con l'uso di bibatteriofagi e probiotici e solo se questi farmaci sono inefficaci vengono prescritti farmaci antibatterici, tenendo conto dell'età e del grado di danno.

    Prevenzione delle infezioni causate da E. coli

    In primo luogo nella prevenzione c'è l'osservanza dell'igiene personale e delle regole di lavorazione termica e conservazione degli alimenti, il lavaggio di frutta e verdura, nonché l'evitamento del consumo di acqua da fonti sconosciute.

    Dottore in malattie infettive N.I. Bykova





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