Оценка результатов бактериологического исследования. Условия для размножения микроорганизмов

Для получения достоверного результата анализ должен проводиться не менее чем через 2 недели после последнего приема антибиотиков и (или) антибактериальных препаратов.

• Соскоб из уретры рекомендуется сдавать через 2 часа после последнего мочеиспускания, из зева и носоглотки – натощак (через 4-5 часов после последнего приема пищи, при этом необходимо исключить чистку зубов и полоскание рта), для других локусов специальной подготовки не требуется.
• Моча. Исследованию подлежит средняя порция свободно выпущенной мочи, в количестве 3-5 мл в стерильный пластиковый одноразовый контейнер (контейнер можно получить в регистратуре) после тщательного туалета наружных половых органов без применения антисептиков. Срок доставки в лабораторию при комнатной температуре – 1-2часа, при температуре 2-8°С – 5-6 часов.
• Сперма для бактериологического исследования собирается в стерильный пластиковый одноразовый контейнер с широким горлом путем мастурбации (контейнер можно получить в регистратуре). Срок доставки материала в лабораторию при комнатной температуре в течение 1-2 часов.
• Мокроту рекомендуется собирать с утра, натощак после санации ротовой полости, в стерильную пластиковую посуду. Срок доставки материала в лабораторию при комнатной температуре в течение 1-2 часов, при температуре 2-8°С – 5-6 часов.
• Забор секрета предстательной железы осуществляет врач-уролог, после предварительного массажа простаты (данная манипуляция выполняется только в Центральном офисе). Перед забором секрета предстательной железы рекомендуется половое воздержание в течение не менее 2-х дней.
• Бактериологическое исследование грудного молока . Забор грудного молока проводится только до кормления ребенка или через два часа после его кормления грудью. Обследуемая пациентка обмывает левую и правую грудную железу теплой водой с мылом и насухо вытирает чистым полотенцем. Поверхность сосков и кончики пальцев обрабатывает ваткой, умеренно смоченной 70 % этиловым спиртом. Первая порция грудного молока, приблизительно в количестве 0,5 мл, сбрасывается. Затем, не касаясь соска руками, женщина сцеживает 0,5 – 1 мл молока из каждой железы в отдельный стерильный контейнер (контейнеры можно получить в регистратуре). Сроки доставки в лабораторию при комнатной температуре – 1-2 часа, при температуре 2-8°С – 5-6 часов.
• Забор синовиальной жидкости для бактериологического исследования осуществляется врачом в стерильную пластиковую посуду (контейнер можно получить в регистратуре). В условиях лаборатории эта процедура не выполняется. Срок доставки материала в лабораторию при комнатной температуре в течение 1-2 часов, при температуре 2-8°С – 5-6 часов.
• Забор раневого отделяемого для бактериологического исследования осуществляется врачом, в одноразовый контейнер со средой Эймса (контейнер можно получить в регистратуре). Срок доставки материала в лабораторию при комнатной температуре в течение 6 часов, при температуре 2-8°С – до 2 суток.
• Желчь для бактериологического исследования собирается при зондировании, отдельно, по порциям А, В и С в три стерильные пробирки, либо во время операции с помощью шприца в одну пробирку, соблюдая правила асептики (в лаборатории эта процедура не выполняется). Срок доставки материала в лабораторию при комнатной температуре в течение 1-2 часов, при температуре 2-8°С – 5-6 часов.

Ни для кого не секрет, что в нашем кишечнике обитает большое число различных микроорганизмов. Все они, согласно своим свойствам, делятся на 3 группы:

• «полезные» (бифидобактерии, лактобактерии);
• условно-патогенные (грибы, энтеробактерии);
• патогенные («вредные» — , шигеллы).

«Полезные» жители кишечника принимают активное участие в процессе переваривания пищи, способствуют насыщению организма полезными микроэлементами, витаминами. Условно-патогенные организмы занимают нейтральную позицию, не являясь в полной мере ни «полезными», ни «вредными». Однако при нарушение природного бактериального баланса организма () они могут запросто «перейти на сторону зла» и стать патогенными.

Изначально патогенных микроорганизмов (сальмонелл, шигелл) в кишечнике здорового человека быть не должно. Их появление сразу же вызывает острые кишечные инфекции, выявить и лечить которые поможет бак исследование кала.

Бактериологический анализ кала - это лабораторное исследование фекалий человека, которое проводят путем помещения биоматериала в питательную среду с целью определения содержания в кишечнике набора «вредных», условно-патогенных микроорганизмов, стандартной «полезной» микрофлоры. Пациента направляют на бак анализ кала, если у него проявляются симптомы дисбактериоза и заболеваний кишечными инфекциями.

Причин развития в организме человека «вредных» микроорганизмов может быть множество. Одна из самых основных - это несоблюдение элементарных правил личной и пищевой гигиены , а именно:

1. употребление в пищу немытых овощей и фруктов;
2. пренебрежение мытьем рук перед едой;
3. употребление пищи из грязной посуды;
4. использование в качестве питья сырой воды (молока);
5. недостаточная термическая обработка мясных продуктов;
6. пренебрежение уборкой в доме.

Тем не менее, чтобы нарушить природный бактериальный баланс организма, вовсе не обязательно быть откровенным неряхой. Как уже говорилось ранее, чтобы условно-патогенные микроорганизмы, населяющие наш кишечник, перешли в разряд патогенных, достаточно:

• постоянно испытывать стресс;
• перегружать себя физически;
• переехать в неподходящую для вас климатическую зону.

Можно еще невольно стать носителем опасных кишечных инфекций, ничего при это не подозревая. Бывает, что патогенные микроорганизмы населяют кишечник человека, однако тот не наблюдает у себя никаких конкретных симптомов заболеваний кишечными инфекциями, к примеру, таких:

1. повышенная температура;
2. ломота в теле;
3. рвота;
4. боли в животе;
5. понос;
6. отсутствие аппетита;
7. неприятный запах изо рта.

Когда пациент приходит к терапевту с жалобой на вышеописанные симптомы, тот направляет его на бактериологическое исследование кала. Дальнейшее лечение определяет более узкий специалист - гастроэнтеролог или же инфекционист .

Правила сдачи анализа

Чтобы получить достоверный результат бактериального анализа кала, необходимо строго придерживаться правил забора биоматериала. Итак, чтобы правильно сдать бак анализ необходимо за 2-3 дня до сдачи материала в лабораторию прекратить использование ректальных свечей, вазелинового, касторового масла, слабительных препаратов, лекарственных препаратов с содержанием железа, висмута.

Посуда для сдачи кала на бакпосев должна быть стерильной. Лучше всего подойдет специальная емкость с крышкой и палочкой для забора кала, которую можно приобрести в аптеке. Поскольку для получения достоверных результатов бактериологического исследования кала на кишечные инфекции нужна стерильность емкости, лучше не открывать лишний раз баночку для забора биоматериала, не касаться ее внутренней поверхности руками.

Акт дефекации должен происходить естественным путем (категорически запрещается использование слабительных препаратов, ректальных свечей, клизмы). Перед забором материала на анализ, необходимо помочиться в унитаз, поскольку результат не будет достоверным, если в емкость для кала попадет моча. Дефекация производится в чистое судно (не в унитаз). Затем при помощи специальной палочки, которая идет в комплекте с контейнером, собирается кал, его помещаем в емкость для сбора кала на баканализ. Объем материала не должен превышать треть контейнера (2 чайных ложки).

Емкость с биоматериалом нужно доставить в лабораторию в максимально короткие сроки. Если доставить сразу же не получается, то собранный материал можно поставить в холодильник на срок до 8 часов .

Биоматериал на бакпосев кала у грудничка можно собрать с чистой пеленки или белья ребенка. Кал с подгузника лучше не сдавать, поскольку анализ может дать неверный результат.

Иногда берется ректальный мазок на дизгруппу. В таком случае все манипуляции по забору материала на анализ совершает медсестра. Пациент ложится на бок и раздвигает ягодицы, а медсестра с помощью специального ректального тампона собирает материал для бактериологического исследование кала на дисбактериоз.

Ждать результатов приходится в среднем 1 неделю. Срок годности анализа на дизгруппу отсчитывается от дня получения результатов исследований и составляет 10 дней.

Как проходит исследование

Бак анализы — это комплексные исследования кала пациента на предмет выявления патогенных организмов в кишечнике, диагностики дисбактериоза. Он проводится с использованием таких методов исследования:

• микробиологических;
• биологических;
• серологических.

Микробиологический метод позволит увидеть с помощью микроскопа возбудителей болезни — патогенные бактерии. Однако этот метод будет осуществим только на 7-й день после заражения.

Посев на кишечную группу проводится таким образом: кал помещают в такую среду, которая наиболее подойдет для роста и развития вредоносных микроорганизмов. Через некоторое время (5-7 дней ) можно определить вид микроорганизмов по выросшим за этот период колониям.

Анализ на дизгруппу показывает, находятся ли в кале пациента такие патогенные микроорганизмы, как сальмонелла или шигелла. Если таковые присутствуют, то осуществляется еще одно исследование - на чувствительность данных болезнетворных организмов к определенным антибиотикам.

Если возбудители заболеваний погибают, то пациенту назначают соответствующий препарат. Посев на дизгруппу – это то, что позволит вовремя выявить опасные заболевания и начать соответствующее лечение.

Расшифровка результатов

Таблица нормальных показателей бак анализа

Бактероиды - это грамотрицательные бактерии, населяющие кишечник человека. Состав бактероидов в кале здорового человека обычно не превышает

Бифидобактерии играют очень важную роль во всех процессах, которые происходят в ЖКТ. Они синтезируют витамины группы В и К, благодаря им организм лучше усваивает витамин D. Также бифидобактерии способствуют укреплению иммунной системы человека. Содержание бифидобактерий (норма) - 109-10 КОЕ\г.

Обычно бак анализ определяет количественное соотношение «полезных» и условно-патогенных микроорганизмов в кишечнике человека. Если пациент здоров, то патогенных бактерий быть не должно.

Лактобактерии живут во рту и кишечнике человека. У женщин лактобактерии обитают и во влагалище. Основная их функция - бактерицидная. Дело в том, что в кислой среде этих культур микробы не способны выжить. Всем известна способность лактобактерий квасить молоко. Именно с их помощью изготавливают кефиры, йогурты, ряженку. Кроме того, лактобактерии являются активными катализаторами фагоцитоза (уничтожение фагоцитами вредоносных вирусов и бактерий).

Классификация

Бак анализы способны помочь врачу диагностировать не только желудочно-кишечные инфекции, но и другие заболевания. Например, бак анализы от гино () могут диагностировать у женщин. Как уже упоминалось ранее, лактобактерии живут не только в кишечнике, но и во влагалище у женщин в определенном количестве. Нарушение соотношения условно-патогенных, патогенных и «полезных» бактерий может спровоцировать такое заболевание, как бактериальный вагиноз.

Врач может назначить на дизгруппу, если симптомы пациента указывают на заражение крови. Показания для бак анализа крови:

1. повышенная температура (долгое время);
2. подозрения на инфекционные заболевания.

Обычно анализ на бакпосев крови сдают до начала курса терапии антибиотиками, поскольку после употребления антибиотиков нельзя надеяться на достоверный результат исследований.

Влияние различных факторов на результаты лабораторных исследований

Лабораторные исследования зачастую служат более чувствительными показателями состояния человека, чем его самочувствие. Результаты анализов отражают физико-химические свойства исследуемой пробы и дают объективную диагностическую информацию в цифровом выражении. Важные решения о стратегии ведения пациента часто основаны на небольших изменениях лабораторных данных. Именно поэтому роль лабораторных тестов, а также спектр и количество проводимых исследований, необходимых в процессе диагностики и лечения заболеваний, постоянно возрастает. Однако из практики работы любой диагностической лаборатории известно, что получаемые ими результаты далеко не всегда являются правильными. Это связано с наличием большого количества непатологических факторов, способных оказывать влияние на конечные результаты лабораторных данных.

Как показывает наш опыт работы, основное количество получаемых неудовлетворительных результатов связано с ошибками, допущенными в ходе проведения анализа. Появление случайных и систематических ошибок на любой стадии анализа будет снижать достоверность лабораторных результатов и, как следствие, затруднит постановку правильного диагноза и проведение адекватного лечения.

ПРЕАНАЛИТИЧЕСКИЙ (ДОЛАБОРАТОРНЫЙ) ЭТАП включает в себя все стадии от назначения анализа клиницистом до поступления пробы в лабораторию на рабочее место, а именно: назначение анализа, взятие биологического материала, его обработку и доставку в лабораторию. Ошибки, возникающие на внелабораторном этапе анализа, составляют от 70% до 95% от общего их числа. Именно они могут оказаться непоправимыми и полностью обесценить весь ход проводимых исследований.

Поэтому правильная организация преаналитического этапа должна стать составной частью любой системы обеспечения качества лабораторного анализа.

При получении, обработке и доставке образцов в лабораторию следует иметь в виду следующие факторы, которые могут быть как устранимыми, так и неустранимыми. Результаты лабораторных исследований подвержены влиянию биологи­ческой и аналитической вариации. Если аналитическая вариация зависит от условий выполнения теста, то величина биологической вариации - от целого комплекса факторов. Общая биологическая вариация исследуемых показателей обусловлена внутрииндивидуальной вариацией, наблюдаемой у одного и того же человека в результате влияния биологических ритмов (разное время дня, года), и межиндивидуальной вариацией, вызванной как эндогенными, так и экзогенными факторами.

Факторы биологической вариации (физиологические факторы, факторы среды, условия взятия пробы, токсичные и терапевтические факторы) мо­гут оказать влияние на результаты лабораторных исследований. Часть из них способна вызывать реальные отклонения лабораторных результатов от референтных значений вне связи с патологическим процессом. К таким факторам относят:

• Физиологические закономерности (влияние расы, пола, возраста, типа сложения, характера и объёма привычной активности, питания);
• Влияние окружающей среды (климат, геомагнитные факторы, время года и суток, состав воды и почвы в зоне обитания, социально-бытовая среда);
• Воздействие профессиональных и бытовых токсичных средств (алко­голь, никотин, наркотики) и ятрогенные влияния (диагностические и лечебные процедуры, лекарственные средства);
• Условия взятия пробы (приём пищи, физическая нагрузка, положение тела, стресс во время взятия пробы и др.);
• Методика взятия крови (способ взятия, средства и посуда, консерван­ты и т.д.);
• Неправильный (по времени) забор материала;
• Условия (температура, встряхивание, влияние света) и время транспортировки биоматериала на исследования в лабораторию.

Рассмотрим влияние наиболее важных факторов на результаты лабора­торных анализов.

ПРИЕМ ПИЩИ

Режим питания, состав принимаемой пищи, перерывы в её приёме оказывают существенное влияние на ряд показателей лаборатор­ных исследований. После приема пищи содержание отдельных продуктов обмена в кро­ви может повышаться или подвергаться изменениям в результате постабсорбционных гормональных эффектов. Определение других аналитов может затрудняться вследствие мутности, вызванной хиломикронемией в послеобеденных пробах крови.

После 48 часов голодания может увеличиваться концентра­ция билирубина в крови. Голодание в течение 72 часов снижает концентрацию глюкозы в крови у здоровых людей до 2,5 ммоль/л, увеличивает концентрацию триглицеридов, свободных жирных кислот без значитель­ных изменений концентрации холестерина. Длительное голодание (2 – 4 недели) также способно влиять на ряд лабораторных показателей. Концентрация общего белка, холестерина, триглицеридов, мочевины, липопротеинов в крови снижается; выведение креатинина и мочевой кислоты почками с мочой повышается. Длительное голодание тесно связано со снижением расхода энергии. Вследствие этого в крови снижается концентрация гормонов щитовидной железы – общего тироксина и еще в большей степени трийодтиронина. Голодание также приводит к увеличению содержания в пробах сыворотки крови кортизола и сульфата дегидроэпиандростерона.

Употребление жирной пищи может повысить концентрацию калия, триглицеридов и щелочной фосфатазы. Активность щелочной фосфатазы в таких случаях может особенно увеличиваться у людей с О- или В-группой крови.

Физиологические изменения после употребления жирной пище в виде гиперхиломикронемии могут увеличивать мутность сыворотки (плазмы) крови и тем самым влиять на результаты измерения оптической плотности. Повышение концентрации липидов в сыворотке крови может быть после употребления пациентом масла, крема или сыра, что приведёт к ложным результатам и потребует повторного анализа.

Определенные виды пищи и режимы питания могут влиять на ряд показателей сыворотки крови и мочи. Потребление большого количества мяса, то есть пищи с высоким со­держанием белка, может увеличить концентрации мочевины и аммиака в сыворотке крови, количества уратов (солей кальция) в моче. Пища с высоким отношением нена­сыщенных жирных кислот к насыщенным может вызвать снижение кон­центрации холестерина в сыворотке крови, а мясная пища вызывает увеличение концентрации уратов. Бананы, ананасы, томаты, авокадо бога­ты серотонином. При их употреблении за 3 дня до исследования мочи на 5-оксииндолуксусную кислоту даже у здорового человека её концентрация может быть повышенной. Напитки, богатые кофеином, увеличивают кон­центрацию свободных жирных кислот и вызывают выход катехоламинов из надпочечников и мозга (концентрация катехоламинов в сыворотке крови повышается). Кофеин способен повышать активность плазматического ренина. Приём алкоголя увеличивает в крови концентрацию лактата, мочевой кислоты и триглицеридов. Повышенное содержание общего холестерина, мочевой кислоты, гамма-глутамилтранспептидазы и увеличение среднего объема эритроцитов может быть связано с хроническим алкоголизмом.

Бессолевая диета может приводить к повышению уровня альдостерона в 3-5 раз. Концентрация билирубина после 48-часового голодания может повыситься в 2 раза, после еды – снижается на 20–25%; изменения уровня билирубина в течение суток могут достигать 15–30%.

ФИЗИЧЕСКИЕ УПРАЖНЕНИЯ

Состояние физической активности обследуемого оказывает большое влияние на результаты.

Физическая нагрузка может оказывать как пре­ходящее, так и длительное влияние на различные параметры гомеостаза. Преходящие изменения включают в себя вначале снижение, а затем уве­личение концентрации свободных жирных кислот в крови, повышение на 180% концентрации аммиака и на 300% - лактата, увеличение активности креатинкиназы, ACT, ЛДГ. Физические упражнения влияют на показатели гемостаза: активируют свертывание крови и функциональную активность тромбоцитов. Изменения указанных показателей связаны с актива­цией метаболизма и они обычно возвращаются к исходным (до физической нагрузки) значениям вскоре после прекращения физической деятельности. Тем не менее, активность некоторых ферментов (альдолаза, КК, ACT, ЛДГ) может оставаться повышенной в течение 24 ч после 1одночасовой интенсив­ной физической нагрузки. Длительная физическая нагрузка увеличивает концентрацию в крови половых гормонов, включая тестостерон, андростендион и лютеинизирующий гормон (ЛГ).

При длительном строгом постельном режиме и ограничении физической активности повышается экскреция с мочой норадреналина, кальция, хлора, фосфатов, аммиака, активность щелочной фосфатазы в сыворотке крови.

ЭМОЦИОНАЛЬНЫЙ СТРЕСС

Влияние психического стресса (страх перед взятием крови, перед операцией и т.д.) на результаты лабораторных тестов часто недооценивается. Между тем под его влиянием возможны преходящий лейкоцитоз; сни­жение концентрации железа; увеличение уровня катехоламинов, альдостерона, кортизола, пролактина, ангиотензина, ренина, соматотропного гормона, ТТГ и повышение концентрации альбумина, глюкозы, фибриногена, инсулина и холестерина. Сильное беспокойство, сопровождаемое гипервентиляцией, вызывает дис­баланс кислотно-основного состояния (КОС) с увеличением концентра­ции лактата и жирных кислот в крови.

ПОЛ ПАЦИЕНТА

Для целого ряда клинико-химических и гематологических показателей имеются статистически значимые различия между полами. В частности, это относится к уровням стероидных и гликопротеидных гормонов (прогестерон, эстрадиол, тестостерон, 17-ОН прогестерон, ЛГ, ФСГ, пролактин), транспортных белков (ССГ, ТСГ) и других биологически активных соединений (ТГ). В методической литературе имеется обширная информация по этому вопросу, кроме того, ее можно найти в большинстве инструкций по использованию диагностических наборов. Однако следует отметить, что приведенные в литературе референсные интервалы следует рассматривать лишь как ориентировочные. Это связано с наличием конструктивных особенностей наборов от различных фирм-производителей, а также с региональными и расовыми различиями в составе населения. Поэтому в каждой лаборатории рекомендуется установить собственные значения нормальных уровней исследуемых показателей с использованием тех видов наборов, которые регулярно применяются в рутинной практике.

ВОЗРАСТ ПАЦИЕНТА

Концентрация целого спектра аналитов зависит от возраста пациента и может значительно изменяться от момента рождения до старости. Наиболее ярко возрастные изменения выражены для некоторых биохимических показателей (гемоглобин, билирубин, активность щелочной фосфатазы, содержание липопротеинов низкой плотности и др.) а также для ряда аналитов, определяемых иммунохимическими методами. К ним относятся половые стероидные и гликопротеидные гормоны, тиреоиды, АКТГ, альдостерон, ренин, гормон роста (соматотропный), паратгормон, 17-оксипрогестерон, дегидроэпиандростерон, ПСА и др. Желательно, чтобы в каждой лаборатории имелись возрастные нормы для каждого из исследуемых показателей, что позволит более точно интерпретировать полученные результаты.

БЕРЕМЕННОСТЬ

Трактуя результаты лабораторных исследований у беременных, не­обходимо учитывать срок беременности в момент взятия пробы. При физиологической беременности средний объем плазмы возрастает при­мерно от 2600 до 3900 мл, причем в первые 10 недель прирост может быть незначительным, а затем происходит нарастающее увеличение объема к 35-й неделе, когда достигается указанный уровень. Объем мочи также может физиологически увеличиваться до 25% в 3-м триместре. В послед­нем триместре наблюдается 50% физиологическое повышение скорости клубочковой фильтрации.

Беременность является нормальным физиологическим процессом , который сопровождаются значительными изменениями в выработке стероидных, гликопротеидных и тиреоидных гормонов, транспортных белков (ССГ, ТСГ), АКТГ, ренина, а также в целом ряде биохимических и гематологических показателей. Поэтому для правильной интерпретации результатов важно точно указать срок беременности, когда была взята исследуемая проба крови.

При проведении скрининга врожденных пороков развития плода по лабораторным показателям следует иметь в виду, что диагностическая чувствительность и специфичность данного вида исследования в значительной степени будет определяться комбинацией выбранных иммунохимических маркеров. Она должна быть различной на разных стадиях развития плода. Например, для первого триместра беременности наиболее предпочтительным является определение АФП, свободной 6-субъединицы ХГЧ и ассоциированного с беременностью белка А (РАРРА), а для второго триместра - АФП, общего ХГЧ и свободного эстриола. Все указанные виды анализа должны проводиться в строго рекомендуемые сроки беременности, а каждая лаборатория, занимающаяся скрининговыми исследованиями, должна располагать собственной постоянно обновляемой и пополняемой базой медиан уровней исследуемых маркеров для каждой недели беременности.

МЕНСТРУАЛЬНЫЙ ЦИКЛ

Статистически значимые изменения концентрации могут быть выз­ваны колебаниями гормонального фона при менструации. Так, концент­рация альдостерона в плазме определяется в два раза выше перед овуля­цией, чем в фолликулярной фазе. Подобным образом ренин может про­явить предовуляторное повышение.

Менструальный цикл является нормальным физиологическим процессом, который сопровождается значительными изменениями в выработке половых, тиреоидных гормонов, транспортных белков, АКТГ, ренина, а также в целом ряде биохимических и гематологических показателей. Для правильной интерпретации результатов важно точно указать день менструального цикла, когда была взята исследуемая проба крови.

БИОЛОГИЧЕСКИЕ РИТМЫ

Существуют линейные хронобиологические ритмы - например, возраст пациента, циклические ритмы - такие, как циркадные и сезонные, а также другие биологические циклы - например, менструальный цикл.

Циркадные ритмы аналита, т.е. изменения его концентрации в течение суток, наиболее ярко выражены у кортизола, АКТГ, альдостерона, пролактина, ренина, ТТГ, паратгормона, тестостерона и др. Отклонения концентраций от среднесуточных значений могут достигать 50%-400%, и этот фактор обязательно должен приниматься во внимание.

Суточные колебания содержания некоторых аналитов в сыворотке крови

	Максимальная концентрация (время суток)	Минимальная концентрация (время суток)	Амплитуда (% от средней за сутки)
Кортизол
Тестостерон
Пролактин
Альдостерон
Адреналин

Например, циркадный ритм кортизола может являться причиной недостоверных результатов теста на толерантность к глюкозе, если он проводится во второй половине дня.

Для того чтобы не затруднять процесс интерпретации результатов, отбор проб для анализа нужно проводить строго в определенное время суток, обычно между 7:00 и 9:00 часами утра. Следует иметь в виду, что референсные интервалы большинства тестов, приведенных в справочной литературе, установлены именно для этого промежутка времени.

При проведении специальных исследований, например, при установлении индивидуального циркадного ритма секреции гормона, в течение суток берется несколько проб анализируемого материала. В документах, сопровождающих такие образцы, необходимо указать точное время взятия каждого из них.

На циркадный ритм могут накладываться индивидуальные ритмы сна, еды, физической активности, которые не следует путать с действительно суточными колебаниями. Для того, чтобы исключить индивидуальные ритмы при определении уровня аналитов, секретируемых порциями (ренин, вазопрессин, тестостерон, пролактин и др.), можно использовать смешанную пробу, полученную из трех образцов крови, взятых с интервалом в 2-3 часа. В некоторых случаях следует учитывать сезонные влияния. Например, содержание трийодтиронина на 20% ниже летом, чем зимой.

ПРИЕМ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ

Прием может отражаться на количественном содержании в организме целого ряда анализируемых показателей. Например, уровень ТТГ снижается при лечении допамином, концентрация общих и свободных фракций тиреоидных гормонов будет изменяться при введении фуросемида, даназола, амиодарона и салицилатов, а применение некоторых противоязвенных препаратов может повышать уровень пролактина у мужчин.

Присутствие лекарственных препаратов в биологическом материале – например, контрацептивов, салицилатов, андрогенов и др. - может специфическим (перекрестная реакция) или неспецифическим образом (интерференция) влиять на результаты лабораторных исследований при определении концентрации стероидных и тиреоидных гормонов, а также специфических связывающих белков крови. Прием аспиринсодержащих препаратов при определении длительности кровотечения по Дуке должен быть отменен за 7 – 10 дней до исследования. Если этого не сделать, можно получить патологический результат исследования. Поэтому проведение медикаментозной терапии, могущей искажать результаты анализа, следует назначать после взятия проб крови.

При проведении лекарственного мониторинга точное время взятия крови является очень важным параметром для правильной интерпретации результатов исследования.

Широкий спектр лекарственной интерференции в ходе лабораторных исследований рассмотрен во многих обзорах и книгах. Чтобы исключить возможность получения ложных результатов, обусловленных применением лекарственных препаратов, рекомендуется консультироваться с клиницистами, а также использовать соответствующие справочники.

При подготовке обследуемых к проведению биохимических иссле­дований приняты следующие подходы: лекарства, мешающие определению компонентов, исключаются до взя­тия биоматериала, если они даются не по жизненным показаниям; утренний прием лекарств проводится только после взятия биомате­риала; взятие крови с диагностической целью проводится перед инфузией лекарств и растворов. Загрязнение лабораторных проб инфузионными растворами являет­ся самой обычной и часто встречаемой формой преаналитической ин­терференции в больницах. Рекомендуется информировать лабораторию о том, когда и какое вливание было проведено пациенту, и когда была взята проба крови.

Пробу крови никогда не следует брать из сосуда, расположенного проксимально месту инфузии. Пробы следует брать из другой руки, из вены, в которую не проводится вливание.

Влияние ЛС на результаты лабораторных исследований может быть двух типов:

1. Физиологическое влияние in vivo (в организме пациента) ЛС и их ме­таболитов;
2. Влияние in vitro (на химическую реакцию, используемую для опреде­ления показатели) благодаря химическим и физическим свойствам ЛС (интерференция).

Физиологическое влияние ЛС и их метаболитов во многом известны практическим врачам. Рассмотрим зна­чение интерференции, то есть вмешательства постороннего фактора в ре­зультаты анализа.

Интерференция может быть вызвана наличием в пробе биоматериала как эндогенного, так и экзогенного вещества. К основным эндогенным интер­ферирующим факторам относят следующие:

• Гемолиз, т.е. разрушение эритроцитов с выходом в жидкую часть крови ряда внутриклеточных компонентов (гемоглобин, ЛДГ, калия, магния и др.), что изменяет истинные результаты определения концентрации/активности таких компонентов крови, как билирубин, липаза, КК,ЛДГ, калий, магний и др;
• Липемия, извращающая результаты ряда колориметрических и нефелометрических методов исследования (особенно при исследовании фосфора, общего билирубина, мочевой кислоты, общего белка, электролитов);
• Парапротеинемия, вызывающая изменения результатов определения некоторыми методами фосфатов, мочевины, КК, ЛДГ, амилазы.

Наиболее частые экзогенные интерферирующие факторы - ЛС или их метаболиты. Так, при определении катехоламинов флуориметрическим ме­тодом в моче интенсивную флюоресценцию может вызывать принимаемый пациентом тетрациклин; метаболит пропранолола 4-гидррксипропранолол интерферирует при определении билирубина методами Йендрассика-Грофа и Эвелина-Меллоя.

Выявить интерференцию ЛС - одна из задач врача клинической лабораторной диагностики. Важный шаг для решения этой проблемы - контакт с клиницистом для выяснения характера принимаемых пациентом препаратов.

КУРЕНИЕ

У курильщиков может быть повышена концентрация карбоксигемоглобина, катехоламинов в плазме крови и кортизола в сыворотке крови. Изменения концентра­ции этих гормонов часто приводят к снижению количества эозинофилов, в то время как содержание нейтрофилов, моноцитов и свободных жир­ных кислот увеличивается. Курение приводит к увеличению концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, среднего объёма эритроцита (MCV) и снижению количества лейкоцитов. Обнаружено повышение активности гаммаглутамилтрансферазы на 10% при потреблении 1 пачки сигарет в день; возможно удвоение активности по сравнению с референтными значениями при потреблении большего количества сигарет.

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ И ЛЕЧЕБНЫЕ МЕРОПРИЯТИЯ

На результаты лабораторных исследований могут оказывать влия­ние следующие диагностические и лечебные мероприятия:

• Оперативные вмешательства;
• Вливания и переливания;
• Пункции, инъекции, биопсии, пальпация, общий массаж;
• Эндоскопия;
• Диализ;
• Физическое напряжение (например, эргометрия, физические упраж­нения, ЭКГ);
• Функциональные тесты (например, пероральный тест на толерант­ность к глюкозе);
• Прием рентгеноконтрастных и лекарственных веществ;
• Ионизирующее излучение.

Например, уровень ПСА в течение нескольких дней может быть повышен после массажа простаты или катетеризации мочевого пузыря. Любые манипуляции с молочной железой или тепловые процедуры (например, сауна) приводят к значительному возрастанию уровня пролактина. Чтобы предотвратить такое влияние, взятие проб необходимо про­водить до выполнения диагностических процедур, способных искажать результаты теста. Влагалищное кровотечение, произошедшее перед взятием пробы крови, может влиять на результат скрининга: кровотечение может увеличивать уровень АФП в крови матери. В этих условиях рекомендуется отложить анализ ~ на одну неделю после остановки кровотечения.

ПЕРИОДИЧНОСТЬ ВЗЯТИЯ ПРОБ

Повторные взятия проб крови широко используются в динамических исследованиях - при проведении стимуляционных тестов, для оценки эффективности проводимого лечения, при прогнозировании исхода заболевания, при лекарственном мониторинге, а также в целом ряде других случаев. Интервалы между взятием образцов, помимо конкретных задач исследования, должны определяться с учетом следующих факторов:

• Периода биологической полужизни определяемого аналита. Например, для оценки уровня ПСА в постоперационном периоде отбор крови для исследования должен проводиться не ранее, чем через 10-14 дней после хирургического вмешательства;
• Факмакокинетических свойств препаратов при проведении терапевтического лекарственного мониторинга. Например, забор крови для определения циклоспорина А должен производиться непосредственно перед приемом следующей его дозы, а для сердечных гликозидов - через 4 часа после введения препарата.
• Динамики изменения концентрации аналита в ходе нормальных или патологических процессов (мониторинг беременности, диагностика и мониторинг опухолевых и инфекционных заболеваний и др.). Обычно при этом индивидуальные колебания уровней исследуемых аналитов могут быть очень значительными (свободный эстриол, ХГЧ, АФП и др.). В этих случаях средние значения нормы или ее диапазоны не являются достаточно информативными для постановки диагноза. Вместо них используют значения медиан нормальных концентраций.

При мониторинге опухолевых заболеваний, а также для оценки эффективности проводимого лечения в качестве точки отсчета используются индивидуальные базовые уровни онкомаркеров до начала терапии. Последующие заборы крови проводятся через строго определенные клиницистами промежутки времени. Этот же принцип используется при диагностике и лечении инфекционных заболеваний - выявление специфических антител к возбудителю и динамика их уровней в ходе лечения.

При хранении образцов мочи при комнатной температуре может теряться до 40% глюкозы после 24-часового хранения.

ПОЛОЖЕНИЕ ТЕЛА ПАЦИЕНТА ПРИ ЗАБОРЕ КРОВИ

Положение тела пациента также влияет на ряд показателей. Переход из положения лёжа в положение сидя или стоя приводит к гидростатическому проникновению воды и фильтрующихся веществ из внутрисосудистого пространства в интерстициальное. Вещества, имеющие большую молекулярную массу (белки), и клетки крови со связанными с ними веществами не проходят в ткани, поэтому их концентрация в крови повышается (ферменты, общий белок, альбумин, железо, билирубин, ХС, ТГ, ЛС; связанные с белками, кальций). Могут увеличиваться концентра­ция гемоглобина, гематокрит, количество лейкоцитов. Отбор крови для определения ряда аналитов - таких, как альдостерон, эпинефрин, норэпинефрин, предсердный натрийуретический пептид, а также для оценки активности плазматического ренина - следует проводить в положении лежа и/или стоя при спокойном состоянии пациента. В направлении должна быть сделана специальная отметка о времени и условиях получения пробы.

МЕСТО И ТЕХНИКА ЗАБОРА КРОВИ

Место и техника забора крови также могут оказать существенное влия­ние на результаты лабораторных тестов (например, наложение жгута на период времени более 2 мин при заборе крови из вены может привести к гемоконцентрации и увеличению концентрации в крови белков, факто­ров коагуляции, содержания клеточных элементов). Лучшее место забора крови на анализы - локтевая вена. Следует также отметить, что веноз­ная кровь - лучший материал не только для определения биохимичес­ких, гормональных, серологических, иммунологических показателей, но и для общеклинического исследования. Это обусловлено тем, что применя­емые в настоящее время гематологические анализаторы, с помощью ко­торых проводят общеклинические исследования крови (подсчёт клеток, определение гемоглобина, гематокрита и др.), предназначены для работы с венозной кровью, и в большинстве своём в странах, где их производят, они сертифицирова­ны и стандартизированы для работы только с венозной кровью. Выпускае­мые фирмами калибровочные и контрольные материалы также предназна­чены для калибровки гематологических анализаторов по венозной крови.

Помимо этого, при заборе крови из пальца возможен ряд методических особенностей, которые стандартизировать очень трудно (холодные, цианотичные, отёчные пальцы, необходимость в разведении исследуемой крови и др.), что приводит к значительным разбросам в получаемых результатах и как следствие - к необходимости повторных исследований для уточ­нения результата.

Для общеклинического исследования кровь из пальца рекомендуют забирать в следующих случаях:

• При ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента;
• При наличии у пациента очень мелких вен или их малой доступности;
• При выраженном ожирении пациента;
• При установленной склонности к венозному тромбозу;
• У новорождённых.

Пункцию артерии для забора крови используют редко (преимущественно для исследования газового состава артериальной крови).

ДРУГИЕ ФАКТОРЫ

Среди других факторов, влияющих на результаты ис­следований, имеют значение расовая принадлежность, географическое положение местности, высота над уровнем моря, температура окружающей среды.

Например; уровни АФП выше у женщин негроидной расы по сравнению с европеоидной расой. Активность ГГТ приблизительно в два раза выше у афро-американцев по сравнению с белым населением.

Как правильно подготовиться к исследованиям в клинико-диагностической лаборатории

АНАЛИЗ КРОВИ (КЛИНИЧЕСКИЙ, БИОХИМИЧЕСКИЙ, ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ)

• Исследование производится утром натощак – между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8 – 12 часов. Вечером предшествующего дня рекомендуется необильный ужин. Желательно за 1 – 2 дня до обследования исключить из рациона жирное, жареное и алкоголь. Если накануне состоялось застолье или было посещение бани или сауны – необходимо перенести лабораторное исследование на 1 – 2 дня;
• Накануне исследования лечь спать в обычное время и встать не позднее чем за 1 час до взятия крови;
• По возможности пробы следует брать между 7 и 9 часами утра;
• Период воздержания от приема алкоголя должен быть не менее 24 ч до сдачи анализа;
• За 1 час до взятия крови необходимо воздержаться от курения;
• Не следует сдавать кровь после рентгенологических исследований, физиотерапевтических и лечебных процедур, способных оказать влияние на результаты теста;
• Необходимо исключить факторы, влияющие на результаты исследований: физическое напряжение (бег, подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. Перед процедурой следует отдохнуть 10 – 15 минут и успокоиться. Для исключения влияния изменения положения тела обследуемый должен находиться в покое, сидеть или лежать не менее 5 мин. При динамическом наблюдении за пациентом взятие материала нуж­но проводить в идентичном положении тела;
• Необходимо помнить, что результат исследования может быть искажен действием принимаемых лекарственных препаратов. Поэтому перед сдачей анализа следует проконсультироваться у врача о возможности ограничения приема лекарственных препаратов для подготовки к исследованию. Рекомендуется отказаться от приема лекарственных препаратов перед сдачей крови на исследование, то есть забор крови производится до приема лекарственных препаратов;
• Учитывая суточные ритмы изменения показателей крови повторные исследования целесообразно проводить в одно и то же время;
• В разных лабораториях могут применяться разные методы исследования и единицы измерения. Чтобы оценка результатов обследования была корректной и была приемлемость результатов, желательно проводить исследования в одной и той же лаборатории, в одно и то же время.

ТЕСТ ТОЛЕРАНТНОСТИ К ГЛЮКОЗЕ (САХАРНАЯ КРИВАЯ)

Пероральный тест толерантности к глюкозе проводится, если клинические симптомы сахарного диабета отсутствуют, а содержание глюкозы в крови натощак ниже патологического уровня и находится в пределах физиологической нормы (предварительно необходимо провести исследование глюкозы в крови натощак).

Цель теста – определить эффективность работы инсулиновыделительного механизма поджелудочной железы и глюкозораспределительной системы организма. Необходимо подготовиться к этому тесту изменением диеты и приема лекарственных препаратов, по меньшей мере, за 3 дня до проведения теста. Очень важно точно следовать приведенной ниже инструкции, так как только в этом случае будут получены ценные результаты теста:

• Количество углеводов в пище должно быть не менее 125 граммов в день в течение 3 дней перед проведением теста;
• Нельзя ничего есть в течение 12 часов, предшествующих началу теста, но ни в коем случае голодание не должно быть более 16 часов;
• Не позволять себе физические нагрузки в течение 12 часов перед началом теста и во время проведения теста.

Методика проведения теста. Исследование производится дважды с интервалом в 2 часа. Утром, натощак, производится забор крови на глюкозу. Затем пациенту дают определенное количество глюкозы (в зависимости от массы тела), растворенной в теплой воде. Нагрузку следует принять медленно, не залпом, но не дольше, чем за 5 минут. За это время формируется адекватная физиологическая реакция на прием большого количества углеводов. После приема нагрузки производят повторный забор крови на глюкозу через 2 часа. Вместо глюкозы можно использовать пробный завтрак, содержащий не менее 120 граммов углеводов, 30 грамм из которых должны составлять легкоусвояемые (сахар, варенье, джем).

ОСОБЕННОСТИ ПОДГОТОВКИ К ОТДЕЛЬНЫМ ЛАБОРАТОРНЫМ ТЕСТАМ

Исследование холестерина и липидного спектра

Для определения холестерина и липидного спектра забор крови производится строго после 12 – 14 часового голодания. За 2 недели необходимо отменить препараты, понижающие уровень липидов в крови, если не ставиться цель определить гиполипидемический эффект терапии этими препаратами. Накануне взятия крови должен быть исключен прием алкоголя: присутствие алкоголя в крои является распространенной причиной выявления гипертриглицеридемии, даже у голодавших пациентов. Если исследование липидов проводится у больного, перенесшего инфаркт миокарда, то кровь следует брать либо в течение 24 часов после инфаркта, либо по истечении 3 месяцев, поскольку в период выздоровления метаболизм липидов нарушен.

Мочевая кислота

Необходимо в предшествующие исследованию дни соблюдать диету – отказаться от употребления богатой пуринами пищи: печени, почек, максимально ограничить в рационе мясо, рыбу, кофе, чай, алкоголь. Противопоказаны интенсивные физические нагрузки. Обязательна отмена таких лекарственных препаратов, как кофеин, теобромин, теофилин, салицилаты, аскорбиновая кислота, антибиотики, сульфаниламиды, производные тиазола.

Кортизол

Накануне исследования исключить прием таких препаратов как: глюкокортикоиды, эстрогены, пероральные контрацептивы. Также необходимо исключить прием алкоголя, физические упражнения, курение, стрессовые ситуации. Забор крови осуществляется не позднее 2-х часов после сна и до 10 часов утра.

Простатспецифический антиген (ПСА)

Забор крови должен быть произведен до пальпаторного исследования и массажа предстательной железы (ПЖ), лазерной терапии, рентгенографии, цистоскопии, колоноскопии. Эти лечебно – диагностические мероприятия могут вызвать более или менее выраженный и длительный подъем уровня ПСА в крови. Так как степень таких изменений непредсказуема, забор крови необходимо проводить или до или спустя неделю после проведенных манипуляций.

Диагностики инфекционных заболеваний (в том числе урогенитальные инфекции)

Забор крови для диагностики производится до начала приема антибактериальных и химиотерапевтических препаратов или не ранее чем через 10 – 14 дней после их отмены. При выполнении исследований на наличие инфекций следует учитывать, что в зависимости от периода инфицирования и состояния иммунной системы у любого пациента может быть ложноотрицательный результат. Но, тем не менее, отрицательный результат не исключает полностью наличие инфекции и в сомнительных случаях необходимо провести повторный анализ.

Иммунограмма

Анализ крови сдается строго натощак, после 12-часового голодания и обязательно до начала приема антибактериальных, противовоспалительных и гормональных препаратов или не ранее чем через 2 недели после их отмены. Если накануне исследования было повышение температуры, какое либо острое или обострение хронического заболевания, то лучше перенести срок сдачи анализа.

Аллергены

Для исключения ложноотрицательных результатов необходимо воздержаться от приема противоаллергенных препаратов за 3 – 5 дней до сдачи анализа крови.

Пролактин

Забор крови производится утром, не ранее, чем через 3 часа после пробуждения. Учитывая, что уровень пролактина может повышаться в результате физического или эмоционального стресса, после половых актов, после пребывания в сауне, приема алкоголя, необходимо перед исследованием исключить указанные факторы.

Исследование на тиреоидные гормоны

За 2 – 3 дня до проведения исследования исключается прием йодсодержащих препаратов, за 1 месяц – тиреоидных гормонов (чтобы получить истинные базальные уровни), если нет специальных указаний врача- эндокринолога. Однако, если целью исследования является контроль за дозой препаратов тиреоидных гормонов, забор крови производится на фоне приема обычной дозы.

Тиреоглобулин

Исследование целесообразно проводить спустя как минимум 6 недель после тиреоэктомии, либо проведенного лечения. Если назначены такие диагностические процедуры, как биопсия или сканирование ЩЖ, то исследование уровня ТГ в крови нужно строго проводить до процедур.

Соматотропный гормон

За 3 дня до взятия крови необходимо исключить спортивные тренировки, стрессовые ситуации. За 1 час до взятия крови - курение. Исследование проводится натощак (через 12 часов после последнего приема пищи). Пациент должен находиться в полном покое в течение 30 минут перед взятием крови. Не допускать стресса в процессе взятия крови.

ОБЩИЙ АНАЛИЗ МОЧИ

Для общего анализа мочи предпочтительно использовать «утреннюю» мочу, которая в течение ночи собирается в мочевом пузыре. Моча должна быть собрана после тщательного туалета наружных половых органов (несоблюдение этого правила может повлечь за собой выявление повышенного количества эритроцитов и лейкоцитов в моче, что затруднит постановку правильного диагноза) в сухую, чистую, хорошо отмытую от чистящих и дезинфицирующих средств посуду (для сбора мочи лучше использовать одноразовые пластиковые контейнеры). Для анализа можно собирать всю мочу, однако, в нее могут попасть элементы воспаления мочеиспускательного канала, наружных половых органов. Поэтому, как правило, первую порцию мочи не используют. Вторую, среднюю, порцию мочи собирают в чистую посуду, не касаясь склянкой тела. Посуда с мочой плотно закрывается крышкой. Моча, собранная для общего анализа, может храниться не более 1,5 – 2 часов (обязательно на холоду!). Длительное хранение мочи при комнатной температуре приводит к изменению физических свойств, разрушению клеток и размножению бактерий.

Накануне сдачи анализа следует исключить алкоголь, маринады, копчености, сахар, мед.

СБОР СУТОЧНОЙ МОЧИ ДЛЯ БИОХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА

Суточная моча собирается в течение 24 часов на обычном питьевом режиме. Утром в 6 – 8 часов освобождается мочевой пузырь (эта порция мочи выливается), а затем в течение суток собирается вся моча в чистый широкогорлый сосуд с плотно закрывающейся крышкой, емкостью не менее 2 литров. При этом емкость с мочой необходимо сохранять в течение всего времени в прохладном месте (оптимально – в холодильнике на нижней полке – при 4 – 8 С), не допуская ее замерзания. Последняя порция берется точно в то же время, когда накануне был начат сбор (время начала и конца сбора отмечают). Если не вся моча доставляется в лабораторию, то количество суточной мочи измеряется мерным цилиндром, часть отливается в чистый сосуд, в котором ее доставляют в лабораторию, и обязательно указывается объем суточной мочи. Перед сдачей мочи на анализ нежелательно применение лекарственных веществ, так как некоторые из них (в частности, аскорбиновая кислота, входящая в состав комплексных витаминных препаратов) оказывают влияние на результаты биохимических исследований мочи.

Несоблюдение правил сбора, сроков и режима хранения проб, полученных для исследований, приводит к отрицательному результату!

Сдавайте анализы постоянно в одной и той же лаборатории – и вашему врачу будут примерно известны Ваши личные показатели нормы и любое отклонение от нормы будет сразу им замечено.

Бактериологический посев – метод исследования биологического материала (кровь, моча, кал и пр.), взятого у пациента и помещенного на искусственную питательную среду, способствующую росту и размножению возбудителя заболевания. При исследовании можно выявить не только факт наличия возбудителя, но и его концентрацию. Таким образом можно исследовать, кроме уже перечисленного, спинно-мозговую жидкость (ликвор), мокроту, желчь, отделяемое из зева, носа, глаз, дыхательных путей, половых органов, ран. То есть высевать микроорганизмы можно с практически любого участка организма. Подобные методики удобны для нахождения и идентификации бактерий и грибов, вирусы обнаружить таким образом гораздо сложнее, что связано с особенностями биологии вирусов.

Бактериологические посевы позволяют не только определить типы микробов, провоцирующих то или иное заболевание, но и подобрать эффективные антибиотики (определить чувствительность микробов к ним), которые помогут выздоровлению. Только забор материала необходимо сделать до начала антибиотикотерапии. Назначать бактериологический посев могут как в поликлинике (например, всем известное исследование кала на дисбактериоз), так и в стационаре (например, при кишечных инфекциях, а также если биологический материал труднодоступен, как ликвор). После того как материал забирают у пациента, его помещают на специальные питательные среды, через 3–10 дней оценивают результаты. Распознать (идентифицировать) микроб специалисты его микробиологической лаборатории могут путем определения морфологических, культуральных, биохимических признаков. Морфологию (строение) «вредителя» изучают под микроскопом, культуральные свойства характеризуются потребностями, условиями и типом роста микроорганизмов на питательных средах. Биохимические признаки определяются набором ферментов, синтезируемых микробом в процессе жизнедеятельности. Также обращают внимание на пигменты, окрашивающие колонии микроорганизмов и питательные среды, например, золотистый пигмент образует золотистый стафилококк.

Виды анализов

Бактериологическое исследование крови

Показания: подозрение на заражение крови; длительно повышенная температура, причину которой не удается выяснить; подозрение на некоторые инфекционные заболевания (например, кишечные инфекции, эпидемический менингит, стафилококковые и стрептококковые инфекции). Взятие крови осуществляют в момент максимального подъема температуры (в этот период концентрация микроорганизмов в крови особенно высока), до приема антибиотиков (если диагноз еще не установлен) или после приема антибиотиков через 10–14 дней (чтобы проследить результаты лечения). Кровь берут у постели больного или в перевязочной и тут же засевают на питательные среды. Однократное исследование крови малорезультативно в случае обнаружения условно болезнетворных микроорганизмов, обитающих на коже человека, а при определенных условиях (при снижении защитных сил организма), способных вызвать заболевание, без проведения повторных исследований трудно понять истинность результатов. Поэтому могут быть проведены серии из 3 и более исследований за определенный промежуток времени. Утверждать, что в данном случае возбудителем является какой-либо микроорганизм, позволяет быстрое (в течение 48 часов) обнаружение микроорганизма, неоднократное выделение его из крови или одновременное выделение из других видов исследуемого материала (крови и мочи, крови и мокроты и т.п.), кроме того, его обнаружение одновременно на разных питательных средах.

Отделяемое, мазки из верхних дыхательных путей

Показания: воспалительные заболевания верхних дыхательных путей и воспаление легких без мокроты, диагностика инфекционных заболеваний дыхательных путей (дифтерии, коклюша, скарлатины), диагностика бактерионосительства при менингококковой, дифтерийной и стафилококковой инфекциях. Материал из носовых ходов забирают с помощью сухого стерильного тампона, а из зева – с помощью увлажненного стерильного ватного тампона. Мазки из носа и глотки берут разными тампонами. Материал из глотки и с миндалин забирают натощак до приема гигиенических процедур или не ранее чем через 3–4 часа после еды. При взятии мазков с задней стенки глотки и миндалин нельзя касаться тампоном языка, слизистой щек, зубов, поэтому родители должны создать условия для того, чтобы медицинской сестре было удобно работать с малышом – лучше рассказать заранее, что процедура будет очень короткой, зато удастся поймать микроб, живущий у малыша во рту, но для этого он должен открыть ротик и несколько секунд (на несколько счетов) не шевелиться.

Бактериолоическое исследование мочи

Показания: воспалительные заболевания почек и мочевого пузыря и контроль после лечения, диагностика инфекционных заболеваний (брюшного тифа, лептоспироза). Исследование мочи на флору проводится до начала антибиотикотерапии. В стерильную посуду собирают среднюю порцию свободно выпущенной мочи (3–5 мл). Средняя порция мочи меньше всего загрязнена микробами, которые могут быть на наружных половых органах, ее исследование дает более объективное представление о состоянии почек, мочевыводящих путей. Лучше всего использовать утреннюю мочу, содержащую наибольшее число бактерий. Перед взятием материала необходим тщательный туалет наружных половых органов. Мальчикам следует обнажить головку полового члена (если не было обрезания) и выпустить небольшую порцию мочи; затем выпустить порцию мочи в стерильный контейнер (последнюю часть не собирать), закрыть контейнер и передать в лабораторию. Девочкам вымыть половые органы, используя теплую мыльную воду, в направлении спереди назад; промыть половые органы еще раз теплой водой и вытереть стерильной салфеткой. Собрать среднюю порцию мочи в стерильный контейнер (он должен быть взят в лаборатории). Моча может храниться до начала исследования не более 1–2 часов при комнатной температуре и не более суток в холодильнике, так как имеется риск размножения бактерий и искажения результатов исследования.

Отделяемое ран

Показания: признаки гнойно-воспалительного процесса в ране. Взятие материала осуществляет врач. Кожу вокруг раны обрабатывают антисептиком, удаляют с помощью стерильной салфетки гной. Материал берут с помощью стерильного тампона. При наличии в ране дренажей (трубочек, по которым оттекает содержимое раны) отделяемое из них засасывают шприцем в количестве 1–2 мл и помещают в стерильную пробирку.

Бактериологическое исследование кала

Показания: диагностика кишечных инфекций, контроль при выписке больных с острыми кишечными инфекциями (дизентерия, сальмонеллез и т.д.) из стационара, диагностика хронических дисфункций кишечника, диагностика дисбактериоза кишечника, выявление бактерионосителей. Исследуемым материалом могут служить испражнения, полученные при естественной дефекации или с помощью специальных тампонов (петель). Для сбора материала путем естественной дефекации используют тщательно вымытые и лишенные следов дезинфицирующих средств судна или горшки. На дно судна, для защиты материала от следов дезинфектанта, можно поместить лист чистой бумаги. Пробу испражнений отбирают сразу после дефекации с помощью стерильной стеклянной палочки, проволочной петли, деревянного шпателя или специальной ложечки, вмонтированной в крышку стерильного контейнера, который можно получить в лаборатории. При наличии слизи, гноя, других включений нужно выбрать участки, содержащие эти примеси, но свободные от крови. Получение материала из прямой кишки с помощью ректальных тампонов (петель) осуществляется медсестрой. Ребенка просят лечь на бок с притянутыми к животу бедрами и ладонями развести ягодицы. Петля (тампон) вводится в задний проход на глубину 5–6 см. Материал собирают в пустую стерильную посуду или в пробирки с консервантом. Если консервант не применяется, то время до начала бактериологического исследования ни при каких условиях не должно превышать 2 часов. Обнаружение в испражнениях даже болезнетворных микроорганизмов не всегда свидетельствует о наличии заболевания, а может быть обусловлено бактерионосительством. Поэтому оценка результатов должна проводится с учетом проявлений заболевания. Для правильной оценки результатов рекомендуется проведение 2–3-кратных исследований с интервалом 1–2 дня. Диагностика дисбактериоза кишечника осуществляется на основании оценки качественных и количественных сдвигов в составе микрофлоры толстого кишечника. Следует отметить, что значение имеет не только состояние микробной флоры кишечника в данный конкретный момент времени, но и происходящие в кишечнике изменения. Поэтому для более точной оценки состояния кишечной микрофлоры исследования также необходимо повторить несколько раз. На достоверность полученного результата сильно влияет соблюдение сроков транспортировки материала. В ряде случаев, когда соблюдение этих сроков нереально, следует либо отказаться от определения численности бактерий, либо с осторожностью подходить к информации о снижении их количества.

Ликвор

Показания: подозрение на менингит (воспаление мягкой мозговой оболочки). Ликвор (спинно-мозговую жидкость) получают путем люмбальной пункции (получения спинно-мозговой жидкости из канала спинного мозга), реже при пункции боковых желудочков мозга (в этом случае спинно-мозговую жидкость получают из так называемых желудочков головного мозга, делая прокол за наружным слуховым проходом). Взятие ликвора проводит врач, эта процедура всегда проводится только в стационаре. Ликвор в норме стерилен, поэтому значимым может быть факт находки любого микроорганизма. У детей менингиту часто сопутствует бактериемия – наличие возбудителя в крови, поэтому проводят одновременное исследование крови и ликвора.

Результаты бактериологического исследования

Правильно прочитать результат исследования может только врач. В ряде случаев имеет значение не сам факт обнаружения тех или иных микроорганизмов, а их количество. Часто количество играет роль и для прогноза заболевания, характера лечения. Так, например, в мочевом пузыре в норме моча стерильна, но во время прохождения через нижнюю треть мочеиспускательного канала происходит ее контакт с нормальной микрофлорой, и о наличии патологического процесса говорят только в том случае, когда титр возбудителя (его количество) составляет более 10 4 кое/мл. Оценка количества микроорганизмов в раневом отделяемом важна для прогнозирования течения процесса. Установлено, что при уровне микробной обсемененности раны выше 105 кл (микробных клеток) на 1 г ткани (на 1 мл отделяемого) нагноение развивается даже в жизнеспособных тканях. В случае наличия в ране отмерших тканей, гематом, инородных тел развитие гнойного процесса возможно и при более низких уровнях обсемененности. Кроме того, при уровнях обсемененности раны более 105 кл на 1 г раневого отделяемого резко возрастает угроза развития сепсиса. По результатам обследования так или иначе изменяют схемы лечения. В заключение отметим, что результат любого анализа, в том числе и бактериологического, может быть ошибочным, поэтому врач может назначить подтверждающие или уточняющие исследования, например, полимеразную цепную реакцию (ПЦР) для определения ДНК возбудителя и др.

Мазок из зева берут для проведения стандартного бактериологического исследования с целью изучения микробного состава и количественного соотношения микрофлоры носоглотки. Это метод лабораторной диагностики, позволяющий выявить возбудителей инфекционно-воспалительных заболеваний верхних отделов респираторного тракта. Для определения этиологии инфекции необходимо провести бактериологическое исследование отделяемого носа и зева на микрофлору.

Специалисты направляют больных с хроническим , и в микробиологическую лабораторию, где стерильным ватным тампоном отбирают биоматериал из носа и зева и проводят его исследование. По результатам анализа специалист определяет возбудителя патологии и его чувствительность к антибиотикам.

Причины и цели взятия мазка на микрофлору из зева и носа:

• Диагностика , вызванной бета-гемолитическим стрептококком и приводящей к развитию тяжелых осложнений - гломерулонефрита, ревматизма, миокардита.
• Наличие в носоглотке золотистого стафилококка, провоцирующего образование фурункулов на коже.
• Бактериологический посев клинического материала при воспалении носоглотки проводится с целью исключения дифтерийной инфекции.
• Подозрение на менингококковую или коклюшную инфекцию, а также респираторные недуги.
• Диагностика стенозирующего , абсцессов, расположенных рядом с миндалинами, включает однократное проведение анализа.
• Лица, контактные с инфекционным больным, а также дети, поступающие в детский сад или школу, проходят профилактическое обследование с целью выявления бактерионосительства.
• Полное обследование беременных женщин включает взятие мазка из зева на микрофлору.
• Мазок из зева и носа на стафилококк с профилактической целью сдают все медицинские работники, воспитатели детских садов, повара и продавцы продуктовых магазинов.
• Мазок из зева для определения клеточного состава отделяемого. Исследуемый материал наносят на специальное предметное стекло. Под микроскопом врач-лаборант подсчитывает количество эозинофилов и прочих клеток в поле зрения. Проводится исследование для определения аллергической природы заболевания.

В баклабораторию направляют больных для исследования материала из носоглотки с целью исключения или подтверждения конкретной инфекции. В направлении указывают микроорганизм, наличие которого необходимо подтвердить или опровергнуть.

Микрофлора носоглотки

На слизистой оболочке зева и носа обитает множество микроорганизмов, составляющих нормальную микрофлору носоглотки. Исследование отделяемого горла и носа показывает качественное и количественное соотношение микробов, обитающих в данном локусе.

Типы микроорганизмов, обитающих на слизистой носоглотки у здоровых людей:

1. Бактероиды,
2. Veillonella,
3. Escherichia coli,
4. Branhamella,
5. Pseudomonas,
6. Streptococcus matans,
7. Neisseria meningitides,
8. Klebsiella pneumonia,
9. Эпидермальный стафилококк,
10. Зеленящий стрептококк,
11. Неболезнетворные нейссерии,
12. Дифтероиды,
13. Коринебактерии,
14. Candida spp.,
15. Haemophilis spp.,
16. Actinomyces spp.

При патологии в мазке из зева и носа можно обнаружить такие микроорганизмы:

• Бета-гемолитический группы А,
• S. aureus,
• Листерия,
• Branhamella catarrhalis,
• Acinetobacter baumannii,

Подготовка к анализу

Чтобы результаты анализа были максимально достоверными, необходимо правильно отобрать клинический материал. Для этого следует подготовиться.

За две недели до забора материала прекращают прием системных антибиотиков, а за 5-7 суток рекомендуют перестать использовать антибактериальные растворы, ополаскиватели, спреи и мази для местного применения. Сдавать анализ следует натощак. Перед этим запрещено чистить зубы, пить воду и жевать жвачку. В противном случае результат анализа может оказаться ложным.

Мазок из носа на эозинофилы сдают также натощак. Если человек поел, необходимо подождать как минимум два часа.

Взятие материала

Чтобы правильно взять материал из зева, пациенты откидывают голову назад и широко раскрывают рот. Специально обученный персонал лаборатории шпателем прижимает язык и собирает отделяемое глотки специальным инструментом – стерильным ватным тампоном. Затем извлекает его из полости рта и опускает в пробирку. Пробирка содержит специальный раствор, которой предотвращает гибель микробов во время транспортировки материала. Пробирку необходимо доставить в лабораторию в течение двух часов с момента забора материала. Взятие мазка из горла – процедура безболезненная, но неприятная. Прикосновение ватного тампона к слизистой глотки может спровоцировать рвотные позывы.

Чтобы взять мазок из носа, необходимо усадить пациента напротив и слегка запрокинуть ему голову. Перед анализом необходимо очистить нос от имеющейся слизи. Кожу ноздрей обрабатывают 70% спиртом. Стерильный тампон вводят поочередно сначала в один, а затем в другой носовой ход, проворачивая инструмент и плотно прикасаясь к его стенкам. Тампон быстро опускают в пробирку и направляют материал на микроскопическое и микробиологическое исследование.

Микроскопическое исследование

Исследуемый материал наносят на предметное стекло, фиксируют в пламени горелки, окрашивают по Граму и изучают под микроскопом с иммерсионным маслом. В мазке обнаруживают грамотрицательные или грамположительные палочки, кокки или коккобациллы, изучают их морфологические и тинкториальные свойства.

Микроскопические признаки бактерий - важный диагностический ориентир. Если в мазке находятся грамположительные кокки, расположенные скоплениями, напоминающими гроздья винограда, предполагают, что возбудителем патологии является стафилококк. Если кокки окрашены по Граму положительно и располагаются в мазке цепочками или парами, возможно это стрептококки; грамотрицательные кокки - нейсерии; грамотрицательные палочки с закругленными концами и светлой капсулой - клебсиеллы, мелкие грамотрицательные палочки - эшерихии, . Дальнейшее микробиологическое исследование продолжают с учетом микроскопических признаков.

Посев исследуемого материала

Каждый микроорганизм растет на своей «родной» среде с учетом рН и влажности. Среды бывают дифференциально-диагностическими, селективными, универсальными. Их основное предназначение – обеспечение питания, дыхания, роста и размножения бактериальных клеток.

Посев исследуемого материала необходимо проводить в стерильном боксе или ламинарном шкафу. Медработник должен быть одет в стерильную одежду, перчатки, маску и бахилы. Это необходимо для соблюдения стерильности в рабочей зоне. В боксе следует работать молча, аккуратно, обеспечивая личную безопасность, поскольку любой биологический материал считается подозрительным и заведомо заразным.

Мазок из носоглотки засевают на питательные среды и инкубируют в термостате. Спустя несколько суток на средах вырастают колонии, имеющие различную форму, размер и цвет.

Существуют специальные питательные среды, которые являются селективными для конкретного микроорганизма.

Материал втирают тампоном в среду на небольшой площадке размером 2 кв. см., а затем с помощью бактериологической петли штрихами рассевают по всей поверхности чашки Петри. Посевы инкубируют в термостате при определенной температуре. На следующий день посевы просматривают, учитывают количество выросших колоний и описывают их характер. Пересевают отдельные колонии на селективные питательные среды для выделения и накопления чистой культуры. Микроскопическое изучение чистой культуры позволяет определить размер и форму бактерии, наличие капсулы, жгутиков, спор, отношение микроба к окрашиванию. Идентифицируют выделенные микроорганизмы до рода и вида, при необходимости проводят фаготипирование и серотипирование.

Результат исследования

Результат исследования врачи-микробиологи выписывают на специальном бланке. Для расшифровки результата мазка из зева требуются значения показателей. Название микроорганизма состоит из двух латинских слов, обозначающих род и вид микроба. Рядом с названием указывают количество бактериальных клеток, выраженное в особых колониеобразующих единицах. После определения концентрации микроорганизма переходят к обозначению его патогенности – «флора условно-патогенная».

У здоровых людей на слизистой оболочке носоглотки живут бактерии, выполняющие защитную функцию. Они не доставляют дискомфорта и не вызывают развития воспаления. Под воздействием неблагоприятных эндогенных и экзогенных факторов количество этих микроорганизмов резко увеличивается, что приводит к развитию патологии.

В норме содержание сапрофитных и условно-патогенных микробов в носоглотке не должно превышать 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, а патогенные бактерии должны отсутствовать. Определить патогенность микроба и расшифровать анализ может только врач, обладающий специальными навыками и знаниями. Доктор определит целесообразность и необходимость назначения больному противовоспалительных и антибактериальных препаратов.

После выявления возбудителя патологии и его идентификации до рода и вида переходят к определению его чувствительности к фагам, антибиотикам и противомикробным препаратам. Лечить заболевание горла или носа необходимо тем антибиотиком, к которому выявленный микроб максимально чувствителен.

результатов исследования мазка из зева

Варианты результатов исследования мазка из зева:

• Отрицательный результат посева на микрофлору – возбудители бактериальной или грибковой инфекции отсутствуют. В этом случае причиной патологии являются вирусы, а не бактерии или грибы.
• Положительный результат посева на микрофлору – наблюдается рост патогенных или условно-патогенных бактерий, способных вызвать острый фарингит, дифтерию, коклюш и прочие бактериальные инфекции. При росте грибковой флоры развивается кандидоз полости рта, возбудителем которого являются биологические агенты 3 группы патогенности – дрожжеподобные грибы рода Candida.

Микробиологическое исследование отделяемого зева и носа на флору позволяет определяют вид микробов и их количественное соотношение. Все патогенные и условно-патогенные микроорганизмы подлежат полной идентификации. Результат лабораторной диагностики позволяет врачу правильно назначить лечение.