Il test diretto di Coombs è negativo. Tipi e ragioni per eseguire un test di Coombs

Il test diretto di Coombs è negativo.  Tipi e ragioni per eseguire un test di Coombs

Reazione di Coombs

Reazione di Coombs- test dell'antiglobulina per determinare gli anticorpi anti-eritrociti incompleti. Il test di Coombs viene utilizzato per rilevare gli anticorpi contro il fattore Rh nelle donne in gravidanza e per determinare l'anemia emolitica nei neonati con incompatibilità Rh, che porta alla distruzione dei globuli rossi. Questo metodoè stato offerto Dottore inglese Robert Coombs nel 1945, che in seguito le diede il nome di “reazione di Coombs”.

Reazione diretta di Coombs

Gli anticorpi presenti sulla superficie dei globuli rossi possono essere statici o liberi nel plasma sanguigno. A seconda dello stato degli anticorpi, viene eseguita una reazione di Coombs diretta o indiretta. Se c'è motivo di credere che gli anticorpi siano fissati sulla superficie dei globuli rossi, viene eseguito un test di Coombs diretto. In questo caso, il test si svolge in una fase: viene aggiunto il siero antiglobulina. Se sulla superficie dei globuli rossi sono presenti anticorpi incompleti, si verifica l'agglutinazione dei globuli rossi.

Reazione indiretta

La reazione indiretta di Coombs avviene in 2 fasi. Innanzitutto è necessario sensibilizzare artificialmente i globuli rossi. Per fare ciò, i globuli rossi e il siero del sangue da testare vengono incubati, causando la fissazione degli anticorpi sulla superficie dei globuli rossi. Dopo di che viene eseguita la seconda fase del test di Coombs: l'aggiunta di siero antiglobulina.

Appunti


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    Vedi la reazione di Coombs. (

Il test di Coombs lo è analisi clinica esame del sangue, che viene eseguito per rilevare se il sangue contiene determinati anticorpi che potrebbero essere pericolosi. Questi anticorpi si attaccano ai globuli rossi e possono invadere il sistema immunitario e causare danni in altri modi. IN terminologia medica Questo test è anche chiamato test dell’antiglobulina (AGT).

Tipi di campioni di Coombs

Esistono due tipi di test di Coombs: diretti e indiretti.

Test di Coombs diretto, noto anche come diretto (DAT), rileva gli autoanticorpi che si attaccano alla superficie dei globuli rossi. Questi anticorpi vengono talvolta prodotti nell'organismo a causa di alcune malattie o durante l'assunzione di determinati farmaci, come la procainamide, la metildopa o la chinidina.

Questi anticorpi sono pericolosi perché a volte causano anemia distruggendo i globuli rossi.

Questo test viene talvolta prescritto per diagnosticare la causa dell'ittero o dell'anemia.

Normalmente la reazione di Coombs è negativa.

Positivo per:

  • malattia emolitica dei neonati;
  • emolisi autoimmune;
  • reazioni trasfusionali emolitiche;
  • Anemia emolitica immunitaria indotta da farmaci.

Test di Coombs indiretto, noto anche come , viene utilizzato per rilevare gli anticorpi contro i globuli rossi presenti nel siero del sangue (il siero è il liquido giallo chiaro del sangue che rimane dopo che i globuli rossi e il coagulante sono stati eliminati).

Il test di Coombs indiretto viene utilizzato durante la trasfusione di sangue per determinare se il sangue del donatore corrisponde al sangue del ricevente. Questo è chiamato test di compatibilità e aiuta a prevenire qualsiasi reazione avversa al sangue del donatore. Questa analisi consigliato anche alle donne incinte. Alcune donne hanno anticorpi IgG, che possono attraversare la placenta nel sangue fetale e danneggiare il neonato, causando una malattia emolitica nota come anemia emolitica.

Procedura

Il sangue viene prelevato utilizzando una siringa da una vena, solitamente con lato posteriore palmo o sull'incavo del gomito. Prima di ciò, il sito della puntura viene accuratamente disinfettato e, dopo aver eseguito un esame del sangue, viene applicata una garza pulita o un batuffolo di cotone.

Il sangue risultante viene purificato in laboratorio e i globuli rossi vengono separati. Il campione viene quindi testato in sequenza utilizzando vari sieri e reagenti di Coombs, che vengono messi a contrasto. Se l'agglutinazione (aggregazione di rosso cellule del sangue), ciò significa un risultato positivo.

Se però il test risulta negativo, significa che nel sangue sono presenti anticorpi che agiscono contro i globuli rossi. Questo potrebbe indicare varie malattie, come l'anemia (sia naturale che causata dall'assunzione di farmaci), la sifilide o l'infezione da micoplasma. Dopo aver ricevuto i risultati, il medico curante prescriverà il trattamento appropriato.

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Anemia emolitica, causati da organismi autoimmuni che agiscono contro i propri globuli rossi, non sono ancora stati compresi con precisione. Tuttavia, si presume che alcuni fattori (ad esempio un virus, una proteina anormale) modifichino i globuli rossi in modo tale che il corpo li percepisca “come qualcosa di estraneo” e li combatta con l’aiuto di anticorpi. Secondo un'altra teoria, gli anticorpi diretti contro i globuli rossi compaiono quasi accidentalmente durante la formazione di corpi proteici plasmatici anormali in alcune malattie. Tali corpi proteici, anche “casualmente”, possono dare reazioni che possono essere utilizzate per fare una diagnosi (ad esempio, polmonite virale, come è noto, dà una reazione di Wasserman positiva, una reazione di Paul-Bunnell positiva ed una reazione di agglutinazione a freddo).

Ci sono due principali tipi di autoanticorpi per l'anemia emolitica, vale a dire: anticorpi caldi (reagiscono a 37°C) e anticorpi freddi (la cui reattività aumenta con l'avvicinarsi della temperatura allo zero). Gli anticorpi caldi sono più comuni degli anticorpi freddi. Dacie ha scoperto che le emolisine calde si verificano 2 volte più spesso di quelle fredde. Le emolisine e le agglutinine non sono anticorpi fondamentalmente diversi: differiscono solo nella natura della loro azione. Le agglutinine agglutinano i globuli rossi e le emolisine li rendono più sensibili processo complesso emolisi (complemento!). Gli autoanticorpi, fissandosi sugli eritrociti, formano un complesso eritrociti-globina. Questo complesso viene rilevato utilizzando il test dell'antiglobina di Coombs.

Prova di Coombs effettuata con siero di Coombs, per la cui preparazione il coniglio viene sensibilizzato con siero umano, contro il quale nel siero di coniglio si formano anticorpi. Quando un siero così sensibilizzato agisce sugli eritrociti umani, la loro agglutinazione avviene se i recettori degli eritrociti sono occupati da anticorpi bloccanti. Poiché questi anticorpi bloccanti derivano dal siero umano, si agglutinano con il siero di coniglio sensibilizzato al plasma umano e contenente precipitine. Questa reazione è chiamata test di Coombs; per l'anemia emolitica da corpi autoimmuni (Lo tit) è quasi specifica (per dettagli vedi Maier).

In generale per le anemie emolitiche con un disturbo primario degli eritrociti, il test di Coombs è negativo e con quelli acquisiti è positivo. Tuttavia, ci sono alcune eccezioni a questa regola: un test di Coombs falso positivo è stato riscontrato durante crisi di anemia emolitica costituzionale e in grado debole- talvolta anche dopo splenectomia, nell'artrite reumatica, nella sarcoidosi, dopo frequenti trasfusioni di sangue e nel lupus eritematoso sistemico. Naturalmente, nell'anemia emolitica acquisita senza formazione di corpi autoimmuni, è negativo.

Anemia emolitica causati da organismi autoimmuni possono essere suddivisi in:
a) acuto, subacuto e forme croniche, così come su
b) idiopatico con eziologia sconosciuta e c) sintomatico [polmonite virale (solo agglutinine fredde), leucemia linfatica cronica, reticolosarcoma, linfosarcoma, lupus eritematoso sistemico (principalmente agglutinine calde, meno spesso fredde), sifilide (agglutinine fredde), tumori ovarici (Miescher e collaboratori)) .
c) sintomatico [polmonite virale (solo agglutinine fredde), leucemia linfatica cronica, reticolosarcoma, linfosarcoma, lupus eritematoso sistemico (principalmente agglutinine calde, meno spesso fredde), sifilide (agglutinine fredde), tumori ovarici (Miescher e collaboratori)).

Clinica dell'anemia emolitica, sviluppandosi sotto l'influenza di corpi autoimmuni, è molto vario e quindi difficilmente è possibile tracciarne il generale quadro clinico. Sono colpite allo stesso modo persone di tutte le età e di entrambi i sessi. Tuttavia, le forme idiopatiche sembrano essere più frequenti nelle donne (Sacks e Workman).

Quadro clinico della forma idiopatica varia a seconda della gravità della malattia. Nei casi cronici l'esordio è graduale, la malattia si trascina per molti anni con frequenti riacutizzazioni. La gravità dell'anemia varia a seconda del grado di emolisi. Si osservano cali di emoglobina fino al 10%; in altri casi, l'emoglobina rimane al 50-60% per lungo tempo. L'intensità della reticolocitosi e della colorazione itterica della pelle e del siero corrisponde al grado di emolisi. La bilirubina si trova molto raramente nelle urine, poiché non passa attraverso i reni, ma si osserva emoglobinuria. Nei casi cronici la milza è spesso ingrossata e può raggiungere dimensioni anche molto significative, ma in altri casi può ancora essere palpata. Raramente il fegato non è ingrandito.

Nel sangue nella maggior parte dei casi si osserva macrocitosi, in fasi acute sono presenti anche molti microciti, la normoblastosi e la policromasia sono raramente assenti, le leucocitosi possono arrivare a 30.000, le piastrine sono normali. In alcuni casi, tuttavia, si verifica una grave trombocitopenia. Evans spiega questi casi con la presenza simultanea di anticorpi contro le piastrine, per cui c'è sia anemia emolitica che trombocitopenia dovuta all'azione di corpi autoimmuni - sindrome di Evans. La resistenza osmotica è leggermente ridotta, ma non nella stessa misura e non in modo permanente come nell'anemia costituzionale a cellule globulari. Il test di resistenza al calore (Hegglin-Maier) dopo 6 ore può dare anche una lieve emolisi (osservazione propria), ma in misura minore rispetto all'anemia di Marchiafava. L'emosiderina si trova anche nelle urine (osservazione propria).

Test dell'antiglobulina o test di Coombs effettuato per identificare anticorpi specifici che attaccano il rosso cellule del sangue(eritrociti).

Gli anticorpi sono proteine ​​prodotte dal sistema immunitario. In genere, gli anticorpi si legano a sostanze estranee, come batteri e virus, e distruggerli.

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2. Perché è necessario un test anticorpale?

Un test anticorpale può essere eseguito nei seguenti casi:

Prima della trasfusione di sangue

Probabilmente sai che una persona può avere uno dei quattro gruppi sanguigni. E può essere eseguito un test dell'antiglobulina per determinare la possibilità di una trasfusione di sangue. Se stai ricevendo una trasfusione, il sangue del donatore deve corrispondere al tuo tipo (avere gli stessi antigeni). Se gli antigeni sono diversi durante la trasfusione, il sistema immunitario distruggerà le cellule trasfuse. Ciò può portare a malattie gravi e perfino la morte. Ecco perché cercare il tipo giusto il sangue è un fattore così importante.

Identificare il rischio di sensibilizzazione Rh

Rhesus è un antigene. Il suo nome completo è fattore Rh. Il test di Coombs viene utilizzato per rilevare gli anticorpi contro il fattore Rh nel sangue delle donne in gravidanza. Se una donna con sangue Rh negativo è incinta di un bambino con un fattore Rh positivo (può essere trasmesso dal padre), esiste il rischio di sensibilizzazione Rh. La sensibilizzazione Rh si verifica quando il sangue del bambino si mescola con il sangue della madre durante la gravidanza o il parto. Se il gruppo sanguigno della madre è incompatibile con quello del bambino, il suo sistema immunitario può attaccare il feto, percependolo come un oggetto estraneo. In questo caso, potrebbe svilupparsi grave malattia, chiamata eritroblastosi fetale. IN in rari casi Se la malattia non viene curata, il feto o il neonato possono morire.

A una donna con sangue Rh negativo può essere somministrata un'iniezione di gammaglobulina anti-Rh (p. es., RhoGAM), che viene utilizzata per prevenire lo sviluppo della malattia emolitica Rh.

Per la diagnosi dell'anemia emolitica autoimmune

L'anemia emolitica autoimmune è malattia rara associato alla formazione di anticorpi contro gli antigeni self degli eritrociti.

3. Tipi di test dell'antiglobulina

Esistono due tipi di test dell'antiglobulina, o test di Coombs: diretto e indiretto.

Test di Coombs diretto o test diretto dell'antiglobulina rileva gli anticorpi legati ai globuli rossi. È usato per determinare l'anemia. In questa malattia, i globuli rossi vengono distrutti più velocemente di quanto vengano prodotti.

Test di Coombs indiretto o test dell'antiglobulina indiretto effettuato per ricercare anticorpi non associati ai globuli rossi. Il test utilizza il siero del sangue, che contiene anticorpi. Questa procedura è piuttosto rara: viene eseguita principalmente per determinare la possibilità di una trasfusione di sangue o come fase di esame delle donne incinte.

4. Risultati della reazione di Coombs

Norma:

Risultato negativo del test: nessun anticorpo rilevato.

  • Test di Coombs diretto. Un test antiglobulina diretto negativo significa che il tuo sangue non ha anticorpi associati ai globuli rossi.
  • Test di Coombs indiretto. Un risultato negativo del test dell'antiglobulina indiretto significa che il tuo sangue è compatibile con il sangue del donatore. Per una donna incinta, questo risultato significa che il suo corpo non ha prodotto anticorpi contro Rh positivo il gruppo sanguigno di suo figlio (non si è verificata sensibilizzazione Rh).

Deviazione dalla norma:

  • Test di Coombs diretto. Risultato positivo Un test antiglobulina diretto significa che il tuo sangue ha anticorpi che combattono contro i globuli rossi. Ciò può essere causato da una trasfusione sangue incompatibile o malattie come l'anemia emolitica o malattia emolitica neonati (GBN).
  • Test di Coombs indiretto. Un test antiglobulina indiretto positivo significa che il tuo sangue è incompatibile con il sangue del donatore. In una donna incinta, tali risultati indicano la presenza di anticorpi contro il fattore Rh positivo nel sangue del bambino (sensibilizzazione Rh). Se il bambino ha un fattore sanguigno Rh positivo, la madre sarà attentamente monitorata da un medico durante tutta la gravidanza.
Test diretto di Coombs (test dell'antiglobulina) - reazione positiva rileva gli anticorpi (anticorpi anti-eritrociti - anti-D, C, E, c ed e) o i componenti del complemento fissati sulla superficie degli eritrociti nel sangue di pazienti con malattie autoimmuni anemie emolitiche. Reazione negativa non esclude malattia immunitaria, poiché gli anticorpi possono essere liberi nel plasma (non legati ai globuli rossi). Per rilevarli, eseguire campione indiretto Coombs.

Indicazioni per l'uso: stabilire la natura immunitaria dell'anemia emolitica.

Una reazione positiva è espressa nel fatto che i globuli rossi di una persona malata, con anticorpi fissati su di essi, quando interagiscono con il siero antiglobulina (contro gli anticorpi) ottenuto dopo l'immunizzazione di un coniglio, si agglutinano. Un test di Coombs diretto viene effettuato quando c'è motivo di supporre che i globuli rossi in esame siano già stati sensibilizzati in vivo dagli anticorpi corrispondenti, cioè la prima fase della reazione - è già avvenuta la fissazione degli anticorpi sulla superficie degli eritrociti e l'aggiunta di siero antiglobulina provoca l'agglutinazione delle cellule sensibilizzate. In altre parole, una reazione di Coombs diretta positiva implica che in vivo la superficie dei globuli rossi sia rivestita con immunoglobuline o complemento.

Utilizzando un test di Coombs diretto, le immunoglobuline (anticorpi) vengono rilevate sulla superficie dei globuli rossi. Si tratta di immunoglobuline formate in risposta alla sensibilizzazione a qualsiasi antigene, ad esempio il fattore Rh. Per eseguire il test, ai globuli rossi lavati viene aggiunto siero con antiglobulina (siero di Coombs). Se sui globuli rossi sono presenti immunoglobuline o complemento, si verifica l'agglutinazione. Il test è chiamato diretto perché è un test in una sola fase: richiede solo l'aggiunta del siero di Coombs ai globuli rossi lavati.





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